LOX-1在糖尿病大鼠大血管病变中的表达及普罗布考的干预作用

目的探讨糖尿病大鼠大血管病变低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）的表达及普罗布考的干预机制。方法 50只健康SD大鼠随机分为4组,A组为对照组,给予普通饮食。B、C、D三组（糖尿病组）给予高糖高脂饮食。B组在造模前8周和造模后8周普罗布考全程干预,C组在造模后加普罗布考干预8周。采用免疫荧光法测定大鼠主动脉原位活性氧（ROS）,用RT-PCR和Western blot定量测定LOX-1 mRNA和蛋白水平。结果与对照组相比,糖尿病组大鼠主动脉原位ROS水平及LOX-1 mRNA、蛋白水平明显增高（P均〈0.05）;普罗布考干预组糖尿病大鼠主动脉原位ROS水平及LOX-1 mRNA、蛋白水平较未干预组明显降低（P均〈0.05）。结论 LOX-1在2型糖尿病大鼠大血管病变早期表达增高,其增高与血管原位ROS水平增高有关;普罗布考可以降低2型糖尿病血管LOX-1的表达水平。     

糖尿病大鼠肾脏热休克蛋白70的表达及普罗布考干预的研究

目的 观察糖尿病大鼠肾脏中热休克蛋白70（HSP70）的表达并观察普罗布考对HSP70表达的影响. 方法 链脲佐菌素构建糖尿病大鼠模型50只,随机分为糖尿病（DM）组、普罗布考（PT）组,另设健康对照（NC）组.RT-PCR测定各组肾组织HSP70 mRNA的表达,免疫组织化学法观察HSP70的表达情况,Western blot测定HSP70蛋白的表达水平. 结果 DM组4、8及12周肾脏中HSP70 mRNA及蛋白的表达逐渐升高.同一时间的PT组肾脏HSP70 mRNA及蛋白的表达均较DM组减少（P＜0.05）. 结论 糖尿病大鼠肾脏中HSP70的表达升高,普罗布考可降低HSP70的表达,对肾脏起保护作用.     

普罗布考对糖尿病大鼠大血管病变的影响

目的 探讨普罗布考对糖尿病大鼠大血管病变的影响及机制.方法 44只健康Sprague Dawley(SD)雄性大鼠随机分为对照组(NC组,n=8)、糖尿病组(DM组,n=18)、普罗布考干预组(PB组,n=18)3组,四氧嘧啶50 mg/kg行尾静脉注射制备糖尿病大鼠模型.糖尿病造模成功后PB组给予普罗布考170 mg...     

低氧大鼠肺内硝基酪氨酸的变化研究

目的 观察在低氧大鼠肺组织中氧化产物硝基酪氨酸(nitrotryrosine,NT)表达的变化,探讨氧化应激机制在低氧性肺动脉高压形成中的作用.方法 将14只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、低氧组.以常压低氧3周制备肺动脉高压模型,测量各组大鼠平均肺动脉压(mean pulmonary arterial pressure,mPAP)和右心肥厚指数(right ventricle hypertrophy index,RVHI);图像技术测定管壁厚度占血管外径的百分比(wall thickness %,WT %)和管壁面积占总面积的百分比(wall area%,WA%);采用免疫组织化学法观察两组大鼠肺小动脉管壁NT的表达.结果 ①低氧组大鼠mPAP(22.84±1.79)mm Hg和RVHI(29.78±1.07)%与对照组mPAP(16.67±0.97)mm Hg和RVHI(24.22±0.48)%相比,差异有统计学意义(P均＜0.01).②低氧组WT%(24.96±3.70)%和WA%(73.31 ±6.51)%与对照组WT%(14.19±2.61)%和WA%(46.67±7.42)%相比,差异有统计学意义(P均＜0.01).③低氧组大鼠近端肺小动脉管壁的NT染色强度(1.52±0.07)与对照组(1.00±0.00)相比,差异有统计学意义(P＜0.01).两组大鼠远端肺小动脉管壁NT染色强度无明显变化(P＞0.05).低氧组大鼠近端肺小动脉管壁NT表达强度与mPAP值呈正相关(r=0.867,P＜0.05).结论 低氧可诱导大鼠mPAP增高及肺组织内NT产生增加,其作用机制可能与低氧诱导氧化应激有关.     

普罗布考对糖尿病肾病大鼠氧化应激的影响

目的 观察普罗布考(PB)对糖尿病肾病(DN)大鼠氧化应激的影响.方法 60只Sprague-Dawley (SD)雄性大鼠随机分成4组:正常对照组(NC组)8只,右肾血管结扎组(RL组)8只,DN组22只,DN+ PB组22只.RL组、DN组和DN+ PB组首先进行右肾血管结扎,1周后DN组和DN+ PB组应用50 ...     

普罗布考对糖尿病大鼠动脉粥样硬化的影响及机制

目的 观察普罗布考对实验性糖尿病大鼠动脉粥样硬化的影响,探讨相关机制.方法 40只大鼠分为对照组和模型组,模型组腹腔注射STZ制造模型.成模大鼠随机分成糖尿病组和普罗布考组,高脂高糖饲料喂养,普罗布考组每日予以普罗布考灌胃.8周后处死采血测血脂、丙二醛、超氧化物歧化酶、8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)、血小板内皮细胞黏附分子1;光镜下观察主动脉病变,免疫组织化学测血小板内皮细胞黏附分子1表达.结果 模型组较对照组血糖、饮水量、体重升高(P<0.01),总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白升高(P<0.01),高密度脂蛋白下降(P<0.01),光镜下主动脉内膜厚度增加(P<0.01),有脂斑突向管腔.与糖尿病组比较,普罗布考组总胆固醇、低密度脂蛋白降低(P<0.01),高密度脂蛋白、甘油三酯差异无显著性(P>0.05);光镜下内膜厚度降低(P<0.01),内膜结构较清晰完整.与对照组比较,糖尿病组大鼠丙二醛、8-异前列腺素F2α增加(P<0.01),丙二醛降低(P<0.01),血小板内皮细胞黏附分子1升高(P<0.01),主动脉血小板内皮细胞黏附分子1表达上升(P<0.05).普罗布考干预后,丙二醛、8-异前列腺素F2α下降(P<0.01),超氧化物歧化酶升高(P<0.01),血小板内皮细胞黏附分子1下降(P<0.01),主动脉血小板内皮细胞黏附分子1表达下降(P<0.01).结论 普罗布考减轻实验性糖尿病大鼠的主动脉粥样硬化病变,其保护作用可能与抗氧化应激,抑制主动脉血小板内皮细胞黏附分子1表达有关.     

普罗布考对心肌梗死大鼠心肌组织Bcl-2和Bax表达及氧化应激的影响

背景 心肌梗死后心肌细胞凋亡与氧化应激有关,普罗布考为脂溶性强抗氧化剂,实验证明具有保护心肌细胞的作用,该药保护心肌细胞的作用是否通过调控细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax目前尚不清楚.目的 研究普罗布考对心肌梗死大鼠心肌组织Bcl-2和Bax表达及氧化应激的影响.方法 将心肌梗死后24 h存活大鼠41只随机分为2组:盐水组(5 mL/d,n=20),普罗布考组[60 mg/(kg·d),n=21],灌胃给药;另设假手术组(n=12)作对照.分别于心肌梗死后6周:导管法测定左室有创血流动力学指标,TUNEL法检测非梗死区心肌细胞凋亡;RT-PCR的方法观察心肌组织Bcl-2及Bax mRNA表达的变化;Western blot检测心肌Bcl-2及Bax蛋白表达;比色法测定心肌组织氧化代谢指标.结果 (1)与假手术组相比,所有心肌梗死大鼠均出现显著的Bcl-2 mRNA及蛋白表达降低,Pax mRNA及蛋白表达与心肌细胞凋亡指数显著升高(P均＜0.01).与盐水组相比,普罗布考组心肌组织Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著升高,Bax mRNA及蛋白表达及心肌细胞凋亡指数显著降低(P均＜0.01);(2)与假手术组相比,所有心肌梗死大鼠心肌组织均出现显著的MDA升高,SOD、TAOC含量及SOD/MDA比值降低(P均＜0.01);与盐水组相比,普罗布考组MDA显著下降,SOD、TAOC含量及SOD/MDA均升高(P均＜0.01);心肌细胞凋亡指数与TAOC、SOD/MDA比值呈负相关(P均＜0.01).结论 心肌梗死后心肌细胞凋亡增加,普罗布考治疗可以抑制心肌细胞凋亡,降低心肌梗死后心肌组织的氧化应激.     

普罗布考对2型糖尿病大鼠肾脏硫氧还蛋白系统表达的影响

目的 观察硫氧还蛋白系统在2型糖尿病大鼠肾脏组织的表达及早期普罗布考干预对硫氧还蛋白系统表达的影响.方法 将30只雄性SD大鼠分为正常对照组(C组)、糖尿病组(D组)、糖尿病普罗布考治疗组(P组),普罗布考干预8周后,通过免疫组化、RT-PCR、Western免疫印迹技术观察普罗布考对硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)及硫氧还蛋白相互作用蛋白(Thioredoxin-interacting protein,Txnip)表达的影响,并检测各组大鼠空腹血糖(FPG)、胰岛素、肾功能、丙二醛、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)的含量.结果 P组与C组比较,Trx表达明显降低(0.162±0.008对0.239±0.006,P＜0.05),Txnip表达明显升高(0.159±0.003对0.091±0.016,P＜0.05).P组与D组比较,Trx表达升高(0.162±0.008对0.108±0.013,P＜0.05),Txnip表达降低(0.159±0.003对0.236±0.009,P＜0.05).与C组比较,D组大鼠氧化应激指标升高、肾功能受损、抗氧化酶降低,而P组大鼠上述指标(除FPG外)有所改善(P＜0.05).结论 普罗布考通过部分恢复Trx功能,降低Txnip表达,减少氧化应激,发挥对2型糖尿病大鼠肾脏组织的保护作用.

Abstract：

Objective To observe the expression of thioredoxin (Trx) and thioredoxin-interacting protein (Txnip) in the kidney of type 2 diabetic rats induced by streptozotocin and the effect of probucol treatment on thioredoxin system. Methods Thirty male SD rats were divided into control group( C, n = 10), diabetes group ( D, n =10), and probucol treated diabetic group ( P, n = 10). After eight weeks of probucol treatment, the expressions of Trx and Txnip in the kidney of three groups were measured by RT-PCR, Western blot, and immunohistochemistry. Body weight,24 h microalbuminuria( ALB), fasting plasma glucose( FPG), fasting insulin( HNS), blood urea nitrogen (BUN), creatinine (Cr), malondialdehyde ( MDA ), superoxide dismutase ( SOD ), and catalase (CAT) were determined. Results Compared with group C, Trx was markedly decreased in group P (0. 162 ±0. 008 vs 0. 239 ±0. 006, P＜0.05 ), while Txnip was significantly increased (0. 159±0.003 vs 0. 091 ±0.016, P＜0.05 ). Trx in group P was increased as compared with group D (0. 162 ±0. 008 vs 0. 108 ± 0. 013, P ＜ 0. 05 ), while Txnip was lowered (0. 159±0.003 vs 0. 236±0.009 ,P＜0.05 ). FPG, 24 h ALB, BUN, Cr,and MDA levels in group D were markedly increased as compared with group C (P＜0. 05), while the activity of SOD, CAT, and FINS levels were decreased apparently (P＜0.05). The above markers except for FPG in group P were ameliorated (P＜0. 05 ).Conclusions Probucol attenuated oxidative stress by means of partially restoring Trx function and reducing Txnip expression, and thus played a major role in renoprotection of type 2 diabetic nephropathy.     

3-硝基酪氨酸与糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的关系研究

目的探讨2型糖尿病大鼠心肌组织及血中3-硝基酪氨酸(3-nitmtynosine,3-NT)与糖尿病心肌病(diabeticcardiomyopathy,DCM)心肌细胞凋亡的关系。方法选取8周龄的雄性大鼠60只,将其随机分为4组,空白对照组、DCM组、糖尿病+缬沙坦预处理组、DCM+缬沙坦处理组,每组15只。用TUNEL法检测DCM心肌细胞的凋亡指数(AI);用免疫组化的方法检测心肌组织中3-NT的表达指数(EI);用ELISA法检测血清中3-NT的浓度。结果 (1)四组间SD大鼠的心脏重量指数比较有显著性差异(P<0.01),DCM组、DCM+缬沙坦处理组心脏重量指数>大于空白对照组、糖尿病+缬沙坦预处理组。(2)四组SD大鼠心肌组织免疫组化方法检测表明,心肌组织中3-NT的表达指数与心肌细胞的凋亡指数呈正相关(P<0.01),而血中3-NT的含量与心肌细胞的凋亡指数无相关关系(P>0.05)。(3)四组SD大鼠间的AI比较有显著差异(P<0.01)。两两比较各组AI,DCM组>糖尿病+缬沙坦预处理组、DCM+缬沙坦处理组>空白对照组。(4)四组SD大鼠免疫组化的3-NT表达指数比较有显著差异(P<0.01)。各组免疫组化的3-NT表达指数两两比较,DCM组显著大于其他三组。(5)四组SD大鼠血中3-硝基酪氨酸的浓度比较无显著统计学意义(P>0.05)。结论 (1)DCM大鼠心肌组织中3-NT的表达显著增多并与心肌细胞凋亡密切相关,缬沙坦能够抑制DCM大鼠心肌细胞中3-NT的表达,并由此抑制DCM大鼠心肌细胞凋亡。(2)循环血中的3-NT水平不能真实反映DCM大鼠心肌组织中3-NT表达水平及其对心肌细胞凋亡的影响。     

普罗布考对2型糖尿病动脉粥样硬化的保护作用

目的　研究普罗布考对2型糖尿病动脉粥样硬化（As）的保护作用及可能机制。方法　瘦素受体缺陷（db/db）与低密度脂蛋白受体敲除（LDLR^－/－）杂交的2型糖尿病As易感模型小鼠（db/db-LDLR^－/－）,自8周龄开始喂饲含有0.5%普罗布考的高脂饲料,对照组为同样高脂饮食喂饲的db/db-LDLR^－/－及单纯LDLR^－/－小鼠。在实验2及4个月时分别检测各组小鼠血脂、血糖。实验4个月结束时,检测糖耐量及主动脉粥样硬化损伤情况。结果　普罗布考能明显降低血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）及血糖水平,显著改善受损的糖耐量,减低主动脉全长As斑块面积,同时血浆高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）与TC比值（HDLC/TC）不变。结论　普罗布考治疗对2型糖尿病As有明显的保护作用,可能成为临床治疗2型糖尿病大血管病变的有效药物。     

胰岛细胞系研究进展

由于细胞分化不完全及表型不稳定,目前仍没有非常适合代替原代胰岛β细胞进行功能研究用的细胞系。已经建立的胰岛细胞系主要分两类:动物胰岛β细胞瘤起源的细胞系(如RIN、INS细胞系)和人β细胞起源的细胞系,各种细胞系的生物学特征方面各不相同,但都保留了某些正常胰岛细胞功能特征。采用基因工程的方法和挑选更优越的亚系是目前改善细胞系功能的主要手段。     

替米沙坦对糖尿病大鼠胰岛硫氧还蛋白与硫氧还蛋白相互作用蛋白表达的影响

目的探讨替米沙坦对糖尿病大鼠胰岛硫氧还蛋白（TRX）与硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）表达的影响。方法SD大鼠分为正常对照（NC）、糖尿病（DM）和替米沙坦干预（TM）组。DM组和TM组大鼠高脂高糖喂养4周后,腹腔注射链脲佐菌素（STZ）（30mg／kg）构建2型糖尿病（T2DM）模型,TM组予替米沙坦10mg·kg^-1·d^-1干预,8周后测定血浆生化指标、胰岛中胰岛素、TRX和TXNIP的表达。结果DM组和TM组空腹血糖、丙二醛以及胰岛中TXNIP水平均较NC组高（P〈0．05）,TM组血糖与DM组差异无统计学意义,但TM组上述其余指标水平较DM组低（P〈0．05）;DM组和TM组空腹胰岛素、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶及胰岛中胰岛素和TRX水平低于NC组（P〈0．05）,但TM组高于DM组（P〈O．05）。结论T2DM大鼠胰岛TRX表达较正常大鼠降低,而TX—NIP升高;氧化应激水平和低胰岛素血症的改善可能与替米沙坦干预了这种变化有关。     

胰岛微循环与胰岛功能

胰岛微循环是维持胰岛结构和功能的基础,每个胰岛由1～5个动脉供应血液.动脉分支为毛细血管后在胰岛内形成血管球框架,胰岛细胞位于血管球内,从血管中摄取营养物质及氧气.胰岛微循环受局部合成的生物活性分子、神经系统及胰岛分泌激素等调节,与胰岛功能关系密切,参与糖尿病胰岛功能障碍发生发展过程,是糖尿病防治研究的新视角.     

胰岛内皮细胞与胰岛功能

胰岛内皮细胞是胰岛细胞群的重要组成部分,具有异质性强、通透性高、呈血糖浓度依赖性地分泌血管活性物质等特征.胰岛内皮细胞与胰岛功能关系密切,除了向胰岛内分泌细胞供应氧气及营养物质外,还与内分泌细胞相互作用,参与胰岛血管发生、胰腺内分泌部发育、胰岛素基因表达诱导、胰岛炎性反应损伤及移植胰岛再血管化等病理生理过程,是研究胰岛功能的重要靶点.     

吡咯烷二硫代氨基甲酸酯对2型糖尿病大鼠大血管损伤的保护作用

目的 观察吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)的降糖作用,以及对2型糖尿病(T2DM)大鼠主动脉血管内皮诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达及硝基酪氨酸(NT)生成的影响.方法 雄性WistarA大鼠,随机分为两组,正常对照组(NC组)和高脂饮食组(HFD组),喂养8 w后,HED组腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ),诱导成功的T2DM大鼠随机分为糖尿病组(DM组)和PDTC治疗组(PDTC组),PDTC治疗组接受PDTC(50 mg/kg)治疗,持续1周,断头处死后留取血浆检测血糖及各种生化指标;留取主动脉组织,检测主动脉组织匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量;HE染色观察主动脉组织形态学变化,免疫组化观察各组大鼠主动脉内皮iNOS、NT的表达.结果 PDTC治疗1w后,PDTC组大鼠空腹血糖、MDA水平明显低于DM组;SOD和GSH-Px水平明显高于DM组(P<0.01).免疫组化结果显示:iNOS、NT在DM组大鼠主动脉内皮表达水平明显高于NC组;在PDTC治疗组大鼠主动脉内皮表达水平明显低于DM组.结论 PDTC不仅具有降血糖作用,而且可以减少iNOS的表达,进而减少过氧亚硝基阴离子(ONOO<'->)及NT的产生,延缓了糖尿病大血管并发症的发生.早期应用PDTC可预防T2DM因"代谢记忆"所致的大血管损伤.     

阻断RAS对糖尿病大鼠胰岛形态与功能的影响

目的观察培哚普利和缬沙坦对糖尿病（DM）大鼠胰岛形态及功能的影响,探讨阻断肾素-血管紧张素系统（RAS）对胰岛的保护机制。方法分别用培哚普利、缬沙坦对DM大鼠干预8周,检测胰岛形态与功能的改变。结果培哚普利组、缬沙坦组大鼠胰岛形态改善,TGF-β1表达减少,第一时相胰岛素分泌增加。结论阻断RAS可改善DM大鼠胰岛形态与功能。     

褪黑素对糖尿病大鼠肾脏抗氧化物酶的影响

与正常大鼠比较,STZ诱发的糖尿病大鼠肾与血清的丙二醛水平升高,以及抗氧化物酶活性降低,在褪黑素治疗后均见明显改善,同时伴随出现尿白蛋白排泄率、血尿酸、血脂谱以及肾重对体重的比值等的降低。