Ph+的慢性粒细胞白血病中衍生9号染色体部分序列缺失的研究进展

Ph染色体是慢性粒细胞白血病(CML)特有的细胞遗传学标志。该易位所导致的BCR／ABL 融合基因在CML的发病中起关键作用。然而,近年来应用荧光原位杂交技术发现10％～15％的CML在衍生9号染色体易位断裂点附近有较大的序列缺失。该种缺失和Ph易位同时发生,并且和CML的不良预后密切相关,是一项有价值的预后指标。本文就此作一综述。     

138例慢性髓系白血病衍生9号染色体缺失的研究

为研究慢性髓系白血病（CML）患者衍生9号染色体[der（9）]部分序列缺失情况,对138例CML患者的骨髓应用R显带技术进行核型分析,并应用bcr-abll双色双融合DNA探针荧光原位杂交（FISH）检测der（9）部分序列缺失。结果表明,138例核型检查中Ph阳性126例（91．3％）,其中典型Ph染色体易位122例;Ph阴性12例（8．7％）。FISH检测发现23例（16．7％）der（9）缺失。典型Ph染色体易位122例中20例为典型Ph染色体易位,占典型Ph染色体易位患者的16．4％,变易Ph易位4例中3例为变异易位,占变异易位患者的75％。变异易位患者中的der（9）缺失发生率明显高于典型易位患者;其中慢性期20例,占慢性期的17．2％;急变期3例,占急变期的17．6％,慢性期与急变期患者der（9）缺失的发生率无显著性差异（P〉0．05）。结论：CML患者der（9）部分缺失的发生率为16．7％,FISH技术可有效检测der（9）缺失,der（9）缺失的发生率与cML的分期无相关性。     

Ph染色体阳性慢性粒细胞白血病衍生9号染色体缺失的FISH研究

目的分析105例Ph^＋慢性粒细胞白血病（CML）患者衍生9号染色体[der（9）]部分序列的缺失（以下简称缺失）情况，同时探讨该缺失与易位类型及临床预后的联系。方法所有患者均采用骨髓细胞直接法和（或）短期培养法制备染色体，采用R显带技术进行核型分析。应用bcr-abl双色双融合DNA探针对骨髓间期细胞进行荧光原位杂交（FISH）检测以发现有无der（9）部分序列的缺失，随访患者并收集临床资料。结果105例Ph^＋CML患者中，典型Ph染色体易位76例，变异Ph染色体易位29例。16例（15．2％）患者伴有缺失，其中典型Ph染色体易位12例（占典型易位总数的15．8％），变异Ph染色体易位4例（占变异易位总数的13．7％）。变异Ph染色体易位与典型Ph染色体易位患者的缺失发生率差异无统计学意义（P〉0．05）。在伴有缺失的患者中，所有Ph^＋中期和间期细胞均伴有缺失，只有伴有5’abl和3’bcr同时缺失的3例患者同时存在单纯5’abl或3’bcr缺失的间期细胞杂合。伴有缺失的患者同不伴有缺失的患者在外周血白细胞计数、血红蛋白含量及血小板计数上差异无统计学意义。随访结果表明，伴有缺失的患者的中位生存期（34个月）比不伴有缺失的患者的中位生存期（76个月）明显缩短，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论der（9）缺失在我们研究的Ph^＋CML患者中的发生率约为1／6．该类患者中位生存期较短．提示它是一个不良的预后指标。     

135例非单纯Ph染色体的慢性髓系白血病细胞遗传学分析

本研究探讨135例非单纯Ph染色体慢性髓系白血病（CML）的染色体检查结果并进行细胞遗传学分析：135例CML染色体均采用骨髓细胞直接法和／或短期培养法制备，应用R显带技术对其进行显带分析。结果表明：经染色体检测的1210例的CML中135例有非单纯Ph染色体异常。本组135例非单纯Ph染色体CML中，慢性期87例、加速期21例、急变期27例.87例慢性期患者中，14例伴简单变异易位，22例伴复杂变异易位，其余的伴其他染色体异常，其中伴8号染色体三体4例，伴双Ph4例，伴i（17）5例；在21例加速期患者中，伴8号染色体三体4例，伴双Ph4例，伴i（17）3例；在27例急变期患者中，2例伴简单变异易位，3例伴复杂变异易位，其余的伴其他染色体异常，其中伴8号染色体三体5例，伴双Ph5例，伴i（17）2例。本组常见额外染色体异常检出率高低依次为＋Ph、＋8、i（17）、-Y、＋19和＋21。本组有16例伴简单变异易位，25例伴复杂变异易位。结论：CML是起源于多能干细胞的恶性血液病．染色体核型分析对CML的诊断、预后、发病机制的探讨和治疗方案的选择都具有重要的价值。     

慢性粒细胞白血病患者Ph染色体变异易位的细胞遗传学特征与荧光原位杂交研究

本研究探讨慢性粒细胞白血病(CML)中变异Ph染色体易位的细胞遗传学特征并比较双色单融合(DC-SF)与双色双融合(DCDF)bcr／abl探针荧光原位杂交技术(FISH)在变异易位CML中的应用价值。应用常规细胞遗传学方法分析我院42例CML变异Ph易位患者，其中9例进行DC-SF-FISH和1l例进行DC-DF-FISH研究。结果表明：在642例Ph阳性CML中变异易位42例(6.5％)，简单变异易位42.9％(18／42)，复杂变异易位54.8％(23／42)，遮蔽的或隐匿的Ph易位1例。除4，6号染色体外，其余染色体均被累及。4种类型变异易位分别出现于至少2个病例中。变异易位伴附加异常15例(35.7％)。FISH检测bcr／abl阳性19例(95％)，阴性1例。DC-DF-FISH显示除1例患者部分细胞(8.8％)能检测到abl／bcr融合信号外，其他患者皆缺乏该融合信号。但在易位后的9号和参与变异易位的另外染色体上分别可以见到abl和bcr基因信号。DC-SF-FISH不能观察到信号的变异特征。结论：CML变异Ph易位广泛累及除9，22外其他染色体。部分类型属重现性异常；FISH检测能给予精确的分子诊断．而DC-DF-FISH可提供直观的、准确的分子变异特征分析。     

25例伴复杂变异易位的慢性粒细胞白血病细胞遗传学分析

慢性粒细胞白血病（CML）是起源于多能干细胞的恶性血液病.染色体核型分析对CML的诊断、预后和发病机制的探讨都具有重要的价值.Ph染色体是CML的标志性染色体,95%的CML有该染色体.约5%CML可有变异的Ph染色体,形态上将其分为简单型和复杂型.迄今文献中已报道伴变异易位的CML逾300例.国内亦有相关报道.但对伴复杂变异易位的CML报道不多.现将我院近十年来伴复杂变异易位的25例CML患者的分析结果报告如下.     

荧光原位杂交技术检测BCR/ABL融合基因的研究进展

<正>1960年Nowell和Hungefford[1]在美国费城(Philadelphia)的2例CML患者细胞中第一次发现了异常的小型染色体命名为Ph染色体,1973年Rowley[2]通过显带的方法发现Ph染色体是由于9号和22号染色体发生易位产生,随着分子生物学的发展,Ph染色体的分子水平及其致病机理也日渐明确,t(9;22)(q 34;q 11)易位的结果是使位于9号染色体长臂3     

一例der（22）缺失而存在der（9）的慢性粒细胞白血病的实验室分析

慢性粒细胞白血病（CML）是一种起源于多能造血干细胞的克隆性恶性血液病。其细胞遗传学特征是9号和22号染色体的相互易位，即Ph染色体。该易位导致BCR／ABL融合基因，后者在CML的发病中起着极其重要的作用。     

362例慢性髓系白血病的细胞遗传学分析

为探讨慢性髓系白血病（CML）的细胞遗传学特点及临床意义,对362例CML患者采用24小时短期培养法制备骨髓染色体,用R显带技术进行染色体核型分析。将患者分为慢性期和急变期两组。结果表明：附加染色体异常、变异易位、Ph（-）bcr／abl（＋）并伴有染色体异常者在两组中的比例分别为：70／268（26．1％）、19／268（7．1％）、4／268（1．5％）;50／94（53．2％）、8／94（8．5％）、4／94、（4．3％）。362例标本中检出Ph阳性标本324例（89．5％）,其中典型t（9;22）（q34;q11）易位297例（91．7％）,变异易位27例（8．3％）。在27例变异易位中单纯变异易位13例,复杂变异易位13例,隐匿Ph1例。362例标本中共发现120例特殊核型异常。对上述异常分析显示,出现频率较高的数目异常有：＋Ph：26例（21．7％）;＋8：12例（10．0％）;＋21：12例（10．0％）;＋19：9例（7．5％）。结构异常中以i（17q）最多,有16例（13．3％）。结论：与慢性期相比,急变期附加染色体、变异易位等异常率均明显增加,染色体核型分析有助于疾病进展的判断。     

双色双融合荧光原位杂交探针检测慢性髓系白血病Bcr／Ab1基因重排的研究

本研究探讨双色双融合荧光原位杂交技术（DC-DF-FISH）在慢性髓系白血病（CML）中的应用价值,应用常规R-显带技术、DC-DF-FISH、RT—PCR技术检测41例CML患者的染色体核型及bcr／abl融合基因。结果表明,对于初诊CML的18例患者,R-显带显示Ph染色体阳性检出率为94．4％（17／18）,DC—DF—FISH阳性检出率也为94．4％（17／18）,对于治疗后CML的18例患者,R-显带显示14例有可分析分裂相,其中有ll例存在Ph染色体,阳性检出率为78．6％（11／14）;而用DC—DF—FISH检测治疗后患者的阳性率为94．4％（17／18）;移植后的5例患者R-显带均未检出Ph染色体,而FISH检测出1例bcr／abl基因阳性,RT-PCR证实了FISH的检测结论,但在移植患者中,RT-PCR无阳性发现。结论：双色双融合荧光原位杂交技术具有高度的准确性、可靠性,是检测CML患者bcr／abl基因重排的可靠方法,适用于CML的诊断、疗效判定及微小残留病灶的检测。     

BCR／ABLDCDF—FISH信号特征与染色体核型的关系及其在慢性粒细胞白血病中的意义

目的探讨慢性粒细胞白血病（CML）BCR／ABL DCCF—FISH的信号特点及其与染色体核型的关系。结果使用BCR／ABL的DCDF探针对65例慢性粒细胞白血病骨髓标本进行荧光原位杂交及染色体核型检查。结果65例CML核型43例Ph阳性,1例阴性,其余21例未行核性检查或无可分析分裂相;FISH结果65例均为BCR／ABL阳性,其中9例伴ASS基因缺失,5例复杂易位,1例＋Ph伴ASS基因缺失。结论传统核型与DCDF-FISH,应互相结合,方可对遗传学特征作出更准确分析。     

慢性粒细胞白血病Ph染色体R显带分析与bcl／abl mRNA检测

慢性粒细胞白血病（CML）的细胞遗传特征是具有Ph染色体．即t（9；22）（q34；q11），其结果在分子水平上形成bcl／abl融合基因，该基因表达的蛋白能使细胞调控系统发生紊乱和抑制细胞凋亡。这可能是正常细胞转化为白血病细胞的重要环节。据报道。在95％以上的CML患者中可以检测到Ph染色体。因此。在CML患者的诊断和治疗监测中，Ph染色体分析和bcl／abl融合基因检测具有重要价值。为进一步明确CML患者中Ph染色体与bcl／abl融合基因表达之间的关系，     

双色双融合荧光原位杂交探针检测慢性髓系白血病Bcr/Abl基因重排的研究

本研究探讨双色双融合荧光原位杂交技术(DC-DF-FISH)在慢性髓系白血病(CML)中的应用价值,应用常规R-显带技术、DC-DF-FISH、RT-PCR技术检测41例CML患者的染色体核型及bcr/abl融合基因.结果表明,对于初诊CML的18例患者,R-显带显示Ph染色体阳性检出率为94.4%(17/18),DC-DF-FISH阳性检出率也为94.4%(17/18),对于治疗后CML的18例患者,R-显带显示14例有可分析分裂相,其中有11例存在Ph染色体,阳性检出率为78.6%(11/14);而用DC-DF-FISH检测治疗后患者的阳性率为94.4%(17/18);移植后的5例患者R-显带均未检出Ph染色体,而FISH检测出1例bcr/abl基因阳性,RT-PCR证实了FISH的检测结论,但在移植患者中,RT-PCR无阳性发现.结论:双色双融合荧光原位杂交技术具有高度的准确性、可靠性,是检测CML患者bcr/abl基因重排的可靠方法,适用于CML的诊断、疗效判定及微小残留病灶的检测.     

荧光原位杂交和常规细胞遗传学在慢性粒细胞白血病研究中的应用

目的：应用荧光原位杂交（FISH）和染色体核型分析技术,探讨慢性粒细胞白血病（CML）细胞遗传学特点与临床预后的相关性。方法：采用骨髓细胞直接法和（或）短期培养法制备染色体标本,采用热变性姬姆萨显带技术（RHG）进行染色体核型分析。荧光染色体原位杂交技术检测40例CML患者的BCR／ABL融合基因。回顾分析282例CML的临床及细胞遗传学资料。结果：常规细胞遗传学（CC）分析表明,282例患者中268例Ph染色体阳性,占95．04％;14例Ph染色体阴性,占4．96％。其中250例Ph阳性细胞为100％,占90．32％。12例Ph阳性细胞为30％～99％,占4．48％,核型显示正常与Ph嵌合状态。6例核型为复杂变异异位,占2．24％。41倒除Ph染色体外,还出现额外染色体异常,占15．30％,分别为双Ph,＋8,＋22,-Y,i（17q）等,其中28例为加速或急变患者,占68．29％。应用FISH技术检测,BCR／ABL融合基因阳性34例（舍14例Ph染色体阴性中的8例）,占85％;BCR／ABL阴性6例,占15％。结论：在常规细胞遗传学分析的基础上,选用分子遗传学FISH技术可以明显提高染色体异常的检出率及准确率。细胞遗传学对于CML的正确诊断、指导临床治疗、判断预后具有重要价值。     

119例慢性髓细胞白血病急变期核型分析

为了探讨慢性髓细胞白血病急变期（CML-BC）核型变化规律及意义，应用R显带技术对119例CML-BC患者的核型资料进行分析，并在其中随机选出28例以荧光原位杂交法（FlSH）检测衍生9号染色体[der（9）]是否缺失．结果表明：124例核型检查中Ph阴性11例（8．9％），P11阳性113例（91．1％），其中典型易位104例（83．9％），单纯变异易位4例（3．2％），复杂变异易位5例（4．0％）；Ph阴性CML-BC中72．6％伴有附加染色体异常，主要类型是：i（17q）、＋14，Ph阳性者72．3％伴有附加染色体异常，主要类型是：＋Ph、＋8、i（17q）；Ph阴性CML-BC急变时间为2-66月，平均29．0月，Ph阳性者急变时间为1-127月，平均34．2月，两组比较无统计学差异（P〉0．05）；FlSH检测发现5例（5／28，17．9％）der（9）缺失。结论：慢性髓细胞白血病急变期附加染色体异常多见，FlSH技术可有效检测der（9）缺失．     

无血清培养慢性粒细胞白血病树突状细胞的方法及其杀瘤效应研究

目的无血清培养慢性粒细胞白血病（CML）树突状细胞（DCs）并观察其杀瘤效应。方法小牛血清（FCS）、无血清（SFM）及自体血清分别培养CML—DCs，以SCF，GM—CSF，TNF—α，IL-4（A）与GM—CSF，TNF—α，IL-4（B）两组不同的细胞因子作对照。结果SFM同FCS培养体系相比差异无统计学意义（P〉0．05），与自体血清体系相比差异具有显著性统计学意义（P〈0．01）。CML—DCs HLA—DR高表达（〉50％），CD80，CD83舜口CD86表达比例不高（〈50％）。CML—DCs能刺激正常人T淋巴细胞增殖，但增殖倍数不高。经10～12d培养，5例CML—DCs行染色体G显带分析，含Ph染色体比例分别为100oA3例，98％及60％各1例，同培养前标本携带Ph比例基本吻合。在效靶比40：1，以CML—DCs同自身T细胞，自体Ph叶。单个核细胞（MNCs）共孵育，测其杀伤率为（38．5士6．5）％。结论建立了CML—DCs无血清培养方法。CML—DCs携带Ph染色体，能刺激自体T细胞杀伤自身白血病细胞。     

慢性粒细胞白血病骨髓细胞染色体畸变的临床应用

目的 了解慢性粒细胞白血病(CML)骨髓细胞染色体畸变与临床的联系.方法 用66例骨髓细胞培养,并对检出的54例慢性粒细胞进行白血病的骨髓细胞染色体检查.结果 检出费城染色体(Ph1染色体)阳性患者51例,其中标准型Ph1染色体畸变45例,标准型Ph1伴其他染色体易位者2例,双Ph1染色体者2例,变异Ph1染色体者2例...     

间期荧光原位杂交技术在慢性粒细胞白血病诊断中的应用价值

目的探讨间期荧光原位杂交技术（I—FISH）在慢性粒细胞白血病（CML）诊断中的应用价值。方法同时采用核型分析、逆转录-巢式聚合酶链反应（PCR）以及I—FISH3种检测方法，对3例临床表现、细胞形态学和细胞化学提示CML可能的患者进行检测。结果核型分析均未发现Ph染色体和其他异常，PCR也均为阴性结果，而I—FISH测得3名患者骨髓中含融合基因的细胞百分率分别为59.0％、71.8％、33.7％，远高于阳性判断值。结论对于仅发生小片断易位或不产生主要bcr／abl融合基因型的慢性粒细胞白血病患者，I—FISH是一种很有价值的确诊手段。     

伴复杂核型异常的髓系恶性血液病8号染色体异常分析

为研究伴复杂核型异常（complex chromosome abnormalities，CCA）的髓系恶性血液病的8号染色体异常，采用常规染色体分析和多重荧光原位杂交技术检测81例伴CCA的髓系恶性血液病患者的染色体异常，其中急性髓系白血病（AML）25例、慢性髓系白血病（CML）35例和骨髓增生异常综合征（MDS）21例。结果表明：81例标本中CCA涉及所有染色体，而8号染色体异常发生率为35．8％（29／81），其中AML为56％（14／25）、CML为28．6％（10／35）、MDS为23．8％（5／21），CML加速期、急变期发生率分别为20％（1／5）、33．3％（9／27）。29例伴8号染色体异常的髓系恶性血液病中有15例为非平衡易位，占51．7％。结论：8号染色体异常是伴CCA的髓系恶性血液病中常见的染色体异常，可能与疾病进展相关，多为不平衡性易位。     

404例慢性粒细胞白血病的染色体核型研究

目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)不同时期骨髓细胞染色体核型的变化特点及临床意义。方法采用短期培养法制备骨髓细胞染色体标本,应用R显带技术对该院404例CML患者的骨髓染色体核型进行回顾性分析。结果 404例患者中Ph染色体阳性376例(93.1%),Ph染色体阴性但bcr/abl阳性28例(6.9%)。376例Ph染色体阳性患者中,具有典型Ph易位者360例,具有变异易位者16例(复杂变异易位14例,简单变异易位2例)。16例变异易位患者慢性期10例,急变期6例。伴额外染色体异常者80例(19.8%),其中慢性期32例,占CML慢性期患者(304例)的10.5%,以-Y、+8为主;急变期48例,占急变期患者(100例)的48%,以i(17)、+8、+Ph最多见。CML急变期伴额外染色体异常的比例高于慢性期(P0.01)。结论 Ph染色体是CML的细胞遗传学标志,Ph染色体可表现为典型易位和变异易位,变异易位在慢性期和急变期都可出现。CML急变期伴额外染色体异常的比例高于慢性期,CML病程出现额外染色体异常预示病程进入加速或急变期。