EDTA脱钙方法的实验观察

骨骼组织是一种坚硬的结缔组织,有机成分类骨质和无机成分骨盐2种成分紧密结合形成骨基质,使其变得十分坚硬,不能直接制片。我们实验工作中要获得一张优质的骨切片,均需脱钙处理,使钙盐溶解,组织变软后才能制作切片,然后进行HE染色、特殊染色和免疫组化等观察。在诸多脱钙方法中,笔者在实践中认为化学螯合物(EDTA)脱钙法是一种较为理想、可行的方法,特别适合科学研究。本实验在以前工作基础上[1,2],选用骨质疏松模型大鼠的股骨作为研究对象,以HE和TNF-α免疫组化染色作为考察指标,以浓度、温度和时间作为考察因素,对EDTA脱钙方法进行了L4(23)正交实验,现报道如下。     

同种骨基质明胶与脱钙骨基质成骨作用的定量比较研究

本实验将同种骨基质明胶和脱钙骨基质植入家兔桡骨大块骨缺损，采用放射学和组织形态学方法定量比较两者的成骨作用，结果表明，骨基质明胶和脱钙骨基质均具有诱导成骨作用，且前者的成骨作用明显强于后者。尤以中早期为明显。作者认为，骨基质明胶比脱钙骨基质更适合作为自体骨的代替材料。     

桑桂通痹剂对胶原诱导关节炎小鼠病理形态学及血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶3的影响

目的观察桑桂通痹剂对胶原诱导关节炎（CIA）模型小鼠踝关节血管翳数目、关节炎指数及血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶3（MMP-3）的影响,探讨其作用靶点。方法将50只DBA／1J小鼠随机分为正常纽、模型组、桑桂通痹剂组、甲氨蝶呤组、雷公藤多甙片组,除正常组之外,其余各组使用II型胶原诱导小鼠造成CIA模型,桑桂通痹剂组、甲氨蝶呤组、雷公藤多甙片于造模后开始给药,共计28d。按评分法评价关节炎指数,病理观察小鼠踝关节血管翳数目,免疫组化法检测VEGF、MMP-3蛋白表达。结果桑桂通痹剂组可降低模型小鼠的关节炎指数;减少由滑膜细胞和毛细血管增生所形成的血管翳数目,VEGF、MMP-3表达也有所降低。结论桑桂通痹荆可能是通过抑制VEGF、MMP-3表达,减少模型小鼠的关节炎指数和血管翳数目,从而起到治疗作用。     

开窗减压加脱钙人牙基质填塞配合中药治疗早期ANFH的临床研究

目的:探讨脱钙人牙基质材料经手术植入并配合中药口服治疗肝肾亏虚型的早期ANFH,预防坏死区塌陷的临床疗效。方法:观察2003年6月~2007年12月期间股骨头软骨开窗钻孔减压加脱钙人牙基质填塞并配合中药口服治疗ANFH患者25例34髋(牙基质组),经股骨头软骨开窗钻孔减压加自体骨植入治疗的ANFH患者25例33髋(自体骨组),对疼痛指数、临床疗效及影像学评估。结果:牙基质组治疗后1月VAS评分值3.87±0.17,第24个月JOA评分值72.83±16.81,治疗成功率79.41%;自体骨组治疗后1月VAS评分值4.45±0.15,第24个月JOA评分值75.15±7.56,治疗成功率84.84%。经统计学分析,治疗后1月2组VAS评分组间比较差异有统计学意义(P0.05);治疗后24个月2组JOA评分和治疗成功率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:经股骨头软骨开窗钻孔减压加脱钙人牙基质填塞手术配合中药口服治疗,能有效促进早期股骨头坏死区骨修复,预防坏死区塌陷;而且脱钙人牙基质来源广、提取易、成本低,诱导骨修复疗效确切,不涉及医学伦理问题。     

局部注射脱钙狗骨粉对兔实验性骨折愈合的促进作用

采用２４只雄性新西兰大白兔,手术造成双侧桡骨中段３ｍｍ缺损的骨折模型。左侧断端注射脱钙骨粉,右侧注射生理盐水作为对照,于治疗后第２、４、６周分３批处死,取标本进行Ｘ线摄片评分,组织学观察及形态计量学研究,结果显示,实验组Ｘ线片评分明 显高于对照组（Ｐ〈０．０５）;实验组断端血肿机化快,软骨骨痴出现早,骨化提前,早期形成大量新的小梁骨,血管形成丰富,细胞活性增强,不同时期骨痴中纤维组织,软骨组织,骨     

胶原诱导类风湿关节炎小鼠的重要脏器病理变化

目的：观察胶原诱导关节炎（Collagen Induced Arthritis, CIA）小鼠发病高峰期重要脏器的病理变化。方法：20只雄性DBA/1小鼠随机分为正常组和模型组,模型组给予牛II型胶原混合完全弗氏佐剂诱导CIA模型。造模后每周进行关节炎指数评分,于第63天处死小鼠,取心、肝、脾、肺、肾各组织和踝关节,利用HE染色法观察各脏器的病理变化,并采用Real-time PCR法检测小鼠肺组织中转化生长因子β1（Transforming Growth Factor Beta 1, TGF-β1）以及肿瘤坏死因子α（Tumor Necrosis Factor Alpha, TNF-α）的mRNA表达水平。结果：成功建立了DBA/1小鼠胶原诱导关节炎模型。HE染色结果表明,除了踝关节出现明显的病理变化外,CIA小鼠的肺部有大量的炎细胞浸润,肺泡间隔增厚,肺泡腔中有炎性浸出物,而心脏、肝脏、脾脏和肾脏没有出现明显的病理变化。Real-time PCR结果显示病变的小鼠肺组织中TGF-β1和TNF-α的含量均显著高于正常的肺组织。结论：胶原诱导的DBA/1小鼠,其踝关节呈现严重的病理变化,其肺部也出现明显的炎症,且与类风湿关节炎肺部并发症的病理变化有相似之处,这些结果提示该模型可用于类风湿关节炎肺部病变的相关研究。     

桂枝芍药知母汤对Ⅱ型胶原关节炎大鼠踝关节组织病理改变的影响

目的:观察桂枝芍药知母汤对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗作用及对踝关节组织的影响。方法:将大鼠分为正常组、模型组、桂枝芍药知母汤组、雷公藤多甙片4组。除正常组外,其余各组用鸡Ⅱ型胶原诱导关节炎发生,检测各组大鼠关节炎评分及踝关节组织病理变化。结果:桂枝芍药知母汤组能抑制CIA大鼠的关节炎症,缓解关节肿胀程度。结论:桂枝芍药知母汤对CIA具有保护作用,有显著抑制类风湿性关节炎组织病理改变的作用。     

桂枝汤对痹证（胶原诱导免疫性关节炎）小鼠肠黏膜免疫系统中CD4+、CD8+T淋巴细胞及SIgA的影响

目的 观察桂枝汤对痹证(胶原诱导免疫性关节炎)小鼠肠黏膜免疫学指标的影响。方法 将80只雄性DBA小鼠随机分为4组[即正常组、模型组、桂枝汤高剂量组(简称桂高组)、桂枝汤低剂量组(简称桂低组)]。模型组采用Ⅱ型胶原诱导性关节炎作为痹证模型,运用免疫组织化学染色法标记小鼠小肠及PP结中CD4^+、CD8^+T淋巴细胞及SIgA数量,用图像分析仪进行统计计算其含量。结果与正常组比较,模型组Ⅱ型胶原免疫后小鼠肠黏膜免疫系统中CD4^+、CD8^+T淋巴细胞及SIgA数量明显减少,差异有显著性(P<0．05或P<0．01),应用桂枝汤(高、低剂量)后,CD4^+T淋巴细胞及SIgA数量明显升高,但只有桂高组与模型组比较差异有显著性(P<0．05或P<0．01)。结论桂枝汤可以增强痹证小鼠肠道黏膜免疫功能,从而可能诱导免疫耐受和免疫抑制。     

资木瓜总苷对佐剂性关节炎大鼠滑膜肥大细胞脱颗粒和类胰蛋白酶表达的影响

目的:观察资木瓜总苷(TSCS)对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜组织病理改变、滑膜肥大细胞脱颗粒及类胰蛋白酶表达的影响,探讨肥大细胞功能与TSCS治疗大鼠AA的关系.方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组和TSCS 组(200 mg·kg-1),每组15只,致炎后第3天开始ig给药,1次/d,模型组和正常对照组给予等容积生理盐水,持续21 d.除正常对照组外,其余大鼠足部注射弗氏完全佐剂诱导建立AA模型,检测大鼠体质量和足跖体积变化,HE染色评价滑膜组织病理改变,TB染色观察滑膜肥大细胞数量及其脱颗粒情况,免疫组化法检测滑膜组织中类胰蛋白酶表达情况.结果:TSCS能明显增加AA大鼠体质量,减轻足跖肿胀度,显著减轻滑膜组织炎性细胞浸润、滑膜细胞增生和滑膜纤维组织增生,有效抑制滑膜肥大细胞数量和脱颗粒率,显著抑制滑膜组织类胰蛋白酶表达.相关分析显示,滑膜肥大细胞数量及脱颗粒率均与滑膜组织病理改变总评分呈明显的正相关.结论:TSCS具有治疗大鼠AA和调节滑膜肥大细胞功能的作用,由于两者存在明显的正相关性,因此TSCS可能通过抑制滑膜肥大细胞功能,对AA大鼠起治疗作用.     

滋肾青芪颗粒对胶原诱导性关节炎小鼠的抗炎作用研究

目的观察滋肾青芪颗粒对胶原诱导性关节炎小鼠的炎症预防及治疗作用。方法 DBA/1小鼠随机分为正常组,模型组,滋肾青芪颗粒低、中、高剂量组,甲氨蝶呤组。除正常组外,其余各组建立胶原诱导性关节炎小鼠模型,于攻击造模当天开始,连续给药3周。评定关节炎指数,观察小鼠关节病理切片炎性介质评分、骨破坏评分,ELISA法测定各组小鼠血清抗Ⅱ型胶原(CⅡ)特异性抗体水平。结果滋肾青芪各剂量组均可有效降低小鼠关节炎指数,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05);滋肾青芪高剂量组能有效降低小鼠血清抗CⅡ的抗体滴度,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05);滋肾青芪颗粒各组炎性介质评分、骨破坏评分均低于模型对照组(P0.05)。结论滋肾青芪颗粒对胶原诱导性关节炎小鼠关节炎具有预防治疗作用,其机制可能与降低关节炎小鼠血清中特异性抗血清CⅡ抗体水平有关。     

Intradermal Needle Method

Also called needle-embedding,is a development of retention of needles method.Insert a granular intrdermal needle or ringheaded thumbtack needle into the selected point,then fix the needle with adhesive plaster.The skin is stimulated lightly for a long time.This method can regulate the functions of the Zang-fu     

浅论"消法"

消法是通过消积导滞、消坚散结作用,使气、血、痰、食、水、虫等有形之结聚、积滞渐消缓散的一种治法。其核心是“消”与“散”,适用于蓄积有形之邪的病证。临床有消导食积、消痞化癜、消痰祛水、消疳杀虫、消疮散痈等具体方法。     

反佐法刍议

文章论述了反佐法的渊源与本义,应用的原则与适用的范围.具体讨论了反佐法应用的形式,并进一步明确了反佐法的概念及与佐制的区别.     

论反佐法

重新确定反佐法的概念,论述了反佐法的起源与立法依据,并将反佐法概括为反佐六法.     

关于微透析法与血药浓度法的异同及其药动学数据特殊处理的探索与思考

从采样方式、采样原理、适用性、发展趋势、样品浓度与机体整体浓度的关联性角度比较微透析采样技术与经典药动学采样技术的异同,探讨微透析技术进行药动学研究的适用性,根据采样对象性质,深入思考其样品数据处理的特殊性,提出并总结关于微透析样品数据的校正方法以提升微透析技术进行药动学研究的稳健性及结果可靠性。     

土木香趁鲜切制与传统切片方法的比较

目的: 探讨鲜切土木香饮片的可行性,对土木香传统切片工艺进行改良。 方法: 以土木香内酯、异土木香内酯及总黄酮含量为指标,通过正交试验考察含水量、干燥方式及切片厚度对土木香直接鲜切饮片工艺的影响,并与传统切片工艺进行比较。采用紫外分光光度法测定总黄酮含量;HPLC测定土木香内酯和异土木香内酯含量,色谱条件为SHIMADZU C₁₈色谱柱(4.6 mm×200 mm,5 μm),流动相乙腈-0.1% 磷酸溶液(50:50),柱温30 ℃,流速1.0 mL·min^-1,检测波长220 nm,进样量20 μL。 结果: 优选的鲜切饮片工艺为土木香药材在含水量为35% 时切片,饮片厚度2.5~3.0 mm,阴干。鲜切饮片中土木香内酯、异土木香内酯及总黄酮质量分数分别为(22.41±1.38),(12.87±0.73),(15.04±0.64) mg·g^-1,传统工艺切制饮片中则依次为(22.94±1.24),(13.24±0.83),(14.12±0.58) mg·g^-1。 结论: 趁鲜切制土木香饮片产品质量稳定,具有推广意义。     

谈舒肺达肝法

舒肺达肝法在百家著述中少有论及 ,余在数十年的临床实践中却取得了满意的疗效。因为肺脏在人体功能中占重要地位。肺居上焦 ,主诸气 ,司呼吸 ,主通调 ,在生理状态和病理变化中是个主角。肝为藏血脏器 ,性喜条达而主疏泄 ,对人的情志状态有着极其重要的作用。由于脏器的互相关系 ,肝与肺在生理和病理方面又有其制约与乘侮之变化 ,例如 ,肺气宣降 ,肝气条达则百脉通畅 ,精神愉快 ,这是人所共知的。可是在病变的情况下 ,肺失宣降可影响肝气条达 ,肝失条达 ,可危害肺气宣降 ,这就可能还有人不甚理解 ,喻嘉言的金伐木荣之说和朱丹溪的木火刑金之…     

和法析要

和法是中医主要治法之一,其治法精神源于<黄帝内经>,其治法内涵当首推<伤寒论>.但由于"和"在中医学中的含义甚多,因此导致和法的概念模糊,和法的含义纷杂.这对正确使用和法、探讨和法的作用机制等均无裨益.     

补气法、补血法抗自由基损伤的比较研究

通过补气、补血方药四君子汤、四物汤对自由基损伤的比较研究,结果表明,二方均能增加SOD活力,促进自由基消除,对LPO.MAO-B具有抑制作用。说明补气法、补血法均具有延缓衰老的作用,其中以补气法更优。