MiR-10b-3p通过靶向结合INHBA抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探究miR-10b-3p对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在机制.方法 下载GEO数据、TCGA_BRCA乳腺癌数据矩阵和临床信息,分析miR-10b-3p、抑制素βA(INHBA)mRNA表达水平与乳腺癌的关系;构建稳定过表达miR-10b-3p的MCF-7和MDA-MB-231细胞系,CCK-8、划痕和...     

MiR-125b-5p抑制卵巢癌细胞的迁移和侵袭：基于靶向下调CD147的表达

目的 探讨miR-125b-5p靶向调控细胞外基质金属蛋白诱导因子（CD147）表达对卵巢癌细胞生物学行为的影响及作用机制。方法 应用荧光实时定量PCR技术（RT-qPCR）检测卵巢癌组织和癌细胞株中miR-125b-5p和CD147 mRNA的表达;构建过表达miR-125b-5p的SKOV3细胞或低表达miR-125b-5p的HO8910细胞。CCK-8实验、克隆形成实验、Transwell实验检测过表达或低表达miR-125b-5p对卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响;使用Starbase(http://starbase. sysu.edu.cn/)生信软件预测miR-125b-5p与CD147之间的潜在互补结合位点并使用双荧光素酶报告基因实验进行验证其靶向关系;体外培养SKOV3细胞,分别转染mimic NC、miR-125b-5p mimic、miR-125b-5p mimic和pcDNA3.1、miR-125b-5p mimic和pcDNA3.1-CD147,转染后分为mimic NC组、miR-125b-5p mimic组、miR-125b-5p mimic组+pcD...     

miR-149-5p通过靶向AEBP1调控胃癌细胞的迁移侵袭

目的：探讨miR-149-5p对胃癌细胞迁移侵袭能力的影响及分子机制。方法：qRT-PCR检测胃癌细胞株和组织标本中miR-149-5p的表达,分析其表达水平与胃癌患者临床病理特征参数及预后的相关性,建立过表达和干扰miR-149-5p的胃癌细胞株,Transwell实验检测miR-149-5p表达水平对胃癌癌细胞迁移侵袭能力的影响;生物信息学网站预测miR-149-5p的靶基因,采用荧光素酶报告基因实验加以验证。结果：miR-149-5p在胃癌组织和细胞株中均低表达（均P<0.05）。miR-149-5p的表达水平与胃癌患者的浸润深度（P=0.016）、淋巴结转移（P=0.001）和TNM分期（P=0.023）相关。miR-149-5p低表达是胃癌患者总生存期的独立危险因素。与对照组相比,miR-149-5p mimics明显抑制胃癌细胞的迁移侵袭能力（均P<0.01）,而转染miR-149-5p inhibitors后得到了相反的结果（均P<0.05）。miR-149-5p靶向调控脂肪细胞增强结合蛋白1(Adipocyte enhancer binding pro...     

miR-99b-5p通过靶向TRIB1基因调控乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的研究

目的探讨miR-99b-5p靶向Tribbles同源蛋白1(Tribbles pseudokinase 1,TRIB1)基因调控人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡。方法采用RT-PCR检测人乳腺上皮细胞HBL-100和乳腺癌MCF-7细胞中miR-99b-5p的表达水平,采用Western blotting检测人乳腺上皮细胞HBL-100和乳腺癌MCF-7细胞中TRIB1蛋白表达量。在MCF-7细胞中转染miR-99b-5p mimics或mimics对照,分别记为miR-99b-5p组和miR-NC组,RT-PCR检测细胞中miR-99b-5p表达变化,Western blotting检测TRIB1蛋白表达量,MTT法检测细胞增殖能力,AnnexinV-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡水平,双荧光素酶报告基因实验检测miR-99b-5p和TRIB1的靶向关系。结果与人乳腺上皮细胞HBL-100比较,乳腺癌MCF-7细胞中miR-99b-5p的表达量明显降低(P < 0.01),而TRIB1蛋白的表达明显升高(P < 0.01)。与miR-NC组比较,miR-99b-5p组MCF-7细胞中miR-99b-5p的表达量升高(P < 0.05),TRIB1蛋白表达水平降低(P < 0.05),细胞增殖能力减弱(P < 0.05),细胞凋亡率升高(P < 0.05)。双荧光素酶报告基因检测实验结果显示,miR-99b-5p能够明显降低TRIB1-Wt MCF-7细胞相对荧光素酶活性(P < 0.01),而对TRIB1-Mut MCF-7细胞相对荧光素酶活性无明显影响(P>0.05)。结论miR-99b-5p在乳腺癌MCF-7细胞中呈低表达,TRIB1蛋白呈高表达,过表达miR-99b-5p能够靶向抑制TRIB1阻碍MCF-7细胞增殖并促进细胞凋亡。     

MiR-744-5p通过靶向 CCND1 抑制肾透明细胞癌细胞的增殖、侵袭和迁移

目的 探讨miR-744-5p/CCND1轴在肾透明细胞癌(ccRCC)中的作用及机制。方法 qRT-PCR检测ccRCC组织和细胞系中miR-744-5p 的表达水平。实验分组：miR-744-5p 模拟物（miR-744-5p mimic）、阴性对照（NC mimic）、CCND1 模拟物（CCND1 mimic）及其阴性对照（NC mimic）。CCK-8实验、划痕愈合实验和transwell实验验证miR-744-5p对ccRCC细胞增殖、迁移及侵袭功能的影响。通过生物信息学预测miR-744-5p的下游靶分子,qRT-PCR和Western blot验证CCND1在786-O及OSRC2细胞中的表达水平,双荧光素酶报告基因实验进一步验证miR-744-5p和CCND1的关系,最后通过回复实验验证miR-744-5p/CCND1轴在ccRCC中的作用。结果 MiR-744-5p在ccRCC组织和细胞系中显著下调（P<0.05）,过表达miR-744-5p可以抑制ccRCC细胞的增殖、迁移和侵袭（P<0.05）。生物信息学分析结果和双荧光素酶报告基因实验结果显示,CCND1是miR-744-5p的下游靶标。回复实验结果显示,上调CCND1可以部分逆转上调miR-744-5p对ccRCC细胞增殖、迁移以及侵袭的抑制作用（P<0.05）。结论 miR-744-5p通过靶向CCND1抑制ccRCC细胞的恶性表型,miR-744-5p/CCND1轴可能是ccRCC诊断和治疗的一个新的靶点。     

miR-181b-5p负调控CYLD的表达促进膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨miR-181b-5p通过下调CYLD的表达促进膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-181b-5p在膀胱癌细胞系(T24、UM-UC-3、5637)和人膀胱上皮永生化细胞(SV-HUC-1)中的表达水平。在T24和UM-UC-3细胞中转染miR-181b-5p模拟物 (miR-181b-5p组)和miR-NC(对照组),CCK-8实验和克隆形成实验检测过表达miR-181b-5p对T24和UM-UC-3细胞增殖的影响,Transwell实验检测过表达miR-181b-5p对T24和UM-UC-3细胞迁移和侵袭的影响。采用生物信息学预测miR-181b-5p潜在下游靶基因CYLD,双荧光素酶报告基因实验验证miR-181b-5p是否与CYLD的3′-UTR结合,qRT-PCR检测过表达miR-181b-5p对CYLD mRNA的影响,Western blot法检测过表达miR-181b-5p对CYLD蛋白的影响。在T24和UM-UC-3细胞中沉默CYLD的表达,采用CCK8实验、克隆形成实验和Transwell实验检测沉默CYLD对T24和UM-UC-3细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果 与SV-HUC-1比较,膀胱癌细胞系中miR-181b-5p的表达水平升高(P<0.05)。与对照比较,过表达miR-181b-5p和沉默CYLD均促进膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,过表达miR-181b-5p 明显降低野生型CYLD 的荧光素酶活性(P<0.05)。qRT-PCR和Western blot法结果显示过表达miR-181b-5p显著下调CYLD mRNA和蛋白的水平(P<0.05)。结论 miR-181b-5p通过负调控CYLD的表达促进膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

FAT10 表达与乳腺浸润性导管癌生物学行为的关系

目的：研究双泛素(diubiquitin,FAT10)表达与乳腺浸润性导管癌生物学行为的关系。方法：免疫组织化学检测50例乳腺浸润性导管癌组织中FAT10,雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)及人表皮生长因子受体(c-erbB2)的表达;Western印迹检测FAT10在乳腺癌细胞系MB-MDA-435和转染FAT10 siRNA表达质粒的MB-MDA-435,MCF-7和转染FAT10表达质粒的MCF-7中的表达;Transwell小室检测4种乳腺癌细胞系的侵袭能力。结果：乳腺浸润性导管癌中,FAT10的阳性表达强度与病理学分级、淋巴结转移、远处转移及TNM分期有关(P<0.01),而与患者年龄及肿瘤大小无关(P>0.05);受体阴性组中FAT10的阳性表达强度显著高于受体阳性组(P<0.01),三阴乳腺癌中FAT10的阳性表达强度率显著高于受体阳性组和受体阴性组(P<0.01);FAT10表达阳性组生存率明显低于FAT10表达阴性组(P<0.05);Western印迹结果显示高侵袭性乳腺癌细胞系中FAT10阳性表达强度显著高于低侵袭乳腺癌细胞系;上调FAT10表达能增强乳腺癌细胞系的侵袭能力,而下调其表达能降低乳腺癌细胞系的侵袭能力(P<0.01)。结论：FAT10可能具有直接或间接增加乳腺癌细胞的侵袭能力的作用,在乳腺癌患者的侵袭和转移中起重要的作用,它有可能作为判断乳腺癌预后的又一独立指标及靶向治疗乳腺癌特别是三阴乳腺癌的潜在靶点。     

NDRG1在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与侵袭、转移的关系

目的研究NDRG1(N-myc downstream regulated gene 1)基因在乳腺浸润性导管癌中的表达,及其与乳腺癌侵袭、转移的关系。方法应用免疫组化法检测26例伴淋巴结转移的乳腺浸润性导管癌和45例无淋巴结转移的乳腺癌中的NDRG1、MMP2、MMP9、TIMP2、E-cad的表达状态。结果乳腺癌伴淋巴结转移的标本中NDRG1的表达率低于无淋巴结转移标本(P<0.01)。NDRG1蛋白的表达与TIMP2的表达正相关(P<0.05);而与MMP2、MMP9和E-cad的表达无关(P>0.05)。结论NDRG1与浸润性导管癌的侵袭和转移能力密切相关,可能是一个候选的肿瘤转移抑制基因,并且可能成为乳腺癌的一个有用的预后指标。     

miR-30b-5p通过Sema3A调控HUVECs细胞增殖、凋亡、迁移与血管形成

目的 探究miR-30b-5p对HUVECs细胞增殖、凋亡、迁移与血管形成的影响及机制。方法 培养的HUVECs细胞进行不同处理：blank组(正常糖培养)、HG组(高糖培养)、HG+mimic-NC组(高糖联合mimic-NC转染)、HG+miR-30b-5p mimic组(高糖联合miR-30b-5p mimic转染)、HG+miR-30b-5p mimic+oe-NC组(高糖联合miR-30b-5p mimic+oe-NC转染)、HG+miR-30b-5p mimic+oe-Sema3A组(高糖联合miR-30b-5p mimic+oe-Sema3A转染)。CCK-8、流式细胞术、划痕实验、血管生成实验分别检测细胞增殖、凋亡、迁移和血管形成。qRT-PCR检测miR-30b-5p、Sema3A mRNA表达。Starbase、Targetscan、miRDB网站预测miR-30b-5p与Sema3A的靶向结合位点,双荧光素酶报告实验分析miR-30b-5p对Sema3A的靶向调控。结果 与blank组比较,HG组HUVECs细胞miR-30b-5p表达下降,细胞增殖、迁移和血管形...     

43例乳腺浸润性导管癌GST-π和P53蛋白的检测分析

目的观察谷胱甘肽-硫-转移酶(GST-π)和肿瘤抑癌基因产物p53蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的表达并探讨其临床意义.方法应用免疫组织化学SABC法,对43例乳腺浸润性导管癌标本GST-π和p53蛋白表达进行检测.结果乳腺浸润性导管癌标本的GST-π的阳性表达率为72.1%;p53的阳性表达率为67.4%,与淋巴结转移的差异有显著性意义(P<0.05).结论联合检测GST-π和p53蛋白,对预测乳腺癌淋巴结转移危险性、指导临床进行针对性治疗有一定的作用.     

虫草素通过调控miR-135b-5p表达抑制宫颈癌Hela细胞侵袭、转移的实验研究

目的 研究虫草素通过调控miR-135b-5p表达对宫颈癌Hela细胞侵袭、转移的影响及其调控机制。方法 用浓度为50μmol/L(虫草素Ⅰ组)和100μmol/L(虫草素Ⅱ组)的虫草素处理宫颈癌Hela细胞,另设空白对照组,用MTT法测定Hela细胞的生长情况。采用Transwell法测定Hela细胞侵袭情况,采用划痕实验检测宫颈癌Hela细胞的转移能力,采用Real-time PCR法测定人永生化表皮细胞Hacat和宫颈癌Hela细胞中miR-135-5p的表达水平及不同浓度虫草素处理后对miR-135-5p的表达水平的影响。转染miR-135b-5p mimic至宫颈癌Hela细胞,并采用Transwell技术和划痕实验检测宫颈癌Hela细胞的侵袭能力和转移能力。结果 加入虫草素后宫颈癌Hela细胞生长受到显著的抑制,且高浓度的虫草素抑制作用更明显(P<0.05)。宫颈癌Hela细胞中miR-135b-5p的表达水平为(1.97±0.07),显著高于人永生化表皮细胞Hacat细胞中miR-135b-5p的表达水平(1.01±0.03),组间比较差异具有统计学意义(t=28....     

乳腺浸润性导管癌X线征象与p27表达的相关性分析

目的 探讨p27在乳腺浸润性导管癌组织中的表达与临床病理因素的相关性.方法 资料齐全的浸润性导管癌82例,钼钯X线片明确X线表现并标明有关肿块、钙化、肿大淋巴结等并进行分组.应用免疫组化S-P法检测82例患者癌组织中的p27的表达水平.结果 p27在浸润性导管癌的低表达率为65%,有无钙化组中,含钙化的浸润性乳腺癌中低表达的p27值明显高于不含钙化的,x2等于6.7456,统计学有显著差异,P＜0.05;按年龄分组中,x2等于0.1344,p＞0.05;肿块≥3厘米及小于3厘米分组中,x2等于4.468统计学有差异,P＜0.05;有无腋下淋巴结肿大中,x2等于10.123,统计学有显著差异,P＜0.05.结论 p27在一定程度上反映了此种病理类型的恶性程度之高及预后之差,本研究表明浸润性乳腺癌中钙化、较大肿块、腋下淋巴结肿大与p27的低表达有相关性,可以作为浸润性乳腺癌预后较差的一种参考.     

miR-125b-5p调控HK2抑制胆囊癌细胞增殖和糖酵解

目的 研究miR-125b-5p通过HK2调控人胆囊癌细胞增殖和糖酵解的作用机制。方法 分别在人胆囊癌细胞GBC-SD中转染NC mimic、miR-125b-5p mimic、miR-125b-5p mimic+pcDNA-NC、miR-125b-5p mimic+pcDNA-HK2。实时荧光定量聚合酶链式反应（Real Time Quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-qPCR）检测miR-125b-5p和HK2 mRNA的表达,Western blot检测HK2和LDHA、PDK1的蛋白表达。细胞计数试剂盒-8(cell countingKit-8,CCK-8)检测细胞增殖活力,糖酵解相关试剂盒检测乳酸生成、葡萄糖消耗以及ATP生成。双荧光素酶报告基因实验对miR-125b-5p和HK2的靶向关系进行验证。结果 miR-125b-5p在胆囊癌细胞系GBC-SD和NOZ(P <0.001)以及组织（P <0.01）中表达降低,且在GBC-SD细胞中低于NOZ细胞中。过表达miR-125b-5p可显著抑制GBC-SD细胞的增殖（...     

乳腺浸润性导管癌组织p21ras和p53表达及与腋淋巴结转移相关性的研究

目的通过检测癌基因p21ras和抑癌基因p53在乳腺浸润性导管癌组织中的表达情况,探讨两者与乳腺肿瘤良、恶性和腋淋巴结转移的关系。方法采用免疫组化SP法检测40例乳腺浸润性导管癌癌组织和10例乳腺良性肿瘤组织中p21ras和p53的表达情况,分析其表达与肿瘤良、恶性和腋淋巴结转移的关系。结果在40例乳腺浸润性导管癌癌组织中,p21ras和p53阳性表达率为52.5%和70%,在10例乳腺良性病变组织中,p21ras和p53阳性表达率为10%和20%,在乳腺浸润性导管癌癌组织中,p21ras和p53阳性表达率高于乳腺良性肿瘤组织,P<0.05;在20例有腋淋巴结转移癌组织中,p21ras和p53阳性表达率为80%和95%,在20例无腋淋巴结转移癌组织中,p21ras和p53阳性表达率为25%和45%,在有腋淋巴结转移癌组织中,p21ras和p53阳性表达率高于无腋淋巴结转移癌组织,P<0.05;p21ras和p53在乳腺癌组织中的表达呈显著的正相关,P<0.05。结论 p21ras和p53的表达与乳腺浸润性导管癌及腋淋巴结转移有关,两者存在一定的协同性,联合检测可能更有助于诊断乳腺浸润性导管癌以及判断预后。     

人乳腺浸润性导管癌裸鼠移植模型的建立

将１９９６年１月获得的１例乳腺浸润性导管癌患者的原发肿瘤和转移淋巴结,移植于ＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕ裸小鼠胸部乳垫下,３１天后在局部出现肿瘤结节,并逐渐长大,以后进行鼠间传代移植,现已１５代,移植成功率１００％,肿瘤保持了原先的生物学特性。经医学文献检索证实,该模型在国内属首次建立,为乳腺癌的深入研究建立了一个很有价值的模型。     

miR-146b-5p调控CD82介导食管鳞状细胞癌恶性表型

目的 探究miR-146b-5p促进食管鳞状细胞癌恶性表型的分子机制。方法 选取2020年10月-2021年12月在四川省西南医科大学附属医院行食管癌根治术治疗的38名食管鳞状细胞癌患者的癌组织和癌旁正常组织(NAT)样本,核酸原位杂交法检测miR-146b-5p在食管鳞癌及癌旁正常组织中的表达水平;通过siRNA敲低miR-146b-5p的表达水平,细胞增殖实验、划痕实验检测敲低miR-146b-5p后细胞行为学表型变化;生物信息学分析预测miR-146b-5p的下游靶基因为CD82;免疫印迹法(Western-blot)检测靶基因CD82的表达水平,双荧光素酶报告基因实验确定miR-146b-5p与CD82之间的调控关系。结果 核酸原位杂交法检测结果显示,与NAT组织病理评分比较,miR-146b-5p在ESCC组织中的病理评分较高(P<0.05);EdU细胞增殖实验结果显示,与NC组比较,KD组EdU阳性细胞比例显著降低(P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,与NC组比较,KD组划痕愈合比例显著下降(P<0.05)。ENCORI数据库预测CD82是miR-146...     

miR-199b-5p调控C1GALT1对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的 C1GALT1已被报道在多种癌症中呈现高表达,miR-199b-5p对肿瘤的发生有抑制作用,但在胃癌中的作用机制尚不明确.文章旨在探讨miR-199b-5p通过调控C1GALT1对胃癌BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭影响.方法 利用生物信息学分析C1GALT1在胃癌中的表达情况.细胞进行分组①SiRNA转染:空...     

乳腺浸润性导管癌中ER、PR、C-erbB-2和p53的表达及临床意义

目的联合检测ER、PR、抑癌基因p53和癌基因C-erbB-2在乳腺浸润性导管癌中的表达情况,来探讨与浸润性导管癌淋巴结转移及预后之间的联系。方法采用免疫组化S-P法分别检测242例乳腺浸润性导管癌ER、PR、C-erbB-2和p53的表达。结果242例乳腺浸润性导管癌中ER、PR、C-erbB-2和p53的阳性表达率分别为69.42%,63.22%,46.28%,34.30%。ER、PR基因表达与有无淋巴结转移及病理组织学分级有关;C-erbB-2、p53阳性表达率与有无淋巴结转移及病理组织学分级有关(p<0.05),C-erbB-2、p53共同阳性表达与淋巴结转移有关。结论联合检测乳腺浸润性导管癌ER、PR、C-erbB-2和p53基因表达对预测乳腺浸润性导管癌淋巴结转移及判断预后有重要意义。