产ESBLs大肠埃希菌氨基糖苷类抗菌药耐药性及修饰酶基因的研究

目的 了解本地产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌对氨基糖苷类抗菌药(AGs)的耐药情况,并分析其氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因的检出情况.方法 对临床分离的75株大肠埃希菌用表型确证试验检测ESBLs,用KB纸片扩散法对6种AGs做药敏试验以及采用PCR技术检测AMEs基因.结果 在临床分离的75株大肠埃希菌中共检出产ESBLs菌37株(49.33%).产ESBLs菌耐药情况:依次为庆大霉素(78.38%)、链霉素(70.27%)、卡那霉素(62.16%)、妥布霉素(50.05%)、奈替米星(18.92%)、阿米卡星(10.81%).与非产ESBLs菌株比较,除奈替米星和阿米卡星外差异均有统计学意义,且产ESBLs菌中耐多药模式明显,差异有统计学意义(P＜0.05).产ESBLs菌携带AMEs基因检出情况:共检出5种基因,其中以aac(3)-Ⅱ(64.86%)和aac(6')-Ⅰ(45.95%)为主,未检出aac(6')-Ⅱ.除ant(2＂)-Ⅰ和aac(3)-Ⅰ外,其余3种基因检出率高于非产ESBLs菌株,且两基因携带率也明显高于非产ESBLs菌株(P＜0.05).结论 ESBLs的产生可使大肠埃希菌对AGs的耐药情况加重.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌遗传标记和耐药基因的研究

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum beta-lactamases,ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的遗传标记基因(整合子qacE△1、转座子tnpU)、氨基糖苷类修饰酶编码aac(6′)-Ib基因和喹诺酮类药物耐药qnrA基因分布状况,为临床使用药物治疗感染和消毒灭菌工作提供参考。方法收集本院的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共60株,采用PCR方法检测这些菌株中qacE△1、tnpU、aac(6′)-Ib和qnrA基因,MIC法药物敏感试验分析菌株的耐药性。结果 60株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中qacEΔ1基因检出率61.7%,tnpU基因检出率7.6%,aac(6′)-Ib检出率为11.7%,qnrA基因检出率3.3%。60株菌中有38株含1种或以上基因,其药敏敏感度最高的是亚胺培南、厄它培南、哌拉西林/他唑巴坦,敏感率均为97.4%,而对氨苄西林和头孢唑啉完全耐药。结论产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药与耐药基因传递机制整合子和转座子系统密切相关,分离株携带qacE△1、tnpU、aac(6′)-Ib和qnrA基因是细菌呈多重耐药的主要原因,提示临床应慎重用药。     

大肠埃希菌和克雷伯菌的qnr基因流行情况调查

目的了解上海部分医院大肠埃希菌和克雷伯菌qnr基因流行情况。方法采用聚合酶链反应(PCR)对267株大肠埃希菌和59株克雷伯菌(其中产酸克雷伯菌4株)的qnr基因进行筛选,全自动细菌鉴定仪VITEK系统进行鉴定和最低抑菌浓度测定,并采用PCR检测qnr基因阳性菌株Ⅰ型和Ⅱ型整合酶基因。结果在267株大肠埃希菌和59株克雷伯菌中检出3株细菌携带qnr基因,其中1株为大肠埃希菌,2株为肺炎克雷伯菌。3株qnr基因阳性菌株均产超广谱内酰胺酶(ESBLs),呈多重耐药性,且Ⅰ型整合酶均阳性、Ⅱ型整合酶均阴性。结论在所收集的大肠埃希菌和克雷伯菌中检出3株细菌携带qnr基因,其阳性率并不高。3株qnr基因阳性菌株均产ESBLs,且呈多重耐药性,qnr基因存在于Ⅰ类整合子上。     

大肠埃希菌和克雷伯菌的qnr基因流行情况调查

目的 了解上海部分医院大肠埃希菌和克雷伯菌qnr基因流行情况.方法 采用聚合酶链反应(PCR)对267株大肠埃希菌和59株克雷伯菌(其中产酸克雷伯菌4株)的qnr基因进行筛选,全自动细菌鉴定仪VITEK系统进行鉴定和最低抑菌浓度测定,并采用PCR检测qnr基因阳性菌株Ⅰ型和Ⅱ型整合酶基因.结果 在267株大肠埃希菌和59株克雷伯菌中检出3株细菌携带qnr基因,其中1株为大肠埃希菌,2株为肺炎克雷伯菌.3株qnr基因阳性菌株均产超广谱内酰胺酶(ESBLs),呈多重耐药性,且Ⅰ型整合酶均阳性、Ⅱ型整合酶均阴性.结论 在所收集的大肠埃希菌和克雷伯菌中检出3株细菌携带qnr基因,其阳性率并不高.3株qnr基因阳性菌株均产ESBLs,且呈多重耐药性,qnr基因存在于Ⅰ类整合子上.     

十二烷基硫酸钠对多重耐药大肠埃希菌Ⅰ类整合子作用的初步探讨

目的 探讨十二烷基硫酸钠(SDS)对多重耐药大肠埃希菌(E.coli)Ⅰ类整合子的作用.方法 采用纸片扩散法(K-B法)测定71株大肠埃希菌对3类4种常用抗菌药物的药敏情况,聚合酶链反应(PCR)检测Ⅰ类整合子3个不同部位的基因.对经SDS处理的Ⅰ类整合子阳性多重耐药大肠埃希菌的Ⅰ类整合子基因与最低抑菌浓度(MIC)值进行测定与比较.结果 71株大肠埃希菌的多重耐药率为32.39%(23株),Ⅰ类整合子的总检出率为88.73%,不同部位基因检出率分别为:整合酶基因74.65%、遗传标记基因78.87%、可变区基因21.13%.SDS处理前、后多重耐药大肠埃希菌中的Ⅰ类整合子基因阳性率差异有统计学意义(P＜0.05);对庆大霉素、头孢噻肟的MIC值差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 SDS对多重耐药大肠埃希菌的Ⅰ类整合子有一定的影响.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药机制研究

目的研究临床分离产ESBLs大肠埃希菌的耐药机制和分子流行病学情况。方法PCR检测大肠埃希菌的I类整合酶、插入序列共同区(ISCR/orf513)、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因;以肠杆菌科间的重复序列(ERIC)为引物进行基因扩增,SPSS13.0分析其遗传多态性。结果102株产ESBLs的大肠埃希菌中,I类整合酶阳性菌有59株(57.8%),orf513阳性菌有6株(5.9%),ESBLs中的TEM型有91株(89.2%),SHV型有0株,CTX-M型有35株(34.3%)。根据指纹图谱,可以把102株大肠埃希菌基因型分为82种,经SPSS系统聚类分析,可归为17个大类。结论产ESBLs大肠埃希菌的整合酶阳性率较高;整合子和ISCR可以共存;ERIC-PCR是一种效果较好的基因分型方法。     

90株新生儿痰培养大肠埃希菌耐药性分析

目的 分析我院新生儿科病区痰培养产ESBLs、AmpC酶大肠埃希菌的耐药情况,指导临床合理用药.方法 按CLSI推荐的超广谱β内酰胺酶(ESBLs)确证试验,对大肠埃希菌进行ESBLs检测,并用三维试验法、三维试验抑制试验进行AmpC酶检测.结果 90株大肠埃希菌中,检到产ESBLs菌株50株,阳性率高达55.56%.15株耐头孢西丁菌株检到4株产AmpC酶,其中单产AmpC酶1株,产AmpC+ESBLs菌株3株,AmpC酶阳性率为4.44%(4/90).结论 分离自我院新生儿科下呼吸道的大肠埃希菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药严重,主要以产ESBLs和(或)AmpC酶为主.给临床抗感染治疗带来很大困难,是院内感染的一大隐患.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药表型和基因型分析

目的:分析临床分离大肠埃希菌耐药性、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性率及耐药基因之间的关系。方法:用K-B法检测117株大肠埃希菌耐药性,用酶抑制剂增强实验纸片法检测产ESBLs菌株,用PCR法检测相关耐药基因,用DNA序列分析确认基因亚型。结果:117株大肠埃希菌产ESBLs 49株,阳性率41.9%。产ESBLs菌株对青霉素类和第一、第二代头孢菌素耐药率100%,对第三代头孢菌素中头孢哌酮、头孢噻肟和头孢曲松耐药率>95%,对酶抑制剂哌拉西林/三唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦耐药率<20%,未检测到亚胺培南耐药株。非产ESBLs菌株耐药率明显低于产ESBLs菌株。49株产ESBLs菌株PCR均扩增到CTX-M型耐药基因,44株扩增到TEM型基因,未扩增到其他基因型。DNA序列分析证实为CTX-M-14亚型、CTX-M-3亚型和广谱酶TEM-1亚型基因。结论:大肠埃希菌产ESBLs较高,耐药显著;耐药基因以CTX-M-14亚型为主,其次为CTX-M-3亚型,尚未检出其他ESBLs基因。TEM-1亚型广谱内酰胺酶基因在大肠埃希菌中普遍存在。     

多重PCR检测临床产ESBLs大肠埃希菌的耐药基因型研究

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性、产ESBLs的阳性率及耐药基因之间的关系。方法采用Kirby-Bauer(K-B)琼脂扩散法检测120株临床分离的大肠埃希菌对18种抗生素的耐药性,用酶抑制剂增强实验纸片法检测产ESBLs菌株,运用多重PCR技术检测相关耐药基因,用DNA序列分析确认基因亚型。结果120株大肠埃希菌产ESBLs的有51株,阳性率为42.5%。120株大肠埃希菌对亚胺培南全部敏感,产ESBLs的大肠埃希菌对头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶等头孢类抗菌药物的耐药率高达100%;51株产ESBLs菌株其中46株扩增到CTX-M型耐药基因,44株扩增到TEM型基因,2株扩增到SHV基因,1株OXA型基因,未检出PER和VEB型。结论大肠埃希菌产ESBLs较高,耐药显著,碳青酶烯类抗生素是目前治疗产ESBLs大肠埃希菌最有效的药物;产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型别为CTX-M型和TEM型。     

产AmpC酶和ESBLs的大肠埃希菌药敏分析

目的了解医院感染病原体中大肠埃希菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株产生及其耐药情况。方法对2008年确诊为医院感染的患者所检出的大肠埃希菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株情况及其耐药率进行统计分析。结果2008年150株大肠埃希菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株检出率分别为22.0%及55.0%。产ESBLs及AmpC酶大肠埃希菌抗菌药物的药敏耐药率均高于不产ESBLs、AmpC酶菌株。仅有阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、美洛培能对产ESBLs大肠埃希菌和AmpC酶菌株具有良好抗菌活性。结论医院感染大肠埃希菌耐药情况严重,应依据其耐药特点及变化趋势,采取适当的医院感染预防控制措施。     

从大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中检测超广谱β内酰胺酶和AmpC酶

目的研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的产酶及耐药模式,并对9种抗菌药做药敏试验,比较产酶菌与非产酶菌对9种抗菌药的耐药率,为临床治疗产酶菌感染提供理论依据.方法菌株来源于2005年1月～2007年5月我院呼吸科住院患者送检合格痰标本中分离的大肠埃希菌43株、肺炎克雷伯菌67株.应用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,采用美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)表型筛选和确认试验检测ESBLs菌株,以K-B琼脂扩散法做药敏试验.结果在110株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,6株(5.45%)产AmpC酶,20株(18.2%)产 ESBLs,1株(0.90%)同时产AmpC酶和ESBLs.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中AmpC酶检出率分别为6.98%、5.97%,ESBLs检出率分别为16.3%、20.9%.产酶株对亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星耐药率低.结论产AmpC酶和产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为多重耐药菌株,治疗产2种β内酰胺酶细菌引起的感染亚胺培南为首选,头孢吡肟和阿米卡星可作为选用药物之一.     

泌尿系感染产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药表型和基因分型

目的:了解本地区泌尿系感染产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌耐药表型及其基因型分布.方法:收集2003-03/2004-06间临床分离的尿培养阳性大肠埃希菌共258株,ESBLs的检测采用NCCLs规定的ESBLs型筛选和确定实验,用K-B琼脂扩散法进行药物敏感性检测,并应用聚合酶链反应(PCR)方法对所分离的产ESBLs菌株进行SHV,CTX-M基因型检测.结果:产ESBLs大肠埃希菌检出率为24.0%(62株),67.7%(42株)携带CTX-M基因,14.5%(9株)的菌株携带SHV型基因,并有1.6%(1株)同时携带CTX-M基因和SHV型基因.结论:本地区泌尿系感染产ESBLs大肠埃希菌以耐头孢曲松和头孢噻肟为主;CTX-M型的ESBLs最为常见.     

产ESBLs大肠埃希菌耐药性分析

目的:了解我院分离的大肠埃希菌临床分布和耐药特点,为临床合理用药和控制大肠埃希菌感染提供依据。方法:收集临床分离的大肠埃希菌231株,采用纸片扩散法(K-B法)进行14种抗菌药物敏感性测定及产ESBLs耐药菌株的初步筛选,再通过双纸片协同试验(DDST)法确认产酶菌株。结果:231株大肠埃希菌标本来源,痰分离出86株(37.23%)、其次为尿液57株(24.68%)、胆汁39株(16.88%)等;产ESBLs大肠埃希菌阳性检出率为36.36%(84株);产ESBLs大肠埃希菌耐药率明显高于非产ESBLs大肠埃希菌。对氨苄西林、哌拉西林、萘定酸、环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素的耐药率较高,对阿米卡星、头孢吡肟的耐药率较低,对亚胺培南耐药率为零。结论:产ESBLs大肠埃希菌具有多重耐药性,要重视产ESBLs菌株的检测,治疗其所致感染时,需根据药敏结果合理选用有效抗菌药物。     

重症监护病房产ESBLs和AmpC酶的大肠埃希菌耐药性分析

目的了解我院重症监护病房患者中大肠埃希菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的耐药性特征：方法采用纸片扩散确证法检测ESBLs,酶提取物三维试验方法检测AmpC酶。结果226株大肠埃希菌中检出单产ESBLs131株,AmpC酶24株,同时产AmpC酶和ESBLs共9株,检出率分别为58．0％、10．6％和4．0％。产酶大肠埃希菌对抗生素的耐药率大部分均高于不产酶菌株;结论重症监护病房产AmpC酶和ESBLs的大肠埃希菌日益增多且呈多重耐药,临床经验用药应首选碳青霉烯类抗生素.     

产ESBLs大肠埃希菌氨基糖苷类钝化酶基因aac（6＇）-Ib’的检测

目的了解本地产ESBLs大肠埃希菌氨基糖苷类钝化酶基因携带状况,为探讨其耐药机制提供信息。方法用聚合酶链反应（PCR）法对临床分离的62株产ESBLs并耐庆大霉素的大肠埃希菌,进行aac（6＇）-Ib’氨基糖苷类修饰酶基因检测。结果62株菌中被检出氨基糖苷类修饰酶基因aac（6＇）-Ib’阳性17株,阳性率27.4%,同时耐阿米卡星的3株中,阳性1株。结论本研究样本菌株中部分菌株的氨基糖苷类耐药性可能与氨基糖苷类修饰酶AAC（6＇）-Ib’有关。     

银花泌炎灵片对产ESBLs大肠埃希菌体外抑菌活性研究

目的研究中药制剂银花泌炎灵片对产ESBLs大肠埃希菌的抑菌活性。方法对40株大肠埃希菌临床株进行产ESBLs表型筛选和确认,采用K-B(Kirby-Bauer)纸片扩散法进行药敏实验,采用2倍平板稀释法测定银花泌炎灵片对产ESBLs大肠埃希菌的体外最低抑菌浓度(MIC)。结果在40株大肠埃希菌临床分离株中检出产ESBLs菌株18株(检出率45.0%),所有产ESBLs株均为多重耐药菌株,对氨苄西林、头孢唑啉、哌拉西林、头孢呋辛酯、复方新诺明、头孢克洛的耐药率均超过90%,对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦,阿米卡星、阿莫西林/克拉维酸、头孢吡肟及头孢西丁的耐药率较低,均在30%以下。银花泌炎灵片对产ESBLs大肠埃希菌临床株及质控对照株ATCC25922和ATCC35218的MIC均为200mg/mL～100 mg/mL,抑菌活性差异无统计学意义(P>0.05)。结论银花泌炎灵片对产ESBLs大肠埃希菌具有较强的体外抑菌作用。     

从大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中检测超广谱β内酰胺酶和AmpC酶

目的:研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的产酶及耐药模式,并对9种抗菌药做药敏试验,比较产酶菌与非产酶菌对9种抗菌药的耐药率,为临床治疗产酶菌感染提供理论依据。方法:菌株来源于2005年1月~2007年5月我院呼吸科住院患者送检合格痰标本中分离的大肠埃希菌43株、肺炎克雷伯菌67株。应用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,采用美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)表型筛选和确认试验检测ESBLs菌株,以K-B琼脂扩散法做药敏试验。结果:在110株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,6株(5.45%)产AmpC酶,20株(18.2%)产ESBLs,1株(0.90%)同时产AmpC酶和ESBLs。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中AmpC酶检出率分别为6.98%、5.97%,ESBLs检出率分别为16.3%、20.9%。产酶株对亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星耐药率低。结论:产AmpC酶和产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为多重耐药菌株,治疗产2种β内酰胺酶细菌引起的感染亚胺培南为首选,头孢吡肟和阿米卡星可作为选用药物之一。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmPC酶和ESBLs的检测及耐药性

目的了解急性阑尾炎患者阑尾残端脓液分离出大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶和ESBLs的情况及耐药性。方法采用纸片扩散确证法检测ESBLs，酶提取物三维试验方法检测AmpC酶。结果180株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中检出单产ESBLs43株、单产AmpC酶17株、同时产AmpC酶和ESBLs 10株，检出率分别为23．9％、9．4％和5．6％；产酶菌株对15种抗生素的耐药率大部分均高于不产酶菌株。结论阑尾残端脓液分离出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs，对产酶菌株临床经验用药首选碳青霉烯类抗生素。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测及药敏结果分析

目的:了解本院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)和耐药情况。方法:用确证试验对从临床分离的219株大肠埃希菌和73株肺炎克雷伯菌做ESBLs检测,ATB自动细菌分析仪做药敏试验。结果:219株大肠埃希菌检出产ESBLs94株,检出率为42.9%。73株肺炎克雷伯菌检出产ESBLs30株,检出率为41%。产ESBLs与非产ESBLs菌株的耐药率差异有显著性。结论:本院分出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs严重,产酶菌株耐药率很高,应引起临床高度重视。     

2008-2013年大肠埃希菌检出情况及耐药性分析

目的:分析2008年1月~2013年9月大肠埃希菌的检出情况及对抗菌药物的耐药性。方法:对送检标本进行细菌鉴定和药敏试验,观察各年大肠埃希菌检出率、耐药性,不同标本来源、不同送检科室检出大肠埃希菌的耐药性,并观察产超广谱β-内酰氨酶(ESBLs)大肠埃希菌检出率。结果:6年共分离大肠埃希菌4 607株,各年大肠埃希菌的检出率为18.2%~26.5%,大肠埃希菌对氨苄西林和哌拉西林的耐药率最高(>91.0%),对亚胺培南的耐药率最低(<3.0%),2010-2013年对环丙沙星、庆大霉素、复方磺胺甲恶唑和妥布霉素抗菌药物的耐药率有所下降(P<0.05);血液标本来源的大肠埃希菌耐药率低于其他标本来源大肠埃希菌的耐药率,来自ICU的大肠埃希菌对常见抗菌药物的耐药率普遍较高,其次为外科,儿科送检标本检出的大肠埃希菌耐药率较低;2010年大肠埃希菌产ESBLs菌株检出率为37%,2012年为70.9%,2010-2012年产ESBLs的大肠埃希菌检出率逐年上升。结论:6年内大肠埃希菌分离株增多,耐药情况严峻,ESBLs产酶率较高,应加强本地区抗菌药物使用合理性。