两起甲3型流行性感冒爆发中病毒抗原性差异的分析

目的为了解在同一地区内同期发生的2起流行性感冒(流感)爆发中的病毒是否为同一性状以及病毒间抗原性的差异.方法从狗肾传代细胞(MDCK)分离的流感毒株提取病毒核糖核酸(RNA)后,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),扩增后的产物纯化后进行序列测定.结果2起爆发所分离的病毒经血清学鉴定均为甲3型流感病毒,核苷酸序列测定发现,引起2起爆发的甲3型流感病毒的抗原间有较大的差异.两者因10个核苷酸序列有差异而造成5个氨基酸被替换,其中3个发生在重要的抗原位点上,同源性98.5%.显示引起2起爆发的流感病毒并非来自同一毒株.其中1起爆发的毒株与2003年曾在宁波市流行的甲3型流感毒株同源性相接近,似是原先流行的毒株引起的爆发.而另1起爆发的毒株则与2003年流行的毒株同源性相差较远,并与当地后来流行的甲3型流感病毒的同源性更近,显然这是一起由流感病毒抗原性发生变异后的毒株引起的爆发.结论在同一地区同期流行的甲3型流感病毒的毒株并不一定为同一性状,抗原发生变异后的流感病毒可引起爆发,原先流行的毒株只要还有易感人群仍可造成爆发.     

浙江省近几年甲3亚型流行性感冒病毒神经氨酸酶基因分析

目的通过浙江省1998~2005年甲3亚型流行性感冒(流感)病毒的神经氨酸酶(NA)基因的序列比较,阐明近几年NA基因的变异与流感流行的关系。方法对浙江省1998~2005年流感流行期间分离的甲3亚型流感代表性毒株,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增病毒NA基因,进行核苷酸序列测定,并用Bio-Edit软件作分析处理。结果浙江省近几年流感流行期间分离到甲3亚型流感病毒代表株13株,其NA基因核苷酸长度均为1 338bp,由此推导的氨基酸数为446个。1998~2005年甲3亚型流感病毒在NA基因区发生可遗传的氨基酸变异达22个,其中1998~1999年、1999~2002年变异最大,均达到9个氨基酸的差异;2003年后病毒的变异趋向平稳,这与NA基因系统进化树的结果相一致。此外,近几年来世界卫生组织推荐的甲3亚型流感疫苗株与当年的流感流行株之间存在一定的差异,而在2003年后的甲3亚型流感疫苗株与当年的流感流行株之间的符合程度较好。结论近年来浙江省甲3亚型流感病毒的NA区域与血凝素区域相似,均发生了较大的抗原性漂移,提示1999~2005年发生的2次流感流行是由于当年的甲3亚型流感分离株变异影响到病毒的抗原性所导致的。     

2006年杭州余杭区甲1亚型流感疫情的应急检测及基因特性分析

目的:对6起流感样疫情进行应急检测并对分离到的流行株的基因特征进行分析。方法:应用荧光RT-PCR的方法对6起流感样疫情进行检测并进行病毒分离,挑选H1N1亚型流感病毒的代表株进行血凝素基因(HA1)片断的核苷酸序列测定,分析基因和氨基酸变异情况。结果:应用荧光PCR检出甲1型流感阳性样本12例;与当前疫苗株A/Newcaledonia/20/1999相比,新分离到的流感株氨基酸序列有较大的差异,两者为不同性状的毒株。结论:H1N1亚型流感病毒重新引起流行并成为优势株,与其抗原性的变异及人群中针对这一病毒的免疫力下降有关。     

云南省2004年流感流行情况分析

目的了解2004年云南省流感流行情况及病毒的变异情况。方法定期采集流感样病人标本以及从暴发疫情中采集标本,利用MDCK细胞从标本中分离病毒,对分离病毒利用血清学方法进行抗原性分析;对病毒的HA1基因进行序列测定,用DNAstat软件进行基因种系发生树分析病毒的遗传变异情况。结果2004年云南省共分离到甲3亚型流感病毒50株,乙型流感病毒56株,没有分离到甲1亚型流感病毒。62%的甲3亚型流感病毒与A/福建/411/2002(H3N2)的血凝效价有4倍或以上差别;2004年4月份以后分离的甲3亚型流感病毒HA1区氨基酸序列上与A/福建/411/2002(H3N2)相比第145位K>N,159位Y>F,189位S>N,226位V>I发生氨基酸替换。5.8%的Yamagata系毒株与B/上海/361/2002血凝效价有4倍或以上的差别,HA1区氨基酸序列与B/上海/361/2002比较,第36、40、129、131、179、232、255位发生了氨基酸替换。10.8%的Victoria系毒株与B/浙江/2/2002有4倍或以上的差别。与B/浙江/2/2001比较第121,126,197位发生了替换。结论2004年云南省流行甲3亚型流感毒株和乙型流感毒株,并且它们的抗原性和基因特性发生了变异。     

浙江省1998-2005年甲3亚型流感病毒株HA1区和NA区基因特性分析

目的分析近几年浙江省甲3亚型流行性感冒（流感）流行株血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）基因的特性、变异与流感流行的关系。方法选择浙江省1998—2005年流感流行期间分离的甲3亚型代表株25株，提取病毒RNA，扩增HA1和NA基因，进行序列测定，用BioEdit软件分析处理。结果浙江省近几年甲3亚型流感流行株在HA1区的核苷酸长度均为987bp，编码329个氨基酸；在NA区的核苷酸长度为1362bp，编码454个氨基酸。1998—2005年甲3亚型流感病毒HA1区与NA区的氨基酸同源性分别在90．9％～99．3％与95．2％～99．5％之间，HA1区的变异较NA区更大。这8年间在HA1区共发生了30个氨基酸的替代，其中14个氨基酸位点涉及HA1区的4个抗原决定簇；NA区发生了21个氨基酸替代，其中5个氨基酸位点涉及NA区的3个抗原决定簇。在1998与2002年无论是HA1区还是NA区，均产生了较大的变异，在氨基酸进化树上也形成了独立的分支。近年的甲3亚型毒株HA1区有11个糖基化位点，较早期毒株A/Aichi／2／68增加了5个，仅1998年至今的8年中就增加了3个。结论浙江省1998与2002年的二次较大规模的甲3亚型流感流行均与病毒的抗原性漂移有关。     

2004～2006年江西省甲3亚型流感疫苗预防效果的基因分析

[目的]了解江西省2004～2006年分离的甲3亚型流感病毒株HA1基因变异特征,分析WHO甲3亚型疫苗推荐株对江西省甲3亚型流感的预防效果. [方法]采集监测医院和疑似流感疫情的流感样病例鼻咽拭子标本进行流感病毒分离,对分离到的H3型流感病毒进行核酸提取,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增病毒HA1基因后进行核苷酸序列测定,用DNAStar5.0、BioEdit(Version5.0)、Mage生物软件对测序结果进行分析处理,推导出氨基酸序列,进行基因特性分析. [结果]21株甲3亚型流感病毒HA1区域核苷酸序列长度均为960 bp,未发现核苷酸的丢失和插入,平均点突变率为1.09%.2004年甲3亚型流感病毒分离株与当年WHO疫苗推荐株HA1区相比较,不同毒株氨基酸的同源性是97.8%～98.8%,抗原决定簇区的氨基酸变异数平均为3.17个,但有毒株已出现在2个抗原决定簇区4个氢基酸替换.2005年甲3亚型流感病毒分离株与当年疫苗推荐株HA1区相比较,不同毒株氨基酸的同源性是98.4%～99.1%,抗原决定簇区的氨基酸变异数平均为20个.2006年甲3亚型流感病毒分离株与当年疫苗推荐株的HA1区相比较,不同毒株氨基酸的同源性是98.1%～98.4%,在2个抗原决定簇区的氨基酸变异数平均为5.71个. [结论]2004年、2005年和2006年分别根据WHO推荐疫苗株生产的疫苗,对我省2004年度的甲3亚型流感总体上有较好的预防效果,但毒株的变异在增强:对2005年度的甲3亚型流感上有良好的预防效果;对2006年度的甲3亚型流感预防效果不 够理想. 比较,不同毒株氨基酸的同源性是98.4%～99.1%,抗原决定簇区的氨基酸变异数平均为20个.2006年甲3亚型流感病毒分离株与当年疫苗推荐株的HA1区 比较,不同毒株氨基酸的同源性是98.1%～98.4%,在2个抗原决定簇区的氨基酸变异数平均为5.71个. [结论]2004年、2005年和2006年分别根据WHO推荐疫苗株生产的疫苗,对我省2004年度的甲3亚型流感总体上有较好的预防效果,但毒株的变异在增强:对2005年度的甲3亚型流感上有良好的预防效果;对2006年度的甲3亚型流感预防效果不 够理想. 比较,不同毒株氨基酸的同源性是98.4%～99.1%,抗原决定簇区的氨基酸变异数平均为20个.2006年甲3亚型流感病毒分离株与当年疫苗推荐株的HA1区 比较,不同毒株氨基酸的同源性是98.1%～98.4%,在2个抗原决定簇区的氨基酸变异数平均为5.71个. [结论]2004年、2005年和2006年分别根据WHO推荐疫苗株生产的疫苗,对我省2004年度的甲3亚型流感总体上有较好的预防效果,但毒株的变异在增强:对2005年度的     

宁波市2002～2004年流行性感冒的检测与HA1序列分析

目的：为了解近年来宁波市流行性感冒的流行情况以及病毒抗原性的变异情况。方法：采用MDCK细胞培养和鸡胚培养法分离流感病毒，交叉血凝抑制法进行抗原分析，对甲3型流感病毒的HA1血凝素基因作了核苷酸序列测定。结果：2002年-2004年共分离到流感病毒330株，其中甲3型324株(98．2％)、甲1型1株(0．3％)、乙型5株(1．5％)。甲3型毒株2002年与2003年及2004年的抗原比分别为1．9和2．45，核苷酸序列测定结果2002年～2004年HA1区约以5个氨基酸改变的速度变异。结论：3年来宁波市一直以甲3型流感为主要流行株，甲1型及乙型流感则以散发存在。甲3型流感病毒虽说没有发生重大变异，但其抗原性每年都有一定的漂移。     

2005～2006年宁波市流行性感冒病毒的流行与优势株转换分析

目的：分析2005—2006年宁波市流行性感冒病毒的流行与流感病毒优势株的转换情况。方法：常年监测宁波市流感病毒的流行情况，选取不同时间的各种型别流感毒株进行血凝素基因HA1区核苷酸序列测定，并推导出其氨基酸序列进行基因进化特性分析。结果：2005年1—9月份宁波市的甲型流感以H3N2亚型为流行优势株，而乙型流感在2005年初以Yamagata系占优势。到2005年9月份以后至2006年底甲型流感的H1N1亚型替代了H3N2亚型占据优势株地位，乙型流感也以Victoria系成了优势株。结论：在2005年流感病毒甲、乙型的流行株均发生了亚型或种系的优势转换。流行株的基因特征及抗原性发生了明显的变异，并造成了一定规模的暴发流行。     

泉州市2009年甲型H1N1流感基因特性分析

目的 了解福建省泉州市2009年甲型H1N1流感病毒的HA和NA基因特征,探讨该病毒的遗传变异及分子特性.方法 采集泉州市甲型H1N1流感患者咽拭子,采用实时荧光聚合酶链反应方法检测病毒核酸及MDCK细胞培养进行病毒分离、鉴定,提取其中2株代表性毒株病毒核糖核酸(RNA),采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增病毒HA和NA基因,纯化产物进行核苷酸序列测定,用DNAstar megalign软件进行序列分析.结果 1 020份咽拭子检出甲型H1N1流感病毒核酸阳性200份;季节性流感病毒核酸阳性70份,其中H3N2亚型53份,H1N1亚型14份,B型3份,并分离到29株甲型H1N1流感病毒株;HA基因核苷酸序列测定显示,该毒株与北美流行株高度同源,由HA基因核苷酸序列推导的氨基酸系列与疫苗株A/Brisbane/59/2007比较,有22个位于抗原决定簇的氨基酸位点发生变异,但受体结合特异性仍为人样受体,NA基因耐药性位点分析显示,对达菲药物依然敏感.结论 2009年泉州市甲型H1N1流感流行毒株与北美流行株高度同源,相对于疫苗代表株出现了HA蛋白抗原性漂移.     

浙江省流行性感冒病毒监测与HA1基因分析

目的了解浙江省流感病毒变异情况和WHO推荐流感疫苗株对我省人体的保护情况。方法对浙江省近两年分离到的甲3型流感病毒进行核酸提取、病毒血凝素HA1基因核苷酸序列测定,与WHO推荐疫苗株进行对比。结果近两年分离到的甲3型流感病毒株HA1区域的核苷酸序列长度均为987bp,未发现核苷酸的丢失和插入,相应的点突变率为0.8~1.3%,推导的氨基酸序列长度均为329个。2003年分离的毒株与同期WHO推荐使用的疫苗株A/Moscow/10/99相比,核苷酸同源性只有95.6%~95.9%,氨基酸总变异达20个,发生在抗原决定簇A、B区的有6个位点。2004年分离的毒株与同期WHO推荐使用的疫苗株A/fujtan/411/2002(A/Kumamoto/102/2002,A Wyoming/3/2003)相比,核苷酸同源性达98.6%~99.1%,仅发生3~6个氨基酸的变异,基因进化树上,我省2003、2004年分离的毒株都属于同一类性状的毒株,与2004年WHO推荐疫苗株接近,远离2003年推荐疫苗株。结论我省甲3型流感病毒的抗原性已发生漂移。2003年WHO推荐使用的流感疫苗株对我省甲3型流感的预防效果不够理想,2004年推荐使用的疫苗株对我省甲3型流感的预防效果较好。     

H1N1 vaccination

Early results (January to April) from the 2010 Canadian Community Health Survey show that an estimated 41% of Canadians (excluding those in the territories) aged 12 or older had been vaccinated for H1N1 by April 2010. The percentages were higher in the Atlantic provinces, Quebec and Saskatchewan than in Canada overall. Relatively high percentages of females and people aged 45 or older were vaccinated; the percentage of immigrants who had done so was relatively low. Being in a priority group (health-care worker, having children younger than 5 in the household, or having a chronic condition that could increase the risk for complications from H1N1) increased the likelihood of vaccination. A history of seasonal flu vaccination and having a regular doctor were also associated with H1N1 vaccination. Nearly three-quarters of those who had not been vaccinated reported that they did not think it was necessary.     

被动吸烟与cyp1b1、gstp1、sult1a1基因多态性对乳腺癌发病的影响

目的 探讨被动吸烟、cyp1b1、gstp1、sult1a1基因多态性及其联合作用对乳腺癌发病的影响。方法 2014 - 2015年间,采用病例-对照研究方法,收集病例794例,对照805例。问卷调查收集研究对象信息。采用飞行质谱技术,进行cyp1b1、gstp1、sult1a1基因单核苷酸多态性分型检测。采用多因素非条件 logistic 回归,分析环境烟草烟雾暴露及cyp1b1、gstp1、sult1a1基因多态性与乳腺癌发病风险的关系。结果 调整年龄、教育程度、家庭年总收入、职业、婚姻状况后,环境烟草烟雾暴露与gstp1基因多态性未发现协同作用。以环境烟草烟雾低暴露且携带 cyp1b1 rs1056836 C等位基因为参照,环境烟草烟雾高暴露且携带 GG 基因在绝经前女性中乳腺癌风险明显增高（OR = 1.678,95%CI:1.039～2.711）。以环境烟草烟雾组合低暴露且携带sult1a1 rs9282861GG基因型为参照,环境烟草烟雾高暴露且携带A等位基因绝经前乳腺癌风险明显增高（OR = 2.389,95%CI:1.157～4.931）,但交互作用系数无统计学意义。结论 环境烟草烟雾高暴露与cyp1b1 及sult1a1基因对乳腺癌发病风险可能存在协同作用,但尚扩大样本进行验证。     

Echo-AM1-1 encephaloscope]

A new miniature model of the A-mode ultrasonic echoencephaloscope, 0.88 MHz, has been developed and adopted to practical use in neurology. The device contains a detector for amplitude determination of echopulsation and curve (echopulsograms) recording. It is highly sensitive, cost-effective, which enhances the quality of rapid diagnosis of central nervous diseases, including those of vascular genesis, in in- and outpatient settings.     

接种甲型H1N1流感疫苗后患甲型H1N1流感分析

目的 分析接种甲型H1N1流感疫苗后发生甲型H1N1流感感染的病例,探讨发病原因,为进一步提高疫苗预防效果提供参考依据.方法 对接种甲型H1N1流感疫苗后发生甲型H1N1流感感染148例,进行回顾性调查分析.结果 接种甲型H1N1流感疫苗11176例.发生甲型H1N1感染148例,感染率1.32%,其中1～14 d感染81例,感染率0.72%,＞15 d感染67例,感染率0.60%.结论 甲型H1N1流感病毒裂解疫苗是一种安全高效的疫苗,不足之处尚待进一步探讨、完善.     

NF1 gene and neurofibromatosis 1

Neurofibromatosis 1 (NF1), also known as von Recklinghausen disease, is an autosomal dominant condition caused by mutations of the NF1 gene, which is located at chromosome 17q11.2. NF1 is believed to be completely penetrant, but substantial variability in expression of features occurs. Diagnosis of NF1 is based on established clinical criteria. The presentation of many of the clinical features is age dependent. The average life expectancy of patients with NF1 is probably reduced by 10-15 years, and malignancy is the most common cause of death. The prevalence of clinically diagnosed NF1 ranges from 1/2,000 to 1/5,000 in most population-based studies. A wide variety of NF1 mutations has been found in patients with NF1, but no frequently recurring mutation has been identified. Most studies have not found an obvious relation between particular NF1 mutations and the resulting clinical manifestations. The variability of the NF1 phenotype, even in individuals with the same NF1 gene mutation, suggests that other factors are involved in determining the clinical manifestations, but the nature of these factors has not yet been determined. Laboratory testing for NF1 mutations is difficult. A protein truncation test is commercially available, but its sensitivity, specificity, and predictive value have not been established. No general, population-based molecular studies of NF1 mutations have been performed. At this time, it appears that the benefits of population-based screening for clinical features of NF1 would not outweigh the costs of screening.     

GSTM1及GSTT1和GSTP1基因多态性对尿中1-羟基芘水平的影响

目的 研究GSTM1、GSTT1和GSTP1基因多态性对多环芳烃接触工人尿中1-羟基芘(1-OHP)水平的影响.方法 分别选取2个炼焦厂共447名多环芳烃职业接触工人(接触组)和某线材厂220名非职业接触工人(对照组)作为研究对象,采用高效液相色谱法测定尿中1-OHP水平,采用线性回归统计模型分析GSTM1和GSTT1缺失型及GSTP1 I105V位点的多态性对不同人群尿中1-OHP水平的修饰作用.结果 接触组工人尿中1-OHP浓度为4.61 μmol/mol Cr,明显高于对照组(0.34μmol/mol Cr),差异有统计学意义(P＜0.05).接触类别和吸烟分别是影响尿中1-OHP水平的主要因素,在控制各混杂因素的影响后,线性回归分析显示,接触组尿中1-OHP水平和GSTP1 I105V位点多态性有关(单基因分析,P=0.012;多基因分析,P=0.011),对总体样本,单基因模型和多基因模型均显示,尿中1-OHP水平可能和GSTT1缺失型多态有关(P=0.055),多基因交互作用分析显示,GSTT1和GSTP1基因多态对接触组尿中1-OHP水平具有交互作用.结论 谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)基因的多态性对接触多环芳烃工人尿中1-OHP水平有影响.

Abstract：

Objective To investigate the modification of GSTM1, GSTT1 and GSTP1 gene polymorphisms on urinary 1-hydroxypyrene (1-OHP) excretions in workers under different exposure levels. Methods Four hundred and forty-seven occupationally exposed workers from two coking plants and 220 control workers from a wire rod plant were genotyped to analyze the modification of GSTM1, GSTT1 and GSTP1 gene polymorphisms on urinary 1-OHP excretions. Results The urinary 1-OHP concentration in exposed group was much higher than that in control group (4.61 vs 0.34 μmol/mol Cr, P＜0.05). Occupational exposure levels and cigarette smoking were of the dominating factors affecting 1-OHP excretions in urine. After controlling potential confounders, decreased excretion of urinary 1-OHP was associated with GSTP1 I105V AG + GG genotype in coke oven workers (single-gene model, P=0.012; multi-gene model, P=0.011 ) and with GSTT1 null type in the analysis including all subjects (P=0.055 in both single-gene and multi-gene models). GSTT1 and GSTP1 were interacted on the urinary concentrations of 1-OHP. Conclusion Urinary 1-OHP concentrations can be modified by GSTM1, GSTT1 and GSTP1 gene polymorphisms, indicating that these genes are involved in the metabolism of polycyclic aromatic hydrocarbons.     

Co-circulation of pandemic 2009 H1N1, classical swine H1N1 and avian-like swine H1N1 influenza viruses in pigs in China

The pandemic A/H1N1 influenza viruses emerged in both Mexico and the United States in March 2009, and were transmitted efficiently in the human population. They were transmitted occasionally from humans to other mammals including pigs, dogs and cats. In this study, we report the isolation and genetic analysis of novel viruses in pigs in China. These viruses were related phylogenetically to the pandemic 2009 H1N1 influenza viruses isolated from humans and pigs, which indicates that the pandemic virus is currently circulating in swine populations, and this hypothesis was further supported by serological surveillance of pig sera collected within the same period. Furthermore, we isolated another two H1N1 viruses belonging to the lineages of classical swine H1N1 virus and avian-like swine H1N1 virus, respectively. Multiple genetic lineages of H1N1 viruses are co-circulating in the swine population, which highlights the importance of intensive surveillance for swine influenza in China.