用生物素标记的DNA探针检测尖锐湿疣和宫颈癌中的人类乳头瘤病毒DNA序列

用生物素标记的HPV6/11DNA和HPV16/18DNA探针,对尖锐湿疣和宫颈癌标本进行原位杂交。结果大多数尖锐湿疣含HPV6/11DNA,所以尖锐湿疣的主要致病因子是H2V6/11.HPV6/11DNA阳性细胞主要位于上皮的表层,少数位于深层。个别合并HPV16/18感染,或仅为HPV16/18所感染的病人恶变的可能性大。大多数宫颈癌病人含HPV16/18DNA,提示宫颈癌的主要致病因子为HPV16/18。一些病人合并HPV6/11感染。在未找见HPV16/18DNA的病例中,可能存在其它致癌因子。     

黑龙江省尖锐湿疣组织HPV感染的型别分析

目的 分析黑龙江省尖锐湿疣组织中感染的人乳头瘤病毒(HPV)基因型分布情况,比较保守引物和序列特异引物PCR扩增方法.方法 提取26例尖锐湿疣组织标本中DNA,用HPV L1区通用引物及HPV 6b、HPV11、HPV16、HPV18型L1区特异引物进行PCR扩增,分析尖锐湿疣组织中感染的HPV型别分布并比较两种扩增方法的结果.结果 26例标本中,HPV 6b和11型感染例数分别为4和11例,各占15.4%和65.4%;HPV 16型感染2例,占总例数7.7%;有2例合并HPV6b/11型混合感染,占7.7%;1例合并HPV11/16/18型的混合感染,占3.8%.用通用引物扩增后26例标本中1例为阴性. 结论黑龙江省地区尖锐湿疣组织HPV DNA检出率为100%,以低危型别11和6b型为主,偶见高危型别16、18型感染.鉴定HPV感染保守引物与型别特异性引物PCR方法相比,前者可导致少量假阴性产生.     

用~(32)P标记的人乳头瘤病毒DNA检测宫颈病变组织DNA中病毒序列

使用Southern blot杂交方法对33例宫颈病变标本进行了检测,发现在26例宫颈癌中,6例存在HPV16DNA同源序列,占23％。HPV18同源序列占7.6％(2/26)。HPVX1同源序列为11.5％(3/26)。HPV16相关序列为27％(7/26)。而在4例慢性宫颈炎中仅有1例含HPV16相关序列,1例尖锐湿疣中含HPV16相关序列。     

用32P标记的人乳头瘤病毒DNA检测宫颈病变组织DNA中病毒序列

使用Southern blot杂交方法对33例宫颈病变标本进行了检测,发现在26例宫颈癌中,6例存在HPV16DNA同源序列,占23%。HPV18同源序列占7.6%(2/26)。HPVX1同源序列为11.5%(3/26)。HPV16相关序列为27%(7/26)。而在4例慢性宫颈炎中仅有1例含HPV16相关序列,1例尖锐湿疣中含HPV16相关序列。     

人乳头瘤病毒结构蛋白及其疫苗的研究进展

由人乳头瘤病毒(Human papillomaviruses，HPV)感染引起的疾病在全球有很高的发病率。已发现HPV有100多种型别，根据HPV DNA的检测和流行病学资料，分为高危型别和低危型别，高危型别主要为HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV45和HPV56等型，低危型别主要为：HPV6、HPV11型。低危型别HPV6、HPV11感染主要引起尖锐湿疣，而高危型别HPV16、HPV18感染与官颈癌发病密切相关。尖锐湿疣在我国发病率呈逐年上升，有些地区发病人数占全部性传播疾病(STDs)人数的20％左右，跃居STDs发病的第2位；宫颈癌为女性生殖道常见的恶性肿瘤，严重威胁我国育龄妇女的生命健康，目前，仍缺乏有效方法来预防和治疗HPV感染及其相关肿瘤如尖锐湿疣及宫颈癌。     

HPV感染在尖锐湿疣及外阴和宫颈上皮内瘤变病变中的分布

目的探讨HPV感染在尖锐湿疣和上皮内瘤变(包括外阴和宫颈)病变中的分布情况。方法通过HPV基因分型检测对330例尖锐湿疣和250例上皮内瘤变病变进行了HPV6、11、42等低危型及16、18、31、33、39、45、52、56、58等高危型DNA检测。结果 330例的尖锐湿疣组织中:274例为HPV6/11型(83.0%),46例为HPV16/18型(13.9%);250例上皮内瘤变病变组织中,8例为HPV6/11型(3.2%),167例为HPV16/18型(66.8%)。结论尖锐湿疣感染的HPV类型以HPV6、11为主,上皮内瘤变病变HPV类型以HPV16、18为主。     

女性外阴尖锐湿疣及湿疣样病变组织中人类乳头瘤病毒 DNA 的检测

用生物素和~(32)P-人类乳头瘤病毒 HPV11、HPV16和 HPV18型 DNA 探针,以斑点和 SouthernBlot 杂交方法检测了49例北京地区女性外阴尖锐湿疣和湿疣样病变组织中 HPV DNA。在24例尖锐湿疣组织中,HPV DNA 阳性者为18例(75%);其中 HPV11 DNA 阳性者16例,占阳性例数的88.9%;HPV16 DNA 阳性者2例,占阳性例数的11.1%;没有发现 HPV18 DNA 阳性者.25例湿疣样病变组织中,8例含有 HPV DNA(32%),全为 HPV11型。本文对湿疣样病变与 HPV 感染的关系,外阴部尖锐湿疣的分型及诊断标准进行了初步探讨。     

FQ—PCR检测尖锐湿疣皮损中HPV—DNA

目的：了解尖锐湿疣（CA）组织中人乳头瘤病毒（HPV）感染的型别及其DNA含量。方法：采用HPV6／11和HPV16／18型荧光定量PCR诊断试剂盒,对临床表现典型的CA组织进行FQ－PCR检测。结果：HPV－DNA阳性检出率95．15％,其中HPV6／11型阳性检出率86．4％。HPV6／11含量在10^5～10^9opies,占92．13％。结论：CA主要为HPV6／11感染,皮损中HPV6／11DNA含量检测可以临床提供一定的参考。     

人乳头瘤病毒DNA载量与尖锐湿疣复发的相关性

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)DNA载量与尖锐湿疣(CA)复发的关系.方法采用实时荧光定量PCR技术,对31例初发性和32例复发性CA患者的疣体组织进行HPV6/11和HPV16/18 DNA的定量检测.结果 63例CA中,62例HPV6/11DNA阳性,阳性率98.4%.初发性CA HPV 6/11DNA载量为1.4×103～6.7×107copies/ml,平均(8.4×106±1.7×107)copies/nl;复发性CA HPV 6/11DNA载量为1.2×104～3.6×108copies/ml,平均(2.9×107±6.7×107)copies/ml.在62例HPV6/11阳性中,有7例HPV16/18 DNA同时阳性,占11.3%,其中初发性CA 2例,复发性CA 5例,初发性CA HPV 16/18 DNA载量为1.9×103～1.6×104copies/ml,平均(8.7×103±9.6×103)copies/ml,复发性CA HPV 16/18 DNA载量为1.4×105～1.7×107copies/ml,平均(5.7×106±7.1×106)copies/ml.复发性CA的HPV6/11和HPV16/18 DNA载量高于初发性CA,差异均具有显著性(P＜0.05).HPV6/11 DNA的载量随着复发次数以及病程的增加而升高,呈正相关,相关系数r分别为0.37和0.30.结论 HPV DNA病毒载量与CA复发之间存在着一定的相关性.     

219例阴道镜拟诊宫颈HPV亚临床感染患者的病理诊断和HPV-DNA检测分析

目的探讨电子阴道镜检查和HPV-DNA检测对宫颈人乳头瘤病毒亚临床感染（SPI）的诊断价值。方法对2000年3月至2008年4月在海南医学院附属医院妇产科门诊经阴道镜检查拟诊宫颈SPI的219例患者行病理检查,同时行HPV6/11、16/18型DNA的检测。结果 219例阴道镜拟诊宫颈SPI患者中,病理确诊为HPV感染209例,阴道镜的诊断符合率为95.4%。HPV-DNA阳性191例,HPV-DNA检测阳性率为87.2%,其中HPV6/11型阳性126例,HPV16/18型阳性62例,混合感染3例。病理诊断为单纯HPV感染患者133例,其中HPV6/11型115例,HPV16/18型18例,而病理诊断为HPV感染合并宫颈上皮内瘤变（CIN）患者58例,其中HPV6/11型11例,HPV16/18型44例,混合感染3例。结论阴道镜检查是一种早期发现宫颈SPI的简便、有效的方法。宫颈单纯HPV感染的主要亚型为HPV6/11型,HPV感染合并CIN的主要亚型为HPV16/18型。     

三种方法诊断尖锐湿疣的对比研究

目的探讨原位分子杂交法诊断尖锐湿疣的敏感性与特异性，并与组织病理及醋白试验相比较。方法应用原位分子杂交法[所用探针为地高辛标记的DNA探针（HPV6／11，HPVl6／18，HPV31／33）]、组织病理及醋白试验分别检测实验组和对照组标本。结果37例标本中，醋白试验34例阳性；组织病理检查37例均阳性；原位分子杂交法的总阳性率为94．6％，HPV6／11阳性31例（阳性率83．7％），HPV16／18阳性2例（阳性率5．4％），1例标本HPV6／11及HPVl6／18均阳性（2．7％），HPV31／33阳性1例（阳性率2．7％），阳性标本可见细胞核着蓝色，阳性反应物主要分布在棘层空泡化细胞的细胞核内。结论原位分子杂交法检测HPV敏感性高，特异性强，能对感染有明确的组织学定位，而且还能进一步鉴定感染的型别，因此是诊断和研究尖锐湿疣的较好和先进方法。     

Detection of human papillomavirus DNA sequences in cervical lesions by in situ hybridization using biotinylated DNA probes.

Ninety-six biopsy specimens were collected for studying the association of specific sequences of HPV DNA with genital warts, precancerous lesions and invasive cervical cancer. Using DNA probes labeled with biotin, 17 of the 22 (77.27%) specimens showing condyloma and 1 of the 14 (7.14%) specimens displaying subclinical papillomavirus infection (SPI) of cervix were found to be positive for HPV 6/11; 4 of 23 (17.39%) specimens of squamous epithelial cervical cancer and 2 of the 23 (8.70%) specimens of cervical intraepithelial neoplasia (CIN) were positive for HPV 16/18. All the 14 specimens of cervicitis were negative for both probes. The HPV 6/11 positive hybridization products were present mainly in the superficial and intermediate epithelium of condyloma and SPI. In invasive cancer, HPV 16/18 were shown more often in cancer cells of infiltrative nests and were focally distributed.

     

人乳头瘤病毒DNA阳性的外阴,宫颈组织病理学表现

目的 探讨外阴、宫颈人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染与局部组织病理学改变的关系,评价组织病理学检查在ＨＰＶ感染诊断中的意义。方法 采用原位杂交和聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法,对１１２例外阴、宫颈病变进行了ＨＰＶ６Ｂ／１１、１６、１８型ＤＮＡ检测,并对ＨＰＶ ＤＮＡ阳性的病变进行组织病理诊断。结果 ＨＰＶ ＤＮＡ阳性者８２例,占７３．２１％,８２例中,组织病理诊断为尖锐湿疣者２２例,其余６０例组织病理学均无     

聚合酶链反应检测尖锐湿疣组织中HPV DNA

为分析尖锐湿疣组织中人乳头瘤病毒感染情况。     

女性尖锐湿疣和假性湿疣的HPV原位杂交检测与病理相关研究

目的 从组织学角度结合ＨＰＶ原位杂交检测探讨尖锐湿疣和假笥湿疣及相关病变的临床病理特点。方法 收集１９６例活检标本,随机抽取典型尖锐湿疣７０例,假性湿疣３０例,相关病变１０例作ＨＰＶ６Ｂ、１原位杂交检测分析,观察ＨＥ组织切片。结果 本组材料中,７０例（１００％）典型尖锐湿疣和３例（１０％）假性湿疣ＨＰＶ表达阳性,相关病变均表达阴性,尖锐湿疣和相关病变ＨＰＶ表达具有显著差异性（Ｐ〈０．００１）。结论     

尖锐湿疣皮损人乳头瘤病毒基因分型的研究

目的探讨外生殖器及子宫颈尖锐湿疣患者皮损脱落细胞或组织中人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)11种基因型别的分布状况及临床意义.方法取子宫颈及生殖器尖锐湿疣疣体脱落细胞或尖锐湿疣组织,经PCR扩增后其产物与11种常见HPV亚型探针进行导流快速反斑点印迹杂交.结果 132例尖锐湿疣患者标本中,经PCR扩增并通过通用探针杂交分析后,有123例标本HPV DNA阳性93%.PCR阳性标本中,112例成功分型.高危型HPV16、18、31、33、52、58和66分别检出42例(31.8%)、22例(16.7%)、9 例(6.8%)、6例(4.5%)、18例(13.6%)、17例(12.9%)和5例(3.8%).低危型HPV6、11、53型分别检出55例(41.7%)、75例(56.8%)和7例(5.3%).危险度待定HPV亚型CP8304检出率为4.5%(6/132).有63.9%患者存在2～5型、高危/低危型HPV交叉感染,二重、三重、四重和五重型别感染检出率分别为31.8%(42/132)、26.5%(35/132)、4.5%(6/132)和1.5%(2/132).结论 HPV感染趋于多重化;HPV 11、6、16型感染仍然是尖锐湿疣发病的主要型别.     

应用PCR技术检测尖锐湿疣患者HPV感染

取尖锐湿疣的３０例患者外阴湿疣标枉和宫颈分泌物及同期非尖锐湿疣患者宫艰苦泌物，用聚合酶链反应技术检测其中ＨＰＶ６．１１ＤＮＡ和ＨＰＶ１６．１８ＤＮＡ。结果表明，尖锐湿疣患者宫颈人乳头瘤病毒检出率显著高于非尖锐湿疣患者，以ＨＰＶ６．１１为主，ＨＰＶ１６．１８在二者之间无差别。提示外阴尖锐湿疣主要由ＨＰＶ６．１１感染引起，应用ＰＣＲ技术检测湿疣组织中ＨＰＶ ＤＮＡ可为痢疾诊断提供客观依据。     

Human papillomavirus DNA and virus-encoded antigens in cervical carcinoma

The present study was undertaken to evaluate the prevalence of HPV in formalin-fixed, paraffin-embedded cervical carcinoma tissues using PCR followed by non-radioactive Southern hybridization with type-specific oligonucleotides for HPV 16 and 18. In addition, the tissue sections were immunohistochemically screened with two monoclonal antibodies, for expression of HPV 16 L1 and HPV 18 E6 proteins. A total of 57 of 60 cervical carcinomas (95.0%) were found with HPV using both techniques. HPV 16 and HPV 18 were present in equal proportions. Results of both DNA hybridization and immunohistochemistry were in agreement for the majority of the cases. HPV 16 and 18 DNA and virus-encoded antigens, L1 and E6 were found highly prevalent in these cervical carcinomas. Due to the high prevalence of HPV with cervical carcinoma in Malaysia, the implementation of routine diagnosis for the virus in cervical biopsies would be clinically useful.     

DNA sequences of human papillomavirus types 11, 16, and 18 in lesions of the uterine cervix in the west of Scotland

Punch biopsy specimens of the cervix were examined both histologically and for the presence of human papillomavirus (HPV) DNA sequences. The presence of HPV DNA sequences was sought with the Southern blot technique using radioactively labelled HPV-6, 11, 16, and 18 DNA probes, both together and separately. Twenty six biopsy specimens were examined. Histological examination showed cervical intraepithelial neoplasia grade 2 or 3 in 16 specimens, viral changes (koilocytosis) in four, and inflammation or a normal appearance in three. Eleven specimens were negative for HPV DNA sequences, 10 contained HPV-16 DNA, four contained HPV-18 DNA, and one contained both HPV-18 and HPV-11 DNA. Episomal HPV-16 DNA was detected in one case of cervical intraepithelial neoplasia grade 3 and in five cases of cervical intraepithelial neoplasia grade 2/3 with koilocytosis; and episomal HPV-18 DNA was found in two specimens classed as cervical intraepithelial neoplasia grade 2/3, one of which also contained HPV-11 DNA, and in one specimen that showed viral changes alone. Integrated HPV DNA was found in six specimens (four with HPV-16 DNA and two with HPV-18 DNA), including two cases of chronically inflamed cervix with no histological evidence of viral infection or cervical intraepithelial neoplasia. Detection of viral DNA in early lesions may identify patients at risk of malignant progression. This is the first report of HPV-18 DNA in cervical intraepithelial neoplasia in Scotland.