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相似文献
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1.
目的采用电化学法在粗化钛片表面制备纳米HA(Nano-HA)涂层并进行生物学评价。方法钛片表面粗化,采用电化学法在粗化钛片表面沉积Nano-HA涂层。通过场发射扫描电子显微镜(FSEM)、傅立叶红外光谱(FTIR)和X射线衍射仪(XRD)观察涂层晶体形貌、化学结构及组成;通过大鼠骨髓基质干(BMSCs)细胞培养验证该涂层的生物活性。结果 FSEM证实Nano-HA沉积在粗化钛片表面,直径约70~80nm,棒状晶粒截面为规则的六变形。FTIR和XRD分析表明该涂层为HA。与对照组相比,Nano-HA能够明显促进碱性磷酸梅(ALP)和骨钙素(OC)的表达。结论采用电化学法可在粗化纯钛表面制备Nano-HA涂层,并可促进BMSCs成骨分化。  相似文献   

2.
目的尝试在纯钛钛片表面构建胶原/透明质酸聚电解质复合膜涂层,并评价其生物相容性。方法纯钛钛片表面经打磨抛光及氧化性混酸溶液处理,得到表面富含钛羟基的基底面(设为对照组),在此基础上接着通过层层自组装技术将I型胶原和透明质酸引入到钛片表面(设为实验组)。采用扫描电镜(SEM)、X射线光电子能谱(XPS)和接触角实验对两组钛片的表面进行表征。最后,在两组钛片表面培养成骨前体细胞,检测其早期粘附、增殖及分化的能力。结果 SEM结果显示,对照组钛片的表面非常平整,高倍镜下发现其表面有很多直径为数十纳米的颗粒状结构。而实验组钛片的表面也很光滑,高倍镜下也可见很多纳米颗粒,但其直径较对照组为小。XPS分析发现实验组钛片表面元素成分氮的含量随着组装层数的增加而不断升高。接触角实验显示实验组钛片表面的可湿性随着钛片表面聚电解质组装层数的变化而不断变化,实验组钛片表面的接触角较对照组小。实验组钛片明显促进了成骨细胞的早期粘附(P<0.05),而且培养在实验组钛片表面的细胞增殖得更快(P<0.05)。同时,在实验组钛片表面生长的成骨细胞分化能力更强。结论 I型胶原和透明质酸能够被成功的组装到纯钛钛片表面,该涂层结构有利于成骨前体细胞的生长,显示了良好的生物相容性。  相似文献   

3.
目的:探讨固定在金属钛表面类骨磷灰石上的胶原蛋白(collagen,Col)和20α羟胆固醇(20α-hydroxycholesterol,HC)复合涂层对大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨表达的影响.方法:通过CCK-8法评估BMSCs在固定了生物活性分子的钛表面上不同时间点的增殖能力:通过检测碱性磷酸酶活性(ALP activity)评估BMSCs在固定了生物活性分子的钛表面上不同时间点的早期分化能力;通过Westem免疫印迹法检测BMSCs在不同时间点骨钙素(osteocalcin,OC)和Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ,Col Ⅰ)的表达.采用SPSS 17.0软件包对数据进行t检验.结果:CCK-8检测结果显示,共固定Col和HC的复合涂层提高了BMSCs的增殖能力,单一固定在具有类骨磷灰石钛表面上的HC对BMSCs的增殖能力无显著影响;检测ALP活性发现,共固定Col和HC的复合涂层显著提升了BMSCs的早期成骨分化能力,在单一固定HC涂层上,BMSCs的ALP活性比在单一固定Col的涂层高;Western免疫印迹结果显示,共固定Col和HC的复合涂层增加了BMSCs的OC和Col Ⅰ表达,显著提高了BMSCs的晚期成骨能力;此外,在单一固定Col的涂层上,骨钙素和Ⅰ型胶原蛋白的表达要高于在单一固定HC的涂层.结论:共固定的Col和HC复合涂层显示出良好的生物相容性,两者显著促进BMSCs的增殖能力和成骨分化能力.  相似文献   

4.
氮硅锆-羟磷灰石涂层应用于纯钛种植体的实验研究   总被引:3,自引:1,他引:2       下载免费PDF全文
目的对比研究采用不同涂层的纯钛种植体表面骨结合力及耐腐蚀性。方法采用等离子喷涂技术在纯钛表面制备氮硅锆-羟磷灰石(ZrSiN-HA)复合涂层并植入实验动物下颌骨。利用扫描电镜(SEM)观察分析复合涂层的表面形貌,电子万能材料实验机对比检测ZrSiN-HA组、氮硅锆(ZrSiN)组、羟磷灰石(HA)组与纯钛种植体组涂层的骨结合力并观测各组断裂区域的形貌,电化学腐蚀测试系统对比检测4组涂层的耐腐蚀性。结果种植体表面喷涂ZrSiN-HA后较单纯喷涂HA的表面更加致密,结晶化明显;ZrSiN-HA涂层与其他涂层比较骨结合力最高,耐腐蚀性能最强。结论ZrSiN-HA涂层的应用有利于种植体的长期固位,对齿科修复体具有一定的应用价值。  相似文献   

5.
目的 研究冷常压等离子体处理后纯钛表面性能变化及对成骨细胞增殖和迁移的影响。方法 本研究于2017年6月至2018年3月在中国医科大学附属口腔医院中心实验室完成。以冷常压等离子体处理后的纯钛片为实验组,未处理的纯钛片作为对照组。(1)通过X射线光电子能谱分析两组钛片表面的化学元素和价键状态,并应用静态接触角测量仪测量两组钛片表面的接触角。(2)通过MTT细胞增殖检测和划痕实验比较两组钛片表面接种的MC3T3-E1成骨细胞增殖和迁移速度。采用SPSS 17.0软件对数据进行统计学分析。结果 (1)实验组钛片表面TiO2和Ti-OH的相对含量百分比较对照组增加;实验组钛片表面的接触角为10.55° ± 0.94°,对照组钛片表面的接触角为46.68° ± 2.77°,两组差异有统计学意义(P < 0.001),且实验组钛片表面的接触角随着在空气中放置时间的延长而迅速增大,2 h后趋于稳定。(2)实验组钛片表面的MC3T3-E1成骨细胞增殖和迁移速度均明显较对照组快(P < 0.05)。结论 冷常压等离子体处理纯钛片表面后能增加其表面的亲水性,促进成骨细胞的增殖和迁移,可加快种植体植入后与骨组织的整合并促进骨组织的再生,具有重要的临床意义。但冷常压等离子体处理后的纯钛片表面亲水性会在空气中迅速降低,因此须将处理后的种植体立即植入种植窝洞中。  相似文献   

6.
《口腔医学》2015,(10):801-805
目的研究聚六亚甲基胍对体外培养大鼠骨髓基质干细胞增殖和成骨性分化的影响,探索Ti O2纳米管负载聚六亚甲基胍对种植体钛表面是否具有促成骨分化能力。方法将1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5kg/L浓度的聚六亚甲基胍盐酸盐溶液分别作用于大鼠骨髓基质干细胞,采用MTT法分析细胞增殖情况。在不加成骨诱导液培养条件下比较聚六亚甲基胍作用组和不加药对照组碱性磷酸酶染色强弱,采用实时荧光定量PCR分析成骨性分化标志基因表达差异。将聚六亚甲基胍负载到Ti O2纳米管修饰种植体钛表面后和单纯Ti O2纳米管修饰种植体钛表面组、酸洗微米级粗糙种植体钛表面组实时荧光定量PCR分析成骨性分化标志基因表达差异。结果聚六亚甲基胍无明显促进细胞增殖能力,1×10-6kg/L浓度下能够促进大鼠骨髓基质干细胞的成骨性分化,将聚六亚甲基胍以1×10-5kg/L的浓度负载到Ti O2纳米管后,显著提高了种植体钛表面的促成骨分化能力。结论 Ti O2纳米管负载聚六亚甲基胍能够促进种植体钛表面成骨性分化,具有潜在的促进骨结合作用。  相似文献   

7.
目的 :探究钛表面纳米形貌介导的巨噬细胞极化对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的影响。方法:选用机械加工的纯钛片作为对照组(control-Ti组);将180℃下水热反应12 h后的纯钛片作为纳米组(nm-Ti组)。通过扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)和水接触角测试其表面性能,细胞学实验检测其生物相容性,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测RAW264.7巨噬细胞极化的相关基因和BMSCs成骨相关基因的表达,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测巨噬细胞炎症相关因子的分泌水平。结果:经过水热处理后,钛片表面形成纳米形貌,且具有良好的亲水性。相比于control-Ti组,nm-Ti组表面细胞增殖和黏附更为活跃。ELISA结果显示,随时间增加,nm-Ti组分泌白细胞介素-10(interleukin-10,I...  相似文献   

8.
何萍  吴鸣蕾 《口腔医学》2016,36(1):37-39
摘要:目的:体外实验研究瘦素对大鼠骨髓间充质干细胞在纯钛表面增殖、分化的影响。 方法:将体外培养的SD大鼠骨髓间充质干细胞接种于钛片表面,实验组加入50nmol/L瘦素,比较实验组与对照组ALP、OC的含量,以及MTT法检测瘦素对细胞增殖的影响。 结果:实验组与对照组之间ALP、OC情况均有统计学差异(P<0.05),对细胞增殖无明显促进作用。 结论:瘦素能够促进钛片表面骨髓间充质干细胞的分化。  相似文献   

9.
目的:研究纳米化纯钛表面对人成骨样细胞黏附、增殖及分化等功能的影响。方法:应用塑性变形技术在纯钛表面制备纳米化结构,根据塑性变形处理时间不同分为3组,即30min组(n=6)、60min组(n=6)和90min组(n=6),另设未处理纯钛为对照组(n=6)。扫描电镜及激光共聚焦显微镜观察4组钛表面的超微结构;以成骨样细胞系(Saos-2)细胞为对象,应用激光共聚焦显微镜和荧光显微镜进行细胞黏附、细胞骨架蛋白和形态的检测,四唑溴盐(MTT)法检测细胞增殖状况,RT-PCR法检测细胞骨分化相关基因BMP-4的表达,采用SAS6.0软件包对数据进行单因素方差分析。结果:塑性变形60min和90min能在纯钛表面获得良好的表面纳米化结构;纳米化纯钛表面结构显著促进细胞黏附(P〈0.05),60min组材料的细胞铺展优于其他组,60min组和90min组细胞的BMP-4表达显著高于对照组(P〈0.05)。结论:医用纯钛表面塑性变形产生的纳米结构,能明显提高成骨样细胞在其表面的黏附、铺展等生物学行为的发挥。  相似文献   

10.
目的:研究釉基质蛋(EMPs)对碱热处理纯钛表面磷灰石涂层生成的影响。方法:采用乙酸法提取猪EMPs。纯钛片碱热处理后,在含不同浓度EMPs(0、50、100、150、200μg/mL)的模拟体液中浸泡1周、2周后取出。扫描电镜观察表面形貌,x射线衍射分析晶相结构。结果:各组试件表面均有类骨磷灰石(CHA)生成。EMPs浓度为50、100μg/mL时,钙磷涂层的沉积受到抑制;EMPs浓度为150、200μg/mL时,钙磷涂层的沉积增强,且涂层粗糙度增加,有直径约300~600nm孔隙生成,晶体呈(002)方向择优取向生长。结论:EMPs对碱热处理纯钛表面磷灰石生成的影响与浓度密切相关,较高浓度EMPs可促进钛表面生成CHA,并改变磷灰石晶体的形态与生长方向。  相似文献   

11.
目的:通过修饰聚多巴胺并结合仿生矿化法在钛合金表面制备掺锶羟基磷灰石涂层,体外评价该复合材料对大鼠骨髓间充质干细胞生物学特性的调控作用.方法:采用两步法制备掺锶羟基磷灰石涂层.采用扫描电镜、X射线光电子能谱、X射线衍射图谱、拉曼光谱和接触角测量等材料表征证实钛合金表面聚多巴胺仿生掺锶羟基磷灰石涂层的形成.将大鼠骨髓间充...  相似文献   

12.
目的: 探讨三维打印含铜钛合金的体外生物相容性和对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响。方法: 以Ti-6Al-4V-5Cu合金粉末为原料,通过选择性激光熔化(selective laser melting, SLM)技术制备三维打印含铜钛合金(3D Ti-5Cu);将BMSCs与3D Ti-5Cu合金共同培养,观察其对细胞活性、黏附、增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性及成骨分化相关基因表达的影响,以医用钛合金(Ti-6Al-4V)作为对照组。采用 GraphPad Prism 9.3.1软件包对数据进行统计学分析。结果: 成功制备3D Ti-5Cu合金,该新型合金无细胞毒性,与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。3D Ti-5Cu合金能促进BMSCs的早期黏附、增殖,并显著提高ALP活性和Runx2AlpBmp2OpnCol1a1等成骨分化基因的表达水平(P<0.05)。结论: 3D Ti-5Cu合金具备出色的生物相容性,能促进BMSCs的成骨分化,有利于改善钛合金的生物惰性,为实现钛合金的生物功能化提供了理论依据。  相似文献   

13.
目的    因各种原因导致的牙槽骨甚至颌骨的缺损、缺失在临床上十分常见,对患者口腔功能和美观均可造成严重影响。磷酸钙骨水泥(CPC)是公认的具有良好生物相容性的可降解骨移植材料,与Ⅰ型胶原混合后可塑性增强,孔隙率增加且弹性模量更接近于人体骨。本研究通过人工合成神经递质P物质(SP)结合于CPC胶原支架材料,体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),观察材料表面形貌及对BMSCs生物学行为的影响。方法     2015年9月至2016年1月在第四军医大学口腔医院选取4周龄雌性大鼠20只,进行BMSCs体外培养。研究材料分为3组,A组:纯CPC组;B组:CPC+Ⅰ型胶原组;C组:CPC+Ⅰ型胶原+SP组。扫描电镜(SEM)观察样本表面形貌及BMSCs形态、黏附与增殖。通过测定细胞增殖对数、成骨及成脂诱导对BMSCs进行鉴定,荧光染色定量分析BMSCs的黏附与增殖,成骨诱导液培养14 d后经茜素红染色,并通过碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测细胞ALP活性。结果    原代BMSCs生长旺盛,生长曲线呈典型“S”形。成骨和成脂诱导液培养3周,行茜素红和油红O染色,镜下可见钙化结节及脂滴形成,BMSCs多向分化能力良好。SEM下B、C 组可见胶原与CPC联结紧密,胶原表面呈条索样间隙,表面BMSCs细胞与胶原附着数量多,突触长并彼此相联,细胞伸展良好。荧光显微镜下观察,C组表面活性细胞比例高于A、B 组。成骨诱导14 d后茜素红染色,肉眼观C组颜色较深,ALP检测C组BMSCs的ALP表达高于A、B 2组(P<0.05)。结论    本研究构建的SP加载的CPC胶原复合材料支架对SD大鼠BMSCs的黏附、增殖和成骨分化均具有促进作用,为今后临床牙槽外科修复重建工作提供了新的思路方法和研究基础。  相似文献   

14.
目的:通过测定人牙周膜干细胞(hPDLSCs)在3种不同金属基底提取液培养过程中的增殖和骨相分化能力,比较3种金属基底冠对牙周组织的影响。方法:在人牙周膜干细胞体外培养系统中分别加入镍铬合金、钴铬合金、纯钛浸泡后提取液,常规进行培养及成骨分化诱导,分别测定并比较各组干细胞增殖能力及成骨分化能力。结果:纯钛提取液组人牙周膜干细胞增殖能力和成骨分化能力明显高于镍铬合金组和钴铬合金组(P〈O.05),差异有统计学意义,与空白对照组相比无明显差异。镍铬合金组与钴铬合金组相比无明显差别,差异无统计学意义。结论:镍铬合金和钴铬合金非贵金属组可降低人牙周膜干细胞增殖和成骨分化能力,而纯钛材料对其影响不大,提示纯钛合金的良好生物相容性。  相似文献   

15.
目的:探讨CKIP-1基因对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖和分化能力的调控。方法:选择CKIP-1基因敲除型小鼠(KO)和野生型C57小鼠(WT),采用全骨髓贴壁法培养BMSCs,取第3代BMSCs,分为KO组和WT组,分别采用成骨及成脂诱导液对细胞进行诱导培养,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测目的细胞表面标记分子,用ALP染色、茜素红染色、油红O染色分别对细胞成骨及成脂能力做定量分析。结果:2种细胞增殖和干细胞分子表达相似;成骨诱导后ALP染色显示,KO组的细胞染色的阳性率要大于WT组。茜素红染色观察显示KO组的矿化结节要多于WT组;油红O染色显示KO组细胞的脂质沉淀量大于WT组。结论:CKIP-1基因缺失可以使BMSCs成骨及成脂分化能力增强,对其增殖影响不明显。  相似文献   

16.
目的:观察低强度脉冲超声(LIPUS)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在钛片表面成骨分化的影响.方法:将体外培养的BMSCs分别接种于光滑钛表面和大颗粒喷砂酸蚀(SLA)钛表面,进行矿化诱导并实施超声干预和假刺激.于矿化诱导后3、7d进行碱性磷酸酶(ALP)定量检测,14 d进行ALP染色观察;矿化诱导21 d后行茜素红染色;于矿化诱导14、21 d检测成骨相关基因及蛋白表达.结果:矿化诱导后3、7d超声组ALP活性较对照组高(P<0.05),14 d超声组与对照组相比钛片表面ALP染色明显深染;茜素红染色显示,21 d后超声组的染色更明显且形成更多的矿化结节;超声组的成骨相关蛋白成骨转录因子2、骨形成蛋白、骨桥蛋白表达增高;RT-PCR检测到成骨相关基因、ALP、成骨转录因子2、骨形成蛋白、骨桥蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原蛋白均有不同程度表达增高(P<0.05).结论:LIPUS可以促进光滑及SLA钛表面BMSCs的成骨分化.  相似文献   

17.
??Objective    The alveolar bone defect and loss caused by various reasons are very common in clinic??which can cause serious effects on the function and appearance of the oral cavity. Calcium phosphate cement??CPC??is recognized as a biodegradable bone graft material with good biocompatibility??and it is more similar to the human bone with the increase of the plasticity and porosity of??collagen after mixing. In this study??the artificial neural transmitter sp??substance P??was integrated in collagen CPC scaffold and SD rat bone marrow mesenchymal stem cells ??BMSCs?? were cultured in vitro to observe the surface morphology and the effects on biological behavior of BMSCs. Methods    From September 2015 to January 2016??20 female rats of 4 weeks old were selected from School of Stomatology?? the Fourth Military Medical University to culture BMSCs in vitro. Materials were divided into 3 groups??group A??pure CPC group??group B??CPC + type??collagen group??group C??CPC + type??collagen+P substance group. In the 4-week old female rats??BMSCs were cultured in vitro. Scanning electron microscopy??SEM?? was performed to observe the morphology??adhesion and proliferation of the sample surface and BMSCs. Through the determination of the logarithm of cell proliferation??osteogenic and adipogenic differentiation of BMSCs were identified??fluorescence staining was used to make quantitative analysis of BMSCs adhesion and proliferation??osteogenic induction medium was used for culture for 14 days and stained by alizarin red??and the ALP kit was used for the detection of ALP activity. Results    The growth of the primary BMSCs was strong??and the growth curve was in typical “S” shape. Three weeks after the culture with osteogenic and adipogenic induction medium??alizarin red and oil red O was used for staining??and microscopy showed formation of calcified nodule and lipid droplet. BMSCs differentiation capacity was good. Under SEM group B and C showed that the collagen and CPC were closely connected?? and there was a kind of gap on the surface. On the surface there were many BMSCs and collagen attached??the synapse was long and connected with each other??and the cells extended well. Under the fluorescence microscope??the ratio of living cells in group C was higher than group A and B. After osteogenic induction of 14 days??alizarin red was used for staining??and group C was darker with naked eyes. With ALP detection??the expression of ALP of BMSCs in group C was higher than that of group A and B ??P??0.05??. Conclusion    In this study??we constructed the substance P loading of CPC collagen composite scaffold played an important role in adhesion??proliferation and bone differentiation of SD rats BMSCs??provided a new method and research foundation for future clinical alveolar surgical repair and reconstruction work.  相似文献   

18.
目的: 探讨柚皮素对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响,SDF-1α/CXCR4信号轴是否参与介导柚皮素促进BMSCs成骨分化。方法: 分离、培养及鉴定大鼠BMSCs,CCK8法检测不同浓度柚皮素对BMSCs增殖的影响,检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性;RT-qPCR法检测各组ALP、骨钙素(osteocalcin,OCN)、趋化因子受体4(CXCL receptor 4,CXCR4)和基质细胞衍生因子1α(stromal cell derived factor-1,SDF-1α)的表达,ELISA法检测各组CXCR4和SDF-1α蛋白的表达。采用SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果: 细胞鉴定结果表明,培养细胞为高纯度的BMSCs。第1、3天,柚皮素对BMSCs增殖无显著影响(P>0.05);第5天时,50 μg/mL柚皮素可促进BMSCs增殖;第7天时,不同浓度柚皮素均促进BMSCs增殖(P<0.05);同时,ALP活性随时间推移逐渐增强。RT-qPCR结果表明,柚皮素组和成骨诱导液组中相关基因表达均较培养基组明显增加,而AMD3100组中各基因表达均受到显著抑制(P<0.05)。ELISA检测结果显示,各组CXCR4和SDF-1α蛋白表达随诱导时间增加均逐渐上调,且两者均在100 μg/mL柚皮素组表达最高。结论: 柚皮素可促进BMSCs增殖和成骨向分化,SDF-1α/CXCR4信号轴参与柚皮素对BMSCs的成骨分化,主要在BMSCs成骨分化早期阶段。  相似文献   

19.
目的以表面经喷砂和酸蚀(SLA)及羟基磷灰石(HA)涂层双重处理的TA2纯钛种植体(HA/SLA-TA2)为支架材料,探讨其对富血小板血浆(PRP)体外诱导骨髓基质细胞(BMSCs)向成骨细胞分化能力的影响。方法PRP分别作用于常规培养的BMSCs(对照组)和与HA/SLA-TA2联合培养的BMSCs(实验组),通过扫描电镜观察BMSCs在HA/SLA-TA2表面的生长情况,并对两组细胞的增殖指数、碱性磷酸酶活性、骨钙素含量进行比较。结果实验组细胞生长状态良好,具有成骨细胞特点,其细胞增殖指数于联合培养第5天起明显高于对照组(P<0.05),碱性磷酸酶活性以及骨钙素含量分别于联合培养第9、13天起明显高于对照组(P<0.01)。结论HA/SLA-TA2是种植体表面骨组织工程较理想的支架材料,BMSCs与HA/SLA-TA2联合培养后,可增强PRP诱导其向成骨细胞分化的能力。  相似文献   

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