肿瘤患者免疫细胞活性及T细胞亚群比例的变化

通过＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法、＾３Ｈ－ＴｄＲ释放试验及间接免疫荧光试验，分别研究肿瘤患者外周血淋巴细胞的转化、ＮＫ细胞的活性及Ｔ细胞亚群的比例变化。结果表明，２０例患者外周血淋巴细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入功能明显低于对照组，为对照的７３．４％（ｔ检验，Ｐ〈０．０１）。ＮＫ细胞的活性出明显低于正常人（为对照组的８０．１％，Ｐ〈０．０１）。病人外周血Ｔ细胞亚群中，ＴＨ比例明显低于正常对照（Ｐ〈０．０１），Ｔｓ     

硒提高肿瘤患者NK细胞和T淋巴细胞功能

硒对肿瘤患者细胞免疫功能促进作用的体外试验表明：当亚硒酸钠（Ｎａ２ＳｅＯ３）的作用浓度为４．３４×１０－７ｍｏｌ／Ｌ时，２０例患者淋巴细胞转化明显加强：３Ｈ－ＴｄＲ掺入量由１．０７（±０．５７）ＫＢｑ／１０６淋巴细胞增加到１．５９（±０．７５）Ｋ即／１０５淋巴细胞，Ｐ＜０．０１，同时，硒还显著提高ＮＫ细胞杀伤活性：１４例患者ＮＫ细胞介导的３Ｈ－ＴｄＲ释放率由３０．９７％±１３．９％增至４０．２８％×１３．０１％。Ｐ＜０．０５。提示适宜浓度的硒可能是一种免疫促进剂，硒在免疫功能低下的肿瘤患者的综合治疗中可能具有临床的应用价值。     

Graves病患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞变化的临床意义

对４４例Ｇｒａｖｅｓ病初治患者于治疗前检测外周血Ｔ淋巴细胞亚群及ＮＫ细胞活性，结果显示ＣＤ＿３细胞与正常对照组差异无显著性（Ｐ＞０．０５），ＣＤ４细胞低于正常对照组（Ｐ＜０．０５），ＣＤ＿细胞显著低于正常对照组（Ｐ＜０．０１），ＣＤ＿４／ＣＤ＿８值及ＮＫ细胞则显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１），并发现这些变化与Ｔ３、Ｔ４无显著相关性。对Ｇｒａｖｅｓ病的细胞免疫改变作了初步讨论。     

c-myc反义寡核苷酸对低氧内皮细胞条件培养液诱导的肺血管周细胞增殖的影响

应用细胞培养、核酸斑点杂交、~３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（~３Ｈ－ＴｄＲ）掺入、免疫细胞化学、图像分析等技术观察ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸（ＯＤＮｓ）对低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）诱导的大鼠肺血管周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达及~３Ｈ－ＴｄＲ掺入量的影响。结果表明,ＨＥＣＣＭ显著促进周细胞 ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、ＰＣＮＡ表达（Ｐ＜０．０１）及~３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加（Ｐ＜０．０１）,反义ＯＤＮｓ显著阻抑 ＨＥＣＣＭ诱导的周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、ＰＣＮＡ表达（Ｐ＜０．０１）及~３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加（Ｐ＜０．０５）,而同义ＯＤＮｓ无上述作用（Ｐ＞０．０５）。结果提示,ＨＥＣＣＭ可通过上调ｃ－ｍｙｃ基因表达促进肺血管周细胞增殖,反义ＯＤＮｓ通过下凋ｃ－ｍｙｃ基因表达,抑制ＨＥＣＣＭ诱导的肺血管周细胞增殖。     

用IL－2／LAK细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响

为了探讨ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响，用３Ｈ－ＴｄＲ掺入ＤＮＡ法测定了１７例中晚期癌症病人在ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞治疗前后外周血加ＰＨＡ或不加ＰＨＡ淋巴细胞体外增殖试验，结果显示无论空白对照（１１／１６）还是ＰＨＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖试验（１２／１６），ｃｐｍ值较治疗前均有明显的提高（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）；在Ｔ细胞亚群的测定中，ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞治疗前后比较，ＣＤ３＋和Ｃ８＋细胞都未发现明显的差异，只有Ｃ４＋细胞较治疗前（１３／１７）有了显著提高（Ｐ＜０．０１）；ＮＫ细胞虽未达到正常水平，但也显示较治疗前有显著增高的倾向；结果表明，ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞疗法既对肿瘤细胞有直接杀伤作用，也对细胞免疫起了明显的促进作用。     

慢性丙型肝炎患者外周血T细胞亚型及NK活性的研究

目的：检测慢性丙型肝炎患者外周血Ｔ细胞亚型和ＮＫ活性，并与正常人比较，以观察ＨＣＶ感染对患者细胞免疫功能的影响。方法：采用间接免疫荧光－流式细胞分析法检测外周血Ｔ细胞ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８表达，采用ＬＤＨ释放法测定ＮＫ活性。结果：慢性丙型肝炎患者外周血ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８比值、ＮＫ活性明显降低，与正常人比较差异有显著性（Ｐ值分别＜０．０１，＜０．０１和＜０．０５），而ＣＤ８升高（Ｐ值＜０．０５）；ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性组与ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性组比较，ＣＤ４／ＣＤ８比值、ＮＫ活性进一步下降，差异有显著性（Ｐ值分别＜０．０５）。结论：慢性丙型肝炎患者存在细胞免疫功能紊乱，提高其细胞免疫功能可能有利于患者的愈后。     

恶性淋巴瘤T细胞亚群及白介素2活怀的观察

应用免疫碱性磷酸酶桥联（ＡＰＡＡＰ法及＾３Ｈ－ＴＤＲ掺入法检测了３０例例非何杰金淋巴瘤（ＮＨＬ）外周血Ｔ淋巴细胞亚群及１４例ＮＨＬ患者白介素２（ＩＬ－２）活性。结果表明：ＮＨＬ患者外周血全Ｔ细胞、ＯＫＴ４细胞的均显著减少（Ｐ〈０．０５），ＯＫＴ８细胞显著增高（Ｐ〈０．０５），ＯＫＴ４／ＯＫＴ８比值明显低于对照（Ｐ〈０．０１）。ＩＬ－２活性明显低于对照（Ｐ〈０．０１）。ＩＬ－２活性与ＯＫＴ４／ＯＫＴ     

自发性高血压大鼠主动脉血管平滑肌细胞异常增殖和自身肾素－血管紧张素系统的关系

目的以２０周龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和正常血压大鼠（ＷＫＹ）胸主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）为模型，探讨ＳＨＲＡＳＭＣ异常增殖和自身肾素－血管紧张素系统（ＲＡＳ）的关系。方法用３Ｈ－ＴｄＲ参入量和倍增时间（ＤＴ）反映ＡＳＭＣ的增殖能力，放射免疫法测定血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）浓度，紫外分光光度法测定血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性。结果（１）ＳＨＲＡＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ参入量显著高于ＷＫＹ，ＤＴ显著短于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０１）。基础状态下，ＳＨＲＡＳＭＣ合成ＡｎｇⅡ、ＡＣＥ以及分泌ＡｎｇⅡ的量显著高于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０１）。（２）在含２％ＦＣＳ的培养基中，１０－６ｍｏｌ／ＬＡｎｇⅡ使ＳＨＲ、ＷＫＹ的３Ｈ－ＴｄＲ参入量分别提高到对照组的３．３倍、２．２倍（Ｐ＜０．０１），ＳＨＲＡＳＭＣ在不同浓度ＡｎｇⅡ刺激时的３Ｈ－ＴｄＲ参入量显著高于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０１），１０－６ｍｏｌ／ＬＡｎｇⅡ使ＳＨＲＡＳＭＣ细胞数增加７２．５±２３．１％（Ｐ＜０．０１），ＷＫＹＡＳＭＣ细胞数无显著增加，１０倍浓度ＡｎｇⅡ的Ｓａｒａｌａｓｉｎ对ＳＨＲ、ＷＫＹ３Ｈ－ＴｄＲ参入的抑制率分别为６６．７±３．３％，４４．７±９．９％（Ｐ＜０．０１）     

肝癌患者外周血NK和LAK活性及T细胞亚群的变化

采用３ＨＴｄＲ释放法测定了２０例肝癌患者的外周血自然杀伤细胞（ＮＫ）活性及淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）活性，同时用ＡＢＣ法检测其外周血Ｔ细胞亚群变化。结果显示，肝癌患者的外周血ＮＫ和ＬＡＫ活性显著低于正常人（Ｐ＜０．０１），Ｔ细胞亚群ＣＤ３及ＣＤ４细胞减少（Ｐ＜０．０１），ＣＤ８细胞增多（Ｐ＜０．０１），ＣＤ４／ＣＤ８比值显著降低（Ｐ＜０．０１）且出现倒置。上述结果提示肝癌患者细胞免疫功能出现紊乱及免疫活性细胞功能有缺陷。     

红细胞对NK细胞活性的影响

应用＾３Ｈ－ＴｄＲ释放法检测了红细胞对ＮＫ细胞活性的影响，结果表明在不同效靶比例时，红细胞均能显著增强ＮＫ细胞杀伤活性（Ｐ〈０．０１），而且红细胞的这种功能与其胞质液有关。提示红细胞通过调节ＮＫ细胞活性参与机体的肿瘤免疫以应。     

C-myc反义核酸对内皮素诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖抑制作用的研究

应用不同浓度的Ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸处理体外培养的经１０－８ｍｏｌ／Ｌ内皮素－１（ＥＴ－１）诱导的人肺动脉平滑肌细胞,通过细胞计数和３Ｈ－ＴｄＲ掺入值观察该反义核酸对细胞增殖及ＤＮＡ合成的抑制作用,应用斑点杂交法检测平滑肌细胞Ｃ－ｆｏｓ和Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ的表达水平。结果表明,１０、２０、５０μｇ／ｍｌ反义寡核苷酸对细胞计数和３Ｈ－ＴｄＲ掺入值与对照组相比抑制率分别为１１．９％和１２．３％（Ｐ＜０．０５）,２１．６％和１４．７％（Ｐ＜０．０１）,３６．３％和２７．２％（Ｐ＜０．０１）;对Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达抑制率分别为７１．３％（Ｐ＜０．０５）,８０．７％（Ｐ＜０．０５）,９２．５％（Ｐ＜０．０１）;５０μｇ／ｍｌ反义核酸对Ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达抑制率是７９．７％,１０、２０μｇ／ｍｌ组无抑制作用。Ｃ－ｍｙｃ反义核酸能显著抑制内皮素诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖,其作用系依赖反义核酸的序列特异性和剂量依赖。     

特女贞甙体外对小鼠脾淋巴细胞转化和自然杀伤细胞活性的影响

目的：观察特女贞甙（ＳＰＮ）体外对小鼠脾淋巴细胞转化和自然杀伤细胞活性的影响。方法：分别采用（１）３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，以核素掺入量为测定指标；（２）３Ｈ－ＴｄＲ标记靶细胞释放法，以杀伤率和抑制率为测定指标。结果：ＳＰＮ能与亚适量刀豆球蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）协同提高正常鼠脾Ｔ淋巴细胞的转化；ＳＰＮ对正常鼠脾自然杀伤细胞（ＮＫ）活性无明显作用（Ｐ＞０．０５），但能显著提高由环磷酰胺抑制的ＮＫ杀伤功能（Ｐ＜０．０１），减轻由地塞米松引起的ＮＫ活性低下作用（Ｐ＜０．０１）。结论：ＳＰＮ为中药女贞子中具有免疫活性的水溶性成分之一。     

膀胱癌患者外周血TcR－γ／δ细胞及其他细胞表型分析

１０例膀胱癌患者外周血ＴｃＲ－γ／δ细胞、ＮＫ细胞百分率、ＩＬ－２受体表达均显著低于正常对照组（Ｐ＜０．０１）；浅表型膀胱癌与浸润性膀胱癌比较无差异．患者ＣＤ、ＣＤ、ＣＤ细胞百分率减少，ＣＤ／ＣＤ细胞比例下降，术后ＣＤ、ＣＤ、ＣＤ细胞百分率显著高于术前（Ｐ＜０．０１）．４例浅表型膀胱癌患者术后ＣＤ／ＣＤ细胞比例技术前升高，初步探讨ＴｃＲ－γ／δ细胞在膀胱肿瘤过继免疫治疗中应用的可能性。     

脑胶质细胞瘤患者手术前,后自然杀细胞（NK）活性测定及其…

报告１４例脑胶质细胞瘤患者术前、术后外周血淋巴细胞中自然杀伤细胞（ＮＫ）活性检测结果，并与７例颅骨成形术患者对照，结果显示：（１）脑胶质瘤患得的ＮＫ活性较颅骨成形术患者降低（Ｐ＜０．０５）。（２）脑胶质瘤患乾术后３－６个月，ＮＫ细胞活性明显回升（Ｐ＜０．０１），甚至有的病例恢复到正常水平。（３）激素对ＮＫ活性有明显抑制作用（Ｐ＜０．０１）。（４）脑胶质瘤复发１例ＮＫ活性回升不明显。     

用IL—2／LAK细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响

为了探讨ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响，用＾２Ｈ－ＴｄＲ掺入ＤＮＡ法测定了１７例中晚期癌闰病人在ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞治疗前后外周血加ＰＨＡ或不加ＰＨＡ淋巴细胞外增殖试验，结果显示无论空白对照（１１／１６）还是ＰＨＡ诱Ｔ淋巴细胞增殖试验（１２／１６），ｃｐｍ值较治疗前均事明显的提高（Ｐ〈０．０５，Ｐ〈０．０１）；在 Ｔ细胞亚群的测定中，ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞治疗前后比较，ＣＤ＾＋和     

改良MTT法检测自然杀伤细胞的活性

采用经作者改良的ＭＴＴ比色测定自然杀伤细胞（ＮＫＣ）活性。结果显示：在效应细胞（ＥＣ）和靶细胞（ＴＣ）活性均≥９５％，ＥＣ≥３．０×１０２／Ｗｅｌ、ＴＣ≥１．６×１０２／Ｗｅｌ时，细胞还原ＭＴＴ产生的甲瓒溶解后的ＯＤ５７０ｎｍ值与细胞数成线性相关（ｒｅ＝０．９４，ｒｔ＝０．９７，Ｐ＜０．００１）。本法在测得ＥＣ∶ＴＣ为４０∶１时，正常人外周血ＮＫＣ活性为４５．６４％。用本法和３Ｈ－ＴｄＲ掺入抑制试验同时测定１０份白血病患者外周血ＮＫＣ活性，分别为３４．８６±７．８０％和３５．１６±８．４０％，两者呈良好的正相关（ｒ＝０．８７６，Ｐ＜０．００１）。本法简便、稳定可靠，是一种很有价值的测定ＮＫＣ活性的方法。     

肝癌患者外周血自然杀伤细胞的活性

目的探讨肝细胞性肝癌患者外周血自然杀伤细胞（ＮＫ）活性与乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、甲胎蛋白（ＡＦＰ）、肿瘤大小、转移及黄疸的关系。方法应用５－１２５Ｉ－２′－脱氧尿嘧啶核苷（１２５Ｉ－ＵｄＲ）释放法分别对５１例肝癌患者和４８例正常人进行ＮＫ活性测定。结果肝癌患者外周血ＮＫ活性明显低下（３８．３０％±１７．０３％，Ｐ＜０．００１），与血清中ＨＢｓＡｇ无关，而与血清中ＡＦＰ呈负相关关系（ｒ＝－０．４５６，Ｐ＜０．０１），且随着患者肿瘤的增大和转移及出现黄疸ＮＫ活性进一步下降。结论ＮＫ活性可作为一种免疫监视指标，对判断肝癌的疗效和预后有一定的临床指导意义     

自体LAK细胞回输疗法对慢性乙型肝炎患者NK及LAK细胞活性的影响

目的探讨自体ＬＡＫ细胞回输疗法的作用机制。方法用ＭＴＴ比色法检测２９例慢性活动型乙型肝炎（ＣＡＨ）患者及１４例正常人外周血ＮＫ及ＬＡＫ细胞活性；检测２１例自体ＬＡＫ细胞回输治疗前、后ＣＡＨ患者外周血ＮＫ及ＬＡＫ细胞活性。结果ＣＡＨ患者ＮＫ及ＬＡＫ细胞活性较正常人低，差异有显著性（Ｐ＜０．０１）；治疗后较治疗前ＮＫ及ＬＡＫ细胞活性增高，差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论自体ＬＡＫ细胞回输疗法治疗ＣＡＨ有效，其作用机制之一是提高了ＣＡＨ患者的ＮＫ及ＬＡＫ细胞活性。     

安替可胶囊抗肿瘤作用的机理

目的：探讨安替可（Ａｎｔｉｋｅ）胶囊抗肿瘤的作用机理．方法：采用移植瘤模型、常规体液和细胞免疫测定、细胞毒结晶紫染色、比色及同位素参入等方法，观察Ａｎｔｉｋｅ及其组分蟾皮（ＳＴ）和当归（ＡＳＤ）的抗肿瘤作用、诱导ＴＮＦ、ＮＫＣ、ＩＬ－２活性、血中过氧化氢酶（ＣＡＴ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）和组织中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量及脾和瘤细胞中３Ｈ－ＵＲ参入ｃｐｍ等指标．结果：①Ａｎｔｉｋｅ，ＳＴ和ＡＳＤ及５－Ｆｕ对Ｈ２２移植瘤的瘤重抑制率分别为４５．０５％，４３．９５％，２７．７９％，５５．７９％（Ｐ＜０．０１）；②Ａｎｔｉｋｅ和ＡＳＤ诱导ＭΦ释放ＴＮＦ分别为２５９．０±４０．８和２１４．８±４３．５Ｕ·μｌ－１（Ｐ＜０．０１），ＮＫＣ杀伤率为７３．３９％，６７．４７％（Ｐ＜０．０１），显著增强ＩＬ－２活性（Ｐ＜０．０１），提高ＣＡＴ，ＧＳＨ－Ｐｘ和移植瘤中ＳＯＤ含量（Ｐ＜０．０１），显著降低瘤细胞ｃｐｍ（Ｐ＜０．０１）；③ＳＴ诱导ＭΦ释放ＴＮＦ为１７７．１±４２．９Ｕ·μｌ－１（Ｐ＜０．０１），ＮＫＣ杀伤率６７．７４％（Ｐ＜０．０１），增强ＩＬ－２活性；但对荷瘤小鼠血中ＣＡＴ，ＧＳＨ－Ｐｘ，ＳＯＤ     

c—myc反义寡核苷酸对低氧内皮细胞条件培养液诱导的肺血管？…

应用细胞培养、核酸斑点杂交、Ｈ＾３－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入、免疫细胞化学、图像分析等技术观察ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸（ＯＤＮｓ）对低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）诱导的大鼠肺血管周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量的影响。结果表明,ＨＥＣＣＭ显著促进周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、ＰＣＮＡ表达（Ｐ〈０．０１）及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加（