NRAGE对结直肠癌细胞增殖和侵袭能力的作用机制

目的 研究神经营养蛋白受体相互作用的同源物(NRAGE)对结直肠癌(CRC)细胞增殖和侵袭能力的作用机制。方法 选取84例CRC患者的临床病理材料,应用荧光定量PCR(qPCR)及免疫印迹实验检测CRC组织及癌旁正常组织中NRAGE的表达,分析癌组织中NRAGE的表达与临床病理特征的关系。RT-PCR及免疫印迹实验检测CRC肿瘤细胞系HT29、SW480、SW620、LOVO及结直肠正常细胞系FHC中NRAGE mRNA及蛋白表达。MTT实验、Transwell迁移实验观察NC组、过表达NRAGE组及NRAGE敲低组肿瘤细胞增殖及迁移能力。qPCR及免疫印迹实验检测各组AKT、p-AKT、ERK1/2、p-ERK1/2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的表达差异。结果 与癌旁组织相比,CRC癌组织中NRAGE的mRNA及蛋白表达明显升高。癌组织中NRAGE的表达与肿瘤分期、远处转移及淋巴结转移有关(P<0.05)。与FHC细胞相比,CRC肿瘤细胞系HT29、SW480、SW620、LOVO细胞中NRAGE的mRNA及蛋白表达较高(P<0.05)。...     

敲低Piezo2对人结肠癌细胞HCT116和SW620增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨敲低机械敏感性离子通道Piezo2对人结肠癌细胞HCT116和SW620增殖、迁移侵袭能力的影响。方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测结直肠癌组织及其相应癌旁组织中Piezo2的mRNA和蛋白表达情况;Western blot检测Piezo2在正常结肠上皮细胞NCM460、结肠癌细胞SW480和HCT116、结肠癌淋巴结转移细胞SW620的表达;将HCT116、SW620细胞系稳定转染Piezo2敲低慢病毒载体,利用RT-qPCR和Western blot检测转染后HCT116和SW620细胞的Piezo2表达情况;CCK-8法检测转染后HCT116和SW620细胞的增殖能力;Transwell法和细胞划痕修复实验检测转染后HCT116和SW620细胞的侵袭和迁移能力;通过裸鼠皮下成瘤检测HCT116和SW620细胞敲低Piezo2后肿瘤大小变化,通过免疫组化检测ki67表达。结果 RT-qPCR及Western blot实验显示,癌组织Piezo2的mRNA和蛋白表达均高于癌旁组织（P均<0.05）;Wes...     

ZNF667-AS1在结直肠癌组织中的表达及其对细胞增殖的影响

目的探讨ZNF667-AS1在结直肠癌（CRC）组织中的表达及其对细胞增殖的影响。方法以2017年3月至2019年3月上海交通大学医学院附属新华医院手术切除的24例CRC组织及癌旁（距离癌组织5cm处）正常组织cDNA及CRC细胞系（HCT116、SW480、Lovo）、结直肠上皮细胞系（NCM460）为实验对象,采用RT-qPCR法检测ZNF667-AS1mRNA表达;构建ZNF667-AS1过表达细胞模型,采用RT-qPCR检测ZNF667-AS1mRNA表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力。结果与癌旁正常组织比较,CRC组织中ZNF667-AS1mRNA相对表达量明显降低（P＜0.05）。与结直肠上皮细胞系NCM460比较,CRC细胞系（HCT116、SW480、Lovo）ZNF667-AS1mRNA相对表达量均明显降低（均P＜0.05）。HCT116、SW480细胞中,过表达组ZNF667-AS1mRNA相对表达量均明显高于空载组（均P＜0.05）。HCT116、SW480细胞的过表达效率均明显高于空载组（均P＜0.05）。ZNF667-AS1过表达组与对照组第24h时450nm波长处的吸光度值（OD450）比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,第48、72、96h时OD450明显降低（均P＜0.05）。ZNF667-AS1过表达组所形成的克隆数明显少于对照组（P＜0.05）。结论ZNF667-AS1在CRC组织中呈低表达,过表达ZNF667-AS1可抑制CRC细胞增殖及克隆形成能力。     

DTX2通过Notch2/Akt轴促进结直肠癌细胞的迁移和侵袭

目的 探讨DTX2对结直肠癌（CRC）细胞迁移侵袭的影响及作用机制。方法 利用基因工具干预CRC细胞,分为敲低组（DTX2-shRNA）、敲低空载组（neg-shRNA）、未转染组（con）、过表达空载组（pcDNA）及过表达组（pcDNA-DTX2）,利用qRTPCR及Western blotting法检测转染效率。采用划痕和Transwell侵袭实验检测DTX2基因的表达改变对CRC细胞迁移侵袭能力的影响,并通过Western blotting检测各组中Notch2、NICD、Akt、p-AKT、MMP-2及MMP-9蛋白的表达水平。CRC细胞共转染pcDNA-DTX2和Notch2 siRNA,检测回复实验对CRC细胞迁移侵袭能力的影响。结果 CRC细胞中DTX2 mRNA和蛋白表达量,敲低组中明显降低（P<0.01）,过表达组中明显升高（P<0.01）。划痕和Transwell侵袭实验提示,CRC细胞迁移侵袭能力,DTX2 shRNA显著低于con和neg-shRNA(P<0.01);pcDNA-DTX2显著高于con和pcDNA(P<0.01)。Wes...     

磷脂酸磷酸酶2域1A在不同结直肠癌细胞中的表达

目的探讨磷脂酸磷酸酶2域1A(PPAPDC1A)在人结直肠癌细胞中的表达及意义。方法取结直肠癌细胞系高转移潜能细胞LOVO、SW620和低转移潜能细胞SW480、RKO、HCT116、DLD-1进行常规培养,待细胞生长至对数生长期时,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测不同结直肠癌细胞中PPAPDC1A mRNA表达,Western blot检测不同结直肠癌细胞中PPAPDC1A蛋白表达。结果 6种人结直肠癌细胞中PPAPDC1A mRNA和蛋白表达比较差异均有统计学意义(F=41.213、344.116,P<0.05)。高转移潜能细胞LOVO、SW620中PPAPDC1A mRNA和蛋白表达显著高于DLD-1、HCT116、RKO、SW480细胞(P<0.05);高转移潜能细胞LOVO中PPAPDC1A蛋白表达显著高于SW620细胞(P<0.05);DLD-1细胞中PPAPDC1A蛋白表达显著高于HCT116、RKO、SW480细胞(P<0.05);低转移潜能细胞HCT116中PPAPDC1A蛋白表达显著高于RKO、SW480细胞(P<0.05);RKO细胞中PPAPDC1A蛋白表达显著高于SW480细胞(P<0.05)。高转移潜能细胞LOVO与SW620细胞中PPAPDC1A mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05);SW480、RKO、HCT116、DLD-1细胞中PPAPDC1A mRNA表达两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 PPAPDC1A在结直肠癌细胞系中存在差异性表达,其可能与结直肠癌的侵袭和转移有关。     

PCBP3 过表达对结直肠癌细胞 增殖和迁移的影响

目的 探讨多聚胞嘧啶结合蛋白（PCBP）3 过表达对结直肠癌（CRC）细胞增殖和迁移的影响。 方法 收集 2022 年 5 至 6 月在嘉兴市第一医院行 CRC 切除术患者的 CRC 组织及癌旁正常组织标本各 10 份,比较 CRC 组织与癌旁正常组 织中 PCBP3 mRNA 及蛋白表达水平。取人 CRC 细胞系 HCT116、HT29,使用含有 PCBP3 CDS 区序列的过表达质粒分别转染 HCT116 和 HT29 细胞（设为 HCT116 过表达组、HT29 过表达组）,未经转染的 HCT116 和 HT29 细胞分别设为 HCT116 对照组、 HT29 对照组,检测 PCBP3 过表达对 CRC 细胞增殖、侵袭能力以及 E-钙黏蛋白（E-cadherin）、裂解的胱天蛋白酶 3（Cleaved Caspase-3）蛋白表达水平的影响。 结果 CRC 组织中 PCBP3 mRNA 及蛋白表达水平均明显低于癌旁正常组织（均 P＜ 0.05）。与对照组比较,PCBP3 过表达可明显减弱 HCT116 和 HT29 细胞增殖和侵袭能力（均 P＜0.05）,上调 HCT116 和 HT29 细 胞 E-cadherin、Cleaved Caspase-3 蛋白表达水平（均 P＜0.05）。 结论 PCBP3 过表达能抑制 CRC 细胞增殖和侵袭,可能通 过上调 E-cadherin、Cleaved Caspase-3 蛋白表达水平发挥作用。     

GDI2通过p75NTR通路调节结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡

目的：探讨GDP解离抑制因子2(GDI2)对结直肠癌（CRC）细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡以及细胞周期的影响及其机制。方法：TCGA数据库分析GDI2 mRNA在CRC肿瘤组织中的表达。将CRC细胞分为sh-NC组和sh-GDI2组，采用CCK-8法检测细胞活力，克隆形成实验检测细胞增殖，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭，流式细胞术检测细胞凋亡和周期，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测GDI2基因表达，western blotting检测GDI2蛋白和神经生长因子受体（p75NTR）通路关键因子（IKK、p-NF-κB和p-IκB）的表达。构建异种移植瘤裸鼠模型，观察GDI2对CRC肿瘤生长的影响。结果：与癌旁正常组织和正常结肠上皮细胞相比，GDI2在CRC患者肿瘤组织和细胞系中的表达上调（P<0.05）。sh-GDI2能抑制CRC细胞增殖、迁移、侵袭，阻滞细胞周期进程，并促进凋亡（均P<0.05）。与sh-NC组相比，sh-GDI2组p75NTR蛋白表达上调，IKK、p-NF-κB、p-IκB蛋白表达下调（均P<0.05）。敲低GDI2可明显抑制裸鼠体内...     

miR-455-5p在结直肠癌中的表达及生物学特性

目的探讨miR-455-5p在结直肠癌（CRC）中的表达及生物学特性。方法收集40例CRC患者经手术切除的结肠和直肠癌组织标本及癌旁10cm的正常黏膜组织标本。采用qRT-PCR法检测CRC组织及癌旁正常黏膜组织中miR-455-5p的表达水平;采用脂质体转染试剂转染CRC细胞,Brdu增殖实验检测转染后CRC细胞增殖能力,流式细胞仪检测转染后CRC细胞凋亡率。应用生物信息学方法预测并验证miR-455-5p的靶基因。结果CRC组织miR-455-5p的相对表达量低于癌旁正常黏膜组织（P＜0.01）。经转染后CRC细胞中,上调miR-455-5p可抑制CRC细胞增殖和迁移,促进细胞凋亡。数据库预测PIK3R1可能是miR-455-5p的靶基因,上调miR-455-5p可抑制PIK3R1mRNA及蛋白表达。结论miR-455-5p在CRC组织中呈低表达,其生物学特性是miR-455-5p具有抑制CRC细胞生长的作用,其机制可能与调控PIK3R1的表达有关。     

LINC01285促进结直肠癌细胞的增殖和转移

目的 探究长链非编码RNA LINC01285在结直肠癌（CRC）中的表达特点及临床意义,阐明潜在的生物学功能及调控机制。方法 基于Starbase生物数据库检索LINC01285在CRC及癌旁组织中的表达量;收集本单位结直肠癌患者的CRC样本及周围正常样本各70例,分组为肿瘤组与非肿瘤组;利用荧光定量PCR实验（RT-qPCR）验证本中心CRC队列、肿瘤细胞中LINC01285的表达量,并分析其与患者临床病理参数及无瘤生存时间的关系。采用脂质体转染技术构建LINC01285低表达细胞株并分为si-Control（对照组）、si-LINC01285-1（敲低组1）、si-LINC01285-2（敲低组2）3个组,采用CCK-8实验、流式细胞学、Transwell 法及蛋白印迹法检测 LINC01285 对结直肠癌细胞的增殖、凋亡及转移能力的影响及潜在的调控机制。结果Starbasev3.0 公共数据库获取 TCGA-COAD 转录组测序数据发现 LINC01285 在癌组织中的表达量明显高于正常组织（P=0.00016）;RT-qPCR结果显示：与非肿瘤组相比,LINC01285在肿瘤组表达水平显著上调（P=0.0002）,其表达量与肿瘤组织学分化程度（P=0.036）、T分期（P=0.000）、淋巴结转移（P=0.001）、TNM分期（P=0.000）、Duke分期（P=0.009）和无瘤生存时间（P=0.0102）密切相关。相比于正常结直肠粘膜细胞,CRC细胞（尤其在SW620和HT-29）内LINC01285的表达水显著高表达（P<0.001）。相比于 si-Control 组,脂质体转染的细胞（si-LINC01285-1、si-LINC01285-2）内 LINC01285 表达量显著下降（P<0.001）。同时相比于si-Control组,LINC01285敲低CRC细胞组的增殖能力明显降低（P<0.001）、早期凋亡、晚期凋亡及总凋亡率明显升高（P<0.05）。相比于si-Control组,LINC01285敲低组的CRC细胞迁移和侵袭能力显著下降（P<0.001）,且上皮-间质转化相关通路的E-钙粘蛋白表达量显著升高（P<0.001、N-钙粘蛋白显著下调（P<0.001）。结论 LINC01285的表达与CRC的预后高度相关,可调节上皮-间质转化通路影响CRC细胞的增殖、凋亡与转移能力。     

CTHRC1在结直肠癌中的表达及作用机制

目的：检测胶原三股螺旋重叠蛋白（CTHRC1）在结直肠癌组织及细胞中的表达,探讨CTHRC1对结直肠癌细胞生物学特性的影响和作用机制。方法应用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测CTHRC1在结直肠癌组织和5株结直肠癌细胞的表达;将靶向作用于CTHRC1的shRNA和NC转染进LOVO细胞;CCK-8、Transwell、平板克隆检测细胞的增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力。Western blotting检测转染后CTHRC1、ERK1/2、P-ERK1/2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、β-catenin表达的变化。结果与正常黏膜组织相比,20例癌组织中的CTHRC1 mRNA的平均表达量为0.0411±0.054,显著高于正常黏膜组织P=0.016,蛋白水平的结果与之一致;同时,CTHRC1在SW620和LOVO细胞里的表达（mRNA水平和蛋白水平）均显著高于HT29细胞株;较之对照组,CTHRC1敲低组抑制了LOVO细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力,差异均具有统计学意义P<0.05。当CTHRC1在mRNA和蛋白水平的表达均被明显抑制时,总ERK1/2在保持基本不变的的前提下,P-ERK1/2明显降低,EMT出现逆转（即MET,E-cadherin升高,N-cadherin、Vimentin、β-catenin降低）。结论 CTHRC1在结直肠癌组织及高转移潜能的人结直肠癌细胞株SW620和LOVO中高表达。敲低CTHRC1抑制了结直肠癌细胞株LOVO的增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力。CTHRC1通过增强ERK1/2的磷酸化所介导的EMT促进结直肠癌的侵袭转移。     

LYPD8在结直肠癌中的表达及其生物学功能

目的探讨含有Ly6/Plaur结构域的高度糖基化的磷脂酰肌醇锚定蛋白8（LYPD8）在结直肠癌（CRC）中的表达及其生物学功能。方法将收集自2015年3月至2016年9月在温州医科大学附属新昌医院的40例CRC患者的CRC组织与相应的癌旁结直肠组织以及正常结直肠组织进行比较,检测不同临床分期患者CRC组织中LYPD8mRNA表达,STAT3、p65的磷酸化水平以及IL-6、TNF-α的分泌水平;同时利用真核表达载体（pIRES2）构建过表达LYPD8的质粒DNA,检测LYPD8过表达对CRC细胞增殖和迁移的影响。结果与正常组织和癌旁组织相比,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期CRC患者癌组织中LYPD8mRNA表达水平均明显降低（均P＜0.05）,其中Ⅲ期患者降低最明显（P＜0.05）。CRC组织中STAT3/p65磷酸化水平及IL-6、TNF-α水平均明显增加（均P＜0.05）。SW480细胞中LYPD8过表达,其存活凋亡百分比明显降低（P＜0.05）,迁移个数明显减少（P＜0.05）。结论LYPD8在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者CRC组织中的表达较癌旁组织及正常组织明显降低;LYPD8在CRC细胞中通过诱导STAT3、p65去磷酸化,抑制TNF-α、IL-6的分泌,从而抑制CRC细胞的增殖和迁移。     

FBXL2和Dkk-1在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的 研究结直肠癌(CRC)组织中F-盒富含亮氨酸的重复蛋白2(FBXL2)、Wnt信号通路抑制剂1(Dkk-1)的表达及临床意义。方法 选取2017年10月—2019年5月保定市第一中心医院普通外科诊治CRC患者75例作为研究对象。应用荧光定量PCR及免疫组化检测CRC癌组织和癌旁组织中FBXL2、Dkk-1 mRNA及蛋白表达水平。比较不同临床病理特征CRC患者癌组织中FBXL2、Dkk-1蛋白表达差异。Kaplan-Meier生存分析(Log-rank检验)FBXL2、Dkk-1蛋白表达与CRC患者生存预后的关系。多因素COX回归分析影响CRC患者生存预后的危险因素。结果 CRC癌组织中FBXL2、Dkk-1 mRNA表达水平低于癌旁组织(t=25.053、34.053,P均<0.001)。CRC癌组织中FBXL2、Dkk-1蛋白表达阳性率低于癌旁组织(χ²=58.134、51.042,P均<0.001)。CRC癌组织中FBXL2与Dkk-1蛋白表达呈显著正相关(r_s=0.714,P<0.001)。TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、...     

沉默p53凋亡刺激蛋白抑制因子抑制结直肠癌细胞的增殖

目的探索p53凋亡刺激蛋白抑制因子(iASPP)在结直肠癌组织/细胞中的表达及iASPP沉默后对结直肠癌细胞增殖的影响。方法该研究首先检测临床样本结直肠癌组织和癌旁正常组织中iASPP mRNA的表达差异、结直肠癌细胞系和正常结肠上皮细胞系(HCoEpiC)mRNA和蛋白质iASPP表达差异;然后在人结肠癌细胞SW480中转染iASPPsiRNA,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测iASPP mRNA表达效率,用免疫印迹试验(Western blot)检测iASPP的蛋白表达水平;最后用MTT法和Brd U法检测沉默iASPP对SW480细胞增殖的影响。结果结直肠癌组织中,iASPP mRNA表达相比癌旁正常组织上调;结直肠癌细胞LoVo、SW620和SW480中iASPP mRNA和蛋白质表达相比正常结肠上皮细胞系(HCoEpiC)均上调;在SW480细胞中转染iASPP-siRNA可下调iASPP的表达;沉默iASPP可抑制结直肠癌细胞的增殖。结论沉默iASPP基因抑制结直肠癌细胞的增殖。     

LAMβ1联合ARPC4检测在结直肠癌诊断中的应用

目的 探讨层粘连蛋白β1(LAMβ1)联合肌动蛋白相关蛋白2/3复合体4(ARPC4)检测在结直肠癌诊断中的应用价值。方法 收集2020年3月至2021年3月江苏省如皋市人民医院收治的74例结直肠癌患者的癌组织标本和癌旁组织标本。采用实时荧光定量PCR检测癌组织及癌旁组织LAMβ1、ARPC4 mRNA表达水平;采用免疫印迹法测定癌组织及癌旁组织LAMβ1、ARPC4蛋白表达水平;采用受试者操作（ROC）曲线分析LAMβ1联合ARPC4蛋白表达水平诊断结直肠癌的价值。结果 结直肠癌组织LAMβ1、ARPC4 mRNA、蛋白表达水平高于癌旁组织（P <0.05）。癌组织LAMβ1、ARPC4蛋白表达水平诊断结直肠癌的最佳截断点分别为1.02、0.94;灵敏度分别为78.38%、81.08%;特异度分别为82.43%、78.37%;曲线下面积（AUC）分别为0.815、0.804;约登指数分别为0.608、0.595;两者联合的特异度、AUC和约登指数分别为98.65%、0.873和0.757。结论 结直肠癌患者癌组织LAMβ1、ARPC4蛋白表达水平均异常升高,两者均可作为诊断结直...     

UBQLN1诱导上皮-间质转化促进食管鳞癌细胞的迁移和侵袭

目的分析泛醌蛋白1（UBQLN1）及上皮-间质转化（EMT）标志分子在食管鳞癌（ESCC）组织中的表达及其相关性,探讨UBQLN1对ESCC细胞迁移和侵袭的影响。方法 RT-qPCR和western blot检测ESCC癌组织及对应癌旁组织中UBQLN1的mRNA和蛋白表达;RT-qPCR检测ESCC癌组织及对应癌旁组织中EMT标志分子（E-cadherin、N-cadherin、Vimentin）的mRNA表达;构建UBQLN1 siRNA和过表达重组质粒,分别转染ESCC细胞系EC9706、HET-1A和TE-1;采用划痕试验和Transwell试验检测各细胞的迁移和侵袭能力;RT-qPCR和western blot检测各组EC9706细胞中EMT标志分子的mRNA和蛋白表达。结果 ESCC癌组织中UBQLN1的mRNA和蛋白表达均高于癌旁组织（均P<0.05）;ESCC癌组织中E-cadherin mRNA的表达低于癌旁组织（P<0.05）,而N-cadherin和Vimentin mRNA的表达均高于癌旁组织（均P<0.05）;ESCC组织中UBQLN1与E-cadherin的mRNA表达呈负相关（r=-0.517 3,P<0.001）,而与N-cadherin和Vimentin的mRNA表达呈正相关（r=0.780 3、0.685 6,P<0.001）。下调UBQLN1表达增加EC9706、HET-1A和TE-1细胞中E-cadherin的表达,降低N-cadherin和Vimentin的表达,抑制其迁移和侵袭,而过表达UBQLN1下调E-cadherin的表达,上调N-cadherin和Vimentin的表达,促进细胞迁移和侵袭。结论 UBQLN1能诱导EMT,促进ESCC细胞的迁移和侵袭。     

miR-17-92通过靶向抑制QKI促进结直肠癌转移

目的探讨miR-17-92和QKI蛋白在结直肠癌(CRC)生物学行为中的作用及其可能的作用机制。方法收集2017年1—12月辽宁省人民医院确诊的CRC患者29例的新鲜癌组织和癌旁组织,分别通过实时定量(qRT)-PCR技术检测miR-20a、Western blot方法检测QKI蛋白在结直肠组织中的表达水平,并观察和分析两者表达相关性;在结肠癌SW480细胞系中转染miR-20a模拟物或共转染QKI蛋白过表达质粒,通过Western blot检测QKI蛋白的表达量,同时运用Transwell迁移实验对结直肠癌细胞迁移能力的变化进行分析。结果 qRT-PCR检测显示,miR-20a在CRC组织中呈高表达(t=4.099,P=0.000);Western blot检测显示,QKI蛋白在CRC组织中呈低表达(t=3.037,P=0.005);相关性分析结果显示,miR-20a和QKI蛋白在CRC组织中的表达呈负相关(r=-0.437,P=0.018)。Western blot检测和Transwell细胞迁移实验结果显示,在结肠癌SW480细胞过表达miR-20a后,QKI蛋白的表达量下降,细胞的迁移能力增强(P<0.05);而共转染QKI过表达质粒后,QKI蛋白的表达量有所上升,细胞迁移能力的增强作用有所减弱。结论 miR-17-92和QKI共同参与结直肠癌的进展;miR-17-92可能通过靶向抑制QKI而促进结直肠癌的转移。     

敲低EEFSEC可体外抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 探讨硒代半胱氨酸tRNA特异性真核延伸因子（EEFSEC）对人前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 采用qRT-PCR法检测人正常前列腺细胞系RWPE1和人前列腺癌细胞系22Rv1、LNcap、Vcap、PC-3细胞中EEFSEC mRNA的表达;收集前列腺癌患者的癌组织和癌旁组织,采用Western blot法检测前列腺癌组织中EEFSEC的蛋白表达情况。慢病毒感染22Rv1 细胞,Western blot检测敲低效率;XTT实验检测各组细胞的增殖能力;划痕实验和Transwell实验用来检测细胞迁移能力;Transwell试验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞周期;qRT-PCR检测敲低EEFSEC后周期相关基因的mRNA水平的变化。结果 与对照组相比,EEFSEC在前列腺癌中高表达（P<0.05）;且EEFSEC高表达导致前列腺癌患者不良预后;感染敲低EEFSEC的慢病毒后,可明显降低22Rv1细胞中EEFSEC的蛋白表达水平;与对照组相比,敲低EEFSEC可显著抑制22Rv1细胞的增殖（P<0.001）,迁移（P<0.001）和侵袭能力（P<0.001）;敲低EEFSEC细胞周期主要阻滞在G0/G1期,qRT-PCR实验显示敲低EEFSEC可明显下调C-myc和CCNB1的表达,上调p15的表达。结论 敲低EEFSEC可能通过降低C-myc表达来抑制前列腺癌细胞22Rv1的增殖、迁移和侵袭能力。     

基于FAK/ERK途径探讨NRP-1对结直肠癌细胞的影响

目的 探究神经纤毛蛋白-1(neuropilin-1,NRP-1)对结直肠癌(colorectal cancer, CRC)细胞行为的作用,及其对黏着斑激酶(focal adhesion kinase, FAK)/胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases, ERK)信号途径的影响。方法将CRC细胞系DLD-1随机分为对照组、CT-707组、sh-NRP-1组、sh-NRP-1+CT-707组,按分组使用sh-NRP-1慢病毒液感染细胞与FAK抑制剂CT-707处理细胞,通过荧光显微镜观察感染慢病毒后细胞内增强型绿色荧光蛋白表达情况,实时荧光定量PCR和Western blot法检测细胞内NRP-1mRNA与蛋白的表达变化。CCK-8法和EdU染色检测细胞增殖能力,细胞划痕实验观察细胞划痕愈合率,Transwell实验检测细胞迁移与侵袭,Western blot法测定细胞内FAK/ERK相关蛋白表达情况。结果 感染sh-NRP-1重组慢病毒的DLD-1细胞中可见明显绿色荧光,细胞内NRP-1mRNA相对表达量和蛋白相对表达量均显著下调...     

SOX14对膀胱癌细胞生物学行为的影响

目的观察性别决定区Y框基因转录因子（SOX）14在膀胱癌组织中的表达情况,探讨其对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为的影响。方法收集2019年12月至2022年6月温州医科大学附属第一医院手术切除的膀胱癌组织（37例）和癌旁组织（14例）,采用qRT-PCR法检测癌组织和癌旁组织中、膀胱癌细胞和正常尿路上皮细胞中SOX14mRNA的表达水平。使用过表达和敲低SOX14载体转染膀胱癌细胞,采用细胞计数试剂盒（CCK）-8法、细胞划痕实验和Transwell实验检测并比较不同转染细胞增殖、迁移和侵袭能力的差异。结果膀胱癌组织中SOX14mRNA相对表达量显著低于癌旁组织,5637、T24、EJ、J82和RT4等5种膀胱癌细胞中SOX14mRNA相对表达量均显著低于正常尿路上皮细胞。相比相应对照组,过表达SOX14后膀胱癌细胞存活率、细胞迁移和侵袭能力均显著降低;敲低SOX14后膀胱癌细胞存活率、细胞迁移和侵袭能力均显著升高。结论SOX14在人膀胱癌组织和细胞中低表达。调控SOX14mRNA的表达水平能影响膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。提示SOX14可能是治疗膀胱癌的新靶点。     

结直肠癌患者HOXA9、FGFR1基因表达情况及临床意义研究

目的：探讨结直肠癌(CRC)患者同源盒A9(HOXA9)、成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)基因表达情况及与临床分期的相关性。方法：选取我院110例CRC患者，采集患者癌组织标本及癌旁(距病灶边缘>5 cm)正常组织标本，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测癌组织、癌旁正常组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达情况，并比较不同临床分期CRC患者(TNM分期：Ⅰ期21例，Ⅱ期28例，Ⅲ期41例，Ⅳ期20例)癌组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达情况，分析HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达与CRC患者临床分期的相关性，随访3年，比较不同预后CRC患者(失访3例，完成随访的107例患者中，死亡21例，生存86例)癌组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达情况。结果：CRC患者癌组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达量均高于癌旁正常组织(P<0.05);随着CRC患者临床分期升高，癌组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达量逐渐升高(P<0.05);CRC患者癌组织中HOXA9 mR...