青蒿琥酯及其与放疗联用对CNE细胞的作用

目的研究青蒿琥酯及其与放疗联用对鼻咽癌CNE细胞增殖和凋亡的影响。方法采用细胞集落计数法和原位末端标记（TUNEL）法,测定单用青蒿琥酯及其与放疗联用对CNE细胞增殖的抑制作用和对凋亡的诱导。结果青蒿琥酯能够抑制CNE细胞增殖,并呈现明显的剂量效应,药物浓度2．5～50μg／ml的细胞存活率为15．75％～93．64％。青蒿琥酯可诱导CNE细胞凋亡,高浓度组（10μg／ml）作用比低浓度组（5μg／ml）强（P〈0．05）。当青蒿琥酯与放疗联用时作用更为明显,联用组的作用效果均优于单用青蒿琥酯组或单纯放疗组。结论青蒿琥酯对CNE细胞增殖有明显的抑制和诱导凋亡作用,且和放疗联用作用更强。     

双氢杨梅树皮素抗肉瘤S180的体外实验

目的：探讨双氢杨梅树皮素（APS）的抗肿瘤作用。方法：以MTT法观察APS及其含药血清对肉瘤S180，细胞的体外抑制作用。结果：APS及其含药血清均能明显抑制体外培养的S180细胞的生长，APS的IC 50为9．22mg·L^-1，20％，10％含药血清的抑制率分别为39．47％，26．88％。结论：APS对体外培养的S180细胞有明显的抑制作用。     

青蒿琥酯对前列腺癌PC-3细胞的抑制作用

目的:观察青蒿琥酯对前列腺癌细胞株PC-3的体外作用,并探讨其可能作用机制。方法:应用光镜形态学、MTT法、流式细胞仪观察不同浓度青蒿琥酯在体外对前列腺癌细胞系PC-3的作用和对细胞DNA含量的影响。结果:青蒿琥酯对前列腺癌细胞系PC-3有明显的生长抑制作用,并能诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖周期。结论:青蒿琥酯对前列腺癌PC-3细胞有明显生长抑制和凋亡诱导作用,提示青蒿琥酯有用于治疗激素非依赖性前列腺癌的可能性。     

青蒿琥酯抑制新生血管生成的作用

目的　为研究青蒿琥酯成为抗血管生成药物的可能性 ,观察其对新生血管的影响 ,并初步探讨其机制。方法　采用鸡胚绒毛尿囊膜、大鼠主动脉环无血清培养、人脐静脉内皮细胞损伤迁移等实验 ,检测青蒿琥酯对新生血管增殖与迁移的抑制作用。结果　鸡胚绒毛尿囊膜实验表明 ,青蒿琥酯有较强的血管增殖抑制作用 ,对微血管作用强于大血管 ;大鼠主动脉环无血清培养实验表明 ,青蒿琥酯能明显推迟血管新生 ,减少新生血管数量 ;人脐静脉内皮细胞损伤迁移实验表明青蒿琥酯对内皮细胞具有增殖和迁移抑制作用。在这些体内外实验中 ,青蒿琥酯抑制血管生成作用呈剂量依赖性。结论　青蒿琥酯具有抑制新生血管生成作用 ,此作用可能与抑制血管内皮细胞迁移有关。     

青蒿琥酯对非小细胞肺癌A549放射增敏的初步研究

目的初筛青蒿素及其衍生物联合放射线对非小细胞肺癌A549细胞的放射增敏效应,并以青蒿琥酯为主要研究对象,研究其对A549细胞的体内、外放射增敏效应,初步探讨其对A549细胞的放射增敏作用机制。方法通过MTT法初筛低毒剂量的青蒿素及其衍生物对非小细胞肺癌细胞株A549的放射增敏作用,发现青蒿琥酯具有较强放射增敏效应;采用裸鼠移植瘤模型,观察青蒿琥酯联合β电子线对荷痛裸鼠移植瘤生长抑制作用。同时采用Giemsa染色、流式细胞术,观察青蒿琥酯联合电子线对A549细胞的形态学变化以及细胞周期、凋亡的影响,初步探讨青蒿琥酯联合电子线对肿瘤细胞A549的放射增敏作用机制。结果MTT法得到青蒿素及其衍生物对非小细胞肺癌A549细胞生长抑制的IC10,以IC10为剂量参考,发现青蒿琥酯、双氢青蒿素具有放射增敏效应：联合射线后20rtM和40州的青蒿琥酯对A549细胞有生长抑制作用（p〈0．05）并呈一定量效关系,10μM、20μM和40μM的双氧青蒿素也有一定放射增敏作用（p〈0．05）。体内移植瘤实验结果表明青蒿琥酯（30mg／kg）可显著增加荷瘤裸鼠肿瘤组织B放射线的敏感性,肿瘤生长抑制率达50．90％。体外Giemsa染色结果表明,80μM的青蒿琥酯可以引起A549细胞出现显著的凋亡形态学变化;流式细胞术结果提示,20μM青蒿琥酯可将A549细胞周期阻滞于G2仃订期;凋亡结果分析,20μM青蒿琥酯联合放射线不引起A549细胞凋亡。结论青蒿素衍生物中双氢青蒿素、青蒿琥酯对A549细胞有一定的放射增敏作用。青蒿琥酯联合放射线在体内、外实验中均表现出较强的放射增敏效应,其放射增敏作用机制可能与青蒿琥酯的过氧桥断裂,产生自由基导致细胞周期的延迟以及诱导细胞凋亡相关,其具体机制与青蒿琥酯剂量之间的联系有待进一步研究。     

青蒿琥酯纳米粒的制备及其体外细胞抑制试验

目的:制备青蒿琥酯纳米粒,并对其性质及体外细胞抑制作用进行研究。方法:以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为载体,采用自乳化方法制备青蒿琥酯纳米粒。扫描电镜观察纳米粒的形态,激光粒度仪测定纳米粒的粒径及其分布;考察纳米粒的载药量、包封率、体外释放情况;MTT法考察纳米粒对人白血病细胞株K562在不同时间(24、48、72h)的体外细胞抑制率,并与青蒿琥酯(原料药)比较。结果:所制青蒿琥酯纳米粒为圆球形,表面光滑,平均粒径为(144±3.0)nm,Zeta电位是-31.5mV,平均载药量和包封率分别为14%、84%;体外释放试验前期有明显突释现象,前24h累积释放度为46%,其后释放均匀,120h累积释放度达65%,具有缓释作用;其在72h时对细胞抑制率高于青蒿琥酯组(76.4%vs.59.1%),有较强抑制作用(P<0.05)。结论:所制青蒿琥酯纳米粒在体外具有较好的缓释性,对K562细胞有较强的抑制作用。     

青蒿琥酯抑制人成纤维细胞增殖的实验研究

目的探讨青蒿琥酯(Art)抑制人成纤维细胞(Fb)增殖的作用及机制。方法取人瘢痕组织,经体外培养及鉴定Fb后,将不同浓度的青蒿琥酯溶液作用于体外培养的成纤维细胞。于倒置显微镜及电镜观察其形态学变化,采用四氮唑盐比色分析法(MTT法)及流式细胞仪观察细胞凋亡,计算增殖抑制率和凋亡指数。结果青蒿琥酯对人瘢痕成纤维有明显抑制作用,且呈浓度依赖性。浓度为240、120 mg/L的青蒿琥酯的凋亡率和坏死率较对照组高(P<0.01)。组织学观察试验组见成纤维细胞呈椭圆性,胞质颗粒增多,甚至可见细胞核浓缩、核碎裂等现象。结论青蒿琥酯可抑制人成纤维细胞的增殖,具体机制需进一步探讨。     

青蒿琥酯对脂多糖诱导人结肠上皮细胞炎症反应影响的分子机制研究

目的探讨青蒿琥酯对脂多糖诱导人结肠上皮细胞炎症反应的影响,并研究青蒿琥酯对人结肠上皮细胞炎症治疗作用的可能机制。方法体外原代培养人结肠上皮细胞,并分为空白对照组,LPS诱导组,青蒿琥酯低、中、高剂量组,CCK-8法检测青蒿琥酯对人结肠细胞增殖的影响,ELISA法检测青蒿琥酯对人结肠上皮细胞分泌IL-6和TNF-α炎症因子的影响,Western blot检测青蒿琥酯对Traf6/p65信号通路的影响。结果与LPS诱导组相比,青蒿琥酯能显著改善LPS对人结肠上皮细胞增殖的抑制作用(P<0.05);与LPS诱导组相比,各剂量青蒿琥酯均显著降低了人结肠上皮细胞分泌的IL-6和TNF-α水平(P<0.05);免疫印迹法检测发现,各剂量青蒿琥酯组相对LPS诱导组细胞中Traf6和p-p65表达水平明显降低(P<0.05)。结论青蒿琥酯可抑制人结肠上皮细胞炎症反应,进而改善炎症对细胞增殖的抑制作用,其作用机制可能与下调Traf6/p65信号通路活化有关。     

青蒿琥酯抑制Twist1蛋白表达和血管再生以及降低口腔鳞癌细胞Tca8113转移的作用

目的 研究青蒿琥酯抑制Twist 1表达、降低口腔鳞癌细胞的转移及对血管生成的抑制作用.方法 采用50、100、150、200 μg·mL-1的青蒿琥酯体外培养的口腔鳞癌细胞,然后分别采用Western blot法、MTT法、划痕实验及流式细胞仪检测不同浓度的青蒿琥酯干预对口腔鳞癌细胞Twist1表达、增殖、迁移及凋亡的影响;采用鸡胚尿囊膜检测青蒿琥酯对鸡胚尿囊膜血管生成的影响.结果 与对照组对比,青蒿琥酯可抑制Twist1蛋白的表达、口腔鳞癌细胞的增殖和迁移,且存在时间和剂量依赖性;青蒿琥酯可引起细胞的凋亡,处理组的细胞凋亡率显著高于对照组;青蒿琥酯对鸡胚尿囊膜血管新生有一定的抑制作用(P＜0.05).结论 中药青蒿琥酯可抑制Twist 1蛋白的表达、细胞增殖、迁移,同时可有效抑制血管再生.     

青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞Caspase-3表达的影响

目的 研究青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblast,HELF)系HFL-Ⅰ细胞体外生长的影响,为青蒿琥酯抗纤维化提供实验依据.方法 采用CCK-8法检测青蒿琥酯对体外培养的HFL-Ⅰ细胞生长的影响,用流式细胞术测定细胞凋亡率;RT-PCR法测定凋亡相关蛋白Caspase...     

青蒿琥酯的抗血管生成作用

目的研究青蒿琥酯对血管生成的抑制作用。方法用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的生长、迁移及小管形成实验研究药物的体外抗血管生成作用;用人卵巢癌裸鼠移植瘤模型和免疫组化法研究药物的体内抗血管生成作用。结果青蒿琥酯浓度2.5 μmol·L^-1时,对HUVEC的增殖、迁移和小管形成均有显著的抑制作用;HUVEC 48 h的IC₅₀值为(21±3) μmol·L^-1。在整体实验中,青蒿琥酯50 mg·kg^-1·d^-1即可明显减少肿瘤的血管生成,抑制肿瘤生长;免疫组化结果表明,青蒿琥酯可以抑制VEGF和KDR/flk-1在肿瘤组织中的表达。结论青蒿琥酯有抗血管生成作用,提示该类药物在抗血管生成中有潜在的应用价值。     

中国圆田螺多糖对Hela细胞体外抑制作用的实验研究

目的初步研究中国圆田螺多糖对体外培养的人子宫颈癌细胞（Hela细胞）的抑制作用。方法采用水提法提取中国圆睚螺粗多糖。使用MTT法检测该多糖在不同浓度下对Hela细胞生长的抑制作用，用显微镜观察Hela细胞的形态变化。结果中国圆田螺多糖对Hela细胞有较显著的抑制作用，12．5ng／L时，细胞抑制率为7．37％，浓度为800ng／L时，细胞抑制率达64．83％。结论中国圆田螺粗多糖在体外可抑制Hela细胞增殖。     

青蒿琥酯抗肿瘤作用的实验研究

目的：探讨青蒿琥酯的抗肿瘤作用。方法：采用体内试验以荷瘤小鼠实体瘤重、抑瘤率为实验指标评价青蒿琥酯对S180移植性肉瘤的抑制作用；以荷瘤小鼠存活时间为实验指标评价青蒿琥酯对H22移植性腹水癌的抑制作用。结果：青蒿琥酯能明显抑制实体瘤重，并延长荷瘤小鼠存活时间。结论：青蒿琥酯对S180、H22诱发的移植性肿瘤具有一定的抑制作用。     

青蒿琥酯增加小鼠腹腔巨噬细胞内化内毒素、大肠埃希菌的作用及可能机制

目的:观察青蒿琥酯(artesunate,AS)对小鼠腹腔巨噬细胞内化清除脂多糖/内毒素(li-popolysaccharide/endotoxin,LPS)和吞噬大肠埃希菌的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法:MTT法检测不同浓度网格蛋白抑制剂(monodansylcadaverine,MDC)、内体酸化抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)对小鼠腹腔巨噬细胞活力的影响,以选择恰当的药物工作浓度;激光共聚焦法检测青蒿琥酯及MDC、CQ对小鼠腹腔巨噬细胞内化FITC-LPS的影响;分别采用激光共聚焦和菌落集落形成计数实验观察青蒿琥酯对小鼠腹腔巨噬细胞内化大肠埃希菌的影响;逆转录PCR检测青蒿琥酯对小鼠腹腔巨噬细胞清道夫受体A(class A scavenger receptor,SR-A)mR-NA表达的影响。结果:MDC和CQ浓度分别小于25μg/mL和20μg/mL时对小鼠腹腔巨噬细胞活力无影响;MDC、CQ可抑制小鼠腹腔巨噬细胞内化LPS,青蒿琥酯可增加小鼠腹腔巨噬细胞对LPS的内化,而且青蒿琥酯可增加MDC和CQ处理的巨噬细胞内化LPS的功能。激光共聚焦和菌落集落形成计数实验均显示青蒿琥酯可增加小鼠腹腔巨噬细胞对大肠埃希菌的内化能力。逆转录PCR结果显示青蒿琥酯可增强LPS处理或未处理的小鼠腹腔巨噬细胞SR-A mRNA的表达。结论:青蒿琥酯可增强小鼠腹腔巨噬细胞内化LPS、大肠埃希菌的能力,该作用可能与SR-A mRNA表达升高有关。     

藤茶双氢杨梅树皮素对Hela细胞及A2780细胞增殖的抑制作用

目的探讨藤茶双氢杨梅树皮素（ampelopsin,APS）的抗肿瘤作用。方法以四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT法）、克隆形成法观察APS对Hela细胞及A2780细胞的体外抑制作用。结果APS均能明显抑制体外培养的Hela细胞及A2780细胞的生长,MTT法的半数抑制浓度（IC50）分别为24．6μg／mL和1．2μg／mL,集落形成法中APS质量浓度在4．4～22．2μg／mL时抑制率均为100％。结论藤茶APS对体外培养的Hela细胞及A2780细胞均有明显的抑制作用。     

青蒿琥酯对大鼠孕酮、雌二醇和蜕膜组织的影响

目的研究青蒿琥酯对妊娠大鼠血清孕酮和雌二醇含量及蜕膜组织的影响,以探讨其终止妊娠机理。方法采用放射免疫分析法(RIA)、HE染色和人蜕膜细胞体外培养等方法。结果青蒿琥酯40mg·kg^-1*5d可使妊娠大鼠血清孕酮水平显著下降(P<0.05);雌二醇有下降趋势,肿瘤坏死因子水平则有上升趋势;整体水平能损伤蜕膜组织乃至胎盘;对体外培养的人蜕膜细胞有直接杀伤作用,其LC₅₀为(25±3)mg·L^-1。结论青蒿琥酯能使血清孕酮含量下降并损伤蜕膜和胎盘而使胚胎坏死、吸收而终止妊娠。