高转移肺腺癌细胞系A2和A549中p16表达的研究

「目的」探讨肿瘤抑制基因对肺腺癌细胞生长的抑制作用。「方法」用ＦｕＧｅｎｅ传染方法将ｐ１６的表达质粒分别转入两个ｐ１６未表达的具高转移能力的肺腺癌细胞系Ａ２和Ａ５４９中，并对转染前后的肿瘤细胞进行了细胞生长曲线、凋亡检测、电镜和流式细胞仪分析。「结果」发现Ａ２、Ａ５４９细胞系转染后的细胞生长曲线的斜率要比转染前低得多，电镜分析也可看出转染前后的细胞形态发生了改变，但均未检测到凋亡信号。经流式细胞仪分析发现：转染后的细胞系均在Ｇ０～Ｇ１期发生阻滞。「结论」ｐ１６基因在Ａ２、Ａ５４９细胞中表达可以抑制其生长。对于发生了ｐ１６基因突变或缺失而导致ｐ１６蛋白在数量或功能上发生改变的恶性肿瘤，外源性ｐ基因的导入不失为一种治疗恶性肿瘤的有效途径。     

P16、P15基因在胃癌及转移淋巴结中的表达

目的：观测抑癌基因P16、P15在原发性胃癌及淋巴结中的表达，以探讨两者在胃癌的发生转移及预后中的作用。方法：应用免疫组织化学检测92例原发性胃癌及138枚转移淋巴结中P16、P15蛋白的表达。结果：P16、P15阳性表达率在原发癌中分别为17.4%和28.3%，在转移淋巴结中分别为15.9%和28.3%，原发癌伴淋巴结转移组P16、P15阳性表达率较无淋巴结转移组显著低（P＜0.05)，P16、P15表达在原发性胃癌中呈正相关性（P＜0.05，列联系数r=0.274)，在淋巴结中呈正相关（P＜0.05，列联系数r=0.324)。结论：P16、P15基因蛋白对胃癌的转移可能有抑制作用，两者联合检测对胃癌淋巴结转移预测及预后评估具有一定帮助。     

胆囊肿瘤P16蛋白表达的免疫组化研究

对１５例胆囊上皮不典型增生，１９例腺瘤，２４例腺癌的ｐ１６蛋白表达进行免疫化研究。发现腺癌和腺瘤伴上皮不典型增生阳性表达率高。而腺瘤不伴上皮不典型增生表达率低，二者差异有显著性。提示Ｐ１６蛋白检测有助于胆囊癌的癌前期的辅助诊断。     

P53蛋白异常高表达与结直肠腺癌预后

ｐ５３蛋白异常高表达与结直肠腺癌预后赵坡，高亚兵，王德文，王芝萍，胡颖川，易平勇，杨光华军事医学科学院病理学研究室（北京市１００８５０）我们采用免疫组化结合微波炉抗原修复方法对４０例有５年临床随访资料的结直肠腺癌进行回顾性研究，旨在探讨Ｐ５３蛋白异常...     

p16基因在胃癌中的表达及其意义

ｐ１６是最近发现的一个比ｐ５３更直接参与细胞周期调控的抑癌基因,又称为多肿瘤抑制基因。本文用流式细胞术对ｐ１６在胃癌和癌旁组织的表达进行了定量分析,以探讨ｐ１６在胃癌发生中的作用及其与胃癌临床病理特点的关系。１材料与方法本院手术切除经病理证实胃癌标本...     

食管癌中P16、PCNA基因蛋白的表达及意义

 目的：探讨P16、PCNA基因蛋白表达与食管鳞癌发生发展的关系。方法：应用S-P免疫组织化学方法对84例食管鳞癌及10例正常食管组织分别检测P16蛋白、PCNA蛋白表达。结果：84例食管鳞癌中P16蛋白表达率为54.8%(47/84),P16表达与淋巴结转移、临床分期、术后生存期显著相关(P<0.05);PCNA表达阳性率与食管癌组织分化程度显著性正相关(P<0.05),淋巴结转移组显著高于未转移组,并与术后生存期互相关(P<0.01),与临床分期无显著相关。P16与PCNA表达呈反相关系(P<0.01)。结论：表明P16在食管癌生长、转移中起重要作用,P16、PCNA可作为判断预后的重要指标。     

Barrett食管及其腺癌中p16蛋白表达及临床意义

我们应用免疫组化SABC法对34例Barrett食管（BE）及其腺癌（BA）组织中pl6蛋白进行检测,旨在探讨pl6蛋白表达在BE和BA中的临床病理意义。1材料与方法1．l标本取我院1980－1995年间经纤维内窥镜活检及外科手术切除的34例标本作为研究对象,其中BE28例,根据Ridded“’分期...     

p16蛋白在骨肉瘤的表达及与预后的关系

为研究Ｐ１６蛋白在骨肉瘤发生中的作用及对预后的影响，采用免疫组化方法观察４６例骨肉瘤标本中Ｐ１６的表达，结果表明，Ｐ１６蛋白表达阳性率为５２．２％，阳性率在各组织学类型及临床分期的病例中无显著性差异。在３１例有随访资料的骨肉瘤中，Ｐ１６阳性表达组１５例的术后生存期较Ｐ１６阴性组为长，且差异有显著性。，提示Ｐ１６基因变异可能在骨肉瘤发生中起一定作用，并影响预后。     

肺腺癌耐药相关基因BC006151原核表达载体的构建及蛋白表达

背景与目的肺癌细胞对化疗药物的耐受是肺癌患者生存率低的重要原因之一。我们在前期研究中发现了一条肺腺癌耐药相关的基因BC006151,本研究拟构建肺腺癌耐药相关基因的原核表达载体PGEX-4T-1-BC006151,诱导其表达及鉴定目的蛋白,从而揭示该基因与肺腺癌耐药的关系。方法以RNA为模板RT-PCR扩增,产物与质粒PGEX-4T-1用BamHI和EcoRI双酶切,用T4DNA连接酶将二者连接,连接物转化DH5α菌,重组克隆菌经测序鉴定确认。将带有目的片段的重组克隆载体转化BL21表达菌,SDS-PAGE电泳检测表达产物,Western blot检测GST融合蛋白表达。结果经酶切鉴定及DNA测序,重组质粒中已插入了目的基因片段,与GenBank中公布的BC006151基因序列一致。重组克隆载体经BL21表达菌表达,获得40KD的条带(其中目的蛋白13KD,GST标签26KD)。结论成功构建了肺腺癌耐药相关基因BC006151原核表达载体,并成功诱导了目的蛋白表达,GST亲和纯化,为进一步制备该基因的多克隆、单克隆抗体奠定了基础。     

p16 protein expression is associated with a poor prognosis in squamous cell carcinoma of the lung

An immunohistochemical analysis for p16 protein was performed in 171 patients with non-small-cell lung cancer (NSCLC). Sixty-two carcinomas (36.3%) were classified as p16-negative. p16-negative tumours in squamous cell carcinomas (SCCs) were significantly more than those in adenocarcinomas (P = 0.039). There was no significant difference in survival according to tumour p16 status in patients with NSCLCs or in patients with adenocarcinomas. In contrast, of patients with SCCs, the 5-year survival rate of patients with p16-negative tumours was significantly lower than those with p16-positive tumours (P = 0.001). Especially, the survival of patients with p16-negative tumours was significantly worse than that of patients with p16-positive tumours in the early stage of the SCC, e.g. stage I (P = 0.005). Multivariate analysis showed that p16 status and nodal status were significant prognostic factors for the survival of patients with SCCs of the lung (P = 0.024 and P = 0.008 respectively). In conclusion, our study showed that alteration of p16 was one of the significant factors of a poor prognosis in SCCs of the lung, and that p16 might play an important role in some SCCs of the lung due to its high prevalence and prognostic value.     

p16基因及产物在原发性肺癌中的表达及其临床病理学意义

目的 探讨Ｐ１６基因及产物的异常表达与肺癌发生、发展关系。方法 应用免疫组化检测１１４例原发性肺癌组织中Ｐ１６蛋白的表达,应用ＰＣＲ技术分析６２例Ｐ１６蛋白表达丢失的肺癌组织中Ｐ１６外显子２（Ｅ２）的缺失情况,并以１４例癌旁正常肺组织作对照。结果 Ｐ１６蛋白阳性表达率在鳞癌、腺癌和小细胞肺癌中分别为４３．２％、８４．５％和２７．０％,各组间无显著差异（Ｐ〉０．０５）;Ｐ１６蛋白表达水平与非小细胞肺     

肺癌组织中P53v和p16基因的表达及临床意义

目的:探讨肺癌组织中p53V和p16基因编码蛋白的表达及其临床意义。方法:采用流式细胞术对47例非小细胞肺癌患者瘤组织p53V+和p16+细胞表达率进行检测和分析,并对肿瘤转移者和未转移者的p53V和p16基因编码蛋白表达水平进行对比研究。结果:肺癌患者瘤组织p53V+细胞检出百分率:肿瘤患者为58.52±26.02,显著高于正常对照的9.55±2.97,t=486.78,P=0.0045,肿瘤转移者为77.87±14.33,显著高于未转移者48.87±23.87,t=521.36,P=0.0071,并随着患者临床分期和病理分级的增加而逐渐增高;肺癌患者瘤组织p16+细胞检出率的变化规律与p53V+的变化恰好相反。两者相关分析显示,p53V+细胞与p16+细胞表达率呈显著负相关,r=-0.648,P=0.0180。结论:肺癌患者瘤组织细胞p53V和p16基因编码蛋白表达水平变化与肺癌临床生物学行为的关系十分密切。p53V和p16的检测可以作为肺癌诊断的参考指标,并可提示肺癌的转移情况,为患者的预后估计提供客观依据。     

血管生成和p16、p53蛋白表达与非小细胞肺癌淋巴结转移的相关性研究

目的　分析非小细胞肺癌 (NSCLC)淋巴结转移与血管生成及p16、p5 3蛋白表达的关系。方法　采用免疫组织化学方法对 187例NSCLC(74例腺癌、76例鳞癌和 37例腺鳞混合癌 )进行血管染色计数和p16、p5 3蛋白测定 ,并作相关临床因素分析。结果　非小细胞肺癌组织中微血管密度平均为 6 .8± 3.3,p16和p5 3蛋白阳性表达率分别为 4 7.6 %和 34.2 %。各组织类型非小细胞肺癌中淋巴结转移病例 (T2 N1～ 2 M0 )的微血管密度显著高于未转移者 (T2 N0 M0 ) ;在肺鳞癌和腺鳞癌中 ,p16和p5 3蛋白同时表达异常 (p16 -p5 3 )与微血管密度增高有关 ,但与淋巴结转移无关 ;而在肺腺癌中 ,p16和p5 3蛋白同时表达异常与淋巴结转移有关 ,但与微血管密度无关。微血管密度和p16、p5 3蛋白表达异常与年龄、性别、病理类型及分化程度均无明显相关。结论　各组织类型非小细胞肺癌的淋巴结转移均与活跃的血管生成密切相关 ,其中在肺鳞癌和腺鳞癌中 ,血管生成与p16和p5 3基因表达异常有关。而在肺腺癌中 ,血管生成和p16、p5 3蛋白异常表达是影响其淋巴结转移的两项独立的因素。     

p16蛋白在宫颈癌中的表达及其与患者临床特征和预后的关系

目的探讨p16蛋白在宫颈癌组织中的表达情况及其与患者临床特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学染色法检测116例宫颈癌患者的宫颈癌组织标本和100例子宫肌瘤患者的正常宫颈组织标本中p16蛋白的表达情况,分析宫颈癌组织中p16蛋白的阳性表达情况与宫颈癌患者临床特征和预后的关系。结果宫颈癌组织中p16蛋白的阳性表达率明显高于正常宫颈组织(P<0.01)。不同年龄、肿瘤直径、病理类型、宫颈癌分期宫颈癌患者宫颈癌组织中p16蛋白的阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);分化程度为低分化、有淋巴结转移宫颈癌患者宫颈癌组织中p16蛋白的阳性表达率均高于分化程度为中高分化、无淋巴结转移的宫颈癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。Log-rank检验结果显示,p16蛋白阴性表达患者的生存情况优于p16蛋白阳性表达患者(P<0.05)。结论低分化、有淋巴结转移宫颈癌患者宫颈癌组织中p16蛋白的阳性表达率较高,且p16蛋白阴性表达宫颈癌患者的生存情况更优。     

肺腺癌患者淋巴转移的分子指纹鉴定

背景与目的：远处转移是肺癌患者的重要死因,癌转移可能与细胞内基因表达模式改变有关。急需运用新技术来筛选和分析这些基因,以便进一步阐明癌转移的机制并寻找新的治疗靶点。本研究旨在筛选肺腺癌患者淋巴转移差异表达基因。方法：原发癌组织及区域淋巴结取自22例接受根治性手术的肺腺癌患者。根据组织来源将标本分为三组：不伴淋巴转移的肺腺癌组织（TxN-,n=11）、伴有淋巴转移的肺腺癌组织（TxN＋,n=11）及相应转移淋巴结中的肺腺癌细胞（N＋,n=11）。对各组进行激光显微切割以获得纯净癌细胞,T7RNA线性扩增获取足够量的RNA,实验通道和参照通道分别标记以后与含6000个已知人类基因或表达序列标签的cDNA基因芯片杂交,扫描荧光信号以后进行数据分析。结果：TxN＋组与TxN-组共有17个差异表达基因,其中12个基因表达上调,5个基因表达下调。有53个基因可将N＋组与TxN＋组区分开,其中在N＋组高表达的基因有25个,在TxN＋组高表达的有28个。结论：早期癌形成中的遗传学变化和后期癌进展中的获得性分子学变异共同决定肺腺癌的淋巴转移。     

P53蛋白及微血管密度在老年Ⅰ、Ⅱ期肺腺癌中的表达及研究

目的探讨血管新生、P53蛋白表达与老年较早期肺腺癌转移及预后的关系,进一步了解P53基因突变对血管形成的影响.方法采用免疫组织化学的方法,对33例老年肺腺癌患者病理切片进行分析,用P53抗体(PA1801)和FⅧ因子相关抗原抗体,检测P53蛋白及微血管密度(MVD).结果33例中,有淋巴结转移19例,无淋巴结转移14例,淋巴结转移组P53蛋白表达平均为40.5±30,MVD为35.5±18.5.无淋巴结转移组平均为25.8±21.MVD为16.2±7.6,P53与MVD两者有显著相关关系(r=0.64)(P<0.01).P53蛋白>20+MVD>24组,淋巴结转移,术后生存率较其它组有显著差异P<0.05.结论在老年早期肺腺癌中,P53蛋白>20+MVD>24预示预后不良,P53蛋白+MVD联合检测对患者临床诊治及预后的判断提供依据,P53基因可能对血管新生起重要调控作用.     

nm23和p53基因与肺腺癌生物学特性的关系

目的：检测肺腺癌组织中nm23表达和p53基因外显子突变情况,寻找有助于准确预测局部肿瘤进展、分型和预后情况的临床参照指标。方法：应用PCR技术检测31例肺腺癌术后存档蜡块组织中nm23表达及p53基因外显子突变情况,并与肺腺癌的病理及临床指标进行相关性分析。结果：nm23表达及p53基因突变率分别为38．7％（12／31）及48．4％（15／31）。nm23表达和p53基因突变与临床分期相关,P值分别为0．005、0．037。结论：nm23表达和p53基因突变与肺癌临床分期和生存相关,在判断肺腺癌细胞增殖、分化程度、恶性程度及预后转归方面有一定价值,可作为判断肺腺癌预后的参考指标,指导高危患者的进一步治疗。