硒代蛋氨酸通过NF-κB和MAPK通路抑制P.g-LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS和COX-2表达

目的:探讨硒代蛋氨酸(Selenomethionine, SeMet)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,P.g-LPS)诱导的RAW264.7细胞的作用和机制。方法:使用P.g-LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7体外构建炎症细胞模型,CCK-8法检测不同浓度SeMet对RAW264.7细胞活性的影响。以不同浓度的SeMet(10、25、50μmol/L)干预细胞1 h后,再使用P.g-LPS诱导细胞24 h。RT-PCR法检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)和环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)相关基因表达,ELISA法检测iNOS和COX-2相关蛋白分泌情况。Western blot检测NF-κB和MAPK信号通路相关蛋白表达情况。结果:浓度低于50μmol/L的SeMet对RAW264.7细胞活性没有显著影响。对RAW264.7使用SeMet预处理后,SeMet明显抑制P.g-LPS诱导的iNOS和COX-2相关基因...     

重组人β防御素3对牙龈卟啉单胞菌脂多糖致炎作用的影响

目的:以牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)诱发载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠和RAW264.7小鼠单核巨噬细胞的急性炎症反应,并应用重组人β防御素3(rhBD3),观察其对炎症的干预效果。方法:20周龄雄性ApoE-/-小鼠随机均分为PBS对照组、P.g-LPS组和P.g-LPS+rhBD3组,分别经腹腔注射给药2h后,检测血清中不同炎症指标(MCP-1、TNF-α、IL-6、IL-1β和NO)的水平。同时,以rhBD3干预P.g-LPS对RAW264.7细胞的致炎作用,分别检测培养上清和细胞中炎症指标的水平及其mRNA的相对表达量。结果:经P.g-LPS刺激后,ApoE-/-小鼠血清MCP-1、TNF-α、IL-6和NO的水平较对照组显著上调;而同时应用rhBD3能明显降低MCP-1、TNF-α和NO表达量。P.g-LPS能显著上调RAW264.7细胞培养上清中TNF-α和NO的水平以及细胞中TNF-α和IL-6的mRNA相对表达量,rhBD3对此具有抑制作用。结论:rhBD3对P.g-LPS在体内、外诱导的急性炎症具有一定的抑制效应,可能在牙周炎与高脂血症的相互作用中发挥免疫调节作用。     

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对THP-1源性巨噬细胞CD36和LOX-1表达的影响

目的该文以THP-1源性巨噬细胞为研究对象,研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)对巨噬细胞内胆固醇代谢关键分子CD36、LOX-1表达的影响。方法以160 nmol/L佛波酯(PMA)诱导THP-1单核细胞48 h,使其分化为巨噬细胞。建立P.g-LPS与THP-1源性巨噬细胞共孵育的体外模型,在负荷50μg/m L低密度脂蛋白(LDL)的条件下,分别用浓度为0.1、1.0、10.0μg/m L P.g-LPS与巨噬细胞共孵育48 h;1μg/m L P.g-LPS与巨噬细胞共孵育24、48和72 h。采用实时荧光定量PCR和Western blot方法探讨巨噬细胞胆固醇代谢关键分子CD36和LOX-1表达变化。结果与空白对照组相比,随着P.g-LPS浓度的增加和1μg/m L P.g-LPS孵育时间的延长,巨噬细胞内CD36 mRNA和蛋白表达均逐渐下降;LOX-1mRNA和蛋白表达无明显变化。结论 P.g-LPS可促进巨噬细胞CD36的表达,对LOX-1表达无影响,从而可能对巨噬细胞脂质代谢产生影响。     

硅酸二钙对小鼠巨噬细胞系RAW264.7的促炎反应机制研究

目的:探讨硅酸二钙对小鼠巨噬细胞系RAW264.7的促炎反应机制。方法:选取小鼠巨噬细胞系RAW264.7作为研究对象,磷酸三钙(Tricalcium phosphate,简称TCP)颗粒作为对比,硅酸二钙(Dicalcium silicate,简称C2S)、磷酸三钙颗粒均设置两种浓度:10 mg/L和100 mg/L,观察RAW264.7对两种材料的吞噬作用,观察是否有细胞自噬现象发生,采用qRT-PCR的方法,检测硅酸二钙、磷酸三钙颗粒分别与RAW264.7共培养6 h和24 h后TLR2(Toll like receptor2)、TLR9基因的表达量,初步探讨硅酸二钙促炎反应的机制。结果:硅酸二钙与磷酸三钙颗粒与RAW264.7共培养后,细胞吞噬颗粒,通过透射电镜观察可见细胞自噬现象。与磷酸三钙颗粒组相比,硅酸二钙颗粒组与RAW264.7共培养6 h后,TLR2、TLR9基因的表达均无明显变化;共培养24 h后,硅酸二钙颗粒组的TLR2基因表达量明显增高(P<0.001),10 mg/L磷酸三钙颗粒组的TLR2基因表达可能增高(0.05<P<0.1)。结论:硅酸二钙对小鼠巨噬细胞RAW264.7的促炎反应与TLR2基因的高表达可能有密切的关系。     

IL-17联合IFN-γ体外诱导RAW264.7细胞增殖和凋亡的影响

目的研究白细胞介素-17(IL-17)联合干扰素-γ(IFN-γ)在小鼠破骨前体细胞系RAW264.7分化为成熟破骨细胞过程中,对细胞增殖和凋亡的影响。方法将核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导小鼠破骨前体细胞系RAW264.7建立破骨细胞体外诱导分化研究模型,被诱导的RAW264.7细胞培养24 h后,分为IL-17组、IFN-γ组、IL-17+IFN-γ联合组(IL-17+IFN-γ等量组、IL-17固定+IFN-γ梯度组)进行干预。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色对破骨细胞成熟进行鉴定,利用CCK-8细胞增殖试验检测各组细胞增殖情况,AnnexinⅤ细胞凋亡实验评价各组细胞凋亡的差异,实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因mRNA表达差异。结果 50 ng/m L IL-17与不同浓度的IFN-γ联合,随着IFN-γ浓度升高,IL-17对RAW264.7细胞生长抑制呈浓度依赖性。IL-17和IFN-γ的联合作用比单独应用IL-17,凋亡率更高;与单独应用IFN-γ相比,凋亡相关基因Fas L表达明显增加。结论试在RAW264.7细胞向破骨细胞的分化过程中,IL-17和IFN-γ联合能抑制破骨前体RAW264.7细胞向破骨细胞的增殖,并促进RAW264.7细胞的凋亡。     

他米巴罗汀对牙龈卟啉单胞菌抗原刺激RAW264.7细胞的影响

目的 探讨他米巴罗汀（Tamibarotene,Am80）对经牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis）抗原刺激后的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的影响。方法 采用P.gingivalis抗原刺激RAW264.7细胞,分别用不同浓度的Am80进行干预;相差显微镜下观察各组细胞生长情况;MTS法检测不同浓度Am80对抗原刺激RAW264.7细胞的增殖情况;酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞培养上清中抗炎因子IL-10的含量。结果 10 nmol/L Am80能够显著抑制P.gingivalis抗原刺激RAW264.7细胞的增殖分化（P<0.001）;Am80（10 nmol/L）致抗原刺激的细胞IL-10的分泌量显著增加（P<0.05）;倒置相差显微镜下观察显示Am80抑制抗原刺激细胞的增殖分化。结论 Am80（10 nmol/L）时可显著促进P.gingivalis抗原诱导小鼠巨噬细胞分泌抗炎因子IL-10,并可能由此抑制P.gingivalis抗原诱导的炎症反应。     

脂多糖刺激单核细胞上清对成骨细胞Runx2/Cbfα1表达影响

目的　观察牙龈卟啉菌脂多糖(Pg-LPS)刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清对成骨细胞Runx2/Cbfα1表达的影响。 方法　收集经100 ng/ml Pg-LPS刺激的单核巨噬细胞RAW264.7培养24 h后上清,以20%的稀释浓度的分别作用于MC3T3-E1细胞1、6、12、24、48、72 h后,采用半定量RT-PCR与Western-Blot检测细胞Runx2/Cbfα1在基因与蛋白水平上的差异性表达。 结果　成骨细胞MC3T3-E1在20%稀释浓度的培养上清刺激后,半定量RT-PCR法发现Runx2/Cbfα1基因表达显著受抑制,且呈时间依赖性,72 h降到最低; Western-Blot检测显示细胞Runx2/Cbfαa1蛋白表达6 h后开始下降,72 h降至最低。 结论　Pg-LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清能抑制小鼠成骨细胞Runx2/Cbfα1的表达且与时间呈一定相关。     

炎症状态下张应力对成骨细胞基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1表达的影响

目的 观察炎症状态下周期性张应力对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1细胞)基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1表达的影响.方法 收集100 ng/ml的经牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)刺激小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)24 h后培养上清液,以20％稀释浓度作用于MC3T3-E1细胞24 h,采用四点弯曲细胞力学加载仪对正常培养与炎症状态下培养的MC3T3-E1细胞分别加载张应力0 h(对照组)、1h、3h、6h,采用荧光定量聚合酶链反应(real time PCR)和免疫组化法检测基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1的mRNA及蛋白水平表达的变化.结果 炎症状态下周期性张应力作用于小鼠成骨细胞后,加力组基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1的mRNA和蛋白表达量较非炎症状态下显著增加,并随着时间的延长而不断增加,且不同时间段的表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 炎症状态下张应力可显著影响成骨细胞基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1的表达,从而为炎症状态与张应力共同作用下基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1参与牙周组织细胞外基质代谢提供了理论依据.     

低强度脉冲式超声波在脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞分化中的抗炎和抗氧化作用

目的研究低强度脉冲式超声波（LIPUS）对RAW264.7巨噬细胞极化的影响及相关分子机制。 方法100 ng/mL脂多糖（LPS）和10 ng/mL白细胞介素（IL）-4诱导巨噬细胞RAW264.7分别向M1和M2型极化，45 mW/cm²强度LIPUS对巨噬细胞处理25 min。采用流式细胞术检测巨噬细胞氧化应激活性氧（ROS）水平、M1分化标志物CD80和CD11b，以及M2分化标志物CD163的表达水平。采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测CD80、CD11b、核转录因子κB（NF-κB）p65、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1β和IL-6的mRNA水平。采用Western blot技术检测细胞p65、p-p65、TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平。采用流式细胞术检测细胞培养上清TNF和IL-6表达水平。 结果LIPUS可明显减少LPS诱导的RAW264.7细胞ROS水平。LPS诱导后，RAW264.7细胞M1分化标志物CD80和CD11b表达和转录水平均上调；LIPUS可抑制LPS对RAW264.7细胞向M1的诱导，差异具有统计学意义。并且，LIPUS可促进IL-4诱导的巨噬细胞M2分化标志物CD163表达。LPS诱导的RAW264.7细胞炎症因子NF-κB p65、TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA水平上调，LIPUS可下调这些炎症因子的mRNA水平，差异均具有统计学意义。LIPUS抑制了LPS对RAW264.7细胞因子蛋白p65和p-p65、IL-1β、TNF-α和IL-6蛋白表达上调的作用。胰酶可以通过激活ROS-NF-κB通路，回复LIPUS促进巨噬细胞M1分化的作用。 结论LIPUS可通过ROS-NF-κB抑制RAW264.7向巨噬细胞M1型分化，促进RAW264.7向巨噬细胞M2型分化。氧化应激和炎症因子表达水平被抑制。LIPUS可能在牙周疾病中起到抑制氧化和炎症的作用，从而发挥对牙周疾病的治疗功能。     

microRNA-223在牙龈卟啉单胞菌诱导牙龈成纤维细胞炎症调控的研究

目的 探讨microRNA-223在牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharides, P.g-LPS)诱导牙龈成纤维细胞(gingival fibroblasts,GFs)炎症过程中对相关炎症因子表达水平的调控作用。 方法 采用慢病毒转染、干扰GFs中的microRNA-223的表达,在最适P.g-LPS刺激浓度(800 μg/L)分别刺激过表达、抑制以及正常表达microRNA-223的GFs,采用实时聚合酶联反应（Real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR）检测TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达水平变化,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测其蛋白水平的变化。 结果 LPS刺激GFs产生炎症反应时,细胞内microRNA-223以及相关促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA和蛋白表达水平较正常细胞中的表达量明显上调。当细胞内microRNA-223上调时,促炎因子的mRNA和蛋白表达水平也会上调(P<0.001);当细胞内microRNA-223下调时,促炎因子TNF-α、IL-1β的蛋白水平会显著下降(P<0.001)。 结论 当GFs受P.gingivalis-LPS刺激发生炎症时,microRNA-223的表达量增多,上调促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6,进一步加重组织细胞的炎症。     

白藜芦醇减轻LPS诱导的牙周膜细胞损伤并抑制TLR4/NF-κB活化

目的:探究白藜芦醇(RES)对脂多糖(LPS)诱导的人牙周膜细胞(hPDLCs)损伤的保护作用.方法:体外培养并鉴定hPDLCs,将培养的hPDLCs随机分为5组:对照组、LPS(10 μg/ml)+RES(0、30、60、90tμmol/L)组,MTT法检测各组细胞增殖能力,ELISA检测各组细胞分泌TNF-α/IL-6水平,PCR和Western blot检测各组细胞TLR4/NF-κB mRNA和蛋白表达.结果:分离培养的hPDLCs抗波丝蛋白表达阳性,抗角蛋白表达阴性.与对照组比,LPS处理后细胞增殖能力明显降低,细胞分泌TNF-α/IL-6水平和TLR4/NF-κB mRNA和蛋白表达明显增加;30～90 μmol/L白藜芦醇预处理后,细胞增殖能力增加(P＜0.05),细胞分泌TNF-α/IL-6水平、TLR4/NF-κB mRNA以及蛋白表达则下调(P＜0.05),均呈现一定的浓度依赖性.结论:白藜芦醇可抑制TLR4/NF-κB活化并减轻LPS诱导的牙周膜细胞损伤.     

口腔种植修复在牙列缺失患者中的应用效果及对龈沟液中TNF-α、IL-6、IL-8的影响

目的:探讨口腔种植修复在牙列缺失患者中的应用效果及对龈沟液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6、8(IL-6、IL-8)的影响.方法:选择2014年10月-2016年10月于我院就诊的94例牙列缺失患者,按治疗方式分组,各47例,对照组采用常规修复,实验组采用口腔种植修复,比较2组的临床疗效,TNF-α、IL-6、IL-8,牙龈状态、牙功能,以及并发症发生情况.采用SPSS8.0软件包对数据进行统计学处理.结果:实验组总有效率显著高于对照组(95.74％:80.85％,P＜0.05).实验组TNF-α、IL-6、IL-8[(3.55±0.42)μg/L、(25.90±3.24)μg/L、(69.34±8.65) μg/L]显著低于对照组[(4.69±0.58)μg/L、(41.37±5.19)μg/L、(108.72±13.56)μg/L] (P＜0.05).实验组牙龈状态、牙功能均优于对照组,且并发症率显著少于对照组(P＜0.05).结论:口腔种植修复在牙列缺失患者中的应用效果肯定,可抑制龈沟液中TNF-α、IL-6、IL-8的表达,减轻局部炎症反应,改善牙的功能.     

DHA对人牙龈成纤维细胞生物学活性及炎症因子表达的作用

目的 探索二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）对人牙龈成纤维细胞（human gingival fibroblasts,HGFs）生物学活性及炎症因子表达的作用。方法 分别采用活死细胞染色法、荧光染色法、流式细胞术观察DHA对细胞活性、细胞形态、细胞周期的影响;DHA预处理HGFs后,利用牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis）脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）或热灭活P.gingivalis刺激细胞,定量PCR和ELISA观察白介素-6（interleukin-6,IL-6）、IL-8、IL-1β基因和蛋白表达的变化;通过定量PCR和Western blot检测DHA对血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）基因和蛋白表达的作用。结果 200 μmol/L DHA可降低HGFs的细胞活性,但100 μmol/L DHA不影响细胞活性及形态,对细胞周期也无明显影响（P＞0.05）;DHA可抑制P.gingivalis LPS或热灭活P.gingivalis诱导HGFs表达的IL-6、IL-8、IL-1β mRNA以及IL-6、IL-8蛋白（P＜0.05）,并可显著上调HGFs表达的HO-1 mRNA及蛋白（P＜0.05）。结论 DHA可显著抑制HGFs的炎症因子表达,并且不影响其生物学活性,其抗炎作用可能与HO-1上调相关。     

转化生长因子β3对脂多糖诱导的成骨细胞中IL-6表达的影响

目的:探讨转化生长因子β3 (transforming growth factor β3,TGF-β3)对成骨细胞内炎性细胞因子IL-6表达的影响,及其发挥抗炎作用的机制.方法:20 μg/mL牙髓卟啉单胞菌脂多糖(lipopolysaccharide of Porphyromonas endodontalis,Pe-LPS)刺激人成骨肉瘤细胞系MG63,构建成骨细胞炎症模型.取不同浓度(5～20 ng/mL)的人重组蛋白生长因子TGF-β3和TGF-β1,分别与20 μg/mL P.e-LPS共同作用于MG63细胞24 h后,利用实时荧光定量PCR检测细胞内IL-6 mRNA的表达,ELISA法检测培养液上清中IL-6的表达水平.以10 ng/mL TGF-β3预处理细胞30 ain后,再与20 μg/mL P.e-LPS共同作用20 min,Western印迹法检测细胞内ERK1/2蛋白磷酸化的表达.采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:实时荧光定量PCR结果显示,单独20 μg/mL P.e-LPS作用下,MG63细胞内IL-6的表达显著增高(P＜0.01);TGF-β1在低浓度条件下(5～10 ng/mL)对IL-6的表达无显著作用,仅在20 ng/mL时可显著抑制IL-6的表达(P＜0.05).不同浓度的TGF-β3与Re-LPS共同作用均可显著抑制IL-6的表达(P＜0.01).ELISA结果显示,10～20 ng/mL TGF-β3可在蛋白水平上对IL-6有显著抑制作用(P＜0.05).单独P.e-LPS作用时,可使MG63细胞内ERK1/2蛋白的磷酸化水平升高(P＜0.01);而当TGF-β3与P.e-LPS共同作用时,ERK1/2的磷酸化被抑制(P＜0.05).结论:相同浓度条件下,TGF-β3比TGF-β1对成骨细胞炎症的抑制作用更为显著,ERK1/2信号机制参与了TGF-β3的抗炎过程.     

脱蛋白牛骨基质对骨膜细胞影响巨噬细胞M1表型的调控

目的:探讨脱蛋白牛骨基质骨替代材料与炎症环境中骨膜细胞的条件培养液对巨噬细胞M1表型的影响。方法:取P3代小鼠颅骨骨膜细胞,10 ng/mL LPS刺激24 h,分别换成常规培养基和脱蛋白牛骨基质(Bio-Oss骨粉)浸提液培养24 h,取上清记为A液、B液。体外培养小鼠RAW264.7细胞,100 ng/mL LPS诱导成为M1型巨噬细胞,分别加入条件培养液A液(对照组)和B液(实验组)。培养24 h后CCK-8检测细胞增殖活性;qRT-PCR分析M1型表型基因诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)。免疫荧光检测iNOS的表达。结果:CCK-8结果显示,实验组M1巨噬细胞增殖活性提高。与对照组相比,实验组iNOS、TNF-α、IL-1β的mRNA表达均下调(P<0.05);免疫荧光结果显示,实验组的iNOS表达下调。结论:脱蛋白牛骨基质可抑制骨膜细胞间接作用下的巨噬细胞M1表型基因的表达。     

Effect of iRoot SP and mineral trioxide aggregate (MTA) on the viability and polarization of macrophages

ObjectiveThis study was performed to investigate the effect of iRoot SP and mineral trioxide aggregate (MTA) on the viability and polarization of macrophages.MethodsThe effect of iRoot SP and MTA on the viability of RAW 264.7 macrophages was tested using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay after 1 and 2 days of culture. The gene expression levels of interleukin 1β (IL-1β), tumor necrosis factor α (TNF-α), interleukin 10 (IL-10), interleukin 12p40 (IL-12p40) were measured by quantitative real time polymerase chain reaction (qRT-PCR) after stimulation of the RAW 264.7 macrophages with iRoot SP and MTA. The expression levels of CD11c and CD206 in RAW 264.7 macrophages were examined by immunofluorescence and flow cytometry after stimulation with iRoot SP and MTA. The data were analyzed by one-way analysis of variance and the Tukey test.ResultsBoth iRoot SP and MTA were non-toxic to the RAW 264.7 macrophages. The use of iRoot SP and MTA increased the expression of IL-1β, TNF-α, IL-10, IL-12p40 on the first day of culture and could promote macrophage M1 and M2 polarization.ConclusionsMTA and iRoot SP have good biocompatibility with macrophages, and they induced both M1 and M2 polarization of the RAW 264.7 macrophages.     

核因子κB受体活化因子配体和肿瘤坏死因子α经炎性牙周膜干细胞外泌体促进破骨细胞分化

目的　慢性牙周炎表现的病理性骨吸收非常常见，牙周膜干细胞（PDLSCs）的外泌体（Exo）对骨吸收的作用和影响尚不明确，本研究分析了该Exo蛋白组分对破骨细胞分化的影响。方法　分别从正畸前拔牙患者和慢性牙周炎患者的牙周膜组织中提取PDLSCs，通过流式细胞术检测表面标记物；通过差速离心分别提取2种细胞的Exo，即Exo-WT和Exo-CP，并通过Western blot、透射电子显微镜（TEM）、蛋白浓度检测、纳米粒径追踪检测Exo特征；通过蛋白质谱检测2种Exo的蛋白组分；通过酶联免疫吸附（ELISA）验证了差异表达蛋白肿瘤坏死因子α（TNF-α）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、白细胞介素（IL）-1α、转化生长因子β（TGF-β）、骨形态发生蛋白2（BMP-2）表达水平；将10、100、1 000 μg·mL^-1的Exo-CP或Exo-WT加入RAW264.7培养基中并于5 d时通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）、Western blot、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测破骨分化相关指标表达情况；采用SPSS 24.0软件对实验数据进行统计学分析。结果　Exo-CP富集的差异表达蛋白主要与破骨细胞分化的TNF信号通路、核转录因子κB（NF-κB）信号通路相关；ELISA实验证实了Exo-CP中高表达TNF-α、RANKL、IL-1α，低表达TGF-β1、BMP-2（P<0.05）；Exo-CP作用于RAW264.7，显著提高了细胞的破骨分化相关基因及蛋白的表达水平，TRAP染色可见分化的破骨细胞，且呈现浓度依赖性，100、1 000 μg·mL^-1浓度Exo-CP对破骨细胞分化的促进作用显著高于10 μg·mL^-1浓度组（P<0.05）。结论　慢性牙周炎的病理性骨吸收可能由炎性PDLSCs所分泌的Exo通过促进破骨细胞分化引起，Exo中主要的作用蛋白可能为RANKL和TNF-α，本研究为慢性牙周炎骨吸收的发病机制提供了新视角。