某院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因检测及分型

目的了解某院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生的超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）基因型。方法采用表型确证试验测定并收集该院产ESBLs大肠埃希菌（40株）和肺炎克雷伯菌（20株）,提取质粒DNA。采用特异性引物扩增TEM、SHV和 CTX M系列基因,测序后进行序列分析。结果60株表型确证试验阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,聚合酶链反应（PCR）扩增均阳性,包括TEM、SHV、CTX M 3组和CTX M 9组4种基因型。大肠埃希菌中上述4种基因型阳性率分别为37.50%（15株）、2.50%（1株）、62.50%（25株）、50.00%（20株）;肺炎克雷伯菌上述4种基因型阳性率分别为40.00%（8株）、90.00%（18株）、65.00%（13株）、40.00%（8株）。100.00%的大肠埃希菌和80.00%的肺炎克雷伯菌产生blaCTX M,12.50%(5/40)的大肠埃希菌和25.00%(5/20)的肺炎克雷伯菌携带2种CTX M酶基因。23例TEM基因皆为TEM 1型;19例SHV型基因包括SHV 1型6株、SHV 11型6株、SHV 12型5株及SHV 25型2株,仅SHV 12为ESBLs基因,且均来源于肺炎克雷伯菌;66例CTX M型基因,其中CTX M 14在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为45.00%和35.00%,CTX M 55检出率均为35.00%,CTX M 15检出率分别为20.00%和15.00%,检出少量CTX M 3、CTX M 65、CTX M 101及CTX M 123基因型。结论该院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因型以CTX M 为主,其次为SHV 12。CTX M基因型中以CTX M 14最为常见,CTX M 101及CTX M 123型ESBLs为山东省首次检出。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药性及基因分型

目的了解某院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型。方法收集临床分离的肺炎克雷伯菌,采用美国临床实验室标准化委员会2005年推荐的方法进行ESBLs初筛及表型确证试验;K-B纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验;聚合酶链反应(PCR)法分析产ESBLs菌株的基因类型。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌的检出率为62.22%(56/90)。产ESBLs菌仅对第三代头孢菌素与β-内酰胺酶抑制剂合剂、碳青霉烯类抗生素较敏感。基因型分析结果显示,产ESBLs肺炎克雷伯菌中SHV型、CTX-M 1型、TEM型、CTX-M-9型的检出率分别为69.64%、51.79%、37.50%、0.00%,同时携带2种、3种耐药基因的菌株分别占35.71%和14.28%。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药严重,基因型以SHV、CTX-M-1为主。     

呼吸重症监护室产质粒介导AmpC酶和ESBLs细菌的耐药性及基因型

目的了解深圳地区2所三级综合医院呼吸重症监护室（RICU）分离的革兰阴性（G-）菌产AmpC酶和超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）情况及其耐药性与基因型特征。方法选择分离自上述2所医院RICU的对第一、二代及1种以上第三代头孢菌素耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法及E test进行药敏试验,酶提取物三维试验检测单产AmpC酶,美国临床实验室标准化研究所 (CLSI)推荐的表型筛选和确证试验检测产ESBLs菌株,聚合酶链反应（PCR）通用引物扩增AmpC酶和ESBLs基因及其序列测定以确定基因亚型。结果检出单产AmpC酶、单产ESBLs、合产AmpC酶和ESBLs的菌株分别为9株（9.38%）、52株（54.17%）和10株（10.42%）。单产AmpC酶菌株对头孢吡肟和亚胺培南具有较高的敏感性,耐药率分别为33.33％和0.00%;单产ESBLs菌株对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦及头孢哌酮/舒巴坦的敏感性较高,耐药率分别为0.00％、34.62％和19.23%;合产AmpC酶和ESBLs的菌株仅对亚胺培南敏感,未发现耐药株。检出AmpC酶基因型为DHA 1和ACT 1,分别占76.92％和26.08%;ESBLs基因型为CTX M系列和SHV 5,分别占96.77％和3.23%。结论该2所综合医院RICU存在产质粒介导DHA 1、ACT 1型AmpC酶和CTX M、SHV型ESBLs的G-菌流行株,其对大多数新型广谱β 内酰胺类抗生素耐药,对亚胺培南敏感,值得临床关注。     

产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析 FREE

目的了解某院大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）的分布及耐药特点。方法对该院2007年10月-2008年9月各科送检标本分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,采用双纸片扩散法进行ESBLs确证试验,K B纸片扩散法进行药敏试验。结果分离出大肠埃希菌766株,其中产ESBLs株443株（57.83%）;肺炎克雷伯菌632株,产ESBLs株355株（56.17%）。产酶菌株主要分离自痰（557株,69.80%）、尿（149株,18.67%）等标本。产ESBLs菌对亚胺培南/西司他丁、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦敏感性高,对第一～三代头孢菌素类几乎全部耐药,对喹诺酮类、氨基糖苷类等存在交叉耐药。结论产ESBLs菌感染严重,以下呼吸道感染最多,其次为泌尿道感染;耐药率较高,亚胺培南/西司他丁、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦对其保持较高的抗菌活性。     

肺癌患者术后感染超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌分离株基因分型和耐药性

目的 探究肺癌患者术后感染超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌分离株基因分型和耐药性,为临床治疗ESBLs肺炎克雷伯菌用药提供指导。方法 收集2019年1月-2021年7月于武汉市肺科医院行胸腔镜肺段切除术后感染患者肺炎克雷伯菌分离株100株,分析菌株对常用抗菌药物的耐药率,双纸片扩散法进行ESBLs表型筛选及确证,聚合酶链式反应(PCR)检测产ESBLs菌株的耐药基因,将PCR阳性产物进行测序并确定基因型别。结果 100株肺炎克雷伯菌中检出35株产ESBLs菌株,占35.00%,主要来源于痰液;产ESBLs肺炎克雷伯菌对氨苄青霉素、头孢菌素的耐药率高于90%; 35株产ESBLs肺炎克雷伯菌主要耐药基因型为TEM、CTX-M和SHV,其中CTX-M型中,CTX-M-1有10株,CTX-M-9有12株,未检测出CTX-M-2、CTX-M-8及CTX-M-25型,所有TEM型均为TEM-1,SHV型均为SHV-12。结论 胸腔镜肺段切除术后感染肺炎克雷伯菌菌株产ESBLs检出率较高,产ESBLs肺炎克雷伯菌对替加环素、美罗培南及亚胺培南较敏感,且携带的基因型以CTX-M型、TEM...     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药及TEM与SHV基因型分析

目的探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌在医院的耐药情况,并分析其TEM与SHV基因型的分布,为制定合理的治疗方案提供参考。方法收集医院2012年2月-2014年1月分离的214株大肠埃希菌和186株肺炎克雷伯菌,用双纸片协同试验确定产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,同时提取产ESBLs菌株DNA,用PCR扩增技术及电泳进行基因分型,K-B法比较产ESBLs阳性株与阴性株耐药率。结果 214株大肠埃希菌中检出产ESBLs菌株51株,检出率为23.83%;186株肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs菌株48株,检出率为25.81%;两种菌种产ESBLs与非产ESBLs的耐药情况均较相似,产ESBLs菌株对氨苄西林、哌拉西林、头孢呋辛等的耐药性均90%,且明显高于非产ESBLs菌株,且对庆大霉素及左氧氟沙星、环丙沙星有部分耐药性,耐药率均50%,具有明显的多重耐药性;产ESBLs与非产ESBLs均对碳青霉烯类抗菌药物耐药性较差,耐药率5%;大肠埃希菌TEM基因型31株,检出率为60.78%,SHV基因型27株,检出率为52.94%;肺炎克雷伯菌检出TEM基因型35株,检出率为72.92%,SHV基因型31株,检出率为64.58%。结论本地具有较高的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌发生率,耐药形势严峻,TEM、SHV是其重要的基因分型。     

大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌产ESBLs表型与基因型分析

目的 了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌发生率及主要基因型分布特点.方法 采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的纸片扩散法对临床标本中分离的110株大肠埃希菌和94株肺炎克雷伯菌进行ESBLs的表型确定试验,同时分别用聚合酶链反应(PCR)扩增法检测TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-9耐药基因,并对其产物进行序列分析.结果 产ESBLs阳性菌株的检出率分别为:肺炎克雷伯菌占36.2%,大肠埃希菌占42.7%,总检出率为39.7%;ESBLs检出模式以头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸单组为底物阳性率最高,占阳性菌株的66.7%;单用头孢他啶,头孢他啶/克拉维酸一组为底物,会造成大肠埃希菌68.1%和肺炎克雷伯菌64.7%的漏检;耐药基因型分析显示,TEM、SHV、CTX-M-I、CTX-M-2、CTX-M-9基因检出率分别为54.3%、38.3%、21.O%、24.7%、70.4%,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均以CTX-M型为主要基因型,占91.4%;同时携带>2种耐药基因菌株占71.6%.结论 医院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株携带多种耐药基因严重,需引起临床的高度重视.     

多药耐药肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的研究医院感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌的主要耐药基因型并进行序列分析。方法收集临床住院患者产ESBLs肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和变形菌属,通过改良Hodge试验、EDTA双纸片增效试验、分别测定KPC、金属酶;聚合酶链反应(PCR)检测其耐药基因、分析PCR产物序列并在GenBank中比对分析,总结产ESBLs细菌同源性的和变异情况。结果肺炎克雷伯菌中CTX型占85.0%,TEM型占77.0%,SHV型占15.0%;大肠埃希菌中3种基因型比较均衡,其中CTX占100.0%,SHV型和TEM型均为83.0%;变形菌属中TEM型占100.0%,CTX型占40.0%,未检出SHV型;同时还有携带金属酶和碳青酶烯酶的细菌检出。结论医院多药耐药肠杆菌科细菌产ESBLs耐药基因主要以CTX和TEM为主。     

天津地区医院产ESBLs菌株基因型研究

目的 了解天津产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌基因型及耐药情况.方法 收集部分医院临床分离218株产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌,利用实时荧光定量PCR方法检测CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9、TEM、SHV、OXA-1、OXA-2、OXA-10耐药基因,结合Tm值将其分型.结果 109株产ESBLs大肠埃希菌耐药基因CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9、TEM、SHV、OXA-1分别为32.1%、0.9%、0.9%、33.9%、73.4%、27.5%、15.6%,携带>2种基因菌株达66.1%;109株产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药基因CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9,TEM、SHV、OXA-1、OXA-10分别为49.5%、2.8%,1.8%、22.9%、78.9%、76.1%、33.0%、9.0%,携带>2种基因达82.2%;检测菌株对亚胺培南保持高度敏感.结论 天津市肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌ESBLs的基因型以SHV型、TEM型、CTX-M-1型、CTX-M-9型为主,OXA呈上升趋势,各医院肺炎克雷伯菌耐药基因型存在一定差异.     

产ESBLs与AmpC酶肠杆菌科细菌表型检测及基因型分析

目的了解肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)与Amp C酶基因型特征。方法对临床分离的287株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌筛选产ESBLs/AmpC酶的菌株进行表型确证试验。对常见的SHV、TEM超广谱β-内酰胺酶基因型和DHA-1、ACT-1 AmpC酶基因型进行PCR扩增,并对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。结果表型确证产酶大肠埃希菌SHV、TEM、DHA-1、ACT-1基因的阳性率分别为46.5%、49.5%、50.9%、32.1%,产酶肺炎克雷伯菌SHV、TEM、DHA-1、ACT-1基因的阳性率分别为50.0%、26.7%、62.5%、45.8%。部分分离菌株同时携带2种或以上基因型。结论临床分离的产ESBLs与AmpC酶大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌携带多种耐药基因比率较高,临床检出多重耐药细菌逐年升高,临床对产酶的多重耐药菌的防治迫在眉睫。     

耐头孢西丁肺炎克雷伯菌AmpC酶的检测及耐药性基因分析

目的对耐头孢西丁肺炎克雷伯菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)进行检测及其耐药基因进行分析,探讨产AmpC酶基因对其耐药表型的影响。方法采用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,采用双纸片确诊试验测定ESBLs,PCR扩增AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定确定其基因型。结果 72株耐头孢西丁肺炎克雷伯菌中AmpC酶阳性有45株,阳性率为62.5%(45/72),3株为CMY-2型,43株为DHA-1型,其中在1株菌株中同时存在CMY-2和DHA-1两种基因;45株AmpC酶阳性肺炎克雷伯菌中33株检测出ESBLs,检出率为73.3%(33/45),23株携带CTX-M基因,15株携带SHV基因,19株携带TEM基因。结论 AmpC阳性肺炎克雷伯菌菌株中ESBLs检出率高,加强监测高产AmpC酶耐头孢西丁肺炎克雷伯菌,治疗相关菌感染以亚胺培南和美罗培南为首选,合并产AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌比单产AmpC酶菌株对亚胺培南和美罗培南的耐药率低。     

呼吸重症监护室常见细菌产AmpC酶和超广谱β 内酰胺酶的检测及耐药性研究

目的了解呼吸重症监护室（RICU）分离的常见革兰阴性（G-）耐药菌产AmpC酶和超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）情况及其耐药谱特征。方法采用酶提取物三维试验检测单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs菌株,以美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)表型筛选和确认试验检测单产ESBLs菌株,纸片扩散法及E test进行药物敏感性检测。结果检出单产AmpC酶、单产ESBLs、同时产AmpC酶和ESBLs的细菌分别为28株(16.67%)、71株(42.26%)和12株(7.14%)。AmpC酶检出率在阴沟肠杆菌中最高,为57.14%;ESBLs检出率以肺炎克雷伯菌最高,其次为大肠埃希菌,分别为71.70％和55.81%。单产AmpC酶菌株对亚胺培南和头孢吡肟具有较高的敏感性,耐药率分别为3.57％和28.57%;单产ESBLs菌株对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦及头孢哌酮/舒巴坦的敏感性较高,耐药率分别为2.82％、32.39％和25.35%;同时产AmpC酶和ESBLs的菌株仅对亚胺培南敏感,未发现耐药株。结论RICU常见G-耐药菌的AmpC酶和ESBLs检出率较高,该类菌对大多数新型广谱β 内酰胺类抗生素耐药,对亚胺培南敏感。     

产ESBLs大肠埃希菌CTX—M型耐药基因分析

目的了解某院CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）在大肠埃希菌中的检出率，并确定其基因型。方法对该院2005年1—12月临床送检标本中分离的197株大肠埃希菌进行ESBLs表型确证试验和接合试验；采用聚合酶链反应（PCR）检测CTX-M酶基因型，对PCR产物测序并确定其基因型。结果197株大肠埃希菌中有104株（52．79％）ESBLs表型检测阳性，其中91株符合供体菌标准，64株（70．33％）接合成功，接合子均确证产ESBLS。PCR扩增结果示104株产ESBLs大肠埃希菌中共有98株（94．23％）携带CTX-M型基因，其中38株（36．54％）检出blaCTX-M-1组基因，69株（66．35％）检出blaCTX-M-9组基因。64株接合子中共有51株（79．69％）携带CTX-M型基因，其中18株（28．13％）检出blaCTX-M-1组基因，35株（54．69％）检出blaCTX-M-9组基因。基因测序确定存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15、CTX-M-14、CTX-M-27五种基因亚型，以CTX-M-14为主。结论该院大肠埃希菌产ESBLs和耐药质粒水平传播情况严重，产ESBLs细菌基因型以CTX-M-9组的CTX-M-14亚型为主，同时存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15和CTX-M-27等多种亚型。     

武汉地区儿科ICU病房产ESBLs大肠埃希菌的耐药性及基因型检测

目的了解武汉地区儿科ICU病房产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药性及基因型。方法收集武汉地区三家医院儿科ICU病房156株大肠埃希菌，采用NCCLS规定的方法筛选和确认产ESBLs菌株，用K．B琼脂扩散法进行药物敏感性检测，应用聚合酶链反应（PCR）检测产酶株的基因型。结果产ESBLs大肠埃希菌的检出率为37，18％（58／156），其中87．93％（51／58）携带CTX-M基因，6．89％（4／58）携带SHV基因，1.72％（1／58）同时携带CTX-M和SHV基因。产ESBLs菌株对环丙沙星、青霉素类、酶抑制剂合剂、第三代头孢菌素均有不同程度的耐药，但对碳青酶烯类亚胺培南、伊他培南均敏感。结论武汉地区儿科ICU病房产ESBLs的大肠埃希菌耐药谱广，多重耐药明显，其中以CTX-M型的ESBLs最常见，应加强检测，合理治疗。     

重庆地区HIV阴性男男性行为者药物滥用情况分析

目的 了解重庆市人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）阴性男男性行为者（men who have sex with men,MSM）药物滥用情况及其影响因素,并探究药物滥用与其性病发生率的关系。方法 2018年6月-2019年6月招募重庆地区HIV阴性MSM人群并收集其社会人口学、高危性行为及性病感染等信息,采用单因素和多因素logistic回归分析其药物滥用的影响因素,采用卡方检验分析药物滥用与性病发生的关系。结果 共招募139名HIV阴性MSM,其中34.53%（48/139）近6个月有药物滥用史。单因素和多因素logistic回归分析结果显示,服用过暴露后预防药物是药物滥用的阻碍因素：发生过≥3人的"群交"行为（OR=0.027,95%CI：0.009~0.085）是药物滥用的独立影响因素。药物滥用者性病发生率为16.67%（8/48）,高于非药物滥用者的4.40%（4/91）,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 重庆地区HIV阴性MSM人群药物滥用比例高,且药物滥用导致其发生高危性行为的可能性更大,性病发生率更高。     

产ESBLs大肠埃希菌的耐药性分析 FREE

目的了解昆明市第一人民医院产超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的检出及耐药情况。方法对该院2006年1-12月临床分离的293株大肠埃希菌,用表型确证试验检测ESBLs,K B琼脂纸片扩散法做药物敏感试验。结果293株大肠埃希菌中,检出产ESBLs菌168株（57.34%）。各类标本中,产ESBLs率以痰标本分离株（64.71%）最高,其次为血液（62.50%）和脓液标本（57.14%）;各科室中,产ESBLs率以重症监护室（ICU）分离株（65.22%）最高,其次为内分泌科（65.00%）和肿瘤科（63.33%）。除亚胺培南和阿米卡星外,产ESBLs菌对其他14种常用抗菌药物的耐药率均明显高于非产ESBLs菌(均P<0.01);产ESBLs菌株不仅对青霉素、头孢菌素、氨曲南等抗生素广泛耐药,同时对喹诺酮类、氨基糖苷类、磺胺类等多种抗菌药物耐药,仅对亚胺培南、阿米卡星的耐药率＜5%(分别为0.00%、3.30%)。结论昆明市第一人民医院临床分离大肠埃希菌产ESBLs率较高;产ESBLs菌株对临床常用多种抗菌药物严重耐药,可经验选用的药物十分有限。临床医生应根据病原菌药敏结果合理选用抗菌药物,以提高治疗效果。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法采用美国德灵Microscan WalkAway40 S1自动微生物分析仪(W/A40)及专用NC21鉴定药敏复合板检测产超广谱β-内酰胺酶和药敏试验。结果 341株菌中共检测出ESBLs细菌150株,检出率43.99%,其中大肠埃希菌118株,检出率49.79%,肺炎克雷伯菌32株,检出率30.77%,产ESBLs菌株对大部分抗菌药物耐药,对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、头孢西丁耐药性较低。结论及时监测产ESBLs菌的发生率及其耐药趋势,指导临床合理用药,亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、头孢西丁是目前治疗产ESBLs菌感染的有效抗菌药物。     

产ESBLs大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶基因的检测 FREE

目的了解某地区产超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因存在状况及耐药情况。方法对临床分离的75株大肠埃希菌用表型确证试验检测ESBLs, K B纸片扩散法对6种氨基糖苷类抗生素做药敏试验,并采用聚合酶链反应（PCR）检测AMEs基因。结果75株大肠埃希菌中共检出产ESBLs菌37株（49.33％）。产ESBLs菌对氨基糖苷类抗生素耐药率(包括中介株)：庆大霉素78.38%,链霉素75.68%,卡那霉素67.57%,妥布霉素64.86%,奈替米星24.32%,阿米卡星13.51%;共检出5种基因,其中以aac(3) Ⅱ（64.86%）和aac(6′) Ⅰ（45.95%）为主,其次为ant(3＂) Ⅰ（29.73%）、ant(2＂) Ⅰ（10.81%）、aac(3) Ⅰ（5.41%）,未检出aac(6′) Ⅱ;除ant(2＂) Ⅰ和aac(3) Ⅰ外,其余3种基因检出率均高于非产ESBLs菌株,且2个基因携带率也明显高于非产ESBLs菌株(P＜0.05)。结论该地区产ESBLs大肠埃希菌携带AMEs基因的比率较高,对氨基糖苷类抗生素的耐药率亦高,应加强监测与防控。