采用化学药物联合致小鼠血虚模型评价四物汤及其配伍组成的作用特点

目的:研究四物汤组方对乙酰苯肼及环磷酰胺致血L虚模型小鼠的影响,探讨其组方特点和作用机制.方法:用乙酰苯肼和环磷酰胺造小鼠血虚模型,分别采用全白动血细胞分析仪测定血虚小鼠外周血象,称重法测定肝脾指数,定磷法测定红细胞膜Na+-K+-ATP酶,Ca2+ -Mg2 -ATP酶活性,流式细胞仪检测骨髓细胞周期.结果:其中药味当归、白芍对模型小鼠的外周血象、肝脾指数、骨髓细胞周期均有较显著的恢复作用,熟地对红细胞膜Na+ -K+ -ATP酶活性的影响也较显著;含当归的药对对模型小鼠的肝脾指数、红细胞膜Na+ -K+ -ATP酶活性的影响则较显著;含白芍的药组和含当归的药组则分别对肝指数和红细胞膜Na+ -K+ -ATP酶活性有较显著影响;各给药组均能促进Go/G1期阻滞的骨髓细胞向S期转化.结论:四物汤及其组方药对化学损伤血虚模型小鼠均有不同程度的保护作用,作用途径各有特点,可见当归和白芍对血虚症状的改善有重要的作用,是四物汤发挥理血调经功效的重要贡献药味.     

胶艾汤与四物汤对血虚模型大鼠补血功效的比较研究

目的比较胶艾汤和四物汤对血虚模型大鼠外周血象、免疫器官指数和红细胞膜能量代谢酶活力的影响,探讨胶艾汤衍化为四物汤后补血功效变化的机制。方法每天于大鼠眼底静脉丛放血5 m L/kg,连续放血12 d,复制大鼠血虚模型;同时造模大鼠分别ig给予不同剂量的胶艾汤、四物汤、胶三汤及胶四汤,复方阿胶浆为阳性对照,各组均给药12 d;检测各组大鼠红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、血小板(PLT)、免疫器官指数、红细胞膜Ca2+,Mg2+-ATP和Na+,K+-ATP酶活力。结果与对照组比较,模型组大鼠RBC、HGB、HCT、PLT明显降低(P0.01),红细胞膜Ca2+,Mg2+-ATP酶和Na+,K+-ATP酶活力明显降低(P0.05、0.01),脾脏和胸腺指数明显降低(P0.05)。与模型组比较,胶艾汤高、中剂量组可明显升高大鼠RBC、PLT、HCT、HGB(P0.05、0.01),升高脾脏和胸腺指数(P0.05、0.01),增强Ca2+,Mg2+-ATP酶和Na+,K+-ATP酶活力(P0.05、0.01);四物汤组可明显升高大鼠RBC、HCT、PLT(P0.05),升高脾脏和胸腺指数(P0.05、0.01),增强Ca2+,Mg2+-ATP酶活力(P0.05)。四物汤组对RBC和Na+,K+-ATP酶活力改善作用明显弱于胶艾汤中剂量组。结论胶艾汤和四物汤均具有不同程度的补血作用,胶艾汤衍化为四物汤后补血作用具有减弱的趋势。     

甘肃不同产地当归对小鼠肝脏功能及组织形态影响的比较研究

目的:比较甘肃不同产地当归对小鼠肝脏功能及组织形态的影响.方法:将78只小鼠随机分为生理盐水组、岷县当归组、渭源当归组、临夏当归组、礼县当归组、云南当归组共6组,每组13只;各药物组分别按18.75μL/g剂量灌胃相应药物,生理盐水组按18.75 μL/g剂量灌胃生理盐水,1次/d,连续22 d.检测血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)、白蛋白(ALB),肝脏组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)及肝脏病理组织学改变.结果:甘肃各当归组小鼠血清中GPT的活性均较生理盐水组降低,差别有统计学意义(P＜0.01);岷县、渭源、临夏当归弱于云南当归,差别有统计学意义(P＜0.01).甘肃岷县、渭源、礼县当归组小鼠血清中GOT的活性均较生理盐水组降低,差别有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).甘肃各当归组小鼠血清中LDH的活性均较生理盐水组低,差别有统计学意义(P＜0.01);甘肃各当归组作用强于云南当归,差别有统计学意义(P＜0.01).甘肃各当归组小鼠肝细胞GSH-PX的活性均较生理盐水组高,差别有统计学意义(P ＜0.05或P＜0.01);岷县、渭源当归弱于云南当归,差别有统计学意义(P ＜0.05或P＜0.01).甘肃各当归组小鼠肝细胞MDA的含量均较生理盐水组低,差别有统计学意义(P＜0.01);渭源、临夏、礼县当归强于云南当归,差别有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).肝脏组织形态未见异常改变.结论:甘肃当归均能提高小鼠肝脏抗氧化、蛋白质合成及减少过氧化产物的能力,综合比较礼县当归作用较强.     

赤白芍对血虚证动物模型补血作用及机制研究

目的:探讨不同基源和同基源赤、白芍对血虚证动物模型外周血象及Na+-K+-ATP酶活性的影响,观察其补血作用。方法:应用综合放血制备血虚证小鼠模型,检测各组动物外周血常规及Na+-K+-ATP酶活性。结果:血虚证动物模型外周血象及Na+-K+-ATP酶活性均有显著变化。当归(2.4 g/kg)、野生芍药(2.4 g/kg)对血虚模型降低的RBC有显著升高作用,同时野生芍药(2.4 g/kg)对降低的HGB也具有显著升高作用。结论:当归(2.4 g/kg)、野生芍药(2.4 g/kg)对血虚模型有明显补血作用,其作用机制可能与增强红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性相关。     

符合中医体征的血虚便秘小鼠模型的建立与评价

目的:建立血虚便秘小鼠模型,评价模型小鼠的体征并探讨模型复制条件。方法:将64只SPF级KM小鼠随机分为正常对照组、血虚组、便秘组和血虚便秘组,每组16只。血虚组皮下注射乙酰苯肼60μg/g+腹腔注射环磷酰胺40μg/g,便秘组灌胃复方地芬诺酯25μg/g,血虚便秘组皮下注射乙酰苯肼60μg/g+腹腔注射环磷酰胺40μg/g+灌胃复方地芬诺酯25μg/g,正常对照组皮下注射+腹腔注射+灌胃等量生理盐水,造模连续28 d。观察小鼠状态,检测体质量、血常规、粪便性状、小肠推进率(SIPR)、首粒黑便排出时间(TFBF)、粪便含水量(FWC)和结肠含水量(CWC);结肠组织进行HE和AB-PAS染色,观察组织形态学改变。结果:与正常对照组对比,血虚组随造模时间延长,体质量增长缓慢,WBC、RBC、HGB和HCT均显著降低(P0.05或P0.01),粪便质软、SIPR、TFBF、FWC和CWC均无显著性变化(P0.05);便秘组体质量增长稍慢,WBC、RBC、HGB和HCT无显著变化(P0.05);血虚便秘组体质量增长缓慢,WBC、RBC、HGB和HCT均显著降低(P0.05或P0.01);便秘组和血虚便秘组小鼠粪便质硬,SIPR显著减慢、TFBF显著延长、FWC和CWC均显著下降(P0.05或P0.01);血虚组小鼠结肠组织形态和黏液分泌与正常对照组相似(P0.05),便秘和血虚便秘组小鼠结肠黏膜层和大肠腺萎缩,黏液分泌减少(P0.05)。结论:乙酰苯肼、环磷酰胺联合复方地芬诺酯能建立符合中医体征的血虚便秘小鼠模型,造模方法可控、简便、易行。     

胶艾汤对血虚模型大鼠补血作用的有效部位筛选

目的比较胶艾汤不同溶剂提取部位对血虚模型大鼠外周血象、免疫器官指数、白细胞介素2(IL-2)和促红细胞生成素(EPO)水平以及红细胞膜能量代谢酶活性的影响,筛选胶艾汤补血作用的有效部位。方法采取每天于眼底静脉丛放血5 mL/kg,连续放血12d的方法,复制大鼠血虚模型;造模同时各组动物分別ig给予胶艾汤及其正丁醉、石油醚、醋酸乙酯、水部位浸膏(剂量均为生药量12g/kg),以复方阿胶浆为阳性对照。造模第12天检测各组大鼠外周血红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、血小板计数(PLT),计算脾脏和胸腺器官指数。检测血清中IL-2和EPO水平,检测全血红细胞膜能量代谢酶Na~+,K~+-ATP及Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性,UPLC法初步分析胶艾汤不同提取部位的化学成分差异。结果与对照组比较,模型组大鼠RBC、HGB、HCT、PLT、胸腺指数以及IL-2水平明显降低,Na~+,K~+-ATP酶和Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性明显减弱,脾脏指数及EPO水平明显升高,表明血虚模型复制成功。与模型组比较,胶艾汤正丁醇组可明显升高HCT、RBC、HGB、PLT(P0.05、0.01);降低脾脏指数及EPO水平(P0.05、0.01);明显升高胸腺指数、IL-2水平(P0.01),升高红细胞膜Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶及Na~+,K~+-ATP酶活性(P0.05、0.01)。石油醚组可明显升高PLT及IL-2水平(P0.01),降低EPO水平及脾脏指数(P0.05、0.01)。醋酸乙酯组可明显降低脾脏指数及EPO水平(P0.01),升高红细胞膜Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性(P0.05)。水部位组可明显升高PLT(P0.05),降低EPO水平(P0.01)。胶艾汤正丁醇提取部位中检测到其他提取部位不含有的咖啡酸、苯甲酰芍药苷、甘草酸铵,且正丁醇提取部位中没食子酸、原儿茶酸、磷酸川芎嗪、绿原酸的量均高于胶艾汤醋酸乙酯和水提取部位。结论正丁醇部位是胶艾汤补血作用的最强有效部位。     

白芍一体化加工与传统工艺对血虚模型大鼠补血作用的研究

目的考察比较一体化加工和传统工艺的白芍对慢性失血性血虚模型大鼠补血的作用。方法利用SD大鼠血虚模型考察传统工艺和一体化工艺加工的白芍对血虚大鼠红细胞数、红细胞压积、血红蛋白含量、血小板数、Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活力及免疫器官脾脏、胸腺重量的影响,比较不同剂量对血虚大鼠的补血作用。结果一体化加工和传统工艺产品均能显著增加血虚大鼠的RBC、HGB、HCT、PLT,增高大鼠红细胞膜上Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活力,降低脾脏指数,增加胸腺指数。结论白芍一体化加工产品与传统工艺产品均有补血作用,与传统工艺相比,一体化加工提高了生产效率,降低了生产成本。     

四物汤对血虚模型小鼠补血作用有效部位的筛选

目的考察四物汤不同溶剂提取部位对血虚模型小鼠外周血象和免疫器官指数的影响,筛选四物汤补血作用有效部位。方法采用ip环磷酰胺(CTX)复制小鼠骨髓造血功能抑制模型。以驴胶补血颗粒作为阳性对照药物。药物组分别ig给予四物汤的多糖、挥发油、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇提取部位。测定外周血象、脾脏指数和胸腺指数。采用HPLC法对四物汤不同提取部位的化学成分差异进行初步分析。结果与对照组比较,模型组小鼠RBC、HCT、HGB、PLT、胸腺指数及脾脏指数明显降低,表明血虚模型复制成功。与模型组比较,四物汤多糖部位可明显升髙RBC、HCT、HGB、PLT、胸腺指数及脾脏指数(P 0.05);二氯甲烷部位可明显升高HCT、HGB、PLT、胸腺指数及脾脏指数(P 0.05);挥发油部位可明显升高HGB、PLT和脾脏指数(P 0.05);正丁醇部位可明显升高HCT、RBC、胸腺指数和脾脏指数(P 0.05);乙酸乙酯部位可明显升高PLT(P 0.05)。四物汤正丁醇部位含有川芎嗪、芍药苷和阿魏酸。二氯甲烷部位含有5-羟甲基糠醛和藁本内酯。乙酸乙酯部位含有5-羟甲基糠醛。挥发油部位含有藁本内酯。结论多糖、二氯甲烷、挥发油和正丁醇部位均为四物汤补血作用有效部位,其中多糖和二氯甲烷部位补血作用最强。     

“双固一通”电针法对老年阳虚证模型大鼠肝线粒体结构及ATP酶活性的影响

目的探讨"双固一通"电针法对老年阳虚证模型大鼠肝线粒体形态结构及ATP酶活性的影响。方法选用5月龄SD雄性大鼠40只,随机分为A组、B组、C组和D组,每组10只。A组为正常对照组,其余3组大鼠均皮下注射D-半乳糖40 d后再肌肉注射氢化可的松7 d制作老年阳虚证大鼠模型。C组采用"双固一通"电针法,电针关元、足三里、百会穴;D组采用电针中极、阴陵泉、印堂穴治疗。每星期治疗6次,共治疗4星期。治疗后以游泳力竭时间判定各组大鼠抗疲劳能力,并采用透射电镜观察肝线粒体结构、比色法检测各组大鼠肝组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性。结果与A组比较,B组和D组大鼠平均游泳力竭时间明显缩短(均P0.01),肝线粒体内外膜模糊不清,嵴变形、断裂或消失,肝线粒体出现肿胀等改变,Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均下降(P0.01,P0.05)。C组比B组游泳力竭时间明显延长(P0.01),肝线粒体形态结构得到明显改善,Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均明显提高(P0.01,P0.05);D组与B组比较,大鼠平均游泳力竭时间缩短(P0.05),肝粗面内质网有脱颗粒,肝Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性降低(P0.05)。结论 "双固一通"电针法可改善老年阳虚证模型大鼠阳虚抗疲劳能力,改善肝线粒体超微结构,提高肝Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,促进肝脏能量代谢。     

当归对血虚便秘模型小鼠结肠水通道蛋白4表达的影响

目的:观察当归对血虚便秘模型小鼠的治疗作用及对小鼠结肠水通道蛋白4(AQP4)表达的影响。方法:用乙酰苯肼、环磷酰胺和复方地芬诺酯联合复制血虚便秘小鼠模型,在观察当归对血虚便秘小鼠的血虚便秘体征、体重、血液学指标(RBC、WBC、HGB和HCT)、粪便排出时间等血虚便秘指标基础上,采用免疫组织化学技术(IHC)、实时荧光定量聚合酶链反应技术(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹技术(WB)检测小鼠结肠AQP4的表达,采用酶联免疫技术(ELISA)检测小鼠结肠PLC-IP3-CaM途径中各因子的表达量,探讨当归润肠通便作用及其机制。结果:与血虚便秘组比较,3个剂量(16.67、8.33、4.17g/kg)当归水煎液均能改善模型小鼠血虚便秘证候,均能升高血虚便秘小鼠外周血RBC、WBC、HGB和HCT、缩短排便时间;3个剂量当归水煎液均可显著降低血虚便秘小鼠结肠AQP4和AQP4mRNA的表达;16.67g/kg的当归水煎液组小鼠结肠PLC显著降低;3个剂量当归水煎液组小鼠结肠IP3均有降低趋势,但差异无统计学意义;3个剂量当归水煎液组小鼠结肠CaM均显著降低。结论:当归对血虚便秘模型小鼠具有一定的治疗作用,其作用机制可能与调节结肠PLC-IP3-CaM信号通路从而下调结肠AQP4和AQP4mRNA的表达,减少结肠水分重吸收有关。