4-[4”-(2”,2”,6”,6”-四甲基哌啶氮氧自由基)氨基]-4’-去甲表鬼臼毒抗肿瘤作用

新合成的鬼臼毒素氮氧自由基衍生物4-[4”-(2”,2”,6”,6”-四甲基哌啶氮氧自由基)氨基]-4’-去甲表鬼臼毒(GP-7)显著抑制小鼠移植性肿瘤S180、实体型HePS和Lewis肺癌生长;7.5～20mg/kg,给药10d,抑瘤率分别为36.0％～58.4%、29.6%～60.0%和27.2%～46.5%;抑制作用和鬼臼乙叉甙(VP-16)相似。GP-7小鼠一次ip,LD_(50)为231.2mg/kg,是VP-16的3.3倍;连续给药10d,对小鼠脾和胸腺指数的影响较VP-16小,对小鼠WBC的影响和VP-16相同。GP-7和VP-165mg/L处理L1210细胞24h,抑瘤率分别为75.5%和73.6%;处理SGC-7901细胞72h,抑瘤率分别为81.4%和84.2%。     

高效液相色谱法测定4-[4″-(2″,2″,6″,6″-四甲基哌啶氮氧自由基)氨基]-4'-去甲表鬼臼毒素大鼠血浆浓度及药代动力学参数

建立了大鼠血浆中4-[4″-(2″,2″,6″,6″-四甲基哌啶氮氧自由基)氨基]-4'-去甲表鬼臼毒素(GP-7)浓度的HPLC测定方法。用ODS柱分离,甲醇-水-冰醋酸(59:41:0.6)为流动相,检测波长285nm。血浆甲乙醚-二氯甲烷混合液萃取,45℃水浴蒸干,残渣用流动相溶解进样,内标法定量;血药浓度在2～200μg·ml^-1范围内呈线性关系,r=0.9997,血浆最低检测浓度0.2μg·ml^-1,方法回收率94%～100%,日内、日间RSD2.29%～7.70%。大鼠ivGP-710,20,30mg·kg^-1,药代动力学过程符合二室开放模型,消除半衰期为39.8±10.8min。     

4-[4″-(2″,2″,6″,6″-四甲基-1″-哌啶氮氧自由基)氨基]-4′-去甲表鬼臼毒素对K562/ADM细胞的抑制作用

目的比较4-[4″-(2″,2″,6″,6″-四甲基-1″-哌啶氮氧自由基)氨基]-4′-去甲表鬼臼毒素(GP-7)对多药耐药人慢性粒细胞白血病K562的多柔比星耐药株细胞(K562/ADM细胞)的抑制作用是否优于依托泊苷。方法以依托泊苷和K562细胞为对照,用不同浓度GP-7处理K562/ADM细胞不同时间,MTT比色法测定细胞增殖,流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡率,普通光学显微镜观察细胞凋亡形态,琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA凋亡性降解。结果8~128mol.L-1GP-7处理48h或64μmol.L-1GP-7处理24~72h,GP-7对K562/ADM细胞的增殖抑制呈剂量依赖性(r=0.947,P<0.05)和时间依赖性(r=0.999,P<0.01)。GP-7及依托泊苷对K562/ADM的IC50分别为(45.9±1.8)及(68.7±4.6)μmol.L-1;64μmol.L-1GP-7作用48h可使G2/M期细胞明显增多,相同情况下依托泊苷则使S期细胞明显增多;GP-7可引起K562/ADM和K562细胞凋亡,但其引起的K562/ADM和K562细胞凋亡率与依托泊苷无明显差异;GP-7可引起K562/ADM和K562细胞典型的凋亡形态学变化和DNA凋亡性降解,但GP-7引起的K562/ADM细胞DNA凋亡性降解弱于K562细胞;128及256μmol.L-1GP-7或依托泊苷处理K562/ADM和K562细胞48h,GP-7诱导DNA凋亡性降解的作用强于依托泊苷,但32和64μmol.L-1时作用则相反。结论GP-7可抑制多药耐药白血病细胞株K562/ADM的增殖,诱导细胞凋亡。GP-7抑制多药耐药白血病细胞株K562/ADM的作用优于依托泊苷。     

4-［4″-(2″, 2″, 6″, 6″-四甲基-1″-哌啶氮氧自由基)氨基］-4′-去甲表鬼臼毒素对K562/ADM细胞的抑制作用

目的 比较4-［4″-(2″, 2″, 6″, 6″-四甲基-1″-哌啶氮氧自由基)氨基］-4′-去甲表鬼臼毒素（GP-7）对多药耐药人慢性粒细胞白血病K562的多柔比星耐药株细胞（K562/ADM细胞）的抑制作用是否优于依托泊苷。方法 以依托泊苷和K562细胞为对照，用不同浓度GP-7处理K562/ADM细胞不同时间，MTT比色法测定细胞增殖，流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡率，普通光学显微镜观察细胞凋亡形态，琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA凋亡性降解。结果 8～128 mol·L^-1 GP-7处理48 h或64 μmol·L^-1 GP-7处理24～72 h，GP-7对K562/ADM细胞的增殖抑制呈剂量依赖性（r=0.947，P＜0.05)和时间依赖性(r=0.999，P＜0.01)。GP-7及依托泊苷对K562/ADM的IC₅₀分别为(45.9±1.8)及(68.7±4.6)μmol·L^-1；64 μmol·L^-1 GP-7作用48 h可使G₂/M期细胞明显增多，相同情况下依托泊苷则使S期细胞明显增多；GP-7可引起K562/ADM和K562细胞凋亡，但其引起的K562/ADM和K562细胞凋亡率与依托泊苷无明显差异；GP-7可引起K562/ADM和K562细胞典型的凋亡形态学变化和DNA凋亡性降解，但GP-7引起的K562/ADM细胞DNA凋亡性降解弱于K562细胞；128及256 μmol·L^-1 GP-7或依托泊苷处理K562/ADM和K562细胞48 h，GP-7诱导DNA凋亡性降解的作用强于依托泊苷，但32和64 μmol·L^-1时作用则相反。结论 GP-7可抑制多药耐药白血病细胞株K562/ADM的增殖,诱导细胞凋亡。GP-7抑制多药耐药白血病细胞株K562/ADM的作用优于依托泊苷。     

4-〔4″-(2″,2″,6″,6″-四甲基哌啶氮氧自由基)氨基〕-4′-去甲表鬼臼毒素诱导NB4肿瘤细胞凋亡

为了从细胞凋亡角度探讨 4-〔4″- ( 2″,2″,6″,6″-四甲基 - 1″-哌啶氮氧自由基 )氨基〕- 4′-去甲表鬼臼毒素 ( GP7)抗肿瘤作用的机理 ,用活细胞计数法及MTT比色法观察了 GP7对 NB4细胞的生长抑制作用 ;用光学显微镜及电子显微镜观察了凋亡细胞的形态学变化 ;用琼脂糖凝胶电泳观察了 DNA的梯形改变 .结果发现 :GP70 .1 8- 1 8μmol· L-1能显著抑制 NB4细胞的生长增殖 ;GP7可明显诱导NB4细胞凋亡的形态学变化及 DNA梯形带 .凋亡率随处理时间延长而增高 . 9μmol· L-1处理 NB4细胞 48h凋亡率达到最高峰 ,为 45.0± 3.0 ) % .延长处理时间至 72 h,凋亡率降至 ( 2 6.7± 1 .5) % .凋亡率与药物浓度的对数呈正相关 ( r=0 .938,P<0 .0 5) .结果表明 GP7具有诱导 NB4细胞凋亡作用 .     

4-[4″-(2″,2″,6″,6″-四甲基哌啶氮氧自由基)氨基]-4′-去甲表鬼臼毒素在荷肉瘤180小鼠体内的药物动力学(英文)

目的:研究4-[4″-(2″,2″,6″,6″-四甲基哌啶氮氧自由基)氨基]-4′-去甲表鬼臼毒素在荷肉瘤180小鼠体内的药物动力学.方法:用HPLC紫外检测法.结果:GP-7在小鼠血浆中的浓度—时间过程符合二室开放模型.20,60mg·kg~(-1)iv,T_((1/2β)约40 min;药物浓度以肝脏和肺中最高;肿瘤组织中药物水平高于脾,肾和骨髓.72 h内,经尿以原形排出的GP-7占给药量的20％左右.结论:GP-7在荷肉瘤180在小鼠体内分布较广,消除较慢.肿瘤组织中浓度较高,部分以原形从尿中排出.     

鬼臼酰肼哌啶氮氧自由基腙及其还原物体外抗肿瘤作用

采用L1210，SGC－7901细胞，观察鬼臼酰肼哌啶氮氧自由基腙（GP－1）及其还原物（GP－1－OH，GP－1-H）的体外抗肿瘤作用。结果表明三者均抑制L1210细胞增殖，IC50分别为1．57，4．02，13．68μmol／L：三者对SGC－7901细胞MTTformazan生成的抑制作用与细胞增殖试验相似，IC50分别为2.76，8.03，19．10μmol／L，GP-1作用最强。     

4-去氧-4β-芳甲磺酰胺基-4′-去甲鬼臼脂素的合成及体外抑制肿瘤细胞活性

目的　寻找高效低毒的鬼臼脂素类抗肿瘤药物。方法和结果　设计合成了4-增碳侧链的磺酰胺基鬼臼脂素衍生物(1-15),均为新化合物。并对这些化合物进行了体外抑制KB细胞和L1210白血病细胞活性试验。结论　化合物2,3,8,9,11和12有显著的体外抑制肿瘤细胞活性。     

鬼臼酰肼-2,2,6,6-四甲基哌啶腙的抗肿瘤作用

目的研究鬼臼酰肼-2，2，6，6-四甲基哌啶腙的抗肿瘤作用。方法：K(562)及L(1210)细胞体外培养24h台盼蓝染色计数、小鼠单次腹腔注射LD(50)测定、小鼠移植性肿瘤S(180)、EAC及HepA皮下接种及测瘤重。结果：鬼臼酰肼-2，2，6，6-四甲基哌啶腙及鬼臼乙叉甙用0．1714、0．0857、0.0171、0.0086及0.0017mmol·L(－1)浓度对体外培养的K(562)及L(1210)细胞有杀伤及增殖抑制作用，鬼臼酰肼-2，2，6，6-四甲基哌啶腙的抑制率为60．55％、45．38％、18．68％、15．93％、11．57％；61．88％、47．59％、24．28％、16．55％、12．85％。鬼臼乙叉甙抑制率为64．73％、49．15％、22．94％、15．37％、10．44％；66．37％、52．43％、36.32％、19．37％、9．07％，给药组与对照组比较差别有显著性。两药品相同剂量比较无明显的差异，鬼臼酰肼-2,2，6，6-四甲基哌啶腙小鼠单次腹腔注射LD(50)为288．6～413．1mg·kg(-1)。鬼臼乙叉甙LD50为72.3～102.9mg·kg(-1)，对小鼠移植性肿瘤S(180)、EAC及HepA有抑制作用，瘤重抑制率鬼臼酰肼-2，2，6，6-四甲基哌啶腙为41．6％、43．3％、40．3％、（70．0mg·kg(－1)），32．2％、34．6％、35．1％（35．0mg·kg(-1)），26.2％、32.3％、28．6％（14．5mg·kg(－1)）;鬼臼乙叉?     

新化合物2-[(4-苄氧基)苯胺基]-6-环己胺基嘌呤的体外抗肿瘤活性

目的研究新化合物2-[(4-苄氧基)苯胺基]-6-环己胺基嘌呤(S701)的体外抗肿瘤活性。方法采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法),检测S701在1⁵0μmol·L-1浓度范围内对人肺癌A549细胞、人结直肠腺癌Lo Vo细胞和人肝癌BEL-7402细胞存活率的影响,计算半数抑制浓度(IC50),并观察相应的细胞形态学变化。结果在150μmol·L-1浓度范围内对人肺癌A549细胞、人结直肠腺癌Lo Vo细胞和人肝癌BEL-7402细胞存活率的影响,计算半数抑制浓度(IC50),并观察相应的细胞形态学变化。结果在1⁵0μmol·L-1浓度范围内,S701作用24 h对人肺癌A549细胞、人结直肠腺癌Lo Vo细胞和人肝癌BEL-7402细胞存活率均表现出不同程度的抑制作用,且呈现出一定的浓度依赖趋势。S701 A549细胞、Lo Vo细胞和BEL-7402细胞的IC50分别为13.43、28.56、13.02μmol·L-1。形态学结果显示,S701对上述三种肿瘤细胞均有不同程度的杀伤作用,其作用随浓度的增加而增强。结论新化合物S701可抑制A549细胞、Lo Vo细胞和BEL-7402细胞的生长,在体外具有一定的抗肿瘤活性。     

4—（4“—（2”,2“,6”,6“—四甲基哌啶氮氧自由基）...

The antitumor activity of GP-7, a new spin-labeled epipodophyllotoxin, was studied by liquid scintillation spectrometry. There were many similarities between GP-7 and etoposide. Both GP-7 and etoposide inhibited the incorporation of [3H]TdR, [3H]UR, and [3H]Leu into DNA, RNA, and protein synthesis in leukemia 7712 cells. The inhibition correlated with drug concentration and duration. IC50 of GP-7 and etoposide on DNA synthesis at 24 h were 0.21 and 0.37 micrograms.ml-1, respectively. The inhibition of GP-7 or etoposide on DNA synthesis retained even after the drug were washed out for 3 h. GP-7 and etoposide caused DNA single-strand breaks, with a well concentration-response relationship. These data suggest that the inhibition of DNA synthesis by GP-7 or etoposide is likely due to the damage of DNA template and breaking of single-strand DNA.     

2-乙氧甲酰亚甲基-4-氰基-5,6-二苯哒嗪-3-酮对L1210细胞周期的影响

本文研究了哒嗪(DPP)衍生物PD032对L1210细胞周期移行的影响。结果表明,PD032(2～10μmol/L)作用24h,G_1期细胞明显减少,G_2+M期细胞增加5～10倍。同时观察到有丝分裂指数增加,细胞体积增大及多核现象。S期在高浓度(10μmol/L)PD032时有减少,这时[~3H]TdR参入DNA也有轻度抑制。洗去药物后24～48h,上述变化有不同程度的恢复。以上结果说明PD032是有丝分裂抑制剂。     

Podophyllic acid piperidyl hydrazone nitroxide radical and etoposide on nucleic acids and protein metabolism of leukemia L7712 cells in vitro

Podophyllic acid piperidyl hydrazone nitroxide radical (GP-1) and etoposide (VP-16), derivatives of podophyllotoxin, inhibited DNA, RNA, protein and ATP synthesis of leukemia L7712 cells at a concentration of 5 micrograms/ml. Inhibitory extents were dependent on the exposure time from 3 to 24 h. The inhibitory rates of both drugs were about 15-66%. ID50 of GP-1 and VP-16 on the synthesis of L7712 cells at 24 h were 0.16 and 0.38 micrograms/ml, respectively. The dose-response curve of GP-1 was a parabolic one, while that of VP-16 was a straight line. The inhibition of GP-1 or VP-16 on DNA synthesis existed also after cells washing. It is suggested that the antitumor effects of GP-1 and VP-16 seem to be related to the damage of DNA template.     

自由基在鬼臼酰肼哌啶腙氮氧自由基抗肿瘤及毒性中的作用

目的：探索鬼臼酰肼哌啶腙氮氧自由基中自由基对其抗肿瘤作用及毒性的影响。方法;采用小鼠移植肿瘤及体外培养的肿瘤细胞系,检测ＧＰ－１及其自由基还原物ＧＰ－１－Ｈ的体内外抗肿瘤作用,毒性及对细胞周期,有丝分裂指数和小鼠免疫功能的影响。     

Showdomycin and its reactive moiety,maleimide: A comparison in selective toxicity and mechanism of action in vitro

Showdomycin, a C-nucleoside antibiotic, was twice as toxic to L1210 murine leukemia cells as to murine bone narrow progenitor cells of the granulocyte-macrophage series. Its aglycone, maleimide, was equally toxic to both cell lines. Cysteine, adenosine and the potent nucleoside transport inhibitor 6-[(2-hydroxy-5-nitrobenzyl)thio]-9-β-d-ribofuranosylpurine (HNBMPR) reversed the early stages of toxicity of showdomycin to L1210 cells, but did not reduce the toxicity of maleimide. At cytotoxic concentrations, showdomycin progressively inactivated the nucleoside uptake system to completion. This inhibition of nucleoside uptake was reversed by cysteine under conditions where it reversed cytotoxicity. The binding of 6-[(4-nitrobenzyl)thio]-9-β-d-ribofuranosylpurine (NBMPR) by L1210 cells was also inhibited by showdomycin, indicating that the antibiotic inactivated the nucleoside transport site. The data suggest that the C-nucleoside structure confers some selectivity to the cytotoxic action of maleimide, directing it toward the nucleoside transport system of the tumor cell.