PCR在诊断结核性胸膜炎中的应用

本文对聚合酶链反应在结核性胸腔积液诊断方面的应用作一简介 ,分析了该技术应用时可能出现的假阳性和假阴性的原因 ,并对定量PCR、实时定量PCR等新技术作简要概述     

350例血清乙肝HBV—DNA检测结果分析

荧光定量PCR技术是目前基因诊断中的一个重要手段，因其灵敏度高，特异性强，特别是它采用了荧光技术和闭管检测，克服了常规PCR方法中只有定性而无法定量，假阳性率高，以及紫外线对工作人员的严重伤害等缺点，因而在临床中得到了广泛的应用。本院自２０００年开始应用该技术进行乙肝HBV－DNA检测，现将部分抽调统计定量结果与乙肝三系定性结果作比较。报道如下：１对象和方法１．１检测对象３５０例均为２０００年１１月至２００１年１１月间在两院临床各科的住院患者，其中男性１７９例，女性１７１例，年龄１１～７５岁。１．２方…     

定量PCR的研究进展

定量PCR技术是在PCR定性技术基础上发展起来的基因定量技术，克服了原有的PCR技术存在的不足，能准确敏感地测定模板浓度及检测基因变异等。本文就定量PCR技术中的竞争性PCR和荧光定量PCR技术作一综述，以便更好地理解及应用这项技术。     

定量PCR在弓形虫病诊断中的研究进展

弓形虫病是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病。应用定量PCR对弓形虫进行定量检测，为弓形虫病的诊断提供了一条快速、准确、灵敏的途径。现就定量PCR技术诊断弓形虫病所用目的基因、定量PCR的类型以及在弓形虫病诊断中的应用作一综述。     

定量PCR技术

用PCR技术对基因从定性到定量测定是分子生物学方法学研究的一大飞跃，实现对核酸信息量的分析比较，为疾病的诊断和治疗提供更多、有效的基因水平信息。本文介绍了近年来研究和应用较多的4个重要定量PCR方法，即对PCR产物的直接定量、极限稀释法、靶基因与参照基因的同步扩增和竞争性PCR。并对定量PCR的特性和扩增动力学的影响因素等作了讨论。     

实时PCR在肿瘤诊断中的应用

以荧光能量传递技术为基础的荧光定量PCR技术，自1995年建立以来，无论从技术和应用上都得到了快速发展。本文就荧光定量PCR的各种探针技术及其在肿瘤检测方面的应用作一简要综述。     

实时PCR在肿瘤诊断中的应用

以荧光能量传递技术为基础的荧光定量PCR技术，自从1995年建立以来，无论从技术上和应用上都得到了快速发展。本文就荧光定量PCR的各种探针技术及其在肿瘤检测方面的应用作一简要综述。     

荧光定量PCR定量检测5种假丝酵母菌方法的建立

目的建立并评价从血液标本中检测5种假丝酵母菌的荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法。方法以5种假丝酵母菌共有的高度保守序列为靶序列,设计特异引物和探针进行检测,优化定量PCR体系,并进行方法学评价。结果建立的荧光定量PCR方法,其线性范围为101~109CFU/m L;灵敏度为5 CFU/m L;批内和批间CV值均5%;对19份模拟血液标本进行检测,其中分别含有5种假丝酵母菌的标本均为阳性,而分别含有常见血液感染曲霉菌和细菌的检测结果均为阴性。结论建立的检测血中假丝酵母菌荧光定量PCR方法快速、准确,结果可靠,可对常见的临床血液感染假丝酵母菌进行定量检测。     

350例血清乙肝HBV-DNA检测结果分析

荧光定量PCR技术是目前基因诊断中的一个重要手段,因其灵敏度高,特异性强,特别是它采用了荧光技术和闭管检测,克服了常规PCR方法中只有定性而无法定量,假阳性率高,以及紫外线对工作人员的严重伤害等缺点,因而在临床中得到了广泛的应用.     

荧光定量PCR技术及其在临床上的应用

荧光定量PCR（Fluorescence Quantitive Polymerase Chain Reaction FQ-PCR)技术是在90年代末期发展起来的一项全新技术。经过几年的实践及临床应用，已获得了较为稳定的检测效果。作为一种体外基因扩增技术，它能敏感地检测初始模板浓度及基因变异等情况。它的出现，克服了传统PCR技术普遍存在的假阳性及不能定量等问题，使得PCR技术更广泛地应用于临床，在监测患者病情、预后、指导用药等方面有着广阔的应用前景。本文概述了FQ－PCR技术及其在临床上的应用，即常见病原体的检测及其在分子遗传学和法医学中的应用。     

定量PCR在弓形虫病诊断中的研究进展

弓形虫病是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病.应用定量PCR对弓形虫进行定量检测,为弓形虫病的诊断提供了一条快速、准确、灵敏的途径.现就定量PCR技术诊断弓形虫病所用目的基因、定量PCR的类型以及在弓形虫病诊断中的应用作一综述.     

荧光定量PCR技术在临床微生物检测中的应用价值

目的探究荧光定量PCR,技术在临床微生物检测中的应用效果。方法回顾性分析2017年1月-2019年1月间我院门诊收治的90例患者的临床标本,对其荧光定量PCR技术微生物检测结果进行分析。结果各取2株沙门氏菌、肠出血性大肠杆菌0157:H7、副溶血性弧菌及黄色葡萄球菌进行试剂盒特异性检测,结果未出现假阳性或假阴性情况,特异性100%;同时对所取菌株进行10倍系列系数PCR技术灵敏度检测,结果表明102拷贝/mL核酸样本能够进行最低核酸检测限度。结论在微生物的临床检测中,荧光定量PCR技术灵敏度强,特异性好,检测效率高,还具有精准的特点,值得推广应用。     

定量PCR的研究进展

定量PCR技术是在PCR定性技术基础上发展起来的基因定量技术 ,克服了原有的PCR技术存在的不足 ,能准确敏感地测定模板浓度及检测基因变异等。本文就定量PCR技术中的竟争性PCR和荧光定量PCR技术作一综述 ,以便更好地理解及应用这项技术     

梅毒血清学检查RPR试验假阴性的排除

由于梅毒血清学检查ＲＰＲ（快速血浆反应素环状卡片）试验试剂稳定，操作简便，结果易观察，已广泛应用于临床。但在我室应用中发现５例假阴性标本，经作玻片定量试验，结果阳性，并经ＴＰＨＡ证实试验证实。因此，为了防止假阴性结果，可疑标本应同时作玻片定量试验。以...     

实时荧光定量PCR的研究进展及其应用

多聚酶链反应飞速的发展使其成为了分子生物学实验室重要的工具，实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR）以其敏感性高、重复性好、速度快和污染少使PCR技术又向前迈进了一步。本文对real-time Q-PCR技术的原理、五种主要的荧光化学及定量方法作一介绍，同时也讨论了此技术存在的不足，并对其目前在研究领域中主要的应用进行了概述。     

实时荧光定量PCR技术的理论研究及其医学应用

背景:实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法.目的:对实时荧光定量PCR的理论进行研究并探讨其在医学方面的应用和进展.方法:以real.time fluorescence quota PCR,theorem,application为检索词,检索PubMed数据库(2000-01/2008-12).以实时荧光定量PCR,原理,应用为检索词,检索万方数据库(2000-0112008-12),清华同方中文系列数据库(2000-01/2008-12).文献检索语种限制为英文和中文.以细胞因子和肿瘤耐药基因的表达为评价指标.纳入实时荧光定量PCR技术的方法学研究和实时荧光定量PCR技术的医学应用研究.排除重复性研究和Meta分析.结果与结论:实时荧光定量PCR技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、灵敏度高、重复性好、定量准确、自动化程度高、全封闭反应等优点,成为分子生物学研究中的重要工具.实时荧光定量PCR的应用范围非常广泛,包括mRNA表达的研究、DNA拷贝数的检测、单核苷酸多态性的测定等,已广泛应用于医学临床,它能对结核分枝杆菌、乙型、丙型肝炎、爱滋病病毒、淋球菌、沙眼衣原体等病原体进行准确的定量检测.其定量范围极宽,无需做梯度稀释,特异性更强,克服了假阳性.由于传统的PCR技术不能准确定量,使其在实际应用方面受到很大限制.因此,对PCR产物进行准确定量,尤其是病毒性病原的动态监控,成为迫切需要.     

实时定量PCR应用中的问题及优化方案

实时定量PCR是利用PCR反应过程中所产生的荧光强度进行实时检测的定量PCR反应。目前，该方法已在生命科学领域得到了广泛的应用，本文对其应用过程中存在的主要问题加以分析，探讨优化实验方法。     

荧光定量PCR技术及其在临床上的应用

荧光定量PCR(FluorescenceQuantitivePolymeraseChainReactionFQ PCR)技术是在 90年代末期发展起来的一项全新技术。经过几年的实践及临床应用 ,已获得了较为稳定的检测效果。作为一种体外基因扩增技术 ,它能敏感地检测初始模板浓度及基因变异等情况。它的出现 ,克服了传统PCR技术普遍存在的假阳性及不能定量等问题 ,使得PCR技术更广泛地应用于临床 ,在监测患者病情、预后、指导用药等方面有着广阔的应用前景。本文概述了FQ PCR技术及其在临床上的应用 ,即常见病原体的检测[1,3 ] 及其在分子遗传学和法医学中的应用     

荧光定量PCR技术及其临床应用

PCR技术是一种体外核酸扩增技术。通过 PCR技术可对待定基因进行扩增 ,其主要应用领域是基因检测和临床基因诊断。但其应用于临床基因诊断还存在许多局限性 ,主要表现在不能准确定量和因交叉污染而易产生假阳性等。荧光定量 PCR(Fluoresence Quantive Polymerase ChainReaction,FQ- PCR)的出现 ,解决了上述问题 ,是 PCR技术的革命性进展。它可以定量分析 DNA或 RNA样本的拷贝数 ,准确检测出样品中的基因数目 ,在临床实践中有着重要的意义和应用前景。FQ- PCR基于荧光共振能量转移 (Fluoresence Reso-nance Energy Transfer,…     

ELISA法和DNA荧光定量PCR法检测乙肝病毒的相关性研究

乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus，HBV）DNA定量检测对乙型肝炎的诊断、抗病毒疗效观察及预后判断均具有重要意义。随着荧光定量（Fluorescent Quantitative，FQ）PCR技术的发展，由于其灵敏、快速、极低的假阴、假阳性率，该技术在临床上已被广泛应用于检测HBV-DNA，而酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清中HBV免疫标志物（Hepatitis B Virus—Marker，HBV—M）仍旧是诊断乙型肝炎的常用方法。