人原发性肝癌基因治疗的实验研究：肿瘤坏死因子基因的初步应用

将含人肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）ｃＤＮＡ的不同逆转录病毒载体（ＬＮＳ－ｔｎｆα、Ｌ－ｔｎｆαＳＮ及ＬＮＣ－ｔｎｆα）和质粒型真核细胞载体（ｐＳＶＫ３－ｔｎｆα），分别用磷酸钙法导入肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１中，观察ＴＮＦ的表达水平。结果：重组质粒型表达载体ｐＳＶＫ３－ｔｎｆα表达好，２４小时开始分泌ＴＮＦα（５０Ｕ／ｍｌ），４８￣７２小时达最高值（９０Ｕ／ｍｌ），９６小时后下降（４０Ｕ／ｍｌ）。将ｐ     

多发性骨髓瘤患者血清IL—6和TNF—α水平的测定及其意义

目的 探讨多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者血清白细胞介素６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）的变化及其意义。方法 采用ＥＬＩＳＡ法测定３６例ＭＭ患者血清中ＩＬ－６和ＴＮＦ－α的水平。结果 进展期ＭＭ患者血清ＩＬ－６和ＴＮＦ－α水平较正常对照组明显增高（Ｐ〈０．０１）;缓解期ＭＭ患者血清ＩＬ－６和ＴＮＦ－α水平明显下降,与正常对照组相比无显著性差异（Ｐ〉０．０５）。进展期ＭＭ患者ＩＬ－６和ＴＮＦ－α水     

白血病患者外周血IL－2、mIL－2R和TNF－α的检测及意义

４５例白血病患者，采用固相放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定其血清白细胞介素２（ＩＬ－２）的水平，以流式细胞仪（ＦＣＭ）检测其外周血单个核细胞（ＰＭＮＣ）上膜白细胞介素２受体（ｍＩＬ－２Ｒ）的表达，用双抗体夹心ＣＥＬＩＳＡ法测定其血清肿瘤坏死固子α（ＴＮＦ－α）的含量。发现急性白血病（ＡＬ）及慢性位细胞白血病原始细胞危象（ＣＭＬ－ＢＣ）患者血清ＩＬ－２和ＴＮＦ－α的水平明显高于正常，ＣＭＬ－ＢＣ尤其急淋变者的ＰＭＮＣ上ｍＩＬ－２Ｒ阳性率较高，并与血清ＴＮＦ－α有关，而与血清ＩＬ－２无关，ｍＩＬ－２Ｒ阳性常提示白血病患者疗效差，预后不良。     

同种异体LAK/IL-2经超声雾化吸入及胸腔内注射治疗晚期肺癌

将ＩＬ－２或ＩＦＮ－γ基因体内转染腹腔巨噬细胞（ＭΦ），其表达的基因产物能提高ＭΦ的细胞毒活性，并诱导ＭΦ分泌ＴＮＦ、ＩＬ－１和ＮＯ等抗肿瘤免疫介质，激发机体的非特异性免疫功能而产生抗肿瘤效应。特别是ＩＬ－２和ＩＦＮ－γ基因联合转染ＭΦ，其表达的产物既能使ＭΦ产生更强的细胞毒活性并发分泌高水平的ＴＮＦ、ＩＬ－１和ＮＯ，又能激活脾ＣＴＬ细胞，从而激发机体的非特异性和特异性免疫功能，产生更强的协同抗肿     

肿瘤坏死因子与白细胞介素2协同抑制肺腺癌细胞的研究

目的：检测肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）、白细胞介素２（ＩＬ－２）单用或合用对肺腺癌Ａ５４９细胞系（Ａ５４９）和耐顺铂Ａ５４９细胞系（Ａ５４９／ＤＤＰ）的细胞毒性作用。方法：采用四氮唑蓝快速比色法（ＭＴＴ法）进行体外细胞毒性实验。结果：ＴＮＦα对两株细胞的毒性作用无显著差异;与ＩＬ－２合用后,ＴＮＦα对两株细胞的毒性作用分别较单用时均明显增强（Ｐ〈０．０１）。结论：ＴＮＦα与ＩＬ－２对两株细胞具有协同     

TNF与化疗药物不同配伍对胃癌细胞作用的研究

研究肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、５－氟脲嘧啶、丝霉素单用及ＴＮＦ与５－Ｆｕ、ＭＭＣ不同配伍方案对人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１细胞毒作用。方法应用噻唑蓝比色法（ＭＴＴ）测量各实验组的光密度（ＯＤ值），计算杀伤率。结果单独应用各药时，三者地ＳＧＣ－７９０１均有细胞毒作用，ＴＮＦ与５－Ｆｕ、ＭＭＣ配伍时细胞毒作用明显增强，不同配伍方案存在非常显著的差异（Ｐ〈０．０１），以先给化学药物，后加ＴＮＦ且毒性作用最经     

瘤内/瘤周注射巨噬细胞集落刺激因子或(和)干扰素γ基因转染的巨噬细胞对肿瘤的治疗作用

目的观察巨噬细胞集落刺激因子（ＭＣＳＦ）和干扰素γ（ＩＦＮγ）基因单独或联合转染的巨噬细胞（ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ，Ｍ）对局部黑色素瘤的治疗效果及相关免疫机理。方法荷瘤小鼠经基因转染的巨噬细胞治疗后，观察其长期存活期并检测其体内抗肿瘤免疫功能。用４小时５１Ｃｒ释放法检测荷瘤小鼠脾细胞自然杀伤细胞（ＮＫ）、细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）活性，间接ＭＴＴ法检测荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的杀伤活性，常规方法检测脾细胞诱导上清中肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、白细胞介素２（ＩＬ２）、γ干扰素（ＩＦＮγ）活性，局部肿瘤经治疗后行常规病理分析。结果经ＩＦＮγ基因及联合基因转染的巨噬细胞治疗后的荷瘤小鼠有２５％能长期存活，体外诱导的ＣＴＬ和小鼠腹腔巨噬细胞杀伤活性显著增强，脾细胞经诱导产生的细胞因子有不同程度的增加，与对照组相比差别显著。常规病理显示，ＭＣＳＦ和ＩＦＮγ联合基因转染的巨噬细胞治疗的小鼠肿瘤局部有大量的淋巴细胞浸润。结论ＭＣＳＦ和ＩＦＮγ基因转染的巨噬细胞瘤内瘤周注射对肿瘤有较好的治疗效果，其机制除了与巨噬细胞在局部直接接触杀伤瘤细胞有关外，宿主抗肿瘤免疫功能的增强亦起了重要的作用     

白血病细胞产生的免疫抑制因子对IL2作用的影响

人白血病细胞产生的免疫抑制因子（ＴＤＳＦ）作用于人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）６小时，即可抑制白细胞介素２（ＩＬ２）产生，与对照组相比Ｐ＜０．０１。当ＴＤＳＦ存在时，经驯化的ＰＢＭＣ效应细胞对外源性ＩＬ２反应显著减弱，表明ＴＤＳＦ能抑制ＩＬ２的利用。ＰＨＡ－Ｐ刺激ＰＢＭＣ增殖，但ＴＤＳＦ使其增殖抑制。表明：ＴＤＳＦ能抑制ＩＬ２产生及其作用；抗癌药对ＴＤＳＦ的分泌有部分阻抑作用。     

急性白血病患者外周血几种细胞因子水平的测定及其意义

目的 了解ＩＬ－２等细胞因子在白血病发病机制中的作用。方法 测定了５１例急性白血病患者ＰＢＭＮＣ培养上清中ＩＬ－２,ＩＬ－２,ＩＬ－６水平及血清ｓＩＬ－２Ｒ,ＴＮＦα水平。结果 （１）急性白血病患者ＰＢＭＮＣ培养上清的ＩＬ－２水平显著低于正常（Ｐ〈０．０１）及ＣＲ组（Ｐ〈０．０５）;而ＩＬ－６水平显著高于正常及ＣＲ组（Ｐ〈０．０１）。（２）急性白血病患者血清ｓＩＬ－２Ｒ及ＴＮＦα水平显著高于正常及     

宫颈癌细胞产生的TDSF对IL－2的免疫抑制作用

人宫颈癌细胞产的免疫抑制因子（ＴＤＳＦ）作用于人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）６小时，即可抑制ＩＬ－２产生，与对照组相比Ｐ＜０．０１。当ＴＤＳＦ存在时，经激活的ＰＢＭＣ效应细胞对外源性ＩＬ－２反应显著减弱，表明ＴＤＳＦ能抑制ＩＬ－２的作用。ＰＨＡ－Ｐ刺激ＰＢＭＣ增殖，但ＴＤＳＦ使其增殖抑制。表明ＴＤＳＦ能抑制ＩＬ－２产生及其作用。抗癌药对ＴＤＳＦ的分泌有部分阻抑作用。     

TNF—α基因转染多药耐药性人乳腺癌细胞的基因表达与生物学 …

目的：探索ＴＮＦ－α基因能否成功导入耐药细胞并获得表达,发挥生物学效应。方法：以重组逆转录病毒为载体将ＴＮＦ－α基因导入具有多药耐药（ＭＤＲ）表型的人乳腺癌细胞系ＭＣＦ７／ＡＤＲ,经Ｇ４１８抗生筛选获４株阳性克隆。ＰＣＲ、Ｅｌｉｓａ法鉴定并检测ＴＮＦ－α基因的整合和表达。细胞计数法观察细胞生长速度的改变,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果：４株阳性克隆整合了ＴＮＦ－α基因并获得表达,分泌ＴＮＦ－α量     

人原发性肝癌基因的实验研究───肿瘤坏死因子基因的初步应用

将含人肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）ｃＤＮＡ的不同逆转录病毒载体（ＬＮＳ－ｔｎｆα、Ｌ－ｔｎｆαＳＮ及ＬＮＣ－ｔｎｆα）和质粒型真核细胞载体（ｐＳＶＫ３－ｔｎｆα），分别用磷酸钙法导入肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１中，观察ＴＮＦ的表达水平。结果：重组质粒型表达载体ｐＳＶＫ３－ｔｎｆα表达好，２４小时开始分泌ＴＮＦα（５０Ｕ／ｍｌ），４８～７２小时达最高值（９０Ｕ／ｍｌ），９６小时后下降（４０Ｕ／ｍｌ）。将ｐＳＶＫ３－ｔｎｆα重组ＤＮＡ用磷酸钙包裹后直接进行瘤内注射，发现裸鼠外周血ＴＮＦα水平有一过性增高，３周后测量瘤体大小，发现实验组的肿瘤体积明显小于对照组（２．５±１．６ｃｍ比３．２±１．８ｃｍ，ｎ＝６，Ｐ＜０．０５），实验组荷瘤裸鼠的生存时间亦明显延长（４４．０±３．３ｄ比２８．２±２．０ｄ，ｎ＝６，Ｐ＜０．０１）。结果表明，应用ＴＮＦα基因转移进行肝癌的基因治疗是一条值得探索的途径。     

急性白血病患者外周血几种细胞因子水平的测定及其意义

目的了解ＩＬ－２等细胞因子在白血病发病机制中的作用。方法测定了５１例急性白血病患者ＰＢＭＮＣ培养上清中ＩＬ－２、ＩＬ－６水平及血清ｓＩＬ－２Ｒ、ＴＮＦα水平。结果（１）急性白血病患者ＰＢＭＮＣ培养上清的ＩＬ－２水平显著低于正常（Ｐ＜０．０１）及ＣＲ组（Ｐ＜０．０５）;而ＩＬ－６水平显著高于正常及ＣＲ组（Ｐ＜０．０１）。（２）急性白血病患者血清ｓＩＬ－２Ｒ及ＴＮＦα水平显著高于正常及ＣＲ组（Ｐ＜０．０１）。（３）急性白血病患者血清ｓＩＬ－２Ｒ水平与其外周血幼稚细胞比例呈正相关（ｒ＝０．４１０,Ｐ＜０．０５）;在Ｍ５患者中血清ｓＩＬ－２Ｒ与ＴＮＦα水平正相关（ｒ＝０．８７４,Ｐ＜０．０１）。结论急性白血病患者存在着细胞因子网络的失调,并在急性白血病的发生、发展中起一定的作用。     

树突状细胞诱导抗人肝癌细胞系的肿瘤免疫

目的 以树突状细胞（ＤＣ）在体外诱导抗肝瘤免疫。方法 自肝癌患者外周血中分离ＤＣ;以粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）及白介素－４（ＩＬ－４）联合刺激ＤＣ;以人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２细胞和ＢＥＬ－７４０２细胞的肿瘤相关抗原（ＴＡＡ）激活ＤＣ;ＤＣ诱导自体Ｔ淋巴细胞增殖、分化为细胞毒素性Ｔ细胞（ＣＴＬ）;检测ＣＴＬ对ｅｐＧ２细胞,ＢＥＬ－７４０２细胞、ＳＧＣ－７９０１细胞、ＬＯＶＯ细胞及ＨＯＳ－     

重组人干细胞因子对人类急性髓系白血病干／祖细胞自我更新作用的实验研究

应用无血清液体一半固体二次培养法，观察了重组人干细胞因子（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｓｔｅｍｃｅｌｌｆａｃｔｏｒ，ｒｈＳＣＦ）对人类急性髓系白血病干／祖细胞（ＡＭＬ－ＣＦＵ）自我更新的影响。认为ｒｈＳＣＦ是一作用阶段早于白介素３（ＩＬ－３）和粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）的造血生长因子（ＨＧＦ）。无论单一，还是与其它ＨＧＦ联合，ｒｈＳＣＦ对绝大部分ＡＭＬ患者，均有强大的维持其ＡＭＬ－ＣＦＵ自我更新的作用。但不同ＦＡＢ亚型及ＦＡＢ亚型相同的患者之间，这种维持作用差异较为显著。提示ＳＣＦ在ＡＭＬ病理过程中起重要作用。     

胃癌病人血清3种细胞因子测定及其临床意义探讨

目的 探讨胃癌病人血清肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）、白细胞介素６（ＩＬ－６）和白细胞介素８（ＩＬ－８）水平的变化及其临床意义。方法 采用ＥＬＩＳＡ法测定３５例胃癌病人血清ＴＮＦ－α、ＩＬ－６和ＩＬ－８水平,并与胃良性肿瘤组和正常对照组进行比较分析。结果 胃癌病人血清ＴＮＦ－α、ＩＬ－６和ＩＬ－８水平明显增高（Ｐ〈０．０１）,并与临床期有关（Ｐ〈０．０５）,病灶切除后血清ＴＮＦ－α、ＩＬ－６和ＩＬ－     

血清可溶性白细胞介素2受体,肿瘤坏死因子在小儿急性白血病中的意义

目的：了解急性白血病（ＡＬ）患儿血清中可溶性白细胞介素２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）和肿瘤霈死因子α（ＴＮＦα）水平及其临床意义。方法：采用ＥＬＩＳＡ及ＲＩＡ测定２７例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）和３１便急性淋巴细胞细胞白血病（ＡＮＬＬ）及２０例２蝗血清ＳＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦα水平。结果：ＡＬ患儿血清ＳＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦα发病期明显高于正常儿童,后二者差异无统计意义。发病期经化疗完全缓解后降至正常水平,化疗     

供者单采外周血中幼稚粒细胞检测的研究

目的：探讨异基因外周血干细胞移植（Ａｌｂ－ＰＢＳＣＴ）供血经细胞集落刺激因子动员后,采集的外周血干细胞（ＰＢＳＣ）移植物中的幼稚粒细胞与单个核细胞（ＭＮＣ）及ＣＤ＾＋３４细胞数之间相关性和移植的剂量标准。方法：对６例Ａｌｌｏ－ＰＢＳＣＴ供者用Ｇ－ＣＳＦ或Ｇ－ＣＳＦ＋ＧＭ－ＣＳＦ进行动员,于动员前及动员后,对外周血及收集的ＮＭＣ收集物中幼稚粒细胞及ＣＤ＾＋３４细胞进行检测计数,并计算出输出患者每公斤     

多发性骨髓瘤患者周围血单个核细胞培养上清液IL—6和TNF活性测定的…

本文测定了１８例ＭＭ患者ＩＬ－６和ＴＮＦ活性，同时分析其活性与ＭＭ病情有关参数相关性。结果显示ＴＮＦ、ＩＬ－６活性明显高于对照组（Ｐ〈０．０５）。ＩＬ－６与β２－ＭＧ、ＴＮＦ与血浆总钙浓度呈正相关（Ｐ〈０．０５）。提示该两种因子参与ＭＭ的发病，且有可能影响骨髓的代谢。     

IL-12协同B7-1增强实验小鼠的抗肿瘤免疫 *

目的：探讨分叉双歧杆菌的完整肽聚糖对巨噬细胞功能的调节作用。方法：以完整肽聚糖注射于源鼠腹腔,用习胸腺细胞增殖法、１９２９细胞体外杀伤法及Ｇｒｉｅｓｓ试剂分别测定裸鼠腹腔巨噬细胞产生的ＩＬ－１,ＴＮＦ－α及ＮＯ的水平;同时也观察了巨噬细胞体外杀瘤活性的变化。结果：完整肽聚糖一裸鼠腹腔巨噬细胞产生的ＩＬ－１,ＴＮＦ－α及ＮＯ含量均显著高于对照组,体外杀瘤活性也明显增强（Ｐ〈０．０１）。结论：分叉双歧