多靶点沉默SOST基因修饰MC3T3-E1细胞注射对小鼠椎体微结构的影响

目的 利用多靶点SOST基因沉默技术修饰小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1,并将其注射到小鼠体内,观察其对小鼠椎体骨密度及微结构的影响。方法 取18只18月龄雌性C57BL/6小鼠在无菌条件下手术切除双侧卵巢制作骨质疏松模型,并分为3组（n=6）：SOST基因沉默组注射采用多靶点SOST基因沉默技术修饰并同时转染CRISPR-sgRNA载体系统和SOST-RNAi修复模板载体假病毒颗粒的MC3T3-E1细胞;阴性组注射同时转染CRISPR-sgRNA载体系统和SOST-N修复模板载体假病毒颗粒的MC3T3-E1细胞;空白组注射不作任何处理的MC3T3-E1细胞。采用HE染色和Masson三色染色观察小鼠椎体骨小梁面积的变化,免疫组化染色观察骨组织中骨保护素（OPG）和RANKL表达的变化,实时荧光定量PCR检测观察各组细胞SOST及骨代谢相关细胞因子（RUNX2、β-catenin、RANKL、OPG）的表达变化。结果 L₁ HE染色和L₂ Masson三色染色结果显示,SOST基因沉默组骨小梁面积大于阴性组和空白组,差异均有统计学意义（P < 0.05）。L₂免疫组织化学染色结果显示,SOST基因沉默组OPG表达量高于阴性组和空白组,RANKL表达量低于阴性组和空白组,差异均有统计学意义（P < 0.05）。L₃实时荧光定量PCR检测结果显示,SOST基因沉默组SOST和RANKL表达量低于阴性组,RUNX2、β-catenin和OPG表达量高于阴性组,差异均有统计学意义（P < 0.05）。结论 多靶点沉默SOST基因修饰MC3T3-E1细胞尾静脉注射能够促进小鼠成骨细胞分化和分泌功能,抑制破骨细胞活性,有效改善小鼠椎体微结构。     

血管紧张素-（1-7）及其受体激动剂AVE0991治疗大鼠急性肺损伤的效果

目的 探讨血管紧张素-（1-7）［Ang-（1-7）］及其特异性受体激动剂AVE0991用于治疗大鼠急性肺损伤（ALI）的效果。
方法 选择清洁级雄性SD成年大鼠45只，6～8周龄，体重250～300 g。采用随机数字表法将大鼠分为五组：对照组（C组）、ALI组（L组）和Ang-（1-7）组（LA组）、AVE0991组（LAV组）和Ang-（1-7）抑制剂（A-779）（LAN组），每组9只。L组静脉注射脂多糖（LPS） 5 mg/kg，机械通气V_T 15 ml/kg，持续4 h；C组静脉注射与 L组等容量的生理盐水，机械通气V_T 8 ml/kg，持续4 h；LA组、LAV组和LAN组静注LPS 5 mg/kg，机械通气V_T 15 ml/kg，持续2 h后分别静注Ang-（1-7） 50 pmol·kg^-1·min^-1、AVE0991 500 pmol·kg^-1·min^-1和A-779 100 pmol·kg^-1·min^-1，继续机械通气2 h 。记录机械通气前（T₀）、机械通气 2 h（T₁）、药物处理 30 min（T₂）、60 min（T₃）、90 min（T₄）、120 min（T₅）时的肺动脉压（PAP）；T₁和T₅时取肺动脉血行血气分析，记录LA组、LAV组和LAN组的PaCO₂、PaO₂。处死大鼠，对支气管肺泡灌洗液（BALF）采用瑞氏-姬姆萨染色行白细胞分类计数，采用ELISA法检测股静脉血TNF-α浓度，采用肺组织称重法计算肺湿/干重比（W/D），采用HE染色观察肺组织病理改变并评估肺损伤程度。
结果 与T₁时比较，T₂时LA组PAP明显降低（P<0.05），T₂—T₄时LAV组PAP明显降低（P<0.05），T₅时LA组PaO₂明显升高（P<0.05）。与C组比较，L组和LAN组BALF中白细胞计数明显增多（P<0.05），L组、LA组、LAV组和LAN组血清TNF-α浓度和W/D值明显升高（P<0.05）。与L组比较，LA组和LAV组BALF中白细胞计数、血清TNF-α浓度和W/D值明显降低（P<0.05）。与LA组比较，LAN组BALF中白细胞计数、血清TNF-α浓度和W/D值明显升高（P<0.05）。C组肺组织损伤轻微，L组肺组织损伤中度，LA组和LAV组肺组织损伤轻度，LAN组肺组织损伤严重。
结论 Ang-(1-7)及AVE0991可以减轻大鼠大潮气量通气合并LPS所致ALI的炎症反应，改善肺损伤，具有肺保护作用。     

肺动态顺应性指导个体化呼气末正压通气对老年患者腹腔镜结直肠癌术中肺功能的影响

目的 观察肺动态顺应性（Cdyn）指导个体化呼气末正压通气（PEEP）对老年患者腹腔镜结直肠癌术中肺功能的影响。
方法选择择期行腹腔镜结直肠癌根治术的老年患者68例，男37例，女31例，年龄65～79岁，BMI<30 kg/m²，ASA Ⅱ或Ⅲ级。采用随机数字表法将患者分为两组：个体化PEEP组（P组）和对照组（C组），每组34例。P组在插管完成即刻、气腹-屈氏体位建立即刻、气腹结束即刻行肺复张及PEEP滴定试验，C组设置固定PEEP 5 cmH₂O。记录P组3次滴定时最佳PEEP和实际V_T。记录气管插管完成后10 min（T₁）、气腹-屈氏体位建立后10 min（T₂）、60 min（T₃）、手术结束拔管前（T₄）PaO₂、PaCO₂、P_ETCO₂，计算氧合指数（OI）、死腔/潮气量比值（Vd/V_T）、肺泡-动脉血氧分压差（A-aDO₂）、驱动压和Cdyn。采用ELISA法测定麻醉诱导前（T₀）、拔管后10 min（T₅）的白细胞介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、肺Clara细胞分泌蛋白（CC16）及肺泡表面活性物质-D（SP-D）的浓度。记录术后肺部并发症（PPCs）的发生情况。
结果 P组滴定最佳PEEP的中位数为4 cmH₂O。与C组比较，P组T₄时PaO₂、OI明显升高，T₁、T₃、T₄时Cdyn明显升高，T₁—T₄时驱动压明显降低，T₅时CC16血清浓度明显降低（P<0.05）。两组T₁—T₄时PaCO₂、P_ETCO₂、A-aDO₂、Vd/V_T差异无统计学意义。两组术后3 d均未发生严重PPCs。
结论 在老年患者腹腔镜结直肠癌根治术中，采用压力控制通气下肺动态顺应性指导个体化PEEP的肺保护通气策略，可提高患者术中肺动态顺应性，降低驱动压，改善手术结束时氧合，降低术后CC16血清浓度，改善术中肺功能。     

锂剂促进自噬保护受损神经细胞的研究

目的：研究锂剂能否通过促进细胞自噬发挥神经细胞保护作用。方法：将SH-SY5Y神经细胞分为4组,包括对照组（正常换液）,模型组（培养液含有200 μmol/L H₂O₂的培养液）,锂剂组（培养液含200 μmol/L H₂O₂及1.0 mmol/L LiCl的培养液）,3-MA干预组（培养液含200 μmol/L H₂O₂、1.0 mmol/L LiCl及5 mmol/L 3-MA的培养液）。培养6 h后进行MTT检测及Beclin 1、LC3b免疫组化染色,评估细胞存活情况及自噬水平。结果：3-MA干预组细胞存活率较模型组降低（P<0.05）,锂剂组细胞存活率较模型组提高（P<0.05）。经过3-MA干预后,细胞存活率较对照组、模型组及锂剂组均有所降低（P<0.05）。经过H₂O₂处理后,细胞Beclin 1、LC3b染色面积增大,染色加深。经锂剂处理后细胞Beclin 1、LC3b染色面积进一步增大,染色更深。3-MA干预组细胞Beclin 1、LC3b染色面积较对照组大、染色深,但细胞染色面积较模型组和锂剂组均小,且染色更为浅淡。结论：锂剂能够促进受损神经细胞存活,促进自噬作用是锂剂发挥神经保护作用的机制之一。     

负载丹酚酸B的破骨前体细胞膜纳米颗粒对成骨细胞和破骨细胞分化的影响

目的 通过制备破骨前体细胞膜纳米颗粒（nanoparticles，NPs）负载丹酚酸B（salvianolic acid，SalB），构建载药纳米颗粒SalB-NPs，观察其对破骨细胞及成骨细胞分化的影响。方法 采用超声裂解、挤膜的方法制备NPs，并将NPs与SalB共孵育后，使用200 nm聚碳酸酯膜挤出，获得SalB-NPs。在诱导小鼠原代破骨细胞分化和成骨前体细胞（MC3T3-E1）成骨分化的过程中，按照处理方式不同，分为对照组、SalB组、SalB-NPs组。采用透射电镜、纳米粒度及ZETA电位仪和Western Blot对材料进行表征，采用噻唑蓝检测试剂盒检测材料对RAW 264.7和MC3T3-E1细胞活力的影响，采用高效液相色谱法检测SalB的释放率和装载率。采用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色评价破骨细胞分化能力，通过碱性磷酸酶（ALP）染色和茜素红染色评估成骨分化能力，采用Real time-PCR检测破骨细胞分化及成骨分化相关基因表达水平。结果 制备的纳米颗粒直径在200 nm左右，同时表达RANK蛋白。TRAP染色显示SalB-NPs显著抑制破骨细胞的形成，下调破骨分化相关基因水平，与对照组和SalB组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。使用成骨诱导培养基诱导MC3T3-E1细胞成骨分化，14 d ALP染色和21 d茜素红染色均显示SalB-NPs组ALP活性和钙盐沉积量较SalB组明显增加，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 SalB-NPs体外发挥促进成骨分化、抑制破骨细胞形成双重功效，作为骨质疏松的治疗药物开发，有很好的应用前景，未来仍需在骨质疏松模型动物进一步验证其治疗效果。     

颈椎终板弧形高度与椎间隙后缘骨赘的相关性研究

目的：通过对颈椎病患者上下终板弧形高度、椎间隙高度与椎间隙后骨赘的影像学测量，研究其相关性及其临床应用价值。方法：收集2017年9月至2018年9月颈椎病手术108例患者的临床资料，男48例，年龄30~72岁，平均52岁，女60例，年龄37~79岁，平均54岁。其中C_2，3 6例，C_3，4 15例，C_4，5 32例，C_5，6 42例，C_6，7 13例。术前及术后摄颈椎X线片，利用PACS（Picture Archiving and Communication Systems）调阅影像，测量椎间隙的下上终板弧形高度（L₁，L₂），椎间隙高度（L₃）及后方骨赘的宽度（L₄）。利用Spearman分析它们之间的相关性。结果：L₁与L₄对比（r=-0.34，P<0.05），L₃与L₄对比（r=-0.36，P<0.05），存在负相关。L₁与L₃对比（r=0.38，P<0.05），L₂与L₃对比（r=0.48，P<0.05），存在正相关。L₁与L₂对比（P>0.05），L₂与L₄对比（P>0.05），差异无统计学意义。结论：下终板弧形高度与椎间隙后缘骨赘宽度呈负相关，通过其测量可明确颈椎退变程度，对颈椎病的早期防治有指导意义。     

树枝状聚合物纳米载体靶向结合损伤心肌细胞的体外实验研究

目的 制备一种可靶向于缺氧损伤心肌细胞的纳米载体,检测其基本理化性质和细胞毒性作用,并实现其与损伤原代心肌细胞的靶向结合. 方法 化学合成树枝状聚合物纳米载体(非靶向纳米载体)和血管紧张素Ⅱ1型(angiotensinⅡType 1,AT1)多肽修饰的树枝状聚合物纳米载体(靶向纳米载体),测定其结构、基因负载能力和负载基因后的粒径、电位,观察其形貌,检测其对心肌细胞的毒性.将SD乳鼠原代心肌细胞采用随机数字表法分为3组:缺氧损伤+非靶向组(A组,原代心肌细胞加入非靶向纳米载体后在缺氧条件下培养),正常+靶向组(B组,加入靶向纳米载体,在常氧条件下培养),缺氧损伤+靶向组(C组,加入靶向纳米载体,在缺氧条件下培养),观察并定量两种纳米载体与心肌细胞的结合情况. 结果 合成的靶向纳米载体与基因质量比为6∶1时可完全负载基因,其粒径为(180±55) nm,zeta电位为+5.4 mV,透射电子显微镜下近球形.当靶向纳米载体的浓度小于200 mg/L时,不同时间点靶向纳米载体作用的细胞活性均大于85％.分别与缺氧损伤+非靶向组(荧光强度为7 102±134)和正常+靶向组(8 120±235)相比,缺氧损伤+靶向组(12 350±495)心肌细胞膜周围的红色荧光均显著增强(P＜0.05). 结论 AT1多肽修饰的树枝状聚合物纳米载体毒性小,基因负载能力强,并可与体外高表达AT1受体的心肌细胞靶向结合.该靶向纳米载体有望为心肌缺血的基因治疗提供新的递送策略.     

青年L5峡部应力骨折患者上关节突间距的解剖学特点

目的 探讨青年L₅峡部应力骨折患者L₅双侧上关节突间距的解剖学特点。方法 回顾性分析2018年3月—2019年9月解放军总医院第七医学中心收治的21例青年男性L₅峡部应力性骨折患者的影像学资料（应力骨折组），并与24例健康青年男性志愿者影像学资料进行对比（对照组）。所有入组对象均拍摄腰椎CT及三维重建，并在CT上测量L₅双侧上关节突顶点间距（a）和S₁上关节突顶点间距（b），计算两者比值c（c=a/b），统计分析2组c值差异。结果 应力骨折组患者c值高于对照组，2组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 青年男性L₅峡部应力骨折患者其L₅上关节突间距增宽，S₁上关节突间距相对较小，该解剖特点可能与峡部应力骨折的发生相关。     

允许性高碳酸血症对老年糖尿病患者术后认知功能的影响

目的 探讨允许性高碳酸血症对老年糖尿病患者术后认知功能的影响。
方法 选择全麻下行腹腔镜上腹部手术的老年糖尿病患者60例，将患者随机分为两组：允许性高碳酸血症通气糖尿病组（DH组）和常规通气糖尿病组（DR组），每组30例。另选择全麻下行腹腔镜上腹部手术非糖尿病老年患者60例，将患者随机分为两组：允许性高碳酸血症通气非糖尿病组（NH组）和常规通气非糖尿病组（NR组），每组30例。麻醉诱导后行机械通气，调控呼吸参数使DH组和NH组维持PaCO₂ 45～65 mmHg，DR组和NR组维持PaCO₂ 35～45 mmHg。记录气腹前5 min及气腹后5、15、30 min的P_ETCO₂，并采集以上时点桡动脉、颈内静脉血样行血气分析，记录pH值、PaCO₂，计算动脉-颈内静脉血氧含量差（Da-jvO₂）和脑氧摄取率（CERO₂）。检测麻醉诱导前及术后3 d的血清S100β蛋白浓度。记录术前1 d和术后1、3、7 d的蒙特利尔认知评估量表（MoCA）评分和术后认知功能障碍（POCD）的发生情况。
结果与气腹前5 min比较，四组气腹后5、15、30 min时P_ETCO₂和PaCO₂明显升高，pH值、Da-jvO₂和CERO₂明显降低（P<0.05）。与麻醉诱导前比较，四组术后3 d血清S100β蛋白浓度均明显升高（P<0.05）。与术前1 d比较，四组术后1、3 d MoCA评分均明显降低（P<0.05）。与DR组比较，DH组气腹前5 min及气腹后5、15、30 min时P_ETCO₂明显升高，pH值、Da-jvO₂和CERO₂明显降低，术后3 d血清S100β蛋白浓度明显降低，术后1、3 d MoCA评分明显升高，POCD发生率明显降低（P<0.05）。与NR组比较，NH组气腹前5 min及气腹后5、15、30 min时P_ETCO₂明显升高，pH值、Da-jvO₂和CERO₂明显降低，术后3 d血清S100β蛋白浓度明显降低，术后1、3 d MoCA评分明显升高，POCD发生率明显降低（P<0.05）。与NH组比较，DH组气腹前5 min及气腹后5、15、30 min时Da-jvO₂和CERO₂明显升高，术后3 d血清S100β蛋白浓度明显升高，术后1、3 d MoCA评分明显降低（P<0.05）。
结论允许性高碳酸血症可改善老年糖尿病患者术中脑氧代谢，降低术后血清S100β蛋白浓度，降低术后认知功能障碍的发生率。     

肝切除术中肾脏局部氧饱和度与术后急性肾损伤的相关性

目的 应用近红外光谱技术（NIRS）监测肝切除术中肾脏局部氧饱和度（rSKO₂）的变化，评估其与术后急性肾损伤（AKI）的相关性。
方法 选择2020年9月至2021年10月择期在全麻下行开腹肝切除术的患者99例，男77例，女22例，年龄60～80岁，BMI 18～30 kg/m²，ASA Ⅱ或Ⅲ级。根据改善全球肾脏病预后（KDIGO）标准判断术后7 d内是否发生AKI，并将患者分为两组：AKI组和非AKI组。记录基础值（T₀）、麻醉诱导即刻（T₁）、手术开始即刻（T₂）、肝门阻断即刻（T₃）、肝门阻断后5 min（T₄）、10 min（T₅）、肝门开放即刻（T₆）、肝门开放后10 min（T₇）、20 min（T₈）、30 min（T₉）、手术结束时（T₁₀）的rSKO₂。记录肝门阻断时间、液体输注量、出血量等术中情况。采用单因素和多因素Logistic回归分析术中rSKO₂与AKI的相关性。
结果 术后7 d内有16例（16%）患者发生AKI。与AKI组比较，非AKI组T₁、T₃—T₇、T₉、T₁₀时rSKO₂水平明显升高（P＜0.05）。术中rSKO₂绝对值低于70%（OR=3.87，95%CI 1.17~15.37，P＜0.05）或下降幅度大于基础值的20%（OR=4.96，95%CI 1.53~18.66，P＜0.05）与术后AKI发生呈正相关。
结论 术中rSKO₂下降与术后AKI发生呈正相关，NIRS监测rSKO₂可以较好地反映患者术中肾脏氧供需状态。     

James Alison Glover (1874-963), OBE (1919) CBE (1941) MD (1905) DPH (1905) FRCP (1933)

James Allison Glover served in the Boer War and World War I. In 1917 he was appointed to the Cerebro-spinal Laboratory in London. There, his work on cerebrospinal fever resulted in the "spacing out" of beds in huts and earned him the name of "good friend of the private soldier". In 1919 he proceeded OBE for his work during the war. In 1920 he was appointed medical officer to the new Ministry of Health. He made significant contributions to rheumatology and the understanding and treatment of tonsillitis, and to public health more widely.     

热毒清对家兔内毒素性DIC急性肺损伤的保护作用

采用间隔２４小时两次注射大肠杆菌内毒素方法复制家兔急性肺损伤模型，检测血浆、肺组织及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中白细胞介素８（ＩＬ－８）、硝酸盐／亚硝酸盐（ＮＯ２／ＮＯ３）水平及有关指标改变，观察中药制剂热毒清（ＲＤＱ）对家兔内毒素性肺损伤的保护作用。发现ＲＤＱ可降低肺系数及通透指数，减少ＢＡＬＦ中白细胞计数；ＩＬ－８、ＮＯ２－／ＮＯ３－水平、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）活性亦显著降低（Ｐ＜０．０１），肺组织学损伤减轻。证实ＲＤＱ对内毒素所致的家兔急性肺损伤具有一定的保护作用。     

Anaplastic (undifferentiated) thyroid carcinoma (ATC)

BACKGROUND: Old age, reduced general condition and far advanced tumor stage associated with poor prognosis induced the belief that, apart from verifying the diagnosis of anaplastic thyroid carcinoma (ATC) by biopsy, no additional surgery would be justified. However, in some cases, an ultraradical approach was recommended in order to improve the quality of life and survival. METHODS: These are the results of a retrospective analysis involving 120 patients subjected to restricted radical surgery (excising as much as possible of the tumor and local metastases, foregoing ultraradical removal of vital organs such as esophagus, larynx and trachea). RESULTS: Irrespective of the surgical approach used, 6+/-2% of the patients were alive after 5 years (median survival time: 3.1 months). Patients without tumor residues (R0-resections; extending to soft tissue only; Kaplan-Meier estimate - cumulative survival 15+/-5%) had a significantly better prognosis than patients with tumor residues (R1/R2-resections; no patient survived 5 years; P<0.001). Tumor morphology (spindle cells, giant cells, mixed cells) or differentiated parts of the tumor as well as lymph-node involvement had no statistically significant impact on the prognosis. CONCLUSIONS: In ATC, the objective should be to remove as much of the carcinoma as possible (in the ideal case, a thyroidectomy); if lymph nodes are affected, neck dissection should be the goal, if possible (restricted radical approach, improving quality of life). Ultraradical surgery to include segmental resection of larynx, trachea or esophagus do not seem to be indicated, as prolonged survival is questionable and quality of life is certainly diminished.     

High-resolution EEG (HR-EEG) and magnetoencephalography (MEG)

HR-EEG (high resolution EEG) and MEG (magnetoencephalography) allow the recording of cerebral electromagnetic activities with excellent temporal resolution. These tools have also considerably progressed in spatial resolution and now constitute real methods of Electric and Magnetic Source Imaging. Their limits and the precision of the results obtained are discussed in distinct types of partial epilepsy. HR-EEG and MEG allow localization of scalp-EEG interictal spikes and more rarely ictal activities. They now contribute to the presurgical evaluation of pharmacoresistant partial epilepsies. These investigations appear to be of particular importance in presurgical assessment of MRI-negative epilepsy.