γ-谷氨酰转肽酶基因在胰头癌组织中的表达及其核苷酸序列的研究

目的　研究胰头癌组织与正常胰腺组织中γ 谷氨酰转肽酶 (γ glutamyltranspeptidase,GGT)基因的表达及核苷酸序列的差异 ,以阐明胰头癌患者血清GGT异常升高的分子机制。方法　收集 3例胰头癌、2例胆管癌和 2例正常胰腺的手术切除标本。应用逆转录多聚酶链反应及核苷酸序列分析方法 ,检测不同组织中GGTmRNA表达量的变化及GGT基因核苷酸序列。结果　胰头癌与正常胰腺组织中的GGTcDNA核苷酸序列中 12 0 2bp～ 16 0 5bp相一致。在正常胰腺、胆管癌和胰头癌组织中均可见GGTmRNA的表达扩增产物 ,但胰头癌组织中GGT基因表达水平明显高于胆管癌和正常胰腺组织。结论　胰头癌与正常胰腺组织中的GGT基因序列是相同的 ,但胰头癌组织中GGTmRNA表达量明显增高 ,证实GGT是诊断胰头癌的有效指标。     

人胰腺γ—GT酶单克隆抗体诊断胰头癌

利用杂交瘤技术制备人胰腺γ－ＧＴ酶单克隆抗体，并采用间接混合夹心法，以ＰＧＧＴ单克隆抗体检测临床病例血清２７１例，正常人血清对照４０例，鉴别诊断胰头癌，肝癌，胆管癌和胆管良性梗阻。     

PCR—SSP快速检测胰腺癌K—ras基因第12位密码子点突变

为研究简便、快速、特异、灵敏的检测胰腺癌Ｋ－ｒａｓ基因突变和突变方式的方法及其在胰腺肿块术前定性诊断中的价值，我们采用针对Ｋ－ｒａｓ基因点突变方式（ＣＧＴ、ＧＴＴ、ＧＡＴ）设计的顺序特异性引物（ＳＳＰ），对冰冻胰腺癌组织进行ＰＣＲ，产物借助常规电泳即可知有无Ｋ－ｒａｓ基因突变及突变方式，无露酶切、杂文、放射性及非放射性显影。结果发现：３４例胰腺癌标本皆存在Ｋ－ｒａｓ基因点突变，其中８例存在两种方式突变，１３例正常胰腺组织、１７例胰腺良性疾病、７例胆管癌、５例壶腹癌及４例十二指肠乳头癌均未见Ｋ－ｒａｓ基因点突变。结果说明该法简便、快速、特异、灵敏，对于胰腺肿块术前定性诊断具有重要参考价值。     

肿瘤抑制基因P53突变与肾细胞癌的关系

采用ＤＮＡ聚合酶链反应－单链构象多态性分析和直接序列测定技术，检测２５例肾细胞癌组织中Ｐ５３基因５－８外显子，２５例肾细胞癌仅有２例肿瘤组织存在Ｐ５３基因点突变，分别位于１５４和２７３密码子上，核苷酸序理分析突变形式分别为Ｇ→Ｔ，Ｃ→Ｔ。结果提示：肾细胞癌组织中Ｐ５３基因突变并不显著，表明肾细胞癌的发生可能是一个多基因变化的过程。     

PGGT单克隆抗体制备及其鉴别梗梗阻性黄疸的价值

目的 介绍ＰＧＧＴ单克隆抗体制备方法及探讨其对梗阻性黄疸鉴别的价值。方法 用杂交瘤技术缺点备人胰源性γ－谷氨酰转移酶（ＰＧＧＴ）单克隆抗体，并采用间接混合夹心法（Ｅｌｉｓａ）检测临床１０３例黄疸病人和４０例健康人血清。结果 恶性阻黄组阳性率为５９．０９％，其中胰头癌组阳性率为１００％，良性阻黄组、黄疸性肝炎组及健康人组均为阴性。结论 ＰＧＧＴ单克隆抗体在黄疸的鉴别诊断中特别是对胰头癌的诊断有重要意     

前列腺癌组织中ras基因产物P21表达和H—ras基因点突变探讨

应用聚合酶链反应结合寡聚核苷酸探针杂交技术及免疫组化及方法检测前列腺癌组织中Ｈ－ｒａｓ基因第１２位密码子突变及其基因产物Ｐ２１蛋白表达水平。２８例前列腺癌中仅发２例这种点突变和１３例Ｐ２１蛋白表达阳性，５例正常组织及癌旁组织Ｐ２１２表达有性     

膀胱癌转化生长因子α和P53基因表达及生物学意义

通过现代分子生物学方法，对膀胱癌实体肿瘤的ＴＧＦα和Ｐ５３表达及生物学意义进行了探讨。３４例膀胱癌中２９例ＴＧＦαｍＲＮＡ表达，表达率为８５．３％（２９／３４）；１３例癌旁对照组织中，６例无表达，６例低表达，１例高于自身肿瘤表达。肿瘤的表达量是癌旁正常对照的２～５倍，统计学分析，Ｐ＜０．０１。１４例膀胱癌４例（２８．５％）Ｐ５３高表达，２例低表达，２例正常和８例癌组织未见表达。膀胱癌ＴＧＦα基因的高表达可能是膀胱癌发生发展的早期信号，Ｐ５３基因的变异表达可能主要参与癌细胞的分化，它可能与膀胱癌恶性表行相关。     

胰腺导管癌扩大和根治性全胰切除术的探讨

目的：探讨胰腺癌根治性全胰切除的疗效。方法：１９７０￣１９９４年对２１胰腺导管癌（按Ｋｌｏｅｐｐｅｌ分期：Ｔ１－２Ｎ０Ｍ０ １０例，Ｔ１－３Ｎ０－２Ｍ０ ８例及Ｔ１－３Ｎ１－２Ｍ０ ３例）施行根治性全胰切除术，包括胰周、区域性淋巴结及后腹膜间隙组织廓清／和有侵犯的门静脉切除。结果：区域性淋巴结阳性占５２．３％，胰后血管粘连或侵犯占２６．６％，胰腺多病灶癌占１９％。本组无手术死亡率。生存期平均５６个     

TGF—β1蛋白的表达对膀胱癌生物学行为的影响

应用ＴＧＦ－β１放免分析方法对１８例膀胱移行细胞癌进行研究，并选取９例下沉膀胱对照。结果显示：膀胱癌组织中ＴＧＦ－β１蛋白表达量显著高于正常膀胱粘膜，分期Ｔ１组和Ｔ２组ＴＧＦ－β１蛋白表达量显著高于Ｔａ组。Ｇ３组ＴＧＦ－β１蛋白表达量显著高于Ｇ１组。     

大肠癌组织酶标志物研究

目的：探讨大肠癌的发病机理及早期诊断的酶标志物。方法：采用酶学方法测定大肠癌及近心端和远心端癌旁组织中鸟氨酸脱羧酶（ＯＤＣ）、γ－谷氨酰转肽酶（γ－ＧＴ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性及ＬＤＨ同工酶谱。结果：（１）大肠癌组织中ＯＤＣ、γ－ＧＴ及ＬＤＨ活性均显著高于癌旁正常组织；（２）大肠癌组织中ＬＤＨ５同工酶及ＬＤＨ４＋ＬＤＨ５／ＬＤＨ１＋ＬＤＨ２的比值也显著升高，ＬＤＨ同工酶谱向Ｍ型转移。结论：肠组织中ＯＤＣ、γ－ＧＴ、ＬＤＨ活性升高，ＬＤＨ同工酶谱向Ｍ型转移与大肠癌的形成有关，提示ＯＤＣ、γ－ＧＴ及ＬＤＨ可能是大肠癌的组织酶标志物     

胰腺和门静脉联合切除人造血管替代治疗胰头癌二例报告

为了提高胰头癌切除率和患者的存活率，作者采用胰腺和门静脉联合切除术治疗２例胰头癌浸润门静脉的患者。门静脉采用直径８ｍｍＧｏｒｅ－Ｔｅｘ人造血管重建。随访结果：１例存活３２个月且无肿瘤复发，Ｂ超和ＣＴ检查显示移植物通畅。另１例存活２０个月移植物血流通畅。作者认为胰头癌累及门静脉而无转移时，胰腺和门静脉联合切除人造血管替代是值得的。自体颈内静脉和Ｇｏｒｅ－Ｔｅｘ是重建门静脉合适材料。     

膀胱癌MDM2、p53基因表达的临床意义

我们运用点杂交、ＰＣＲ ＳＳＣＰ、免疫组化技术 (ＩＨＣ)分别对膀胱移行细胞癌(ＴＣＣ)组织和配对癌旁组织 ,以及非ＴＣＣ正常膀胱粘膜组织中ＭＤＭ2 基因扩增和表达 ,ｐ5 3表达和点突变情况进行对比检测 ,报告如下。材料与方法　ＴＣＣ及对应的癌旁组织标本各 2 3例 ,非ＴＣＣ正常膀胱粘膜标本 2 0例 ,ＨＥ染色诊断。按ＵＩＣＣ和ＷＨＯ标准 ,Ⅰ级 5例 ,Ⅱ～Ⅲ级 18例 ;Ｔｉｓ～Ｔ16例 ,Ｔ2 ～Ｔ4 17例。组织ＤＮＡ提取 ,测定样品浓度并判断纯度。根据ｐ5 3基因核苷酸序列 ,设计四对引物分别扩增 ｐ5 3基因第 5、6、7、8外显子。外显子包…     

gsp癌基因在国人肢端肥大症患者垂体肿瘤中的表达

目的 观察ｇｓｐ癌基因在国人肢端肥大症患者垂体肿瘤中的表达。方法 采用ＰＣＲ－ＤＮＡ直接序列分析方法,观察１８例肢端肥大症患者垂体肿瘤组织中ｇｓｐ癌基因的突变。结果 １８例病人中６例（３３．３％）ｇｓｐ癌基因阳性,４例位于编码Ｇｓａ２０１号密码子上（３例为ＣＧＴ－ＴＧＴ,１例为ＣＧＴ－ＣＡＴ）,２例位于编码Ｇｓａ２２７号密码子上（ＣＡＧ－ＣＴＧ）。结论 ｇｓｐ癌基因在国人肢端肥大症患者垂体肿瘤中的     

原癌基因C—erb B—2在肾盂输尿管癌中表达的临床意义

为了了解原癌基因Ｃｅｒｂ Ｂ－２在肾盂输尿管癌中表达的临床意义，采用免疫组化Ｓ－Ｐ法对４６例肾盂输尿管癌Ｃ－ｅｒｂ Ｂ－２蛋白表达与病理分期，细胞分级，复发与预后的关系进行研究。结果显示，肾盂输尿管癌中Ｃ－ｅｒｂ Ｂ－２蛋白表达阳性率为３４．８％，Ｔ３＋５４Ｃ－ｅｒｂ Ｂ－２表达阳性率高于Ｔ１＋Ｔ２，Ｐ〈０．０１；Ｇ３ ＣｅｒｂＢ－２表达阳性率高于Ｇ２，Ｐ〈０．０５，Ｇ１Ｃ－ｒｒｂ－Ｂ－２染色均国     

转化生长因子-β1及其Ⅱ型受体在肝细胞癌中的基因表达

目的 探讨转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）及其Ⅱ型受体（ＴＧＦ－βＲⅡ）在肝细胞癌中的基因表达。方法 用ＲＴ－ＰＣＲ和免疫组化技术,分别检测３０例肝癌组织和癌旁肝组织中ＴＧＦ－β１及ＴＧＦ－βＲⅡ在ｍＲＮＡ和蛋白水平的表达。结果 （１）ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ阳性表达,在肝癌组织中为２４／３０,癌旁肝组织中为２６／３０,Ｐ〉０．０５;但ＴＧＦ－β１蛋白水平在肝癌组织阳性表达低于癌旁肝组织（Ｐ〈０．０     

胰腺癌p16基因mRNA异常表达的研究

我们应用逆转录 聚合酶链式反应(ＲＴ ＰＣＲ)检测胰腺癌中 ｐ16基因ｍＲ ＮＡ的表达情况 ,同时应用聚合酶链式反应 单链构象多态性分析 (ＰＣＲ ＳＳＣＰ)对其异常表达的原因进行分析 ,现将结果报道如下。一、材料和方法1.对象 :新鲜胰腺癌组织 10例取自中国医科大学第一临床学院普通外科手术切除的肿瘤标本 ,其中胰头癌 9例为胰头十二指肠手术切除 ,胰体尾癌 1例为胰体尾切除术切除。正常胰腺组织 7例为对照 ,取自十二指肠乳头癌和胆管末端癌行胰头十二指肠切除的正常胰腺。2 .ＤＮＡ和ＲＮＡ的提取 :酚 氯法提取上述样品ＤＮＡ ,紫外分…     

肾癌细胞的凋亡与调控因子的表达

我们利用微波免疫组化和流式细胞技术，对５２例肾癌及１４例癌旁正常组织的凋亡率及抗凋亡基因ｂｃｌ－２、转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）、ｃ－ｍｙｃ的表达进行了定性、定量的测定，现报道如下。１．材料和方法：１９８５～１９９５年手术切除的肾癌石蜡标本５２例...     

人结直肠肿瘤中环氧化酶-2的表达

目的 检测环氧化酶－２（ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ－２，ＣＯＸ－２）在结直肠正常粘膜、腺瘤和癌组织中的ｍＲＮＡ表达，探讨ＣＯＸ－２在结直肠肿瘤发生发展中的意义。方法 以β－ａｃｔｉｎ基因为参照，应用逆转录－多聚酶链反应，检测１０例遥瘤、３０例癌及相应正常粘膜组织中ＣＯＸ－２ ｍＲＮＡ表达。应用密度扫描技术定量分析ＲＴ－ＰＣＲ产物电泳带密度。结果 ＣＯＸ－２ ｍＲＮＡ在９０％的癌组织（２７／３０）中表达明显增高，全距０．０２０～０．８５，中位数０．５；在正常粘膜组织中无表达或表达不明显，全距０～０．０７４，中位数０；在部分腺瘤中表达明显增高，全距０～０．５６，中位数０．０１。癌与正常粘膜或腺瘤间ＣＯＸ－２ ｍＲＮＡ表达差异有显著性（秩和检验，Ｐ〈０．０５）。结论 ＣＯＸ－２ ｍＲＮＡ表达在部分结直肠腺瘤中增高，     

TGF－β_1蛋白的表达对膀胱癌生物学行为的影响

应用ＴＧＦ－β_１放免分析方法对１８例膀胱移行细胞癌进行研究，并选取９例正常膀胱为对照。结果显示：膀胱癌组织中ＴＧＦ－β_１蛋白表达量显著高于正常膀胱粘膜（Ｐ＜０．００１）。分期Ｔ_１组和Ｔ_２组ＴＧＦ－β_１蛋白表达量显著高于Ｔａ组（Ｐ＜０．０５和Ｐ≤０．００５）。Ｇ３组ＴＧＦ－β_１蛋白表达量显著高于Ｇ_１组（Ｐ≤０．０５）。应用￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入实验研究表明：ＴＧＦ－β_１在体外可促进ＴＢＣ－１系膀胱癌细胞的体外生长。本组结果提示：ＴＧＦ－β_１蛋白的表达对膀胱癌的生物学行为有重要影响，对评估膀胱癌预后有重要意义。     

黑色素瘤抗原-3基因在肝细胞癌中的研究

目的 检测黑色素瘤抗原－３（ｍｅｌａｎｏｍａ ａｎｔｉｎｅｇ－３,ＭＡＧＥ－３）ｍＲＮＡ在肝细胞癌（ＨＣＣ）中的表达,探计用ＭＡＧＥ－３基因编码蛋白作为疫苗对ＨＣＣ患者进行免疫治疗在理论上的可行性。方法 用ＲＴ－ＰＣＲ方法对４５例ＨＣＣ患者癌组织和相应癌旁肝组织以及１６例肝硬化组织和１２例正常肝组织的ＭＡＧＥ－３ ｍＲＮＡ表达情况进行研究,对３例ＲＴ－ＰＣＲ扩增产物中目的基因片段进行ＤＮＡ序列测定