生物素—亲和素系统检测弓形虫病的研究

目的 建立简易、实用的生物素－亲和素系统（ＡＢＣ）和免疫酶染色试验（ＢＣ－ＩＥＳＴ）和斑点酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）的方法。以检测弓形虫病的微量抗体。方法 以全虫和可溶性虫体为抗原，在常规ＩＥＳＴ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的基因上，加用ＡＢＣ，观察其特异度和敏感度。结果 ＡＢＣ－ＩＥＳＴ和ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的特异度和常规法相同，但敏感度有显著提高。结论ＡＢＣ法可应用于微量本及     

亲和素-生物素酶复合物酶联免疫吸附技术应用于检测HBsAg的研究

作者应用免疫化学 ABC-ELISA 作人群血清中 HBsAg 的检测,验证了该法在检测 HBsAg 方面具有高敏感性。ABC-ELISA 与 ELISA、R-PHA 及 RICEPA 三种方法相比,HBsAg 的检出率按其敏感程度高低为 ABC-ELISA>ELISA>R-PHA>RICEPA。ABC-ELISA 与经典 ELISA单独相比,其HBsAg 检出率由 ELISA的16.07％提高到 ABC-ELISA 的23.58％,并且可将ELISA漏检的32例 HBsAg 携带者检出。此外,该法在检测 HBsAg中还具有特异性高,操作简便和快速等优点。     

三种蠕虫病患者的弓形虫检测

笔者对 1994～ 2 0 0 0年在我室查诊为囊虫病、血吸虫病和肺吸虫病的患者做了弓形虫感染的血清学检测 ,以期阐明这些蠕虫病与弓形虫感染的关系 ,报告如下。1　材料、方法和结果1.1　研究对象　脑囊虫病患者 (临床、实验室诊断及ＣＴ检查均提示脑囊虫感染 ) 78例。经我室作皮试和血清抗体试验皆为阳性 ,并予吡喹酮治疗后转归良好。其中男 5 7例 ,女 2 1例 ,年龄 6～ 72岁 ,平均 (34 .2± 18.6 )岁。肺吸虫病患者 2 6例 ,在流行区有食生或未煮熟的溪蟹史 ,临床ＣＴ或Ｘ线检查提示有肺吸虫感染 ,肺吸虫皮试和血清抗体检测阳性 ,经吡喹酮治疗后…     

链酶亲和素-生物素ELISA检测人心肌肌钙蛋白T

目的 建立人心肌肌钙蛋白T (cTnT)链酶亲和素-生物素（SAB）双抗体夹心酶联免疫分析（ELISA）方法,诊断急性心肌损伤性疾病。方法 以固相化单抗3F7捕捉样品中cTnT,生物素化3H12单抗为检测抗体,加入SA-HRP,显色。根据已知不同浓度标准cTnT显色后D(l)值的标准曲线,检测待测样品cTnT含量。结果 cTnT的最低检测值为0.15 ng/ml,批内变异系数为3.8%,批间变异系数为11.2%,回收率为98%。35例急性心肌损伤患者cTnT含量为(0.68±0.17) ng/ml,明显高于52例正常人对照组(0.20±0.03) ng/ml(P<0.01)。结论 本方法灵敏、特异、稳定,可用于临床急性心肌损伤疾病的诊断。     

重组弓形虫14-3-3抗原用于弓形虫血清抗体的检测

目的　探讨重组弓形虫信号转导蛋白14- 3- 3(Toxo14- 3- 3)在弓形虫病免疫诊断中的价值。方法　根据弓形虫Beverly株猫肠上皮细胞增殖阶段的14- 3 -3编码基因,设计合成引物,自RH株速殖子基因组克隆Toxo14- 3 -3的ORF,克隆pET 28a质粒,转化大肠杆菌,获得表达产物并纯化融合蛋白,以此抗原包被反应板进行ELISA检测,并与粗制抗原及市售试剂进行比较。结果　对400份血清标本的平行检测,Toxo14 -3 -3抗原、粗制抗原和市售试剂盒的阳性率分别为2 5%、3 0%和3 .25%,三者之间差异无显著性(P>0 .05);三者之间的符合率为99 0%、98.8%和99 .0%,差异无显著性(P>0. 05 )。结论　重组Toxo14 -3- 3抗原检测弓形虫血清抗体具有潜在价值。     

生物素-亲和素酶联免疫吸附试验系统检测兔抗伤寒杆菌抗体的实验研究

以国产生物素(B)及亲和素(A)试剂,初步建立了检测免疫血清中抗伤寒杆菌H及O抗体水平的BA—ELISA系统。检出抗H及抗O抗体的敏感性(以GMT计),较常规ELISA高6～7倍;较传统的肥达氏试验高11～22倍。除与副伤寒甲、乙及伤寒Vi血清有轻度交叉反应外,与其他各种菌的抗血清均呈阴性.丁不同天对8份阳性血清经6次重复试验,所得变异系数均<11％,提示本试验系统稳定性良好。     

生物素—链霉亲和素系统在检测MHV抗体中的应用

采用生物素—链霉亲和素系统(BSA)试剂建立测定MHV抗体的BSA-ELISA法,并与SPA-ELISA法比较。结果表明,前者本底极低,敏感性比后者提高4倍,阳性检出率提高1倍,且经阻断试验证明其特异性高。因此,该法在检测实验动物的特异性抗体方面,具有很大的应用潜力。     

两种抗弓形虫抗体的检测与临床应用

目的 探讨自然流产与弓形虫感染的关系。方法 用酶联免疫吸附试验检测了４９例自然流产妇女和７５例妊娠８个月以上的健康孕妇血清物异性ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体。结果 流产组ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体阳性率（３４．７％）和（１８．４％）均明显高于健康对照组（９．３％和３．１％）,并随流产次数的增加,两种抗体阳性呈逐渐升高的趋势。另外,两种抗体阳性率还随患者年龄增加而逐渐增高。结论 弓形虫感染与孕妇流产有一定关系。ＩｇＭ     

酶联免疫吸附试验检测孕妇弓形虫感染的临床研究

目的探讨吴江地区孕产妇弓形虫（TOX）感染率及感染状况。方法酶联免疫吸附试验（ELISA）检测孕妇血清中的TOX-IgM和TOX-IgG 2项指标,比较病理妊娠孕产妇和健康孕产妇的感染率以及病理妊娠孕产妇组中年龄、孕期、季节、是否接触动物等因素与TOX-IgM及TOX-IgG感染的关系。结果 103例病理妊娠的孕产妇中（实验组）TOX-IgM阳性11例（10.7%）,TOX-IgG阳性23例（22.3%）,而1 083例健康孕产妇（对照组）TOX-IgM阳性13例（1.2%）,TOX-IgG阳性42例（3.9%）。结论弓形虫引起围生期感染,是导致流产、死胎、早产、先天畸形、听力障碍和智力障碍等的主要原因之一;实验组弓形虫感染率明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）,且在实验组中TOX-IgM和TOX-IgG阳性率随着产妇年龄增加而增加;早孕者感染率高于中晚孕者;夏季感染率明显高于其他季节;接触动物者感染率明显高于未接触动物者。     

圆斑酶联免疫吸附试验诊断囊虫病——生物素-亲和素酶复合物在该方法中的应用

目的：应用生物素－亲和素－酶复合物系统，建立一种繁感、特异、经济简便的囊虫病血清学诊断。方法：生物素－亲和素－酶复合物圆斑酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）、滤纸血斑ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。结果：ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ 诊断囊虫病，检出率（９５．９２％ ）远较圆斑酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）高８３．６７％ ，平均几何滴度（１∶２ ８０１．７３）约为Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ（１∶５８７．２６）的５ 倍；用该方法对４℃条件下保存３ 月的患者滤纸血斑样本进行检测，阳性率为９４．７４％ （５４／５７），无假阳性反应（０／４５）；对相同患者血清和滤纸血斑双份血样进行检测，阳性率均为９０％ （２０／２２）。结论：该方法提高了检出率，简化了采样及送样程序，适合于边远地区和用于流行病学调查。     

免疫酶染色诊断弓形虫感染的研究

用免疫酶染色法(IEST)探讨了弓形虫感染的诊断价值。结果表明,人工感染弓形虫11份家兔和间接荧光抗体(IFAT)与间接血凝(IHA)抗体均阳性的34份人血清,阳性分别为11份和32份,4份阴性兔血清和108份抗体阴性人血清阳性分别为0份和2份,其敏感性为94.10%～100.00%,特异性为98.15%～100.00%.35份其它寄生虫感染者均未有交叉反应。11份阳性血清间隔半个月进行了4次重复试验,其阳性率及几何均数的倒数(GRMT)均无显著性差异。用IEST对健康体检者、不良生育史孕妇和智力低下儿童进行了测定,阳性率分别为8.46%,16.33%和28.26%,结果与IFAT无显著性差异。该法操作简单,值得在基层推广应用。     

甲硝磺酰咪唑实验治疗弓形虫病的研究

用中国预防医学科学院寄生虫病研究所合成的甲硝磺酰咪唑实验治疗感染弓形虫小鼠,剂量为150mg/kg/d,连用4天,与甲硝咪唑和磺胺嘧啶比较,具有同样的疗效。     

临床妊娠失败微生物感染的检测方法研究

目的：通过分析妊娠失败病人（妊娠失败组）,妊娠情况正常但要求人工流产者（正常人流组）和足月分娩且胎儿正常产妇（正常分娩组）三种妊娠状况时腺病毒（ADV）,人类微小病毒BIP（B19V）,巨细胞病毒（CMV）,爱泼思坦－巴尔病毒（EBV）,单纯疱疹病毒（HSV）,风疹病毒（RV）,柯萨奇病毒（COX）,弓形虫（TOX）,解脲支原体（UU）等微生物的检测结果,探索临床实用的妊娠失败微生物病因学检测方法。方法：妊娠失败组106人,正常人流组55人,正常分娩组55人,对同一对象,采集静脉血液和流产组织或静脉血液和胎盘组织为检测标本,应用聚合酶链反应（PCR）方法检测血液和组织标本中 各种微生物,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血液标本中相应的IgM抗体。结果：上述微生物感染的妊娠失败组中均有阳性发现,其中以PCR检测组织标本的阳性检出率最高;两个正常组也有较低的阳性发现,PCR法检测B19V,CMV,HSV,RV,TOX核酸和应用ELISA检测CMVIgM结果在妊娠失败组和两个正常组之间的差别具有显著性（P＜0．5）。结论：在妊娠失败病人中,微生物的感染率高于正常人工流产者和正常分娩产妇,提示微生物的感染是导致妊娠失败的重要原因之一,PCR和ELISA方法是妊失败临床微生物病因学论断的较实用的方法。PCR检测流产组织标本可以做确证诊断,ELISA和PCR检测血液标本可以做动态监测。     

蒿甲醚、甘草对实验性弓形虫病的疗效

小鼠腹腔接种１万个速殖子，２ｈ后分别灌胃给予：甘草３２ｇ／ｋｇ、甘草１６ｇ／ｋｇ、蒿甲醚２００ｍｇ／ｋｇ、蒿甲醚１００ｍｇ／ｋｇ、乙胺嘧啶５０ｍｇ／ｋｇ及５％淀粉溶液（对照组），连续１４ｄ。甘草各组与对照组小鼠死亡天数无差异。蒿甲醚２００ｍｇ／ｋｇ组的疗效与乙胺嘧啶组接近。图象分析表明：蒿甲醚２００ｍｇ／ｋｇ组的虫体，其周长、面积、体积均数大于对照组说明虫体有肿胀。在透射电镜下，速殖子的核膜消失，染色质减少，对类锥体、棒状体等细胞器无影响。作者首次在实验弓形虫病中证明蒿甲醚２００ｍｇ／ｋｇ的疗效与乙胺嘧啶５０ｍｇ／ｋｇ接近，并探讨了其作用机理。     

HBV上PHSA受体特性的研究

作者建立了检测乙型肝炎病毒(HBV)的人血清聚白蛋白(PHSA)受体的ELISA法,受体的检出率为32.02％(65/203)。用本室制备的抗-PHSA包被酶标板,用同样方法对HBV上的受体与循环中的PHSA结合情况作了初探,其结合率为6.5％(6/91)。PHSA在循环中的检出率为7.8％(13/165),初探结果说明HBV与血循环中的PHSA很少呈结合状态,PHSA可能主要与肝细胞膜上相类似的受体结合以此作为“桥梁”介导HBV吸附到肝细胞膜以启动感染。此外,作者还对该受体的其他特性作了探讨。     

用单克隆抗体桥联酶标法快速诊断呼吸道病毒感染的调查研究

从１９９２年以来，郑州、安阳、鹤壁等地区各自对确诊为肺炎（含毛细支气管炎）的０～１４岁患儿，无选择地用单克隆抗体碱性磷酸酶－抗碱性磷酸酶桥联酶标法，检测患儿鼻咽部脱落的柱状上皮细胞内特异性病毒抗原，共检测１００６例，检出阳性６７６例，总阳性率为６７％，其中呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）占４６％，ａｄｖ＿３．７型占７．６％，Ｆｌｕ＿Ａ．Ｂ型占２４．５％，ＰＴＶ＿１、２、３型占１８．５％，有少数混合感染。病毒感染的流行高峰在冬春两季，３岁以内为易感儿童。此结果大致查明河南省小儿下呼吸道病毒感染的流行情况。     

毛蚴抗原免疫酶染色法诊断日本血吸虫病

用毛蚴抗原免疫酶染色法(IEST)共检测94例血吸虫病患者血清,阳性率92.6％;90名健康献血员血清,假阳性率1.1％;肝吸虫病患者血清40份,交叉反应率2.5％;肺吸虫病患者血清36份,无交叉反应。本法血清工作浓度以1:200～1:400为佳;反应时间45min为宜;室温(16℃)与37℃下,实验结果无显著性差异;自来水与PBS洗涤效果无差别。本法敏感性高,特异性强、重现性及稳定性好,方法简便、经济、取得结果较快及标本容易保存。     

EHF患者血清特异性IgG的动态观察及其与病情的关系

采用ELISA间接法对流行性出血热病程中及病后180天血清特异性IgG抗体的消长情况进行了系统的动态观察,并按病情轻重进行了对比分折。特异性抗体IgG在病后1～5天即出现,第20天下降,病后180天仍维持在一定水平。重型患者抗体水平高于轻、中型患者(P<0.01)。提示这种特异性抗体反应可能与病情的严重程度有关。     

酶免疫法检测消化系癌症患者血清CEA水平

本文采用酶免疫法测定27名健康成人及79例消化系癌症患者血清CEA水平。结果表明,胃癌组、结-直肠癌组以及原发性肝癌组CEA含量与对照组之间差异非常显著(P<0.01);食道癌组与对照组相比差异显著(P<0.05)。各病例组血清CEA检出的阳性率均远高于对照组。因此,作者认为用酶免疫法检测血清CEA值,对消化系癌症的辅助诊断有一定临床价值。     

肝癌患者放射免疫治疗后血清抗抗体检测

本文采用酶联免疫吸附分析(ELISA)检测10例肝癌患者~(131)I抗人肝癌铁蛋白抗体放射免疫治疗后的血清抗抗体反应。其中6例经肝动脉插管给药,另4例经外周静脉给药。分别收集用药后第7、14、21、30和60天的患者血清标本进行动态检测,结果:静脉给药组4例中,有1例测得抗抗体,而肝动脉插管给药组6例均未测得抗抗体。