靶向沉默RACK1基因对肺腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:研究沉默RACK1基因对人肺腺癌细胞株A549裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法:使用人肺腺癌细胞株A549建立裸鼠皮下移植瘤模型。待肿瘤直径为0.3~0.5 cm时将荷瘤裸鼠随机分成3组,每组6只,分别于瘤内注射生理盐水(空白组)、空载质粒-脂质体复合物(空载组)及shRNARACK1质粒-脂质体复合物(实验组)。观察三组裸鼠的皮下移植瘤体积变化,绘制肿瘤生长曲线,并用Western blot检测各组肿瘤组织中RACK1蛋白的表达。结果:移植瘤形成后第28天,与空白组和空载组比较,实验组移植瘤生长速率、肿瘤体积和重量均明显降低(P0.05)。转染干扰载体RACK1-shRNA对裸鼠肺腺癌移植瘤的的抑瘤率为39%。Western blot结果显示,实验组移植瘤组织中RACK1蛋白的表达明显低于空白组和空载组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:沉默RACK1基因对肺腺癌裸鼠移植瘤生长有明显抑制作用。     

HIF-1α反义寡核苷酸治疗人胃癌裸鼠移植瘤的实验研究

目的 研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)反义寡核苷酸对人胃癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用.方法 用人胃癌细胞株SCG-7901建立胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为反义寡核苷酸(ASOND)组、正义寡核苷酸(SOND)组和对照组,瘤体内分别注射阳离子脂质体包裹的HIF-1α ASOND、HIF-1α SOND和空白阳离子脂质体.观察各组动物的肿瘤生长曲线,测瘤重计算抑瘤率,光学显微镜下观察肿瘤细胞形态学变化,免疫组化方法 检测各组肿瘤组织HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)的表达.结果 ASOND组裸鼠的肿瘤生长受到明显抑制,ASOND组瘤重与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);ASOND组、SOND组抑瘤率分别为47.94%、16.88%,差异有统计学意义(P＜0.01);ASOND组肿瘤组织中HIF-1α、VEGF和MVD的表达低于SOND组和对照组(P＜0.01).结论 肿瘤原位注射HIF-1α反义寡核苷酸治疗胃癌裸鼠皮下移植瘤能降低HIF-1α的表达,继而减少VEGF的生成和新生血管的形成,抑制肿瘤的生长.     

毛蕊异黄酮对肺腺癌SPC-A1细胞生长及凋亡的影响

目的 建立肺腺癌SPC-A1细胞裸鼠移植瘤模型，探讨毛蕊异黄酮对肺腺癌移植瘤生长及凋亡的影响。方法 30只裸鼠(6～8周龄)适应性饲养一周后，将制备好的SPC-A1细胞悬液(浓度为5×10⁵个/mL)经腋下皮下注射，拟建造SPC-A1肺腺癌细胞移植瘤模型；按照裸鼠的重量及瘤体的体积大小，随机分为模型组、毛蕊异黄酮组、顺铂组，每组6只；记录各组裸鼠实验前后的体质量、瘤重、瘤体横径和纵径，并分析各组裸鼠模型的肿瘤抑制率，测估SPC-A1裸鼠移植瘤的体积大小及生长状况；通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记(TUNEL)测定法测定SPC-A1细胞裸鼠移植瘤的凋亡状况；蛋白免疫印迹法(Western blot)测定各组瘤体中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达水平。结果 顺利构建了肺腺癌SPC-A1细胞裸鼠移植瘤的模型。与模型组比较，毛蕊异黄酮组裸鼠瘤的瘤重[(1.20±0.19) g vs (0.98±0.14) g]明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)，且抑瘤率为18.33%，表明毛蕊异黄酮能有效抑制SPC-A1细胞裸鼠移植瘤的生长；TU...     

Survivin反义寡核苷酸诱导人胃癌细胞裸鼠皮下移植瘤细胞凋亡的研究

目的研究survivin反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对人胃癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响,并探讨其诱导人胃癌移植瘤凋亡的分子生物学机制。方法建立SGC-7901胃癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为4组,即survivin-ASODN+脂质体组、survivin-ASODN组、脂质体组和空白对照组(蒸馏水)。瘤体内隔日给药,停药后48小时处死裸鼠,剥离瘤组织,称取瘤重,计算抑瘤率。western-blot法检测各组凋亡相关蛋白survivin、Caspase-3蛋白的表达。结果 survivin-ASODN+脂质体组的移植瘤生长速度明显减慢,其抑瘤率为:33.19%。survivin-ASODN+脂质体组的survivin蛋白表达量明显低于对照组(P<0.05),Caspase-3蛋白表达高于对照组(P<0.05)。结论 survivin反义寡核苷酸转染胃癌移植瘤能够明显抑制肿瘤生长,其主要机制与降低survivin蛋白的表达,诱导Caspase-3高表达,从而促进肿瘤细胞凋亡有关。     

抑癌基因p16对人肺腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制

目的　观察不同途径给予抑癌基因 p16对人肺腺癌裸鼠移植瘤的治疗效果。 方法　分别将转染和未转染p16基因的肺腺癌细胞系H4 6 0接种于裸鼠背部皮下 (p16治疗B组和模型组 ) ,再将模型组裸鼠 18只随机分为空白对照组 ,脂质体对照组及p16基因治疗A组。瘤内分别注射生理盐水、脂质体以及脂质体 p16混合物 ,定期测量瘤体体积 ,连续观察 6周 ,免疫组化检测荷瘤组织 p16蛋白的表达。结果　p16基因治疗A、B组其瘤体生长速度明显减缓 ,与对照组相比 ,差异有显著性意义 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,p16基因治疗B组生长受抑作用更为显著。免疫组化结果提示两治疗组 p16蛋白表达阳性率高于两对照组。结论　脂质体介导的 p16基因转染可抑制人肺腺癌裸鼠移植瘤的生长。但与瘤体内直接转染比较 ,先转染再致瘤的抑制作用更强。     

Effects of Survivin antisense oligonucleotide on molecular mechanism of inducing human gastric transplantable tumor apoptosis

目的 研究survivin反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对人胃癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响,并探讨其诱导人胃癌移植瘤凋亡的分子生物学机制.方法 建立SGC-7901胃癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为4组,即survivin-ASODN+脂质体组、survivin-ASODN组、脂质体组和空白对照组(蒸馏水).瘤体内隔日给药,停药后48小时处死裸鼠,剥离瘤组织,称取瘤重,计算抑瘤率.western-blot法检测各组凋亡相关蛋白survivin、Caspase-3蛋白的表达.结果 survivin- ASODN+脂质体组的移植瘤生长速度明显减慢,其抑瘤率为:33.19％.survivin-ASODN+脂质体组的survivin蛋白表达量明显低于对照组(P＜0.05),Caspase-3蛋白表达高于对照组(P＜0.05).结论 survivin反义寡核苷酸转染胃癌移植瘤能够明显抑制肿瘤生长,其主要机制与降低survivin蛋白的表达,诱导Caspase-3高表达,从而促进肿瘤细胞凋亡有关.     

果王素通过下调NPM表达对小鼠移植肺腺癌生长和转移的抑制作用

目的 通过检测果王素干预的小鼠肺腺癌移植瘤组织中核仁磷酸蛋白(NPM)和mRNA的表达,探讨果王素抑制肺癌生长与转移可能的机制。方法 将32只接种Lewis肺腺癌细胞的C57BL/6J小鼠随机分为对照组、低剂量(60 mg/kg)果王素组、中剂量(120 mg/kg)果王素组和高剂量(240 mg/kg)果王素组4组,每组8只。接种后第4天起,予以不同剂量果王素干预,第24天处死小鼠,剥离移植瘤,测量移植瘤体积和称移植瘤质量,计算肿瘤抑制率,计数小鼠双肺肿瘤转移结节数量,计算肿瘤肺转移抑制率,用免疫组化法和Western blot法检测小鼠皮下移植瘤组织中NPM蛋白的表达水平,用荧光实时定量PCR法测定移植瘤组织中NPM mRNA水平。结果 果王素组与对照组相比,小鼠皮下移植瘤的质量和体积均明显降低,双肺肿瘤转移结节数量也明显减少,小鼠皮下移植瘤组织中NPM蛋白和mRNA表达水平下降,果王素的剂量越高,上述指标差异越明显,各组间差异有统计学意义(均P<0.05)。结论 果王素可能通过下调NPM蛋白及基因表达,抑制小鼠肺腺癌移植瘤生长和转移。     

丙戊酸对卵巢癌裸鼠移植瘤血管形成的影响

目的探讨丙戊酸(VPA）对卵巢癌裸鼠移植瘤血管形成的影响。方法建立人卵巢癌裸鼠皮下转移瘤模型,将24只裸小鼠随机分为对照组、VPA组、顺铂（DDP）组、VPA+DDP 4组,每组6只。观察并记录各组裸鼠及其皮下移植瘤的生长情况,绘制肿瘤生长曲线、计算肿瘤体积、肿瘤生长抑制率。采用免疫组化SP法检测各组裸鼠皮下移植瘤中CD105 和sFlk-1的表达水平。结果① 治疗组裸鼠移植瘤的体积较对照组明显变小;② 各治疗组肿瘤组织的CD105表达较对照组均明显下降(P＜0.05),sFlk-1表达较对照组均明显增高(P＜0.05)。结论VPA对卵巢癌裸鼠移植瘤有明显抑制作用,其作用机理可能与抑制肿瘤血管形成有关,与DDP联合应用其抑瘤作用增强。     

5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤生长及促凋亡作用

目的 观察5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素(ADFMChR)对人卵巢癌CoC1裸鼠移植瘤生长的抑制及促凋亡作用.方法 建立人卵巢癌CoC1裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成5组:生理盐水组、顺铂组(2mg/kg)、低剂量ADFMChR组(6 mg/kg)、中剂量ADFMChR组(18 mg/kg)和高剂量ADFMChR组(54mg/kg),每组4只.观察各组裸鼠移植瘤生长情况、裸鼠体重的变化;PI染色流式细胞术(FCM)测定移植瘤细胞凋亡率.结果 ADFMChR对移植瘤的生长有明显抑制作用,低剂量组、中剂量组和高剂量组的瘤重抑制率分别达62.76%、91.76%和77.55%.PI流式细胞术结果 显示ADFMChR诱导移植瘤细胞凋亡,呈剂量依赖性.结论 ADFMChR具有抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤生长的作用并能诱导移植瘤细胞凋亡.     

Influence of site and method of implantation on growth and invasion of human lung adenocarcinoma in nude mice]

In the present study, the growth and invasion of human lung adenocarcinoma cells (LTEP-a-2) transplanted into different sites (s.c. and footpad) and using different methods (including inoculation of tumor cell suspension and tumor fragment) in 12 nude mice were examined. The animals were divided into two groups; namely, subcutaneous inoculation (6 nude mice) and footpad inoculation (6 nude mice). Two transplantation sites were selected in each mouse; i.e. the tumor cell suspension was implanted into one site, and the tumor fragment was implanted into the opposing site of the same mouse. In the subcutaneous inoculation group, tumor growth (100%) was accompanied by no invasive behavior (including suspension and fragment). In the footpad inoculation group, 3/6 cases of inoculation by suspension saw tumor growth with invasive behavior; but in the case of tumor fragment transplantation no tumor growth was found. One murine sarcoma was found in the tissues surrounding the human lung adenocarcinoma cells. The mechanism of formation of this murine sarcoma is discussed. Our results show that human tumor growth in nude mice is obviously influenced by the site of inoculation.     

存活蛋白反义寡核苷酸对XWLC-05细胞的影响

目的 研究存活蛋白反义寡核苷酸对宣威肺腺癌细胞株(XWLC)-05增殖、凋亡及细胞周期的影响.方法 通过设计合成XWLC-05靶向存活蛋白反义寡核苷酸.将其分为对照组、单纯脂质体组(Lip组)、正义寡核苷酸转染组(Lip-SODN组)、反义寡核苷酸转染组(Lip-ASODN组).转染48 h后,蛋白质印迹法检测各细胞组中存活蛋白表达情况,流式细胞仪检测各细胞组凋亡率.结果 转染后的XWLC-05 存活蛋白表达明显下降.Lip-ASODN组细胞在12、24、48 h凋亡率分别为3.01±0.26、7.89±2.63、17.24±3.92,明显高于其他组(P<0.05).结论 存活蛋白反义寡核苷酸转染能下调宣威肺腺癌细胞株XWLC-05存活蛋白表达,诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖.     

脂质体-c-raf-1反义寡核苷酸治疗人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤

目的:探讨c-raf-1反义寡脱氧核苷酸(ASSODN)对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用.方法:将15只裸鼠建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,然后随机分成3组予以不同条件处理:对照组(腹腔注射转染液和脂质体),正义治疗组(腹腔注射脂质体-c-raf-1-SODN),反义治疗组(腹腔注射脂质体-c-raf-1-ASODN).治疗期间定期观测裸鼠体重并测量肿瘤体积,计算抑瘤率及肿瘤缩小率.结果:反义治疗组与正义治疗组的抑瘤率分别为68.1%和6.8%,反义治疗组肿瘤缩小率为16.7%,与正义治疗组相比较有明显的差别.各组裸鼠体重变化无明显差别.结论:脂质体-c-raf-1-ASODN对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤有一定的治疗价值,可能成为日后基因治疗的重要方向.     

Effects of hydroxy safflower Yellow-A on tumor capillary angiogenesis in transplanted human gastric adenocarcinoma BGC-823 tumors in nude mice

OBJECTIVE:To study the effects of hydroxy safflower yellow A(HSYA) on tumor capillary angiogenesis in transplanted human gastric adenocarcinoma BGC-823 tumors in nude mice.METHODS:BGC-823 cells were injected subcutaneously into the right anterior armpit of nude mice to establish an animal model of transplanted tumors.After 24 h,18 nude mice injected with tumor cells were randomized into model,control,and HSYA 0.028 g/L groups,with six mice in each group.Transplanted tumors were excised on day 20.Tumor inhibition ratios were calculated for the transplanted tumors.Pathological changes and capillary angiogenesis in the tumors were observed by light microscopy.RESULTS:Tumors in the model group grew more quickly than those in the control and HSYA groups,with inhibition ratios of 48% and 30%,respectively.The microvessel count in the HSYA group was lower than in the model group(P<0.01),and microvessel density was also lower in the HSYA group(P<0.05).Pathological changes were more obvious in tumors in the model group compared to the HSYA group.CONCLUSION:HSYA inhibits the growth of transplanted BGC-823 tumors,and its effects on tumor capillary angiogenesis may represent one of the mechanisms responsible for this antineoplastic effect.     

白藜芦醇对裸鼠胃癌移植瘤中PDCD5蛋白表达及细胞凋亡的影响

目的探讨白藜芦醇(Res)对裸鼠胃癌移植瘤细胞凋亡相关基因PDCD5蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法将BGC-823细胞复苏后,通过右前肢腋部皮下移植构建裸鼠胃癌移植瘤模型。建模成功后的荷瘤裸鼠随机分为空白对照组、Res组、顺铂组和联合用药组(白藜芦醇+顺铂),各组分别在成瘤部位皮下注射0.2ml相应的药物,每日1次,治疗1周。停药后将裸鼠处死,剥离肿瘤组织。采用免疫组织化学方法检测移植瘤组织中PDCD5蛋白表达,采用原位末端标记法(TUNEL)检测移植瘤组织中细胞凋亡情况。结果 Res组中PDCD5蛋白表达水平明显高于空白对照组,但低于顺铂组和联合用药组,上述各组两两相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。TUNEL法检测到胃癌移植瘤中凋亡细胞核呈棕褐色,染色深浅不一,染色质分布不均,空白对照组中仅见到少数凋亡细胞,Res组、顺铂组和联合用药组凋亡细胞数依次增加,上述各组两两相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论白藜芦醇可上调裸鼠胃癌移植瘤细胞中PDCD5的蛋白表达,表明其可能通过上调PDCD5的表达进而诱导细胞凋亡。