重组人肠三叶因子减轻烧伤后肠源性高代谢的实验研究

目的探讨重组人肠三叶因子(rhITF)对烧伤后肠源性高代谢的作用及期机制。方法采用30%体表面积Ⅲ度烧伤小鼠模型,将72只BALB/c小鼠随机分为正常对照组(C组,8只)、烧伤对照组(B组,每个时相点8只)和rhITF治疗组(ITF组,每个时相点8只)。观察伤前及烧伤后1、3、5、7d小鼠静息能量代谢率(REE)的变化,同时检测伤后血浆内毒素(LPS)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素-1(IL-1)和白细胞介素-6(IL-6)的含量。结果两组烧伤小鼠的REE、TNFα、LPS、IL-1和IL-6水平均明显高于烧伤前水平(P<0.05),两组比较,ITF组小鼠REE明显低于B组,平均降幅达25%左右。与之对应,血浆LPS、TNF-α、IL-1和IL-6含量也明显低于B组(P<0.05)。结论 rhITF能减轻烧伤后肠道受损程度,降低烧伤小鼠血中炎症介质水平,从而减轻烧伤后肠源性高代谢。     

谷氨酰胺对烧伤大鼠肠三叶因子表达的影响

目的　探讨谷氨酰胺对烧伤大鼠肠三叶因子 (intestinaltrefoilfactor,ITF)表达的影响及其可能的机制。方法　采用 3 0 %体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型 ,随机分正常对照 (C)组 ,烧伤后普通肠道营养 (EN)组及烧伤后添加谷氨酰胺的肠道营养 (GLN)组。EN组用等量甘氨酸补足氮量 ,使两组烧伤大鼠保持等氮、等热卡 ,动态观察伤后两组大鼠ITF及ITFmRNA的变化。结果　正常大鼠小肠中ITF及ITFmRNA均有一定表达 ,烧伤后其表达一过性增加 ,随后明显降低。两组比较 ,GLN组大鼠肠组织中ITF及ITFmRNA水平明显高于EN组 ,同时GLN组肠粘膜受损程度也明显低于EN组。结论　严重烧伤后肠粘膜结构受损是ITF合成下降的主要原因 ,谷氨酰胺能保护肠粘膜 ,维护杯状细胞的正常结构和功能 ,促进ITF特别是ITF二聚体的合成和分泌     

肠三叶因子与严重烧伤后肠道损伤及修复的关系

目的 探讨肠三叶因子（ＩＴＦ）在烧伤后的变化规律及其与肠道损伤和修复的关系。方法 Ｗｉｓｔａｒ大鼠４８只随机分成伤前对照（Ｃ）、烧伤后（ＰＢＤ）１、２、３、５及７ｄ共６组。采用高效液相色谱仪定量检测了肠粘膜中ＩＴＦ的动态变化,同时观察了血浆内毒素（ＬＰＳ）水平、肠粘膜损伤指数及肠粘膜增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的变化,并进行相关分析。结果 烧伤后肠杯状细胞分泌ＩＴＦ的能力下降,除伤后第１天ＩＴＦ含量     

乌司他汀对肠手术创伤后肠黏膜屏障功能的影响分析

目的观察乌司他汀对肠手术患者术后肠黏膜屏障功能的影响。方法2010年1-12月本院普外科行肠手术患者80例,随机分为乌司他汀低剂量组和乌司他汀高剂量组各40例。手术前及手术后两组分别静脉滴注乌司他汀20万U／d和10万U／d。分别于手术前、手术后2、4天测定两组患者尿乳果糖与甘露醇的比值（L／M）、血浆谷氨酰胺（Gin）、外周血细菌DNA。结果两组患者术后L／M、Gin逐渐升高,外周血细菌DNA阳性率逐渐降低（P〈0．05）;两组间差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论乌司他汀通过改善肠道黏膜通透性、升高Gin,对肠手术患者肠黏膜屏障功能具有明显保护作用,对预防创伤引起的肠道细菌移位具有重要临床意义。     

肠道营养促进烧伤大鼠肠三叶因子表达的实验研究

目的 探讨肠道营养对烧伤大鼠三叶因子（ITF）及其mRNA表达的影响。方法 采用30％体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型,随机分成伤前对照（C）,静脉营养（PN）及肠道营养（EN）组。采用原位杂交、免疫组化和高效液相色谱等手段检测了烧伤后大鼠肠组织中肠三叶因子（ITF）ITF mRNA的变化,并观察了两组大鼠肠道受损情况。正常大鼠小肠中ITF及ITF mRNA均有一定表达,它们主要分布于肠绒毛杯状细胞中。烧伤后肠道组织结构受损,ITF mRNA表达明显降低,肠杯状细胞分泌ITF的能力大幅下降,特别是ITF二聚体的含量远远低于伤前（P＜0.01）。两组比较,尽管肠道营养不能逆转烧伤后ITF下降的趋势,但能明显抑制其下降幅度,同时EN组肠粘膜受损程度也明显低于PN组。结论 严重烧伤后肠粘膜结构受损的ITF合成下降的主要原因,与静脉营养相比肠道营养可减轻肠粘膜受损程度,降低ITF特别是ITF二聚体的下降幅度。     

体外循环对肠黏膜屏障功能影响的研究进展

肠黏膜屏障功能是指正常肠道具有较为完善的功能隔离带,体外循环特殊的循环方式常引起肠道黏膜灌注不足、血液与管道接触产生的炎症反应、肠道缺血再灌注等使其屏障功能受损引发肠道细菌/内毒素移位,导致术后感染甚至发生全身炎症反应( SIRS)和多器官功能不全综合症(MODS).肠道是全身应激反应的靶器官,又是SIRS和MODS的发动机,体外循环如何影响肠道屏障功能及如何调控体外循环期间的肠道屏障功能,降低细菌、内毒素移位,现就其机制及影响因素进行综合阐述,为临床提供依据.     

囊型包虫病所致过敏反应对肠黏膜屏障功能的影响

目的 探讨囊型包虫病所致过敏反应对肠黏膜屏障功能的影响.方法 45只6～8周龄雌性BALB/c小鼠,SPF级,体重18～22 g,采用随机数宇表法将其分成空白对照组、囊型包虫病模型组、囊型包虫病致敏组,每组各15只;囊型包虫病模型组和囊型包虫病致敏组小鼠通过腹腔注射细粒棘球蚴微囊,每只小鼠接种约50个微囊的剂量,建立包...     

梗阻性黄疸与肠黏膜屏障功能

肠黏膜屏障能保持肠黏膜正常防御功能,维持机体内环境相对稳定.梗阻性黄疸可损伤患者肠黏膜屏障功能,导致细菌移位及内毒素血症,严重影响患者的预后.     

肠三叶因子在大鼠肠道中表达的实验研究

目的 研究肠三叶因子（ＩＴＦ）及其ｍＲＮＡ大鼠肠道的分布规律。方法 采用原位杂交、免疫组化等手段观察了ＩＴＦ及ＩＴＦｍＲＮＡ在大鼠肠道的表达并使用高效液相色谱仪检测了不同肠段ＩＴＦ的含量。结果 从十二指肠至结肠均有ＩＴＦ及ＩＴＦｍＲＮＡ表达，主要分布于肠绒毛杯状细胞，其中ＩＴＦｍＲＮＡ仅在杯状细胞的基底和边缘表达，其它区域的杯状细胞则呈ＩＴＦｍＲＮＡ阴性反应，同时发现部分其它部位的肠上皮细胞中亦有     

重组人生长激素对胃肠黏膜损伤患者肠黏膜屏障及血浆表皮生长因子、内毒素水平的影响

目的:探讨重组人生长激素(rhGH)治疗胃肠黏膜损伤的临床效果及对患者肠黏膜屏障、血浆表皮生长因子(EGF)和内毒素的影响.方法:选取我院于2014年6月~2015年6月收治的100例胃肠黏膜损伤患者随机分为实验组和对照组,根据应用重组人生长激素与否分为rhGH实验组和对照组,每组50例.对照组采用常规治疗,实验组在此基础上皮下注射0.1 IU/kg/d,每日一次,连续治疗十天.观察两组治疗效果,于治疗第1、4、7、10天抽取患者血液检测二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸、血浆EGF和血浆内毒素水平变化.结果:实验组治疗总有效率为90%,明显高于对照组的76%,对比差异有统计学意义;实验组病人外周血DAO、D-乳酸水平和血浆内毒素水平在第1、4天无显著性差异,而在第7和10天显著低于对照组;血浆表皮生长因(EGF)在第1天无显著性差异,而在第4、7、10天显著高于对照组;随着治疗天数逐增,实验组DAO、D-乳酸和内毒素呈下降趋势,EGF呈上升趋势,对比差异有统计学意义.结论:重组人生长激素治疗胃肠黏膜损伤患者,总有效率高,可促进肠黏膜屏障的恢复,降低内毒素水平和促进表皮生长因子分泌,疗效显著值得推广.     

Production of human intestinal trefoil factor in Pichia pastoris

Objective：To construct a Pichia pastoris （P. pastoris） expression vector of human intestinal trefoil factor （hITF） and study its expression and purification procedures. Methods：hITF gene encoding mature peptide was modified with a polybistidine tag sequence at the N-terminal, and then inserted into the P. pastoris expression vector pGAPZaA at the downstream of the s-mating factor signal. After gene sequencing, the recombinant pGAPZaA-hITF was transformed into the P. pastoris strain X-33 with lithium chloride, rhITF was induced to constitutively express in shake flask, and then analyzed with Tricine SDS-PAGEand Western blotting. The obtained rhITF was isolated from the cultured supernatants by ammonium sulfate precipitation, Ni-NTA affinity chromatography, and ultrafiltration. Results：The correctness and integrity of rhITF were identified by restriction digestion and gene sequencing, rhITF was successfully expressed to 50 mg/L as a secretive protein. After purification, the purity was above 95%. Tricine SDS-PAGE and Western-blot analysis showed that rhITF presented as a single band with a molecular weight of 10 kDa, a little larger than 7 879 Da as assayed by mass spectrometry analysis. Conclusion： hITF P. pastoris expression vector is successfully constructed and rhITF is expressed in P. pastoris at commercially relevant level. This research lays foundation for the further functional studying of hITF.     

谷氨酰胺对放射损伤大鼠肠粘膜屏障功能和抗氧化能力的影响

目的　观察谷氨酰胺对放射损伤大鼠肠粘膜屏障功能和抗氧化能力的影响。方法　Wistar雄性大鼠 3 0只 ,随机分对照组 (Control)、添加谷氨酰胺照射组 ( +GLN)和未添加谷氨酰胺照射组 ( GLN)。以不同饲料喂养至第 15天 ,+GLN和 GLN两组动物给予 9Gy60 Co γ射线照射 ,继续分组喂养至第 2 0天处死全部动物 ,进行肠道细菌移位、血清内毒素含量、血清还原型谷胱甘肽 (GSH)和超氧化物歧化酶 (SOD)含量测定。结果　肠道细菌移位率和血清内毒素含量 +GLN组明显低于 GLN组 ,血清GSH、SOD水平 +GLN组显著高于 GLN组 (P <0 .0 1)。结论　饲料中添加谷氨酰胺对放射损伤大鼠的肠粘膜屏障功能具有明显的保护作用 ,并能增强机体的抗氧化能力。     

生长激素对肠粘膜屏障保护作用的临床研究

目的 探讨腹膜炎病人肠粘膜通透性的变化规律及生长激素对肠粘膜屏障的保护作用。方法 40例急性弥漫性腹膜炎病人分为两组，常规治疗组20例，生长激素治疗组20例，10名健康成人为正常对照组。所有病人在入院24h内行手术治疗，生长激素治疗组于术后第1天开始皮下注射生长激素，每天8U，连用7d，其它治疗与常规治疗组一样。术后1、4、8d测定肠粘膜通透性，并观察临床基本情况、营养指标及治疗结果。结果 腹膜炎病人肠粘膜通透性显著高于正常人，生长激素治疗组肠粘膜通透性随治疗进程迅速下降，术后第8d显著低于常规治疗组。生长激素治疗组病人恢复较快，营养状态保持较好，术后并发症少，白细胞计数回落快，住院时间缩短。结论 腹膜炎病人肠粘膜通透性显著升高，生长激素对肠粘膜屏障具有一定保护作用，并有助于提高临床治疗效果。     

小鼠肠急性缺血再灌注模型中芳香烃受体活化对肠黏膜屏障功能的影响

目的 观察吲哚并[3,2-B]咔唑-6-甲醛[6-formylindolo(3,2-b) carbazole,FICZ]活化芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)对C57BL/6小鼠肠急性缺血再灌注(I/R)后肠道屏障功能的影响.方法 取C57BL/6小鼠18只,分成假手术组、I/R组和FICZ干预(I/R+FICZ)组,每组6只.小鼠肠I/R模型:肠系膜上动脉夹闭30 min,再灌注6h.苏木精-伊红(HE)染色观察小肠组织形态学的变化.蛋白质印迹和免疫荧光检测观察肠黏膜AhR与ZO-1的表达与分布情况.结果 与假手术组比较,I/R组肠黏膜明显肿胀,部分绒毛脱落、变粗,甚至倒伏、断裂,而I/R+FICZ组肠黏膜无明显肿胀,绒毛结构相对完整,形态接近正常;免疫荧光显示I/R后肠上皮表面ZO-1连续性明显破坏,而I/R+FICZ组肠上皮ZO-1连续性明显恢复.肠上皮蛋白定量分析显示:与假手术组比较,I/R组和I/R+FICZ组小鼠小肠上皮ZO-1表达分别下降50.7％和32.3％(P＜0.05);I/R+FICZ组较I/R组小肠上皮ZO-1表达上调37.2％(P＜0.05).结论 FICZ预处理可有效缓解小鼠急性I/R对肠黏膜结构与功能的损伤,可能机制是上调ZO-1的表达.