非酒精性脂肪肝大鼠PPARα基因表达及脂代谢和胰岛素水平的变化

目的 观察非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝组织中PPARα基因的表达,并用PPARα激动剂进行干预,探讨其与胰岛素抵抗、脂代谢紊乱的关系.方法 大鼠随机分为①正常对照组、②高脂模型组、③PPARα激动剂干预组,利用高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪肝模型.12周后,检测大鼠血脂、肝功能、血糖、胰岛素水平及胰岛素抵抗指数;RT-PCR法分析PPARα基因的表达;观察肝脏的形态学改变.结果 PPARα激动剂可降低NAFLD大鼠转氨酶、血脂水平及胰岛素抵抗指数,可促进NAFLD大鼠中PPARα基因的表达;肝脏形态学明显改善.结论 PPARα激动剂能改善NAFLD大鼠脂质代谢紊乱, 有明显的保肝降酶作用, 具有适度的胰岛素增敏作用.PPARα及其配体在NAFLD发病机制及治疗中的进一步深入研究,将为临床防治NAFLD提供新的思路.     

灯盏乙素抑制NOX的表达改善非酒精性脂肪性肝病肝脏纤维化的研究

  目的  探讨灯盏乙素（SCU）抑制NOX（NOX2、NOX4）的表达,改善高脂高糖诱导的非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）肝脏纤维化程度。  方法  60只大鼠随机分为:正常组、模型组、SCU-25低剂量治疗组[25 mg/（kg·d）]、SCU-50中剂量治疗组［50 mg/（kg·d）］SCU-100高剂量治疗组［100 mg/（kg·d）］和姜黄素阳性药物治疗组［200 mg/（kg·d）］,每组10只。正常组给予普通饲料喂养24+8周,其余各组采用高脂高糖饲料喂养SD大鼠24周建立NAFLD动物模型后,给予不同浓度的SCU和姜黄素灌胃治疗8周。治疗完成后,称取大鼠的体重,麻醉状态下取大鼠血清和肝脏组织,称取肝脏的重量,计算肝脏指数;通过ELISA法检测血清和组织中ROS的含量;采用油红“O”染色检测肝脏组织脂质沉积,Masson染色检测肝脏组织的纤维化程度;Western blot和免疫组织化学法检测肝脏组织中NOX2、NOX4蛋白的表达。  结果  模型组大鼠体重、肝重及肝脏指数增加（P < 0.01）,不同剂量的SCU和姜黄素治疗后体重、肝重及肝脏指数降低,SCU-100高剂量治疗组和姜黄素阳性药物治疗组对体重和肝重降低的影响较为明显（P < 0.01）。模型组血清和肝脏组织ROS含量增加（P < 0.01）,不同剂量的SCU和姜黄素治疗后ROS含量降低（P < 0.05）。在肝脏组织中,模型组出现大量的脂质沉积和组织的纤维化表现,不同剂量的SCU和姜黄素治疗后,脂质沉积减少,肝脏的纤维化程度改善。在肝脏组织细胞中,模型组的NOX2、NOX4蛋白表达上调（P < 0.05）,不同剂量的SCU和姜黄素治疗后NOX2、NOX4的蛋白表达下调（P < 0.05）,但剂量依赖不明显。  结论  SCU可能通过抑制肝脏NOX2、NOX4蛋白的表达,降低ROS的产生,从而改善NAFLD的肝脏纤维化程度。     

基于网络药理学研究杜仲叶提取物改善非酒精性脂肪肝的作用及机制

  目的  基于网络药理学探讨杜仲叶提取物(Eucommia ulmoides leaf extracts, ELE)改善非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)的有效成分、作用靶点及可能的作用机制。  方法  使用CNKI、万方、TCMSP、Pubmed等数据库、获取并筛选杜仲叶活性成分; 使用TCMSP数据库和SwissTargetPrediction数据库检索并预测ELE活性成分的靶点; 使用Genecard数据库和Drugbank数据库收集NAFLD疾病的靶点; 使用String 11.0构建蛋白互作(Protein-protein interaction)网络图, 分析蛋白靶点之间的关系; 使用Cytoscape 3.7.1软件构建化合物-疾病靶点-通路网络图, 分析三者之间相互作用的关系; 使用DAVID数据库, 对靶点进行GO分析和KEGG通路富集分析, 并对关键靶点进行实验验证。  结果  ELE改善NAFLD疾病靶点网络主要包含9个化合物和35个靶点, 与脂质代谢相关的靶点有PPARα和CPT-1A, 与NAFLD相关的通路主要有胰岛素抵抗、AMPK信号通路。体内、体外实验发现ELE能通过激活AMPKα及增强靶点PPARα和CPT-1A的表达, 增强脂质氧化, 改善NAFLD。  结论  ELE能增强脂质代谢, 改善NAFLD, 其机制主要与AMPK信号通路相关。      

降糖药物在非酒精性脂肪性肝病中应用的进展

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一种多系统代谢性疾病,与胰岛素抵抗、2型糖尿病等密切相关,已成为严重危害健康的常见病、多发病。目前尚无明确的药物用于治疗NAFLD。降糖药物是最有潜力的药物之一,包括胰岛素增敏剂[噻唑烷二酮类药物(TZDs)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-α/γ和α/δ双重激动剂]、双胍类(二甲双胍)、人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物、钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)抑制剂等。这些药物对控制体质量,减少肝脂肪含量、改善肝脂肪变性和气球样变,改善非酒精性脂肪性肝炎(NASH),减轻炎症反应,降低血糖、血脂,改善肝功能,提高抗氧化能力有一定的作用。TZDs(吡格列酮)是临床证据最充分、治疗机制最明确的药物,但因其安全性和耐受性而受限制。二甲双胍是一种安全的药物,但对NAFLD的作用存在争议。新型药物如PPAR-α/γ和α/δ双重激动剂(赛格列扎和GFT505)、利拉鲁肽(GLP-1类似物)等正处于临床试验中,数据显示其对NAFLD及NASH有良好的改善作用,且安全性好。需强调的是,改变不良生活方式和控制体重等措施仍是NAFLD的基本治疗措施。      

艾塞那肽对NAFLD大鼠SREBP1、ACCα及SCD1表达的影响

目的研究艾塞那肽对非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠的肝脏组织、胰岛素抵抗、SREBP-1、ACCα、SCD1表达的影响。方法 SD大鼠予100%高脂溶液灌胃12周,造模成功后取100只随机分为NAFLD模型组(high-fat diet,HFD),艾塞那肽低剂量(exenatidelow dose,ELD)、中剂量(exenatidemiddle dose,EMD)、高剂量干预组(exenatidehigh dose,EHD)及多烯磷脂酰胆碱治疗组(positive drug polyenephosphatidylcholine,PDC),每组各20只。艾塞那肽干预组予艾塞那肽1μg、2μg、4μg/kg (大鼠体重)注射治疗,PDC予多烯磷脂酰胆碱46 mg/kg (大鼠体重)注射。4周和8周后分别处死大鼠各半,HE染色观察肝脏病理改变,测定空腹血糖、胰岛素水平,检测SREBP1、ACCα及SCD1表达。结果艾塞那肽可以改善肝脏脂肪浸润,减少脂肪颗粒,降低天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotran... 更多     

肠道菌群结构在非酒精性脂肪性肝病患者中的改变

  目的  测定非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）患者肠道中目标细菌的数量，探讨肠道菌群在NAFLD发生发展中的作用。  方法  随机选取150例NAFLD患者，60例健康对照者，采用实时荧光定量PCR法检测粪便中目标细菌DNA的表达量。  结果  NAFLD患者粪便中的乳酸杆菌、直肠真杆菌数量显著增加（P = 0.00、P = 0.007），双歧杆菌、多形拟杆菌数量显著降低（P = 0.00、P = 0.022）。  结论  NAFLD患者肠道中存在乳酸杆菌、直肠真杆菌、双歧杆菌、多形拟杆菌的结构失衡，肠道菌群失衡可能参与NAFLD的发生发展，改善肠道菌群失衡对NAFLD具有一定治疗价值。     

疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞P13K p85α蛋白表达的影响

目的 观察疏肝健脾方药对非酒精件脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝细胞磷脂酰肌醇-3-激酶n85α(PI3K p85α)表达的影响.方法 以高脂饮食12周建立大鼠NAFLD模型后,造模组大鼠再随机分为模型组、疏肝组、健脾组、综合组和自然恢复组等5组.治疗组分别给予相应药物灌胃,其他组给予等量蒸馏水灌胃,模型组继续高脂饮食,其余均予基础饲料喂养.治疗8周后,用3%戊巴比妥腹腔麻醉,腹主动脉取血,全自动生化仪检测血脂及肝功,稳态模型法评价胰岛素抵抗程度,光镜下观察各组肝脏病理改变,免疫组化方法 检测肝细胞内PI3K p85α蛋白的表达情况.结果 与模型组相比,药物治疗各组及自然恢复组肝脏脂变程度明显减轻,肝功、血脂、胰岛素抵抗均有显著改善(P＜0.05或P＜0.01),肝细胞内PI3K p85α蛋白的表达明显减少(P＜0.05).与自然恢复组相比,药物治疗各组肝功、血脂、血糖的改善无显著差异,但肝脏脂变程度减轻,胰岛素抵抗指数明显下降(P＜0.05),肝细胞内PI3K p85α蛋白的表达显著降低(P＜0.05).结论 疏肝健脾方药对高脂饮食诱导的大鼠NAFLD有较好的治疗作用,其机制可能是与其降低肝细胞PI3K p85α的表达有关.     

黄芩素调节PPARγ/LXRα/ABCA1信号通路干预NAFLD大鼠肝功能和胰岛素抵抗研究

目的:探讨黄芩素调节过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)/肝X受体α(LXRα)/三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)信号通路对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝功能和胰岛素抵抗的影响。方法:通过高脂饲料喂养建立NAFLD大鼠模型,将造模后的大鼠随机分为模型组、双酚A-二甘氨酸醚(BADGE)组(PPARγ抑制剂,20 mg·kg^-1 BADGE)、黄芩素组(50 mg·kg^-1黄芩素)、黄芩素+BADGE组(50 mg·kg^-1黄芩素+20 mg·kg^-1 BADGE),10只/组,另取10只大鼠作为对照组。检测各组大鼠甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);苏木精-伊红(HE)染色观察肝脏病理状况;油红O染色检测肝脏脂质沉积情况;TUNEL染色测定肝细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹(western blot)法检验肝组织中通路相关蛋白表达水平。结果:模型组与对照组相...     

消木丹颗粒对非酒精性脂肪肝大鼠FXR、ApoM表达的影响

目的 探讨消木丹颗粒对非酒精性脂肪肝（NAFLD）模型大鼠的治疗作用，并探讨其对FXR/ApoM表达的影响。方法 60只SD大鼠按体质量分为正常组，模型组，消木丹颗粒低、中、高剂量组，多烯磷脂酰胆碱组，除正常组外，其余50只采用高脂膳食喂养12周建立NAFLD大鼠模型，造模成功后灌胃给予相应药物，给药4周后取血清及肝脏组织样本。称取大鼠体质量及肝湿质量，计算肝脏指数；HE染色、油红O染色观察肝脏病理变化；ELISA法检测血脂及肝功能水平；免疫组化观察肝组织FXR、ApoM的表达；qPCR法检测肝组织FXR、ApoM mRNA表达水平，Western blot法检测肝脏上述各项基因的蛋白表达。结果 与模型组比较，消木丹颗粒干预后能显著改善NAFLD大鼠体质量、肝脏指数，降低血清ALT、AST、TC、TG、LDL-C含量，增高HDL-C含量，同时能增强肝脏FXR、ApoM的表达，差异有统计学意义（P<0.05~0.01）。结论 消木丹颗粒可调节NAFLD大鼠肝脏的脂质代谢，改善脂质沉积，其机制可能与调控FXR及其相关基因ApoM有关。      

胆绿素改善大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制

  目的  探讨胆绿素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用以及机制。  方法  采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型（middle cerebral artery occlusion model，MCAO），给予胆绿素治疗后，采用改良版神经功能缺损评分评价大鼠神经功能缺损情况，干湿重法测定脑组织含水量，TTC染色测定脑梗死面积，Iba-1/DAPI染色标记缺血侧脑组织小胶质细胞活化情况，免疫荧光染色检测脑组织炎症因子TNF-α表达，Western blot测定脑组织Iba-1/CD68的蛋白表达。  结果  和IR组比较，胆绿素治疗可改善MCAO大鼠的神经功能缺损（P < 0.05），同时，还能减轻脑组织含水量（P < 0.05），降低大脑梗死面积（P < 0.05），以及降低缺血侧脑组织中小胶质细胞的表达和Iba-1/CD68蛋白的表达（P < 0.05）。此外，胆绿素治疗还能减少缺血侧脑组织中炎症因子TNF-α的表达（P < 0.05）。  结论  胆绿素在MCAO大鼠中可能通过抑制小胶质细胞活化而减轻大鼠脑缺血再灌注损伤。     

基于脂质组学探究健脾利湿方对NAFLD小鼠肝脏脂质的调控作用

  目的  基于LC-MS脂质组学探讨健脾利湿方对非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠肝脏脂质代谢的调控作用。  方法  将C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、健脾利湿方组3组, 每组6只, 采用60%高脂饲料饲喂12周诱导NAFLD模型, 同时进行给药干预。通过生化指标检测及病理切片进行药效学评估, LC-MS脂质组学检测小鼠肝脏组织脂质变化。  结果  健脾利湿方改善了HFD诱导的体质量增加, HE、油红染色显示具有肝脏保护作用, 可恢复葡萄糖代谢水平。其次, 降低了肝脏Fasn、CD36、SCD1、Srebp1c的mRNA水平(P < 0.05, P < 0.01,P < 0.001);此外, 脂质组学研究发现, 健脾利湿方对肝脏脂质组成存在调控作用。  结论  健脾利湿方具有降低体质量、调节血糖、保护肝脏的作用, 脂质组学研究表明对肝脏脂质组成的调控可能是健脾利湿方治疗NAFLD主要作用机制。      

慢性乙型病毒性肝炎合并NAFLD患者发生中重度肝损伤的影响因素

  目的  探讨CHB合并NAFLD患者发生明显肝损伤的影响因素。  方法  回顾性分析2020年1月1日至2020年12月30日期间就诊于昆明市第三人民医院的225例CHB合并NAFLD患者的临床资料，根据肝损伤程度分为A组（120例，无肝损伤或轻度肝损伤）和B组（105例，中度或重度肝损伤）。对2组患者的基本资料、代谢相关指标、血细胞分析、肾功能、乙肝相关病原学等实验室资料进行单因素分析，然后将单因素分析中筛查得到的指标全部纳入二元Logistic回归分析，探索CHB合并NAFLD患者发生中度或重度肝损伤的影响因素。  结果  （1）A组 vs B组:男性占比（76.67% vs 87.62%）、HBeAg阳性占比（49.17% vs 53.91%）、CHOL[（4.89±0.95）mmol/L vs（4.23±1.17）mmol/L]、HDL-C[1.10（0.94～1.28）mmol/L vs 0.90（0.53～1.18）mmol/L]、LDL-C[3.03（2.52～3.60）mmol/L vs 2.70（2.05～3.19）mmol/L]、PLT[（202.47±60.79）×109/L vs（173.37±60.89）×109/L]、BUN[4.51（3.83～5.41）mmol/L vs 3.92（3.37～5.02）mmol/L]、UA[369.00（314.00～421.00）μmol/L vs 338.50（292.00～397.25）μmol/L]、Ln（HBV-DNA）[12.79（7.82～17.31）IU/mL vs 15.44（12.64～17.76）IU/mL]在2组间比较差异有统计学意义，均P < 0.05。（2）二元Logisitic回归分析显示，PLT[OR（95%CI） = 0.993（0.987～0.999）]、BUN[OR（95%CI） = 0.726（0.565～0.932）]、UA[OR（95%CI） = 0.994（0.990～0.998）]、HDL-C[OR（95%CI） = 0.175（0.060～0.510）]每下降1个单位，发生中重度肝损伤的可能性分别增加0.7%、27.4%、0.6%、82.5%；Ln（HBV-DNA）[OR（95%CI） = 1.138（1.045～1.239）]每升高1个单位，发生中重度肝损伤的可能性增加13.8%，均P < 0.05。  结论  HBV-DNA、HDL-C、BUN、UA、PLT是CHB合并NAFLD患者发生中度或重度肝损伤的影响因素，临床需高度重视。     

丹栀调脂汤对高脂诱导MAFLD大鼠PI3K/AKT/FOXO1信号通路的影响

目的 研究丹栀调脂汤对高脂饮食诱导的代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)大鼠PI3K/AKT/FOXO1信号通路的影响,探讨其在MAFLD治疗中的作用。方法 雄性SD大鼠分为正常组、模型组及丹栀调脂汤高、中、低剂量组。正常组和模型组予等体积的生理盐水,丹栀调脂汤高、中、低剂量组分别予丹栀调脂汤20.4、10.2、5.1 g·kg^-1·d^-1,连续灌胃8周后取材。检测5组大鼠体质量、血脂、血糖、胰岛素水平及HOMA-IR变化情况;肝脏组织脂质沉积情况;Western blot检测PI3K/AKT信号通路中各蛋白表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠体质量、TG、TC、FFA、GLU、INS、LDL-C及HOMA-IR水平明显升高,HDL-C水平明显降低;肝脏组织油红O染色可见明显肿大的肝细胞及明显的脂质沉积;PI3K、AKT蛋白磷酸化表达水平显著降低。相较于模型组,丹栀调脂汤高、中、低剂量组体质量、TG、TC、FFA、GLU、INS、LDL-C及HOMA-IR水平不同程度降低;肝细胞肿大、肝细胞脂滴及排列结构均有不同程度的改善;PI3K、AKT、...     

评估肥胖相关指标对非酒精性脂肪肝的筛查价值

目的 探讨筛查中老年人非酒精性脂肪肝(NAFLD)的最佳肥胖相关指标。方法 本项横断面研究筛选了2019年1—3月在陕西省人民医院健康管理中心参加体检的40岁及以上受试者1 281人,进行病史采集、体格检查及实验室检查,所有受试者均接受腹部B超检查。应用logistic回归分析研究各肥胖指标与NAFLD患病风险的相关性,采用ROC曲线评估肥胖指标对NAFLD患病风险的筛查价值。结果 在1 281例受试者中,335例诊断为NAFLD,NAFLD的患病率为26.15%。NAFLD组的血压、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、转氨酶、空腹血糖、空腹胰岛素、稳态模型估计的胰岛素抵抗指数、糖化血红蛋白、腰围、腰臀比、BMI、脂质蓄积指数(LAP)均明显升高,高密度脂蛋白胆固醇降低。Logistic回归分析显示,在校正了相关混杂因素后,腰围、腰臀比、BMI、LAP均与NAFLD的患病风险相关。其中LAP与NAFLD的相关性最强,与处于LAP第一分位的受试者相比,处于LAP第四分位的受试者NAFLD的患病风险显著增加(OR=18.055,95%CI:7.683～42.427,P<0.001...     

内源性NO介导的Stargazin亚硝基化修饰在脑缺血再灌注后突触可塑性中的作用及机制

  目的  研究Stargazin-亚硝基化修饰在脑缺血再灌注后突触可塑性中的作用，并探讨NO调控AMPAR“Trafficking”的分子机理。  方法  采用线栓法阻塞大脑中动脉复制局灶性脑缺血再灌注（MCAO/R）损伤大鼠作为模型组，分别在每只大鼠MCAO/R模型内给予NMDAR抑制剂MK801、氧化还原剂DTT干预作为实验组。采用mNSS评分标准检测大鼠神经功能，TTC染色检测脑部缺血损伤情况，TUNEL染色检测以及WB检测缺血侧海马神经元凋亡情况，Griess法检测缺血侧海马组织中NO的含量，此外Western Blot检测海马组织中Stargazin-亚硝基化修饰水平以及AMPAR蛋白的表达和活化情况。  结果  给予MK801和DTT处理后MCAO/R模型中Stargazin-亚硝基化修饰水平（P < 0.01）以及NO含量（P < 0.01）下降；AMPAR亚基GluR2磷酸化水平降低（P < 0.0001）；抑制Stargazin亚硝基化修饰能够改善MCAO/R引起的神经损伤与凋亡（P < 0.001）。  结论  在MCAO/R模型中，抑制内源性NO和Stargazin亚硝基化水平可促进神经突触重塑，其机制可能是干预了Stargazin辅助蛋白与AMPAR亚基GluR2亲和力有关。     

EGCG通过抑制TGF-β1/Smads信号通路改善高脂高糖饮食诱导的肥胖大鼠心肌纤维化

  目的  研究表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate,EGCG）对高脂高糖饮食诱导的肥胖大鼠心肌纤维化影响,探讨EGCG能否通过TGF-β1/Smads信号通路减轻心肌纤维化的程度。  方法  采用长期高脂高糖饮食形成肥胖大鼠模型,给予EGCG每天灌胃,治疗4周后,称取各组大鼠体重,Masson染色检测心肌纤维化的程度。生化检测血清中空腹血糖（FBG）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）的含量。Western blotting检测各组大鼠心脏组织中相关蛋白（Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3、Smad7）的表达水平。  结果   与正常组比较,模型组大鼠体重增加,给予EGCG治疗后减轻。与正常组比较,模型组大鼠心肌纤维化程度严重,给予EGCG治疗后减轻。与正常组比较,模型组大鼠FBG、TC、TG、MDA高于正常组,给予EGCG治疗后下降。与正常组比较,模型组大鼠GSH活性低于正常组,给予EGCG治疗后升高。与正常组比较,模型组大鼠Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达升高,给予EGCG治疗后下降。与正常组比较,模型组大鼠Smad7蛋白表达低于正常组,给予EGCG治疗后升高。  结论  EGCG能够改善肥胖大鼠血糖和脂质代谢紊乱,减轻心肌纤维化程度,其机制可能与氧化应激介导的TGF-β1/Smads信号通路有关。