噬菌体扩增技术在结核分枝杆菌检测中的应用体会

作为对人类最具威胁性的传染病之一,近年来结核病流行正逐步加剧.目前对结核病诊断主要依靠与实验室检查、临床症状、体征及胸片等其他辅助检查相结合.     

结核分枝杆菌抗原及其研究进展

结核病是危害人类健康的最大传染病之一。结核分枝杆菌抗原遗传背景较复杂,且个体差异较大,应用单一抗原和单一的诊断方法无法对结核病进行及时、准确的诊断。近年来国内外学者发现了一些新的结核分枝杆菌菌属抗原和特异性抗原,并逐渐完善了结核病的诊断方法,对结核病的诊断具有重大意义。现就这些抗原的生物学特性及其在结核病诊断中的研究进展进行综述。     

重组结核分枝杆菌38KD-RV2041C特异性抗原在结核病诊断中的价值

目的:研究结核分枝杆菌38KD-RV2041C特异性抗原在结核病辅助诊断中的价值,并与目前临床上常用的2种结核杆菌抗体试剂盒(韩国、高达)作对比,探讨其是在结核病诊断中的应用价值。方法:用化学发光酶免疫分析法检测54例结核病患者、49例非结核肺部疾病患者血清中38KD-RV2041C水平,评价其诊断效能。结果:结核病组38KD-RV2041C表达水平(151999±25035.8pg/ml)高于非结核呼吸病组(41419.4±5692.8pg/ml,P0.05)。38KD-RV2041C在结核组中的灵敏度性(83.3%),较韩国、高达结核杆菌抗体试剂盒(24.1%、33.3%)明显升高(P0.05)。结论:38KD-RV2041C可以成为结核病辅助诊断的备选抗原之一。     

再探结核分枝杆菌及结核病

结核杆菌属于分枝杆菌属，是专性需氧菌。由于细胞壁含大量蜡质和疏水性阿拉伯-半乳聚糖-分枝菌酶，难以用革兰染色着色，为抗酸阳性菌。通常寄生在细胞内，是一种兼性胞内寄生的人类致病菌，可引起结核病。结核菌是分枝杆菌属中对人类致病的主要病原菌，其中以人型结核菌感染发病率最高，占结核患者的90％左右，其次为牛型和非洲型结核菌。     

结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测系统在肺结核诊断中的应用

目的 探讨结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测(Gene Xpert MTB/RIF)系统在肺结核诊断检测中的应用价值.方法 选取396例肺结核门诊患者痰标本,分别进行Gene Xpert MTB/RIF系统、酸性罗氏培养及比例法药敏试验和抗酸染色涂片镜检,分析对比结果.结果 在396例疑似肺结核患者中,G...     

结核分枝杆菌分泌性抗原在结核诊断中的研究进展

结核病是由结核分枝杆菌所引起的一种严重危害人民健康的慢性传染病,是目前所知传染病中最致命的传染病.结核病诊断主要依靠细菌学检测、分子生物学检测、免疫学检测和病理诊断,随着近年来全球结核病发病率的上升,目前已有的检测技术灵敏度和特异性较低,尚不能达到理想的诊断率,寻找高效、准确、简便的诊断方法是控制结核病疫情的关键.已经...     

结核分枝杆菌的分子生物学检测研究进展

该文对用于结核分枝杆菌菌种及菌株鉴定的基因标记和序列作一综述。这些基因标记和序列包括插入序列、串联重复序列、存在于质粒pTBNl2中的多态性GC丰富的重复序列、36bp顺向重复序列、间隔子寡核苷酸等。     

重组结核分枝杆菌38KD-RV2041C 特异性抗原在结核病诊断中的价值

目的：研究结核分枝杆菌38KD-RV2041C特异性抗原在结核病辅助诊断中的价值,并与目前临床上常用的2种结核杆菌抗体试剂盒（韩国、高达）作对比,探讨其是在结核病诊断中的应用价值。方法：用化学发光酶免疫分析法检测54例结核病患者、49例非结核肺部疾病患者血清中38KD-RV2041C水平,评价其诊断效能。结果：结核病组38KD-RV2041C 表达水平（151999±25035．8pg/ml）高于非结核呼吸病组（41419．4±5692．8pg/ml,P＜0．05）。38KD-RV2041C在结核组中的灵敏度性（83．3％）,较韩国、高达结核杆菌抗体试剂盒（24．1％、33．3％）明显升高（ P ＜0．05）。结论：38KD-RV2041C可以成为结核病辅助诊断的备选抗原之一。     

结核分枝杆菌检测技术研究进展

结核是由结核分枝杆菌引起的一种世界性疾病,为最受关注的公共卫生问题之一。虽然近年来结核病的发病率呈下降趋势,但其对人类健康造成的危害仍十分严峻。患者的及时上报是结核病防控的重要环节之一,报告率的上升有助于提高结核的治愈率以及卫生机构对结核患者的管理强度。快速、准确的诊断方法直接影响结核病的报告率,影响疾病传播和患者管理,是控制结核发病的基础。近年来,分子诊断技术发展迅速,为结核病的快速诊断提供了新的思路。分子诊断技术检测速度快,灵敏度、特异度、准确率高,绝大多数技术成本低廉,可同时对多个样本进行检测,实用性较强,具有较好的发展前景。本文对现阶段临床上实际应用的结核诊断技术与近年来出现的新型分子诊断技术进行简要概述。     

聚合酶链反应扩增38KDa蛋白质基因诊断结核分枝杆菌

应用ＭＴ１和ＭＴ２引物通过聚合酶链反应扩增人型和牛型结核分枝杆菌的３８ＫＤａ蛋白质基因。测定了反应体系的灵敏度（０．１２×１０２ＣＦｕ／ｍｌ）和特异性。对三种不同的ＤＮＡ抽提法作了比较，认为用Ｔｗｅｅｎ２０和ＮＰ４０作为裂解液与ＳＤＳ法比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５），且Ｔｗｅｅｎ２０比ＮＰ４０更适合。     

结核分枝杆菌培养及初始耐药监测

目的：分析结核分枝杆菌的耐药情况,为结核病的治疗提供依据。方法180例痰涂片抗酸杆菌阳性肺结核患者的痰液标本使用改良酸性罗氏（ L-J）培养基进行培养。药物敏感试验采用绝对浓度法的间接法,分析其耐药性。结果罗氏培养阳性率为95.00％。171株结核杆菌耐药率46.8％,耐多药率为14.6％。结论黑龙江省结核病患者耐药情况比较严重。     

279株结核分枝杆菌耐药情况分析

目的：了解目前云南省结核病耐药情况,为临床治疗及制定策略提供依据．方法采用世界卫生组织推荐的比例法对临床分离的结核分枝杆菌菌株进行INH、RFP、EMB、SM 4种一线抗结核药物的药敏试验．结果301株分枝杆菌分离株中279株（92.7%）为结核杆菌复合群,结核分枝杆菌的总体耐药率为31.5%（88/279）,其中初始耐药率为27.3%,获得性耐药率为44.3%;结核杆菌对INH、RFP、EMB和SM的耐药率分别为19.7%、10.8%、12.9%和19.0%,耐多药率为9.3%．总体耐药情况与云南省既往数据以及全国水平基本持平．结论结核病控制工作任重道远．应及早发现耐药结核病患者并给予规律治疗,同时应把耐药趋势的追踪和耐药监测作为结核病防治规划的重要组成部分并定期观察．     

降钙素原检测在结核分枝杆菌感染中的临床应用

血清降钙素原检测可作为细菌感染早期诊断的评价指标具有良好的敏感性和特异性.血清PCT检测能动态监测脓毒血症患者病情变化,能反映细菌感染的严重程度,为临床医师评估病情转归提供客观依据;血清PCT检测的结果可反映抗菌药物的疗效,能为临床医师及时调整抗菌药物提供依据.     

应用3种抗原的芯片系统检测结核分枝杆菌

目的 探讨3种抗原的芯片系统检测结核分枝杆菌的敏感性及特异性。方法 以3种结核抗原的芯片检测系统，对临床确诊的100例肺结核标本及100例非结核标本进行检测。结果 芯片检测的敏感度为88％，两项或三项指标同时阳性时，特异度可达100％；芯片检测结核组与非结核组结果有高度显著性差异（P〈0．01）。结论 结核分枝杆菌3种抗原的芯片敏感性高、特异性强。     

临床检验结核分枝杆菌的几种方法比较

结核病菌 (ＴＢ)是严重危害人类健康的疾病。本文对我院收治的肺结核 5 6例 ,结核性胸膜炎 14 4例分别采用痰涂片法、培养法、ＰＣＲ法、金标免疫斑点法进行检验 ,并对检测结果进行综合分析。1　临床资料与方法1 1　观察对象本文 2 0 0例中 ,肺结核 5 6例 ,结核性胸膜炎 14 4例 ,其中 ,肺结核男 14例 ,女 4 2例 ;结核性胸膜炎男 96例 ,女 4 8例。1 2　标本采集空腹采静脉血 2ｍｌ,留取晨痰、胸水。1 3　仪器和试剂2Ｆ - 3型ＤＮＡ扩增仪 ;结核抗体 ,ＴＢ -Ａｂ检测试剂盒 (蓝波生物 ) ;改良罗氏结核培养基 (中国开封科洋生物技术研究所 )。1…     

miRN A与结核分枝杆菌感染的研究进展

microRNA（miRNA）是一类长度为19～22个核苷酸、在转录后水平对基因的表达起调控作用的单链非编码RNA［1］。1993年起,Lee等［2］和Reinhart等［3］先后在秀丽隐杆线虫中发现lin‐4和let‐7可以负向调控靶基因的表达,迄今,已有24000多个miRNA被收录并注释,而且数量逐年递增。研究表明, miRNA在细胞死亡与增殖、癌症发生与发展和疾病转归中发挥着重要的作用。尽管现代医学和诊断技术不断进步,结核病仍然是一个重大的挑战。据世界卫生组织（world health or‐ganization ,WHO）最新统计,目前,全球结核感染者约占总人口的1／3,每年有800多万人发展为活动性结核病,并有140多万人死于该病。虽然结核分枝杆菌和宿主环境之间的相互作用已广泛研究,但对相关RNA的了解仍然非常有限。阐明miRNA在结核分枝杆菌感染中扮演的角色,有助于更透彻地了解结核病的发生、发展,为制订有效的控制策略提供新思路。     

应用基因芯片检测分枝杆菌在关节结核早期诊断中的临床应用

目的 探讨基因芯片技术对关节结核的早期临床诊断价值.方法 抽取关节疾病108例患者的关节积液,应用基因芯片技术对关节积液进行分枝杆菌的检测及其菌种鉴定,并将结果与传统的抗酸染色法进行比较.结果 108例关节疾病中,确诊为结核性关节炎59例.基因芯片法显示结核分枝杆菌阳性51例,阳性率86.44％ (51/59);非结核分枝杆菌感染8例,阳性率7.41％ (8/108);2例复合阳性.抗酸染色显示阳性5例,阳性率8.47％(5/59),该5例基因芯片法也阳性.基因芯片法和抗酸染色法的结核分枝杆菌阳性检出率有统计学差异(P＜0.01).非关节结核49例基因芯片法检测结核分枝杆菌均阴性,特异度为100％.结论 基因芯片技术对鉴别结核分枝杆菌及非结核分枝杆菌分型具有快速、敏感、特异性高的特点,在关节结核早期诊断和治疗上具有重要临床价值.     

噬菌体生物扩增技术在结核分枝杆菌药敏检测中的应用

目的探讨噬菌体生物扩增技术(PhaB)在结核分枝杆菌(MTB)耐药研究中的应用价值。方法应用PhaB法同时测定233株结核分枝杆菌分离株对异烟肼(INH)、链霉素(SM)、利福平(RFP)及左旋氧氟沙星(LEV)的耐药性,并用改良罗氏培养法(LJ)做对照,比较两种方法的检测结果。结果PhaB法检测INH、SM、RFP、LEV的药敏结果与改良罗氏培养法药敏结果相比符合率分别为97.4%、96.6%、95.3%、96.9%。同时检出耐多药菌株26株,占11.1%。结论PhaB法能快速进行结核分枝杆菌的药敏检测并与金标法LJ符合率高,可作为基层结防单位MTB耐药性的快速筛选方法。