乳腺癌中COX-2表达及其抑制剂塞来昔布对乳腺癌细胞系增生和凋亡的影响

目的为进一步观察COX-2对乳腺癌的作用,我们检测了乳腺癌组织、乳腺癌细胞株MCF-7和B37中COX-2的表达,并观察选择性COX-2抑制剂塞来昔布对乳腺癌细胞株生长和凋亡的影响。方法应用免疫组织化学染色的方法检测132例乳腺癌组织标本中COX-2蛋白的表达;应用免疫细胞化学染色、原位杂交、逆转录多聚酶联反应（RT-PCR）的方法,分别检测COX-2蛋白和mRNA在乳腺癌细胞株MCF-7、B37中的表达;采用MTT法、AO/EB双荧光染色法和流式细胞术,研究塞来昔布对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。结果52.3%(69/132)的乳腺癌组织标本表达COX-2蛋白;在乳腺癌细胞株MCF-7和B37中均有COX-2的表达,25μmol/L塞来昔布作用72h后,COX-2表达明显减少;25、50、100μmol/L的塞来昔布与MCF-7细胞作用72h,生长抑制率分别为36.3%、57.7%、74.5%。100μmol/L塞来昔布作用72h后,MCF-7细胞凋亡率为38.5％。结论乳腺癌组织和乳腺癌细胞株MCF-7、B37中存在COX-2的表达;塞来昔布可抑制乳腺癌细胞增殖,并促进细胞凋亡,塞来昔布可能作为新的药物治疗乳腺癌。     

塞来昔布对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究特异性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对人鼻咽癌细胞株CNE-2是否具有抑制增殖、诱导凋亡的作用并初步探讨其作用机制。方法 用塞来昔布作用于体外培养的人鼻咽癌CNE-2细胞,采用四甲基偶氮陛蓝比色法（MTT）测定细胞增殖活力的改变;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot 检测细胞Bcl-2、Bax蛋白的表达情况。结果 MTT结果显示不同浓度塞来昔布（25～100μmol/L）均能抑制鼻咽癌CNE-2 细胞生长,呈浓度和时间依赖性。流式细胞术结果显示塞来昔布（25～75μmol/L）浓度范围内能诱导鼻咽癌CNE-2 细胞凋亡,呈浓度和时间依赖性。Western blot 结果显示塞来昔布作用于鼻咽癌CNE-2 细胞后,Bcl -2 蛋白表达水平下调和Bax蛋白表达上调呈浓度依赖方式。结论 塞来昔布具有抑制人鼻咽癌CNE-2细胞增殖和诱导其凋亡的作用,其机制可能与下调Bcl-2 蛋白表达,上调Bax蛋白表达有关。     

塞来昔布对子宫内膜癌细胞增生和COX-2 mRNA表达的影响

 【目的 探讨塞来昔布对子宫内膜癌细胞HEC-1-B的作用及对COX-2 mRNA表达的影响。方法 采用细胞培养、MTT试验研究不同浓度的塞来昔布对人类子宫内膜癌细胞HEC-1-B生长的抑制作用，通过RT-PCR法检测塞来昔布作用后COX-2 mRNA表达的变化。结果 塞来昔布能够有效地抑制HEC-1-B细胞的生长，并呈一定的剂量和时间依赖关系，同时能够抑制其COX-2 mRNA表达，20 μmol／L和50 μmol／L塞来昔布对COX-2 mRNA表达的抑制率分别为25.92 ％和50.81％。结论 塞来昔布可能是通过降低COX-2 mRNA的表达而抑制子宫内膜癌细胞的生长。     

戊地昔布对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响

目的 观察戊地昔布（Valdecoxib）对COX-2高表达的人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响。方法 将体外培养HT-29细胞分为正常组（C）、药物处理组（V）及溶剂对照组（S）。采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测COX-2、caspase-3、cleaved caspase-3、Bcl-2、p38 MAPK、p-p38MAPK。结果 与正常组相比,药物处理组细胞凋亡明显增加(P<0.05),cleaved caspase-3和p-p38MAPK表达增高,Bax/Bcl-2比率明显升高(P<0.05)。Valdecoxib干预能够显著促进HT-29细胞凋亡,上调cleaved caspase-3和p-p38 MAPK的表达,增加Bax/Bcl-2比率。 结论 COX-2选择性抑制剂Valdecoxib能够促进HT-29细胞凋亡部分可能是通过激活p38MAPK信号通路而实现的。     

COX-2选择性抑制剂Celecoxib治疗胶质瘤的体内实验研究1231

目的　探讨选择性环氧化酶-2抑制剂 Celecoxib(塞来昔布)对 C6 胶质瘤生长抑制的体内实验研究。方法　将成瘤小鼠分为对照组和治疗组,应用肿瘤 HE 染色法、肿瘤生长曲线、前列腺素 E2(PGE2)检测及电镜检查方法观察Celecoxib对小鼠移植瘤的作用。结果　HE染色和电镜可见治疗组血管破坏、细胞坏死和凋亡,PGE2检测及肿瘤生长曲线分析有统计学意义,P <0.05。结论　Celecoxib能够抑制COX-2活性,降低PGE2合成,Celecoxib对 C6 胶质瘤生长具有抑制作用,对胶质瘤的治疗有重要意义。     

泰索帝联合塞来昔布对肺腺癌细胞增殖的影响

目的探讨泰索帝、塞来昔布单药以及联合用药对非小细胞肺癌细胞株A549增殖及凋亡的影响。方法以人NSCLC细胞株A549作为研究对象,采用MTT,免疫组化以及FCM检测泰索帝和塞来昔布对非小细胞肺癌A549细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期和COX-2蛋白表达的影响。结果泰索帝在体外对NSCLC细胞株A549的生长抑制作用呈剂量、时间依赖性,48h最高65%,最低10%,联合塞来昔布(12.5μmol/l,25μmol/l)可以提高泰索帝的抑制率;经高剂量塞来昔布组(>50μmol/l)处理的细胞COX-2蛋白表达呈阴性,而低剂量组(12.5μmol/l,25μmol/l)以及联合用药组细胞COX-2蛋白表达呈阳性;塞来昔布(12.5μmol/l,25μmol/l)作用后,G0/G1期细胞比例增加,S、G2/M期比例下降,联合泰索帝可以提高细胞的凋亡率。结论泰索帝在体外对非小细胞肺癌细胞株的生长有明显的抑制作用,联合塞来昔布可以提高抑制率,诱导细胞凋亡,影响细胞周期的分布,但不是通过影响细胞内环氧化酶-2蛋白表达这一途径实现。     

COX-2 选择性抑制剂Celecoxib 治疗胶质瘤的体内实验研究

 目的 探讨选择性环氧化酶-2抑制剂Celecoxib(塞来昔布)对C6胶质瘤生长抑制的体内实验研究。方法 将成瘤小鼠分为对照组和治疗组，应用肿瘤HE染色法、肿瘤生长曲线、前列腺素E2(PGB)检测及电镜检查方法观察Celecoxib对小鼠移植瘤的作用。结果 HE染色和电镜可见治疗组血管破坏、细胞坏死和凋亡，PGE2检测及肿瘤生长曲线分析有统计学意义，P<0．05。结论 Celecoxib能够抑制COX-2活性。降低PGB合成，Celecoxib对C6胶质瘤生长具有抑制作用，对胶质瘤的治疗有重要意义。     

塞来昔布联合5-Fu对人结肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

 目的 探讨选择性环氧化酶 2（Cyclooxygenase 2，Cox 2）抑制剂 塞来昔布（celecoxib）联合5 氟尿嘧啶（5 fluorouracil ，5 Fu）对实验性人结肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及作用机制。方法 建立人结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型，模型建立后32只实验裸鼠随机分为四组，分别给予塞来昔布及5 Fu药物干预后观察各组皮下移植瘤体积、瘤重和裸鼠实验前后的体重变化，计算抑瘤率。电镜观察细胞凋亡形态,原位凋亡染色检测凋亡指数（AI），免疫组化及Western blot印迹法检测细胞色素C、caspase 3及caspase 9表达。结果 塞来昔布干预组、5 Fu干预组和联合干预组肿瘤生长明显抑制，塞来昔布干预组、5 Fu干预组抑瘤率分别为27.81%和53.02%，联合干预组抑瘤率为78.37%（P<0.01）。干预组较对照组肿瘤细胞凋亡明显增加，干预组各组之间凋亡指数比较差异有统计学意义（P<0.01）。透射电镜下见干预组瘤细胞呈现明显凋亡形态改变，联合干预组凋亡表现尤为典型，对照组无明显凋亡形态改变。免疫组化及Western blot印迹法显示干预组其细胞色素C、caspase 3及caspase 9的表达明显高于对照组，且干预组各组之间比较其表达差异也有统计学意义（P<0.05）。结论 塞来昔布及5 Fu均具有明显的抗肿瘤作用，联合应用时具有协同作用，可显著抑制人结肠癌裸鼠皮下移植瘤的生长，其作用机制可能与上调细胞色素C、caspase 3及caspase 9蛋白表达、激活细胞色素C依赖性凋亡信号通路有关。     

塞来昔布对鼻咽癌CNE-2细胞增殖抑制的实验研究

目的 研究环氧化酶-2抑制剂塞来昔布对鼻咽癌细胞CNE-2增殖的影响。方法 采用MTT法测定细胞代谢率,以流式细胞术观察细胞DNA含量和凋亡的变化情况,免疫组化SP法检测COX-2的表达情况。结果 塞来昔布对CNE-2细胞有明显的增殖抑制作用,呈时间和剂量依赖性。细胞周期各时相DNA 含量改变明显,G₀～G₁期细胞显著升高 (由最初47.03%升至最高79.20%),而S、G₂～_M期细胞明显下降;凋亡率显著增高。塞来昔布明显下调细胞中COX-2蛋白的表达。结论 塞来昔布对鼻咽癌CNE-2 细胞有明显的增殖抑制作用,并且呈时间和剂量依赖性,使细胞聚集在G₀/G₁期,其机制涉及COX-2依赖性途径。     

二甲基塞来昔布抗肿瘤作用的研究进展

近年来,国内外大量文献报道,传统的非甾体抗炎药物塞来昔布可以通过COX-2依赖或非依赖机制在多种恶性肿瘤中发挥抗肿瘤作用。但是,塞来昔布通过抑制COX-2可以减少血管中前列环素的产生,从而导致血栓形成事件。而2,5-二甲基塞来昔布（DMC）作为塞来昔布的紧密衍生物,尽管缺乏COX-2抑制功能,显示出比塞来昔布高20%~50%的肿瘤抑制活性,并且可能避免心血管毒性,因此,可能更适合用于恶性肿瘤的治疗。其可以通过诱导内质网应激、抑制增殖、诱导细胞凋亡、影响细胞周期、抗血管生成以及增加药物敏感性等机制发挥肿瘤抑制活性。本文对二甲基塞来昔布抗肿瘤作用的研究进展进行了详尽综述,为相关研究提供参考。     

戊地昔布对人食管癌细胞凋亡及COX-2表达的影响

目的:探讨戊地昔布对人食管癌Eca109细胞系凋亡及环氧化酶-2表达的影响。方法:采用MTT法检测戊地昔布对人食管癌Eca109细胞生长的作用,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布,电子显微镜进一步检测细胞凋亡,RT-PCR及流式细胞术检测COX-2mRNA及蛋白的表达。结果:戊地昔布(25～400μmol/L)依时间和浓度依赖性抑制人食管癌Eca109细胞的生长,作用72h后,对细胞生长的抑制率可达85.95%,凋亡率由(2.38±0.42)%增加到(48.46±0.73)%;50～400μmol/L时增殖指数和S期的细胞比例则明显降低,G0/G1期的细胞比例增加;同时,低浓度的戊地昔布对COX-2mRNA及蛋白的表达均没有影响,随着浓度的增加明显抑制COX-2mRNA及蛋白的表达。结论:戊地昔布可诱导人食管癌Eca109细胞发生凋亡,其诱导凋亡的机制可能与抑制COX-2的表达有关。     

COX-2在B细胞非霍奇金淋巴瘤中的表达及临床意义

目的探讨环氧合酶．2（COX-2）在B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）中的表达及临床意义。方法采用免疫组化S-P法检测43例B—NHL和10例良性淋巴结病变组织中COX-2的表达。结果COX-2在B．NHL中的阳性表达率为55．8％（24／43）,明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。COX-2的表达与B—NHL的临床分期和病理组织学等级具有相关性：Ⅲ-Ⅳ期B-NHL患者COX-2蛋白的表达高于Ⅰ／Ⅱ期患者（P〈0．05）,侵袭性B—NHL患者COX-2蛋白的表达高于惰性组（P〈0．01）。COX-2阴性表达患者的5年生存率高于COX-2阳性表达患者（P〈0．05）。COX模型显示COX-2是一个独立的不良预后指标。结论COX-2在B-NHL的发生和发展中具有重要作用,并且是一个有用的预后指标。     

COX-2抑制剂对U937细胞中COX-2和VEGF蛋白表达的影响

[目的]探讨COX-2抑制剂对白血病细胞株U937中COX-2及VEGF表达的影响。[方法]培养U937细胞株,每次实验取12瓶5mlU937细胞液,分成3组,加入COX-2抑制剂试剂,使每组药物终浓度分别为5.0、10.0和50.0μmol/L。将3组细胞分别孵育6、12、24h后,观察不同药物终浓度组的细胞形态变化。采用流式细胞术检测COX-2和VEGF蛋白表达情况。[结果]COX-2抑制剂可抑制COX-2蛋白表达,并呈时间剂量依赖性。COX-2抑制剂作用后,U937细胞凋亡率增加,增殖受抑。[结论]COX-2抑制剂可抑制VEGF、COX-2表达,有希望用于治疗恶性血液病。     

选择性COX-2抑制剂Celecoxib对胃癌细胞增殖影响的探讨

目的:探讨选择性COX-2抑制剂Celecoxib对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响.方法:应用MTT法和FCM检测Celecoxib对胃癌SGC-7901细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期和COX-2蛋白和bcl-2蛋白表达的影响.结果:Celecoxib呈时间、剂量依赖性抑制胃癌SGC-7901细胞生长,72h细胞最高存活率为48.7%,最低为20.5%;COX-2蛋白含量由26.73±0.06降至5.79±1.44,bcl-2蛋白含量由2.76±0.14降至0.78±0.05,COX-2蛋白和bcl-2蛋白表达的降低呈浓度依赖性;随着药物浓度的增高,细胞凋亡率由3.0%增加到33.0%;G0/G1期细胞比例增加到(87.29±1.34)%,S期和G2/M期细胞比例分别降低到(8.91±0.78)%、(3.80±0.55)%.结论:Celecoxib能够诱导胃癌SGC-7901细胞的凋亡,影响细胞周期的分布,从而有效地抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖;Celecoxib诱导胃癌SGC-7901细胞的凋亡可能主要通过抑制COX-2的生物活性来实现,并与bcl-2蛋白表达的下调有关.     

Trx-1和COX-2在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨硫氧化还原蛋白1(thioredoxin,Trx-1)和COX-2在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义。方法免疫组织化学方法检测63例非小细胞肺癌组织和20例癌旁正常肺组织中Trx-1和COX-2的表达。结果63例非小细胞肺癌组织中Trx-1和COX-2均呈高表达,分别为63.5%（40/63）和59.1%（37/63）,20例正常肺组织Trx-1阳性3例,COX-2阳性2例,差异具有统计学意义(P<005)。Trx-1在低分化癌组织中阳性表达率高于中高分化癌组织,差异具有统计学意义(P<0.05);在不同TNM分期的非小细胞肺癌组织中,阳性表达率差异具有统计学意义(P< 0.05),在有淋巴结转移的癌组织中阳性表达率高于无淋巴结转移者,差异具有统计学意义(P<0.05)。COX-2的表达与TNM分期及淋巴结转移差异具有统计学意义(P<0.05)。结论Trx-1和COX-2的表达与非小细胞肺癌患者预后密切相关。     

结肠癌中COX-2对VEGF-C表达的影响

目的:探讨COX-2和血管内皮生长因子C(VEGF-C)在人结肠癌组织中的表达及二者之间的关系.方法:首先选择56例结肠癌标本,应用免疫组织化学染色方法,检测COX-2和VEGF-C在人结肠癌组织中的表达,对两者之间的相关性进行统计学分析;其次以COX-2诱导剂PMA及特异抑制剂塞来昔布作为干预因素,检测单独PMA孵育和PMA+塞来昔布联合孵育后,结肠癌细胞HCT116中VEGF-C mRNA及蛋白表达的变化.结果:COX-2在结肠癌组织中的阳性表达率为78.6%,VEGF-C结肠癌组织中的阳性表达率为65.9%.COX-2阳性的结肠癌组织中VEGF-C的阳性率高于COX-2阴性组中VEGF-C阳性率(P＜0.05),而且COX-2表达与VEGF-C表达呈正相关.结肠癌细胞HCT116中当使用COX-2表达诱导剂PMA后,VEGF-C的表达也相应升高;而加入COX-2的特异抑制剂后,该效应也相应被削弱.结论:COX-2可通过诱导结肠癌组织中VEGF-C的表达促进结肠癌的淋巴结转移.     

舒林酸、尼美舒利对人胃癌SGC-7901 细胞增殖及COX-2 、NF-κB 表达的抑制作用

 目的 探讨舒林酸、尼美舒利对人胃癌SGC-7901细胞增殖及COX-2、NF-κB表达的影响. 方法 对人胃癌SGC-7901细胞采用细胞培养,MTT法检测不同浓度舒林酸、尼美舒利对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用,免疫组化、western blot方法检测药物对COX-2、NF-κB表达的影响. 结果 舒林酸、尼美舒利可以抑制人胃癌SGC-7901细胞生长并具有浓度、时间依赖性;与阴性对照组相比,药物作用48h后尼美舒利100、200μmol/L组,舒林酸0.6、1.2mmol/L组COX-2、NF-κB蛋白表达明显减弱并具有剂量依赖性（P＜0.05）,COX-2、NF-κB之间正相关（P＜0.05）. 结论 舒林酸、尼美舒利可以抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,抑制NF-κB, COX-2的蛋白表达在二者抑制肿瘤机制中可能具有一定作用.     

食管鳞状细胞癌CD40COX-2 表达及其与血管生成关系的研究*

目的:探讨CD40和COX-2 在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况、临床病理意义及其与肿瘤血管生成的关系。方法:采用免疫组织化学方法研究79例食管癌和28例正常食管黏膜上皮组织中CD40和COX-2 的表达情况,根据CD34表达计算食管癌组织平均微血管密度（MVD）;分析CD40、COX-2 的表达与食管癌发生部位、肿瘤大小、分化程度、MVD及淋巴结转移的关系。同时采用免疫细胞化学染色及Western Blot方法检测食管癌Eca109 细胞和原代培养的正常食管上皮细胞CD40和COX-2 在蛋白水平上表达的差异。结果:免疫组化结果表明,食管癌组织中CD40和COX-2 的阳性表达率均明显高于正常食管鳞状上皮（54.43% vs 10.71% ,69.62% vs 17.86% ,P 均<0.05）。CD40在食管癌中的表达与淋巴结转移有关,伴有淋巴结转移者CD40阳性表达率明显高于无淋巴结转移者（70.37% vs 46.15% ,P<0.05）,但CD40表达与其他临床病理特征无明显相关。COX-2 在食管癌中的阳性表达与肿瘤大小、部位、分化程度、有无淋巴结转移等均无明显相关（P>0.05）。 CD40与COX-2 在食管癌组织中表达明显相关（P<0.05）,相关系数（Φ）为0.446。食管癌组织中MVD明显高于正常食管组织（25.02± 5.52vs 12.09± 4.55,P<0.05）。 CD40和COX-2 阳性表达组食管癌组织MVD明显高于阴性表达组（26.37± 6.02vs 22.58± 5.25,P<0.05）。 体外研究结果表明,食管癌Eca109 细胞CD40和COX-2 表达均高于正常食管上皮细胞（P<0.05）。 结论:CD40表达与食管鳞状细胞癌的发生、发展密切相关,CD40可能通过影响COX-2 的表达促进食管癌组织微血管生成。      

直肠癌HER-2、COX-2和血清CEA表达及三者之间的相关性研究

目的研究HER-2、COX-2和血清CEA在直肠癌中的表达及三者之间的相关性,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化Envision二步法检测HER-2、COX-2蛋白在15例正常直肠癌旁组织、15例直肠腺瘤、50例直肠癌中的表达水平,采用化学发光免疫法测定术前50例直肠癌患者血清CEA值,分析HER-2、COX-2和血清CEA表达水平与临床病理因素的关系及三者之间的相关性。结果HER-2蛋白在正常直肠癌旁组织、直肠腺瘤及直肠癌中阳性表达率分别为0%、0%、6%,差异无显著性（P〉0.05）;COX-2蛋白在正常直肠癌旁组织、直肠腺瘤及直肠癌中阳性表达率分别为13.3%、40.0%、84.0%,差异显著（P〈0.01）。50例直肠癌中血清CEA 26例高表达,24例低表达。直肠癌组织中HER-2蛋白表达与病理特点间无相关性;HER-2蛋白表达与COX-2蛋白表达、血清CEA之间均未见相关性（r=0.158,P〉0.05;r=0.074,P〉0.05）;而COX-2蛋白阳性表达与淋巴结转移及Dukes分期相关（P〈0.05）;血清CEA表达与Dukes分期相关（P〈0.05）。血清CEA与COX-2蛋白表达水平之间呈正相关（r=0.292,P〈0.05）。结论HER-2蛋白在直肠癌中阳性表达率低,HER-2蛋白的表达在直肠癌中的作用可能很小,与血清CEA和COX-2无相关性,与直肠癌预后无关。COX-2和血清CEA呈相关性,均与直肠癌预后有关,两者在直肠癌发生、发展中可能存在某种联系。