miR-145通过调控人子宫内膜基质细胞OCT4的表达促进子宫内膜异位症的发展机制

目的 通过体外细胞试验探讨miR-145在子宫内膜异位症（Endometriosis,EMs）中的调控机制。方法 蛋白印迹检测OCT4等相关蛋白的表达水平,通过相关分析和双荧光素酶报告试验用于评估miR-145和OCT4之间的关联,CCK8试剂盒检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,通过Transwell法检测hESCs的迁移。结果 前期临床试验发现异位子宫内膜组织miR-145表达上调,OCT4表达下调。在细胞实验中,miR-145过表达可显著促进hESCs的增殖和迁移（P <0.01）,但抑制hESCs的凋亡（P <0.05）。miR-145模拟物转染hESCs后,OCT4、Bax和MMP1等蛋白表达水平降低（P <0.01）,Bcl-2蛋白表达水平升高（P <0.05）。敲除miR-145逆转了上述结果,并通过靶向OCT4显著抑制了hESCs的增殖（P <0.05）。结论 研究结果表明,miR-145表达增加通过抑制OCT4蛋白表达,可能通过促进子宫内膜基质细胞上皮细胞间质转化（Epithelial-mesenchymal Transition,EM...     

c-fos在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的探讨c-fos在子宫内膜异位症（EMT）发生发展中的作用。方法收集正常子宫内膜标本26例,EMT在位内膜标本及异位内膜标本各27例,通过免疫组织化学染色法,检测c-fos蛋白在三组内膜中的表达情况。结果 c-fos主要表达于正常子宫内膜、异位内膜及在位内膜腺上皮细胞核中,少量表达于间质细胞浆;异位内膜及在位内膜组的c-fos蛋白表达明显升高,呈强阳性,与正常对照组比较,两组具有显著性差异（P〈0.05）;但在位内膜与异位内膜c-fos表达率未见明显差异（P〉0.05）;c-fos蛋白在正常子宫内膜组织、异位症在位内膜组织及异位内膜组织中的表达强度均呈现周期性变化,且增生期表达均明显高于分泌期,P值均〈0.05。结论 c-fos蛋白可能为EMT发生发展的重要调控蛋白之一。     

子宫内膜异位症异位及在位内膜中E-cad表达水平的研究

目的 通过对异位内膜及在位内膜中上皮型钙粘蛋白表达的研究,探讨上皮型钙粘蛋白在子宫内膜异位症发病中的作用.方法 应用S-ABC免疫组化方法对41例子宫内膜异位症患者异位内膜及在位内膜和35例对照组在位内膜中上皮型钙粘蛋白表达水平进行检测,并进一步比较两组表达水平的差异.结果 子宫内膜异位症患者异位内膜的上皮型钙粘蛋白的表达水平明显低于在位内膜(P＜0.05);且其异位内膜的表达水平低于对照组(P＜0.05).Ⅲ、Ⅳ期E-cad的表达明显低于Ⅰ、Ⅱ期(P＜0.05).结论 上皮型钙粘蛋白的低表达可能与子宫内膜异位症的发生、发展密切相关.     

Ezrin蛋白在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的 研究细胞骨架相关蛋白ezrin在子宫内膜异位症（endometriosis,EM）患者中的表达情况,探讨ezrin蛋白在EM发生、发展中的作用.方法 选择卵巢EM患者异位内膜标本60例作为异位内膜组,其在位内膜标本30例作为在位内膜组;正常子宫内膜20例作为正常内膜组,应用免疫组化EnvisionTM二步法检测ezrin蛋白在卵巢EM异位内膜、在位内膜和正常内膜的表达情况.结果 在位内膜组ezrin表达值高于正常内膜组,异位内膜组ezrin表达高于在位内膜组,在位内膜组及异位内膜重度组ezrin表达水平高于轻度组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.结论 ezrin蛋白可能在EM的发病机制中起着重要作用,ezrin蛋白的表达水平和EM的临床分期密切相关,提示ezrin可能在EM的发生、发展中起重要作用.     

子宫内膜异位症患者异位及在位子宫内膜基质金属蛋白酶9表达的研究

子宫内膜异位症(简称内异症)患者的异位内膜有播散的潜能，可以侵袭周围组织，这与肿瘤的转移过程很相似，MMP-9与肿瘤细胞的浸润、转移关系密切，因此考虑MMP-9可能在异位内膜的侵袭种植中发挥作用。     

子宫内膜异位症

081660子宫内膜异位症差异蛋白组学分析/张立会…∥中国实用妇科与产科杂志.—2008,24(9).—699～700目的:用蛋白组学技术进行正常的子宫内膜和异位的子宫内膜的差异蛋白质表达谱分析。方法:2006年10月至2007年6月在该院妇产科采用一维电泳和液质联用的方法对30例子宫内膜异位症患者的在位子宫内膜和异位子宫内膜进行蛋白组学分析。结果:对一维电泳中的3条差异条带进行蛋白质组学分析,鉴定出14个蛋白,它们在异位子宫内膜组织中表达上调。结论:通过蛋白质组学分析,可以更深入地理解子宫内膜异位症的发病机制,这些鉴定出的蛋白可能发展成为子宫内膜异位症诊断的标记分子。表1参6(原文摘要)081661子宫内膜异位症患者血浆及组织中骨桥蛋白表达及其作用机制的研究/靳卫国…∥现代妇产科进展.—2008,17(8).—597～601检测了56例子宫内膜异位症患者组织中的有关表达。结果:①异位内膜骨桥蛋白(OPN)主要分布于腺上皮细胞膜,阳性(～)表达率与在位内膜相似,明显高于对照组内膜(P<0.01),异位内膜细胞大多受挤压萎缩,缺乏典型的周期性改变;②血管内皮生长因子(VEGF)在异位内膜胞浆染色呈棕色颗粒,表达...     

microRNA-145在子宫内膜异位症中的研究进展

子宫内膜异位症(EMs)是一种常见的雌激素依赖性疾病,病因尚不明确。表观遗传异常可能是EMs的潜在致病机制,它改变了激素和环境因素对基因表达的反应,其中小分子RNA(miRNA)的差异性表达在EMs的发生、发展过程中发挥一定作用。miRNA是一种非编码调节性单链RNA,通过与信使RNA(mRNA)的3'非编码区(3' UTR)结合在转录或转录后的水平上调节基因表达。已有大量的研究揭示了miRNA作为EMs潜在的强有力的生物标记,这些失调的miRNA中,有些直接参与了疾病的发生,而另一些则与疾病的存在相关,但它们的生物学作用尚不清楚。在这些miRNA中,miR-145在EMs中存在明显的差异性表达。miR-145通过介导细胞黏附分子和细胞骨架元素,如纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、八聚体结合转录因子4(OCT4)以及肌成束蛋白-1(FSCN1)等因子影响内异症病灶的生成。miR-145还受其上游RNA分子的调控,如长链非编码RNA(lncRNA)前列腺癌相关转录物1(PCAT1)可通过miR-145信号通路靶向调控特定基因的表达,从而对EMs的患病风险产生影响。此外,miR-145表达水平的变化可能与EMs中的不孕症有关。本文旨在阐述miR-145在内异症中的作用机制,主要包括细胞的血管形成、腹膜黏附、侵袭、迁移、增殖、自噬、不孕症等内容,以期为临床治疗EMs提供进一步的理论支持。      

子宫内膜异位症的子宫内膜研究进展

组织学观察：在位内膜和异位内膜的结构、功能在内源性卵巢激素的作用下基本相似，但也存在差异。当在位内膜处于增生期时，有32.8％的异位内膜不呈增生反应，而呈分泌反应或无反应状态；当在位内膜处于分泌期时，有71．7％的异位内膜无分泌反应而呈增生或无反应状态。绝经后患者的异位内膜类似老年萎缩性在位子宫内膜，亦有局灶性坏死。     

子宫内膜异位症中miR-143、miR-145和miR-126的差异表达

目的探索子宫内膜异位症（EMs）中miR-143、miR-145和miR-126的差异表达,以及不同月经周期的影响。方法利用realtimeRT-PCR技术,比较miR-143、miR-145和miR-126在EMs患者在位内膜（EU,2例）、异位内膜（EC,14例）、配对EU+EC（14例）,与非EMs患者内膜（EN,28例）中的表达差异;并分析EN和EC组不同月经周期对miR-143、miR-145和miR-126表达的影响。结果不同月经周期的影响分析,发现仅EN标本中miR-143增生期表达量高于分泌期,差异有统计学意义（P＜0.05）。与EN相比,miR-143和miR-145在EU中均表达上调（P＜0.05）,miR-143、miR-145和miR-126在EC中均表达上调（P＜0.01）。配对EU-EC中,miR-143、miR-145和miR-126在EC中均表达上调（P＜0.01）。结论miR-143、miR-145和miR-126在EMs中表达高于非EMs,在EC中表达高于EU。     

HE4在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的 通过检测HE4在异位子宫内膜、正常子宫内膜中的表达,以进一步分析HE4在子宫内膜异位症的发生发展,以及良性疾病恶性表现中所起的作用.方法 选择内蒙古自治区人民医院2012年7月—2014年7月收治的90例,通过病理确诊的子宫内膜异位症60例,正常内膜组织的因子宫病变而进行子宫全切术的患者30例.采用免疫组化实验方法 对两组石蜡切片进行化学染色,并进行对染色结果 的染色强度进行评价,同时应用mIgae-or-plus对染色切片中的阳性部分测量其平均灰度值(mean IOD),并分析HE4在子宫内膜异位症中的表达情况.结果 ①HE4主要在子宫内膜腺上皮细胞中表达,而间质中仅有少量表达,且腺体中的表达明显高于间质(P=0.000<0.05).异位内膜组与正常内膜组比较,腺上皮中的表达异位内膜组高于正常内膜组(x2=7.2000,P=0.007<0.05).②子宫内膜异位症中异位内膜在r-AFS分期中Ⅰ~Ⅱ期的HE4表达强度低于异位内膜组Ⅲ~Ⅳ期,两者比较有统计学意义(t'=11.117,P=0.000<0.05).③异位内膜组织在月经周期的增生期HE4阳性表达高于分泌期HE4的表达,差异有统计学意义(t=10.496,P=0.000<0.05).正常内膜组织在月经周期的增生期HE4阳性表达高于分泌期HE4的表达,差异有统计学意义(t=7.483,P=0.000<0.05).结论 HE4在子宫内膜异位症异位内膜的表达增强,从r-AFS分期,I期至IV期,异位内膜组织中含量呈上升趋势,说明HE4可能参与了子宫内膜异位症的发生和疾病的发展.     

OCT4基因在胃癌细胞系中的表达及其意义

【摘要】 目的 检测八聚体结合蛋白-4（octamer-binding protein-4,OCT4）基因在不同分化程度的胃癌细胞株（MKN-28、SGC-7901、BGC-823）及正常胃黏膜细胞株GES-1中的表达情况,研究OCT4基因表达水平与胃癌细胞分化程度和侵袭力的相关性。方法 RT-PCR确定GES-1、MKN-28、SGC-7901、BGC-823中OCT4基因的表达水平,OCT4 siRNA转染BGC-823细胞,分别通过荧光定量PCR和Western blot检测干扰OCT4基因表达的效果,并利用Transwell小室法研究OCT4在BGC-823细胞侵袭力中的作用。结果 正常人胃黏膜细胞中未检测到OCT4的表达,人胃癌细胞系分化程度越低,OCT4基因表达量越高,低分化人胃癌细胞系BGC-823中OCT4基因表达最高,转染OCT4 siRNA的BGC-823细胞内的OCT4 mRNA和OCT4蛋白表达量明显下降（P＜0．05）。干扰胃癌细胞BG-823中OCT4基因的表达,穿膜细胞数量减少（P＜0．05）,侵袭力下降。结论 OCT4基因表达量与胃癌细胞的分化程度有关,OCT4基因可能在胃癌细胞的分化中起重要作用,影响胃癌细胞的侵袭能力,其表达程度有望成为胃癌患者恶性度预测的参考指标之一。     

OCT4在膀胱癌中的表达及其临床意义

目的检测干细胞标记物OCT4在膀胱癌中的表达,并探讨其与临床病理因素及肿瘤转移的相关性。方法采用Westernblotting、qRT-PCR检测OCT4在5种膀胱癌细胞株及人膀胱上皮永生化细胞株SV-HUC-1中的表达情况;同时收集46例患者膀胱癌根治手术切除的膀胱癌组织标本,应用免疫组织化学方法检测OCT4蛋白的表达。结果 OCT4在人类膀胱癌细胞株RT-4、Tcc-Sup、KK47、T24、5637中均有表达,而在人膀胱永生化细胞株中无表达。OCT4在膀胱癌组织中的表达率为76.1%,在正常膀胱组织中无表达。其异性染色定位于肿瘤细胞核内;膀胱癌组织OCT4蛋白阳性表达率显著高于正常组织(P<0.05);膀胱癌组织中的OCT4蛋白的表达与肿瘤病理分级呈正相关(P<0.05),与膀胱癌的浸润深度无相关性(P>0.05);与肿瘤转移呈正相关(P<0.05);与年龄、性别、TNM分期无明显相关性。OCT4阳性膀胱癌患者及阴性患者的3年总生存率分别为42.2%和76.7%,无转移生存率分别为35.4%和59.2%,结果均有统计学意义。结论膀胱癌组织中OCT4蛋白的表达与肿瘤分化程度及转移相关,对膀胱癌的早期诊断和预后分析有显著意义。     

OCT4介导肝细胞去分化过程中巢蛋白的表达及意义探讨

目的探讨OCT4介导的原代肝细胞去分化过程中巢蛋白（nestin）的表达及其意义。方法体外分离培养小鼠原代肝细胞。包装、浓缩表达OCT4的慢病毒并感染肝细胞。观察细胞的形态变化,用RT-PCR法监测nestin、白蛋白（albumin,ALB）、甲胎蛋白（alpha-fetoprotein,AFP）以及叉头框A2（FOXA2）的表达并进行定量分析。结果 OCT4慢病毒感染后,肝细胞内颗粒逐渐释出,并在7 d左右开始出现肝细胞增殖。在肝细胞ALB减弱,AFP、FOXA2增强的过程中,nestin从第3天持续至第9天,表达逐渐增强,从12 d起开始减弱,至18 d时上述基因的表达几近消失。结论 Nestin的表达伴随肝细胞去分化和增殖的过程。     

microRNA-145通过靶向抑制CREB调节内皮细胞增殖和血管新生

目的 构建微小RNA 145(microRNA-145,miR-145)过表达及干扰腺病毒载体,并探究miR-145对内皮细胞增殖和血管新生的影响及机制.方法 利用T4连接酶分别将miR-145过表达和干扰目的序列插入到pHBAd-EF1-MCS-GFP和pHBAd-U6-CMV-GFP载体,构建出重组miR-145过表达和干扰腺病毒质粒.将重组miR-145过表达和干扰腺病毒质粒分别与骨架质粒pHBAd-BHG共转染人胚肾HEK293细胞进行重组腺病毒的包装与扩增,TCID50法检测病毒感染滴度.miRNA qRT-PCR检测感染腺病毒的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)中miR-145的表达水平,MTT及Western blot检测PCNA蛋白表达量以检测细胞增殖情况.小管形成实验检测血管生成能力的变化.采用miRanda、miRwalk等生物信息学方法预测miR-145的靶基因及与环磷腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element-binding protein,CREB) 3'UTR的结合位点.Western blot检测CREB及其调控的VEGF的表达情况,双荧光素酶实验验证miR-145与目的基因CREB 3'UTR相互作用.结果 基因测序提示miR-145过表达及干扰质粒序列与目标序列一致,qRT-PCR结果亦提示病毒构建成功.细胞增殖和小管形成实验结果显示,与转染空载体组相比,过表达miR-145使570 nm处光密度值明显降低(P＜0.05),亦显著抑制了HUVECs PCNA蛋白表达和小管样结构的形成(P＜0.01),而干扰miR-145表达则使光密度值增高(P＜0.01),亦促进HUVECs PCNA蛋白表达和小管样结构的形成(P＜0.05).同时,过表达miR-145可显著抑制CREB和VEGF蛋白表达(P＜0.05),而干扰miR-145表达则明显促进CREB和VEGF蛋白上调(P＜0.05).双荧光素酶实验亦证实了miR-145与CREB 3'UTR的直接结合作用.结论 miR-145调节内皮细胞增殖和血管新生,其机制与miR-145直接靶向抑制CREB/VEGF信号有关.     

OCT4、SOX2和NANOG在胆囊癌中的表达及临床意义

目的检测OCT4、SOX2和NANOG在胆囊癌组织和非癌胆囊黏膜中的表达,探讨其与胆囊癌临床病理之间的关系。方法随机选取河南科技大学第三附属医院病理科2011年10月至2014年2月经外科手术切除且病理确诊的胆囊癌及良性胆囊病变组织标本各30例,应用免疫组化方法检测OCT4、SOX2和NANOG在胆囊癌及良性胆囊病变组织中的表达,分析其临床病理意义。结果 OCT、SOX2和NANOG蛋白在胆囊癌组织中阳性表达均明显高于其在非癌胆囊病变组织中的阳性表达,分别为(83.33%vs 23.33%;76.67%vs 20%;76.67%vs20%),以上各组组间差异均有统计学意义(P<0.05)。OCT4、SOX2和NANOG三者之间表达呈正相关关系(P<0.05)。结论 OCT4、SOX2和NANOG蛋白在胆囊癌组织中的异常表达说明其与胆囊癌的发生、发展有相关性,且OCT4、SOX2、NANOG表达与胆囊癌患者的临床分期及肿瘤的分化程度有关,而与患者的年龄、性别、肿瘤大小等因素无关,联合检测有助于明确肿瘤的生物学特性。     

内皮型一氧化氮合酶在卵巢异位子宫内膜组织中的表达和意义

目的探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在异位子宫内膜腺上皮细胞中的表达及其在卵巢子宫内膜异位症中的作用。方法应用免疫组织化学SP法检测eNOS在30例卵巢异位子宫内膜和30例正常子宫内膜中的表达。结果eNOS在正常子宫内膜腺上皮细胞表达较弱或不表达,异位子宫内膜中eNOS有高强度的表达,明显高于正常子宫内膜(P<0.05)。结论eNOS在异位子宫内膜中呈持续性增强表达,提示eNOS可能与卵巢子宫内膜异位症的发生及进展有关。     

VEGF在子宫内膜异位症中的表达及其意义

目的观察血管内皮生长因子（VEGF）在子宫内膜异位症（EMS）中的表达并探讨其在EMS发病机制中的作用。方法利用免疫组化法检测VEGF在30例EMS的异位内膜及在位内膜组织、30例正常子宫内膜组织中的表达。结果VEGF在异位内膜的表达显著高于在位内膜和正常子宫内膜（P〈0.05）。VEGF在EMS在位内膜的表达显著高于正常子宫内膜（P〈0.05）。结论VEGF在EMS的发生、发展中起重要作用。     

瘦素及其受体在子宫内膜异位症中的表达

目的测定瘦素(leptin)及其受体在子宫内膜异位症组织中的表达,探讨瘦素及其受体与子宫内膜异位症的相关性。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测21例手术后病理确诊的子宫内膜异位症患者的异位内膜及其诊刮的子宫内膜组织中瘦素受体mRNA表达,同时以17例因功能性子宫出血而行全子宫切除手术的子宫内膜组织中瘦素受体mRNA表达水平为对照。并采用放射免疫法(RIA)检测两组患者血清中瘦素水平。结果子宫内膜异位症患者与对照组血清瘦素水平比较差异无显著性(P>0.05)。异位子宫内膜组与自体子宫内膜及对照子宫内膜均有瘦素受体表达,而前者与后两者之间有显著性差异(P<0.05),后两者之间无显著性差异(P>0.05)。结论瘦素及其受体并非通过影响体内激素代谢而导致子宫内膜异位症的发生,可能参与腹腔内环境的改变而成为子宫内膜异位症发生的相关因素之一。