细针穿刺细胞学结合聚合酶链反应在诊断淋巴结结核中的应用

目的 研究细针穿刺细胞学(FNAC)结合聚合酶链反应(PCR)扩增检测结核杆菌TB-DNA的方法对诊断淋巴结结核的应用价值.方法 选取162例淋巴结结核病例进行细针穿刺,涂片HE染色和抗酸染色,用细胞学剩余材料或重新穿刺材料进行PCR扩增检测结核分枝杆菌TB-DNA.结果 162例标本中117例TB-DNA阳性,阳性率为72.2％,抗酸染色阳性71例,占43.8％,抗酸染色阳性的病例TB-DNA均阳性,对照组病例全部阴性.162例细胞学涂片,Ⅰ型17例,Ⅱ型67例,Ⅲ型78例,其中TB-DNA阳性率分别为11.8％、70.1％、88.5％,抗酸染色阳性率则分别为0％、41.8％、55.1％.两者阳性率在Ⅱ型Ⅲ型明显高于Ⅰ型(P＜0.01).结论 FNAC 结合PCR扩增检测TB-DNA的方法在诊断淋巴结结核的应用中,具有敏感而特异,简便而快速的独特优势.     

荧光染色技术在艾滋病患者活检标本病原学诊断中的应用

目的探讨快速真菌与抗酸分枝杆菌荧光技术在艾滋病患者活检标本病原体诊断中的应用价值及意义。方法选取艾滋病患者500例活检标本,采用快速真菌荧光染色及六胺银、PAS染色对300例可疑真菌感染的活检标本进行检测,采用抗酸分枝杆菌荧光染色及萋尼抗酸染色对200例可疑结核的活检标本进行检测,并对检测结果进行对比。结果（1）快速真菌荧光镜检法检出阳性205例（阳性率68.3%）,六胺银染色法检出阳性209例（阳性率69.7%）,PAS染色法检出阳性97例（阳性率39.5%）,快速真菌荧光染色与六胺银染色检出阳性率差异无统计学意义（P>0.05),但高于PAS染色法;（2）抗酸分枝杆菌荧光染色检出阳性179例（阳性率89.5%）,萋尼抗酸染色法检出阳性117例（阳性率58.5%）,抗酸分枝杆菌荧光染色阳性率高于萋尼抗酸染色法,两者差异有统计学意义（P<0.01）;（3）荧光染色比常规特殊染色操作更快速、简便、显示更清晰。结论艾滋病患者并发机会性感染病原体种类多样,普通的特殊染色阳性率不高并且费时费力,而快速真菌及抗酸荧光染色特别是抗酸荧光染色的阳性率明显增高,为活检组织诊断真菌及结核分枝杆菌感染提供一种快速、准确、经济、对比更清晰的染色方法,能够为真菌感染及结核病患者诊断提供可靠的指导依据,值得在病原体诊断工作中广泛使用。     

肉芽肿性炎组织中结核分枝杆菌检出方法的对比分析及应用价值

目的 探讨肉芽肿性炎组织中结核分枝杆菌常用两种检查方法[抗酸染色和荧光定量PCR(FQ-PCR)]检出效能的大小，与其他实验室检测指标的关系及临床应用价值。方法 对373例石蜡包埋的肉芽肿性炎组织行抗酸染色和FQ-PCR检测，比较两者在各种病检组织中的阳性检出率、敏感度和特异度等方面的差异，同时分析它们与其他实验室检测指标的关系。结果 373例肉芽肿性炎的病例组织中，抗酸染色阳性率为19.57%,敏感度和特异度分别为60.38%、96.63%;结核分枝杆菌DNA(TB-DNA)的阳性率为27.35%,敏感度和特异度分别为94.34%、99.25%;在确诊结核病的病例中，CT影像、涂片抗酸染色、T-SPOT.TB、γ-干扰素释放试验(IGRAs)、TB特异性细胞免疫反应等影像和实验室检查的阳性率分别为82.47%、6.45%、96.00%、80.00%、82.35%。结论 抗酸染色和TB-DNA两者在肉芽肿性炎组织中的联合检测对早期确诊结核病有重要意义，其中TB-DNA有较高的检出率和特异性，与其他实验室检测指标一起可以提高结核分枝杆菌的检出率。     

荧光定量PCR技术检测石蜡包埋组织结核杆菌DNA的应用评价

[摘要] 目的 探讨荧光定量PCR技术（FQ-PCR）检测石蜡包埋组织结核分枝杆菌DNA（TB-DNA）在结核病诊断中的应用价值。方法233例的石蜡包埋组织标本采用实时荧光定量PCR技术检测TB-DNA，同时进行抗酸染色和组织病理学检查，以临床诊断结果为金标准，分别计算TB-DNA、抗酸染色和病理学检查的灵敏度、特异性、准确度、阳性预测值和阴性预测值。结果129例临床诊断为结核病的组织标本中，TB-DNA阳性107例， TB-DNA阴性22例；104例非结核病的标本中， TB-DNA阳性2例，TB-DNA阴性102例。TB-DNA检测的灵敏度、特异性、准确度、阳性预测值和阴性预测值分别为82.95%、98.08%、89.70%、98.17%、82.25%，均高于抗酸染色的63.57%、95.19%、77.68%、94.25%、67.80%和病理学检查的77.52%、96.15%、85.84%、96.15%、77.52%。结论 FQ-PCR技术检测石蜡包埋组织的TB-DNA用于各种结核病的诊断具有灵敏度高、特异性强的优点，与病理学检查相结合可以大大提高结核病的诊断率，适合于临床推广应用。     

五种检测方法在结核病诊断中的应用评价

目的评估涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、XPert MTB/RIF法、结核分枝杆菌RNA荧光定量PCR法、结核分枝杆菌DNA荧光定量PCR法在结核病诊断中的应用价值。方法对374例疑似肺结核病患者、120例肺结核患者及70例非结核病患者的痰液标本分别用涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、XPert MTB/RIF、TB-RNAPCR、TB-DNA PCR进行结核分枝杆菌检测,将检测结果进行分析和比较。结果涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、XPert MTB/RIF、TB-RNA PCR、TB-DNA PCR检测374例疑似肺结核病患者痰液标本阳性率分别为6.68%、13.37%、20.05%、19.25%、22.73%,其中XPert MTB/RIF、TB-RNA PCR、TB-DNA PCR检测阳性率差异无统计学意义(χ2=1.51,P0.05),TB-RNA PCR阳性率高于改良罗氏培养基培养法(χ2=4.75,P0.05),改良罗氏培养基培养法高于涂片抗酸染色法(χ2=9.28,P0.05)。五种方法检测120例肺结核患者及70例非结核病患者的敏感性分别为20.83%、35.00%、50.83%、47.50%、54.17%,特异性分别为100.00%、100.00%、98.57%、100.00%、98.57%。结论 XPert MTB/RIF、TB-RNA PCR、TB-DNA PCR与涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法相比,具有敏感、快速、可定量的特点,可以作为结核病辅助诊断的有效检测方法。     

结核杆菌的细菌学、分子生物学和免疫学检测方法评价

目的比较涂片法、荧光定量PCR方法和结核抗体检测法对结核病的诊断价值。方法选取2006年7月~2010年8月期间临床确诊或怀疑结核的检样326例,进行涂片抗酸染色、荧光定量PCR检测和采集血样进行结核抗体检查。结果 326例检样中,检出TB-DNA阳性107例,阳性率32.82%。其中脓液、支气管灌洗液和痰液最高,分别为48.84%（86例）、31.71%（82例）、30.39%（102例）。抗酸染色标本痰液阳性率为9.80%,脓液25.58%,支气管灌洗液15.85%。结核抗体阳性率52.45%。抗酸染色法与荧光PCR法的符合率81.60%,而结核抗体检测法与抗酸染色法的符合率61.97%,与荧光PCR检测法的符合率为80.37%。结论三种方法中,以结核抗体法阳性率最高,荧光PCR法次之,抗酸染色法阳性率最低。三种方法联合运用,可弥补单独采用1种方法阳性率低的缺点,几种方法之间可相互佐证,从而使准确性得以提高。     

纤支镜及"激惹"后痰检对支气管结核的诊断意义

目的 观察在纤支镜及活检、刷检“激惹”后，支气管灌洗液、痰液抗酸染色阳性率和TB-DNA阳性率的变化，为临床早期诊断支气管结核、避免误诊提供指导。方法 回顾分析126例支气管结核患者的相关检查：纤支镜检查及纤支镜下刷检并灌洗检查；刷检物、纤支镜检查前、后连续3天留取的痰标本及刷检前、后支气管灌洗液行抗酸染色及TB-DNA检查。结果 (1)纤支镜检查后痰标本抗酸染色阳性率及TB-DNA阳性率与纤支镜检查前比较均有较大幅度提高；(2)纤支镜刷检“激惹”后支气管灌洗液标本抗酸染色阳性率及TB-DNA阳性率与刷检“激惹”前比较，均有较大幅度提高；(3)纤支镜刷检物与刷检后支气管灌洗液抗酸染色阳性率及TB-DNA阳性率比较差异无显著性。结论 纤支镜检查“激惹”后连续3天留取的痰标本及刷检后支气管灌洗液行抗酸杆菌、TB-DNA检查，有助于提高支气管结核的诊断率。     

取材方法对病理标本结核病原学阳性率的影响及意义

目的 探讨五种病原学检测技术在不同取材方法获取的病理标本中结核阳性率的差异及其临床意义。方法 收集2017年武汉市肺科医院外科手术并临床确诊结核的345份病例的结核病原学检查结果,以标本取材方式不同为分组依据,对各组抗酸染色涂片（AFB）、实时荧光定量PCR（TB-DNA）、RNA恒温扩增实时荧光检测（SAT-TB）、Gene-X-pert/RIF (X-pert)、结核培养（CTB）等结果进行回顾分析。结果 以临床常用的四种方法获取标本,分别为手术345例、穿刺55例、脓肿切排（简称切排）37例和收集分泌物7例。以临床诊断为标准,手术、穿刺、切排和收集分泌物获取的标本病原学总阳性率分别为86.38%、85.45%、100.00%、85.71%;X-pert阳性率分别为86.26%、83.33%、100.00%、85.71%,五种检测技术灵敏度由高到低排序各组前两名均为X-pert、TB-DNA,最低均为AFB;以手术标本结果为诊断标准,虽切排和穿刺标本CTB阳性率均高于手术标本,一致性均为中等（K=0.521、0.530）,但五种病原学阳性率比较差异均无统计学意义（McNemer检验,P>0.05）。结论 病理标本中五种结核病原学检测技术检出率均与取材方法无关,提倡早期对病灶精准穿刺行X-pert、CTB检查以利于疾病的早期诊断和治疗。     

涂阴PCR-TB-DNA阳性患者组织标本病原学研究

对146例胸水或痰涂阴PCR-TB-DNA阳性患者62例活检组织和84例石蜡包埋组织进行了PCR-TB-DNA扩增和抗酸染色检测,结果146例患者病理诊断结核108例,肿瘤24例,炎症14例;组织标本抗酸染色阳性107例,其中杆菌型31例,L型76例(结核组、肿瘤组和炎症组分别为99例、7例和1例);组织标本PCR检测阳性121例(结核组、肿瘤组和炎症组分别为106例、13例和2例);38例非结核患者有结核病和结核密切接触史者33例。临床标本PCR结果与组织标本的病理学诊断、抗酸染色和PCR结果符合率分别为74.0％(108/146)、73.3％(107/146)和82.9％(121/146);组织标本抗酸染色和PCR检测总符合率为83.6％。提示PCR-TB-DNA扩增对于涂阴结核患者快速诊断有很大帮助,临床标本PCR阳性大多为结核所致,非结核患者有结核感染史者PCR大多数可出现阳性;PCR-TB-DNA阳性除抗酸菌杆菌型外大多数与抗酸菌L型感染有关。     

结核菌PCR检测在附睾结核诊断中的应用

目的 探讨结核菌PCR检测在附睾结核诊断中的价值.方法 68例附睾结节患者中40例患者取精液做结核杆菌PCR检测,28例患者取附睾结节穿抽标本做结核杆菌PCR检测.结果 40例精液标本结核杆菌PCR检测,TB-DNA阳性13例,阳性率为32.5%; 28例附睾结节穿抽标本结核杆菌PCR检测,TB-DNA阳性8例,阳性率为28.5%.68例标本结核杆菌PCR检测,TB-DNA阳性21例,总阳性率为30.8%.结论 精液和附睾结节穿抽标本结核杆菌PCR检测,有助于提高附睾结核的诊断率,具有临床应用价值.     

临床诊断与鉴别诊断结核性与恶性腹水的研究

目的：评价应用阿拉伯糖甘露糖脂IgG抗体（LAM—IgG）、结核杆菌DNA（TB-DNA）、腺苷脱氨酶（ADA）、癌胚抗原（CEA）和癌胚抗原信使核糖核酸（CEA—mRNA）鉴别诊断结核性与恶性腹水的价值。方法：以37例结核性腹水（结核组）和37例恶性腹水（恶性组）为研究对象,分别采用斑点免疫金渗滤试验法检测LAM-IgG、酶学反应终点法检测ADA、磁酶免法检测CEA、PCR法检测TB—DNA和CEA—mRNA。结果：结核组与恶性组检测LAM-IgG、TB-DNA、ADA、CEA和CEA-mRNA结果的差别均具有显著性（P〈0．01）,各指标的特异性、敏感性、阳性预测值和阴性预测值分别为：①诊断结核性腹水：LAM-IgG91．9％、59．5％、88．0％和69．4％,TB-DNA97．3％、70．3％、96．3％和76．6％,ADA（〉33U／L）86．5％、81．1％、85．7％和82．0％;②诊断恶性腹水：CEA94．6％、56．8％、91．3％和68．6％,CEA—mRNA91．9％、81．1％、90．9％和82．9％,ADA（〈33U／L）81．1％、86．5％、82．1％和85．7％。结论：LAM-IgG、TB-DNA和CEA、CEA—mRNA指标分别在诊断结核性腹水和恶性腹水方面具有较高的应用价值,ADA诊断两种腹水的特异性较低但敏感性较高,综合分析这5个指标的检测结果对鉴别诊断结核性与恶性腹水具有较高的应用价值。     

胸水ADA并结核菌试验诊断结核性胸膜炎80例临床分析

目的：探讨胸水腺苷脱氨酶（ADA）检测联合结核茼试验对结核性胸膜炎的诊断价值。方法：选择我院2008年1月至2010年12月收治的80例结核性胸膜炎患者与同期80例健康体检者为对照,对其进行胸水腺苷脱氨酶（ADA）检测与TB-DNA含量测定。胸水腺苷脱氨酶（ADA）检测采用酶法连续监测法,而TB—DNA含量测定采用PCR法,分析胸水腺苷脱氨酶（ADA）检测联合结棱菌试验对诊断结核性胸膜炎的灵敏度与特异性。结果：胸水ADA检测对诊断结核性胸膜炎灵敏度为87．50％,特异性为88．75％;TB—DNA检测对诊断结核性胸膜炎灵敏度为71．25％,特异性为83．75％;胸水ADA联合TB-DNA检测对诊断结核性胸膜炎灵敏度为92．50％,特异性为93．75％。结论：胸水腺苷脱氨酶联合结核茵试验可显著提高诊断结核性胸膜炎的灵敏度和特异性,提高诊断效率。     

5种病原学检查在结核性病理组织及气道分泌物中的检测差异

目的 探讨5种病原学检查在结核性病理组织及气道分泌物标本中的阳性率差异及意义。方法 收集2017年武汉市肺科医院外科经手术确诊结核合并肺结核且接受气道分泌物检查的166份病例的结核病原学检查结果,根据标本来源不同分为手术标本病原学检查组（简称手术标本组）与气道分泌物标本病原学检查组（简称气道分泌物标本组）,对抗酸染色涂片（AFB）、实时荧光定量PCR（TB-DNA）、RNA恒温扩增实时荧光检测（SAT-TB）、Gene-X-pert/RIF (X-pert)、结核培养（CTB）等结果进行回顾分析。结果 以临床诊断为标准,手术标本组和气道分泌物标本组总阳性率分别为86.14%、21.08%,X-per阳性率分别为85.89%、29.76%;两组的五种检测技术阳性率由高到低排序一致,均为X-pert、TB-DNA、SAT-TB、CTB、AFB;以手术标本结果为诊断标准,气道分泌物标本结果与其一致性均较差（Kappa<0.4）,五种检查阳性率均低于手术标本,且差异具有统计学意义（McNemer检验,P<0.05）。结论 病理组织标本结核病原学阳性率高于气道分泌物标本,临床应重视对菌阴肺结核患者的病理组织标本进行X-pert、CTB等检查。     

细针吸取细胞块技术在体表淋巴结肿块诊断中的应用

目的探讨细针吸取细胞学检查中联合应用细胞块切片技术对体表淋巴结肿块诊断的价值。方法选取经活检组织学对照且细针吸取细胞学常规涂片阳性的患者60例,均行二次细针吸取细胞制做细胞块石蜡切片检查,疑难病例加做免疫细胞化学染色,比较联合细胞块切片诊断结果与单纯常规涂片细胞学检查结果,分析两者诊断准确性。结果单纯常规细针吸取细胞学涂片,诊断腺癌与活检组织学诊断符合率为65．4％（17／26）,诊断鳞癌符合率为70．O％（14／20）;联合细胞块切片诊断腺癌与组织学诊断符合率为96．2％（25／26）,诊断鳞癌符合率为95．O％（19／20）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。常规细胞学分类不明确诊断20例,占33．33％,联合细胞块分类不明确诊断7例,占11．7％。结论细针吸取细胞学检查中联合应用细胞块切片技术能明显提高转移癌尤其腺癌和鳞癌的诊断正确率,并能进行免疫细胞化学染色,在肿瘤分型和分类中具有较高的应用价值,但该技术对恶性淋巴瘤及少见疑难肿瘤的诊断仍存局限性。     

肺泡灌洗液联合肺组织PCR方法检测结核杆菌DNA对肺结核早期诊断的意义

目的探讨肺泡灌洗液（BALF）联合肺组织聚合酶链反应（PCR）方法检测结核杆菌DNA对肺结核早期诊断的意义。方法对104例结核杆菌痰阳性和确诊肺结核的痰菌阴性患者经纤维支气管镜采集BALF及活检肺组织进行石蜡包埋,对标本采用PCR方法检测结核杆菌DNA。结果 104例患者BALF中PCR检测结核杆菌DNA阳性92例,阳性率为88.46%;肺组织石蜡包埋检测结核杆菌DNA阳性98例,阳性率为94.23%。两组阳性率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 BALF联合肺组织PCR方法检测结核杆菌DNA有较高的敏感性及特异性,对肺结核病的早期诊断有重要临床意义。     

1731例乳腺肿块细针穿刺诊断的临床应用分析

目的：探讨乳腺肿块细针穿刺细胞学检查（FNAC）的临床应用价值。方法：对2006～2010年的1 731例乳腺肿块细针穿刺细胞学检查结果进行对比分析。结果：1 731例乳腺细针穿刺病例,2009～2010年的病例及阳性病例明显高于2006～2008年,其中924例做了活检对照,恶性肿瘤敏感性为96.68%（233/241）,假阴性率为3.32%（8/241）,无假阳性。FNAC诊断的总准确率为97.29%（899/924）。结论：乳腺肿块细针穿刺诊断技术,操作简易、快速、安全、可靠、价格低廉,可在基层医院及乳腺癌筛查中大力推广。     

可溶性CD44v6、VEGF检测在结核性腹水和卵巢癌性腹水鉴别诊断中的价值

目的探讨可溶性CD44变异性外量子(sCD44v6)及血管内皮生长因子(VEGF)对结核性、卵巢癌性腹水的诊断价值。方法选取39例卵巢癌性腹水、48例结核性腹水采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测腹水中sCD44v6及VEGF的水平,并进行相关性分析。结果卵巢癌性腹水组sCD44v6水平为(102±31)ng/ml,明显高于结核性腹水组(44±15)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.01)。卵巢癌性腹水组VEGF水平为(684±210)ng/ml,明显高于结核性腹水组(90±11)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.01)。sCD44v6以>60.5 ng/ml为阳性界值,sCD44v6诊断卵巢癌性腹水的敏感性为82.1%(32/39),特异性为87.5%(42/48);VEGF以>101.3 ng/ml为阳性界值,VEGF诊断卵巢癌性腹水的敏感性为92.3%(36/39),特异性为89.9%(43/48)。结论癌性腹水中的CD44v6、VEGF水平明显升高,sCD44v6、VEGF的检测对于结核性、卵巢癌性腹水的鉴别诊断有重要价值。     

联合检测ADA、CEA、CRP、淀粉酶在鉴别结核性和恶性胸腔积液中的诊断价值

目的：探讨联合检测腺苷脱氨酶（ADA）、癌胚抗原（CEA）、C反应蛋白（CRP）和淀粉酶在鉴别结核性与恶性胸腔积液中的诊断价值。方法：选取胸腔积液患者117例,分为结核组72例和恶性组45例,每组均留取胸腔积液检测ADA、CEA、CRP和淀粉酶。结果：结核组胸腔积液ADA和CRP均高于恶性组,差异有统计学意义（P〈0．001）;恶性组胸腔积液CEA和淀粉酶均高于结核组,差异有统计学意义（P〈0．001）。结论：联合检测腺苷脱氨酶（ADA）、癌胚抗原（CEA）、C反应蛋白（CRP）和淀粉酶对于结核性和恶性胸腔积液的鉴别诊断有更高参考价值,胸腔积液中ADA和CRP增高时支持结核性胸腔积液诊断,而CEA和淀粉酶增高则倾向于诊断恶性胸腔积液。     

胃液查抗酸杆菌对肺结核的诊断价值

目的探讨胃液结核分枝杆菌检查对成人肺结核的诊断价值。方法对34例患者的胃液进行涂片、T睁DNA及结核茵培养;痰液进行涂片、TB-DNA及结核茵培养,同时行酶联斑点实验、结核抗体及PPD,并对其阳性率进行比较。结果痰结核茵涂片＼培养及TB-DNA检测阳性率明显高于胃液结核茵涂片、培养及TB-DNA阳性率,两者比较差异有统计学意义（P〈O．01）;T—SPOT．TB、痰TB-DNA、PPD、TKDOT／TKCK检测在结核病诊断中显示出高度敏感性。结论成人胃液检查抗酸杆菌作为肺结核诊断价值有限。而痰细菌学检查仍是确诊肺结核的特异方法。     

彩超对颈部结核性淋巴结和转移性淋巴结的鉴别诊断

目的：探讨彩超对颈部结核性淋巴结和转移性淋巴结的鉴别诊断价值。方法：回顾性分析了32例结核性淋巴结和61例转移性淋巴结的内部回声特点、纵横比（L／S）、血流分布及阻力指数（RI）,并进行了比较。结果：结核性淋巴结内部可见无回声液化区及强回声钙化灶;转移性淋巴结内部多呈低回声,可有无回声液化区,少有强回声钙化灶。两组之间内部回声的差异有统计学意义（P〈0．05）,血流分布及RI值的差异亦有统计学意义（P〈0．05）,L／S值的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：彩超检测淋巴结内部回声、血流分布及RI值有助于颈部结核性淋巴结与转移性淋巴结的鉴别诊断。