内皮细胞损伤及功能变化在心肌缺血再灌注中的意义及药物干预

目的：探讨内皮细胞损伤及功能变化在心肌缺血再灌注损伤中的发病机制及卡托普利对其的影响。方法：实验兔分为心肌缺血再灌注组（ｎ＝８），心肌缺血再灌注＋卡托普利治疗组（ｎ＝８）及假手术对照组（ｎ＝８）；分别测结扎前，缺血０．５小时，再灌注０．５小时、１．５小时和６小时共５个时相点。用放射免疫法测定血浆内皮素（ＥＴ），紫外分光光度计测一氧化氮（ＮＯ），Ｐｅｒｃｏｌ密度梯度离心法分离血循环内皮细胞。结果：心肌缺血０．５小时，血中ＥＴ、ＮＯ含量无明显变化，于再灌注０．５小时ＮＯ下降、ＥＴ升高，尤以再灌注１．５小时和６小时变化显著（Ｐ均＜０．０５）。循环内皮细胞则以再灌注１．５小时明显增高（Ｐ＜０．０５）。卡托普利可逆转上述指标。结论：再灌注导致内皮功能紊乱，进而加重内皮细胞损伤，二者互为因果关系，卡托普利通过保护内皮而减轻再灌注损伤。     

卡托普利对缺血再灌注兔心肌一氧化氮及其合酶活性的影响

目的：探讨卡托普利（ｃａｐｔｏｐｒｉｌ）对局部缺血再灌注免心肌保护作用的机制。 方法：将１８只新西兰兔随机分３组（每组ｎ＝６）,对照组左冠状动脉前降支阻断３０分,再灌注９０分;卡托普利组阻断前３０分静脉注射卡托普利每 ２０分 ２ ｍｇ／ｋｇ,再灌注时再持续静脉注射卡托普利每 ９０分１ｍｇ／ｋｇ,假手术组环左冠状动脉前降支置线但不阻断血流。观察心肌一氧化氮合酶（ＮＯＳ）同工酶活性、过氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、肌酸激酶含量及右心房血一氧化氮（ＮＯ）的变化,监测心肌功能。 结果：缺血再灌注心肌原生型ＮＯＳ（ＣＮＯＳ）活性（Ｐ＜０．００１）及总ＮＯＳ活性（Ｐ＜０．０１）显著下降,ＮＯ产生减少（Ｐ＜０．０５～０．０１）,卡托普利组缺血再灌注期间ＮＯ水平高于对照组（Ｐ＜０．０１）,再灌注３０分心肌ＣＮＯＳ活性（Ｐ＜０．０１）及总ＮＯＳ活性（Ｐ＜０．０５）显著高于对照组,心肌损害较对照组减轻。 结论：ＮＯ产生不足是心肌再灌注损伤的重要因素,卡托普利通过调节ＮＯＳ活性,维持正常ＮＯ水平起到保护作用。     

高血压患者血浆和淋巴细胞中血管紧张素Ⅱ、内皮素和一氧化氮的变化及关系

分析一组高血压病患者血浆和淋巴细胞中血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）、内皮素（ＥＴ）和一氧化氮（ＮＯ）含量的变化及它们间的相互关系。方法高血压（ＥＨ）组３９例，正常对照（ＮＣ）组４１例，放射免疫分析法测定ＡｎｇⅡ、ＥＴ，高效液相色谱分析法测定ＮＯ。结果ＥＨ患者血浆和淋巴细胞中ＥＴ均高于ＮＣ组（Ｐ分别＜０．０５和＜０．０１），ＮＯ低于ＮＣ组（Ｐ分别＜０．０５和＜０．０１）。除血浆ＥＴ和ＮＯ外，各指标改变ＥＨⅡ期较Ⅰ期明显（Ｐ分别＜０．０５和＜０．０１）。逐步回归分析表明，ＥＨ组平均动脉压（ＭＡＰ）与血浆及淋巴细胞中ＡｎｇⅡ、ＥＴ呈正相关，与ＮＯ负相关（ｒ分别＝０．６７，０．８１，Ｐ均＜０．０１）；ＥＨ组血浆和淋巴细胞中ＮＯ与ＡｎｇⅡ、ＥＴ均呈负相关（ｒ分别＝－０．６５１，－０．７２５，Ｐ均＜０．０１）。结论淋巴细胞反映血管内皮细胞内分泌功能比血浆更为敏感，与ＭＡＰ相关性更好，ＡｎｇⅡ、ＥＴ和ＮＯ三者分泌失平衡，是ＥＨ发病的重要原因之一。     

心肌梗塞及再灌注治疗对左室结构的影响

本文利用二维超声心动图对心肌梗塞及再灌注治疗对心室结构的形响作了观察，结果显示急性心肌梗塞（ＡＭＩ）和陈旧心肌梗塞（ＯＭＩ）患者左室容积明显增大（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１），但ＯＭＩ患者较ＡＭＩ患者更明显（Ｐ＜０．０５）。ＡＭＩ患者溶栓成功组左室收缩末容积（ＥＳＶ）小于非溶栓者，ＯＭＩ患者曾成功溶栓者在室ＥＳＶ和舒张末容积（ＥＤＶ）均小于非溶栓者（Ｐ＜０．０５）。     

硝酸甘油对哮喘患者一氧化氮内皮素的影响及机制

目的　了解哮喘患者肺泡巨噬细胞（ＡＭ） 、支气管上皮细胞（ＢＥＣ） 源性一氧化氮（ＮＯ）、内皮素（ＥＴ）的分泌状态及硝酸甘油（ＮＴＧ）对哮喘患者ＡＭ、ＢＥＣ产生ＮＯ、ＥＴ的影响及机制。方法　分离纯化了１５ 例轻、中度哮喘发作期患者、７ 名健康受试者ＡＭ、ＢＥＣ,并分为哮喘未干预组、哮喘ＮＴＧ干预组和健康对照组,用放射免疫法和镀铜镉还原法分别测定ＡＭ、ＢＥＣ培养４８ 小时上清液中ＥＴ、ＮＯ·２／ＮＯ·３ 浓度,用原位杂交的方法检测ＡＭ、ＢＥＣｉＮＯＳｍＲＮＡ、ＥＴｍＲＮＡ 的表达。结果　（１） 健康受试者ＡＭ、ＢＥＣ分泌少量ＮＯ和ＥＴ及少量ｉＮＯＳｍＲＮＡ 、ＥＴｍＲＮＡ表达;（２）哮喘患者ＡＭ、ＢＥＣ源性ＮＯ、ＥＴ水平及ＡＭ、ＢＥＣｉＮＯＳｍＲＮＡ、ＥＴｍＲＮＡ表达与各组比较差异有显著性（ Ｐ均＜ ０－０５）;（３）ＮＴＧ 促进哮喘患者ＡＭ、ＢＥＣ源性ＮＯ产生（ Ｐ均＜０－０５）,明显抑制ＥＴ产生和ＥＴｍＲＮＡ 的表达,与对照组比较差异均无显著性（ Ｐ均＞ ０－０５） ,ＮＴＧ同时抑制哮喘患者ＡＭ、ＢＥＣｉＮＯＳｍＲＮＡ的表达,与健康对照组、哮喘未干预组比较差异有显著性（Ｐ均＜０－０５） ;（４） 除哮喘ＮＴＧ     

消化系恶性肿瘤患者血清与腹水中细胞因子活性变化

目的研究消化系恶性肿瘤（ＤＭＴ）患者血清与腹水中内源性ＩＬ２,ＩＬ６,ＩＬ８,ＴＮＦα和ＩＦＮγ的生物学活性．方法应用ＥＬＩＳＡ法检测了１５例ＤＭＴ患者（肝癌１１例,胆总管癌１例,胰腺癌１例,胃癌１例,直肠癌１例）血清与腹水中５种细胞因子活性,并与６例肝硬变（ＬＣ）患者和８例正常成人进行了比较分析．结果ＤＭＴ患者血清ＩＬ２,ＩＬ６的生物学活性显著低于ＬＣ（Ｐ＜００５）;腹水中ＩＬ２,ＩＬ８活性显著低于ＬＣ组（Ｐ＜００１）,而ＩＬ６和ＩＦＮγ活性则高于ＬＣ组（Ｐ＜００１,００５）．ＤＭＴ患者血清中ＩＬ６,ＩＬ８活性明显高于正常成人组（Ｐ＜００５）;ＩＬ２,ＩＦＮγ则低于正常成人组,但缺乏显著性．肝癌血清和腹水中ＩＬ２活性显著高于非肝癌组（Ｐ＜００５）;而ＩＬ６活性则相对降低（Ｐ＜００５）．结论恶性肿瘤患者血清中ＩＬ２和ＩＦＮγ活性低于正常人,是ＤＭＴ患者抗肿瘤免疫功能缺陷的标志．ＩＬ６对于预测ＤＭＴ患者的预后具有重要的意义     

高血压病患者动脉血管平滑肌细胞NO含量及作用

目的: 探讨在基础状态下高血压病患者（ＥＨ）动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的一氧化氮合酶（ＮＯＳ）和一氧化氮（ＮＯ）的变化特点及其对ＶＳＭＣ增殖的影响。方法: 采用血压正常者（ＮＴ）及ＥＨ 患者的肠系膜动脉进行分离培养,对比观察ＮＴ组和ＥＨ 组的动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ活性、ＮＯ含量、细胞计数和细胞周期的变化,研究ＥＨ 患者动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ－ＮＯ系统的变化与细胞增殖的关系。结果:①在基础状态下,ＥＨ组动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ活性和ＮＯ含量较ＮＴ组明显降低（Ｐ＜ ０．０５）。②ＥＨ组动脉ＶＳＭＣ的细胞数量明显高于ＮＴ组（Ｐ＜ ０．０５）。③ＥＨ组Ｓ期百分率和细胞增殖指数（ＰＩ）明显高于ＮＴ组（Ｐ＜ ０．０５）,ＥＨ组Ｇ０／Ｇ１ 期百分率较ＮＴ组明显降低（Ｐ＜ ０．０５）。④ＮＴ组和ＥＨ组的ＮＯＳ活性和ＮＯ含量与ＰＩ均呈负相关。结论:ＥＨ患者动脉ＶＳＭＣ存在着ＮＯＳ－ＮＯ系统功能低下;ＮＯ具有抑制ＶＳＭＣ增殖的作用     

L－精氨酸逆转一氧化氮抑制后的犬冠脉血流动力学改变和内皮素－1含量升高

观察了犬冠脉内灌注Ｎ－单甲基左旋精氨酸（Ｌ－ＮＭＭＡ）后再灌注Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）和单独灌注Ｌ－ＮＭＭＡ前后冠脉血流动力学、冠脉血流储备以及冠脉对不同浓度的乙酰胆碱（Ａｃｈ）反应的变化，同时用放免法测定冠脉前降支（ＬＡＤ）伴行静脉血中内皮素－１（ＥＴ－１）含量。结果发现，Ｌ－Ａｒｇ完全逆转了灌注Ｌ－ＮＭＭＡ引起的血流动力学改变，使心率回升，下降的基础冠脉流量（ＣＢＦ），从２０±８ｍｌ／ｍｉｎ回升至２８±７ｍｌ／ｍｉｎ，Ｐ＜０．０５），降低的冠脉储备恢复，从５１±１０ｍｌ／ｍｉｎ升至９４±１５ｍｌ／ｍｉｎ，Ｐ〈０．０１），ＥＴ－１的含量不再升高，从１５．５±３．０ｎｇ／Ｌ下降至５．０±２．０ｎｇ／Ｌ，Ｐ〈０．０１），Ａｃｈ介导的ＣＢＦ增加不再受到抑制（Ｐ〈０．０１）。结果提示提供外源性Ｌ－Ａｒｇ可增加一氧化氮（ＮＯ）的产生，使由于ＮＯ抑制而产生的血流动力学改变和ＥＴ－１升高发生逆转。     

直接经皮冠状动脉腔内成形术与溶栓治疗急性心肌梗塞近期疗效分析

目的比较直接经皮冠状动脉腔内成形术（ＰＴＣＡ）与药物溶栓治疗急性心肌梗塞（ＡＭＩ）患者住院期间的临床效果。方法在１０９例ＡＭＩ患者中，４５例患者接受直接ＰＴＣＡ治疗，６４例患者接受药物溶栓治疗。结果溶栓组梗塞相关血管（ＩＲＡ）再通的患者有４８例，再通率为７５％；直接ＰＴＣＡ组ＩＲＡ成功开通的患者有４４例，成功率为９７．８％。住院期间左室射血分数（ＥＦ）溶栓组为５４．１±１３．２，直接ＰＴＣＡ组为６４．２±１０．１，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）；病死率分别为６．３％和２．２％，两组间差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。进一步分析溶栓再通组与直接ＰＴＣＡ成功组的临床疗效，前者因再闭塞或缺血发作行择期ＰＴＣＡ的比率明显高于直接ＰＴＣＡ组（２７．１％ｖｓ０；Ｐ＜０．０５），但直接ＰＴＣＡ组左室ＥＦ仍显著高于溶栓再通组（６４．８±９．８ｖｓ５５．９±１２．６Ｐ＜０．０５）。住院期间再发梗塞，心肌缺血事件和心力衰竭例数溶栓再通组都有增加的趋势，但差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论直接ＰＴＣＡ与溶栓治疗ＡＭＩ患者，前者可使ＩＲＡ充分有效地开通，能更好地改善患者心功能     

充血性心衰患者血浆内皮素和一氧化氮变化的临床意义及培哚普利的干预作用

为了解充血性心衰（ＣＨＦ）时心钠素（ＡＮＦ），内皮素（ＥＴ）和一氧化氮（ＮＯ）变化的临床意义及培哚普利的于预作用，我们选择４０例临床确诊为ＣＨＦ的患者，并随机分为培哚普利治疗组和常规治疗组，放免法测定血浆ＡＮＦ，ＥＴ含量，比色法测定血浆ＮＯ含量，与正常对照组比较，并观察治疗前后上述指标的变化情况。结果ＣＨＦ患者的血浆ＡＮＦ，ＥＴ水平均显著高于对照组（Ｐ＜０．０１），ＮＯ明显低于对照组（Ｐ＜０．０５）。常规治疗组治疗前后上述指标无明显改变（Ｐ＞０．０５），培哚普利平均治疗８周后ＡＮＦ，ＥＴ显著下降（Ｐ＜０．００１）而ＮＯ显著上升（Ｐ＜０．０５），提示ＡＮＦ，ＥＴ和ＮＯ参与了ＣＨＦ的病理生理过程。培哚普利可以降低ＣＨＦ的治疗有益。     

褪黑素减轻心肌缺血/再灌注损伤的作用及机制

目的:探讨褪黑素（melatonin,Mel）在大鼠心肌缺血/再灌注（MI/R）损伤中的拮抗作用及其机制。方法:80只体质量200~250 g雄性SD大鼠随机分为4组:假手术（Sham）组、溶剂对照（MI/R+V）组、Mel治疗（MI/R+Mel）组、Mel+EX527（MI/R+Mel+EX）组。常规结扎左冠状动脉前降支行心肌缺血/再灌注手术,缺血30 min,再灌72 h后超声心动图法检测各组大鼠心功能,再灌6 h后ELISA法检测血清酶学指标,TUNEL法检测心肌细胞凋亡率,Evans blue-TTC双染法测定梗死面积,Western blot法检测沉默信息转录调控因子1（SIRT1）、乙酰化叉头转录因子1（Ac-Foxo1）及凋亡相关蛋白表达水平。结果:Mel治疗可显著改善MI/R损伤后心功能,降低血清肌酸激酶（CK）及乳酸脱氢酶（LDH）水平,降低凋亡率及梗死面积,上调SIRT1表达,下调Ac-Foxo1水平,降低凋亡相关蛋白表达。而使用EX527阻断SIRT1信号后逆转Mel的上述作用（均P<0.01）。结论:Mel可发挥抗凋亡作用减轻MI/R损伤并改善心功能,其作用机制可能与其激活SIRT1信号通路并降低Ac-Foxo1水平有关。     

大鼠心脏缺血/再灌注后心肌中GLP-1R表达的变化

目的 观察大鼠心脏缺血/再灌注(I/R)不同时间点心肌中胰高血糖素样肽-1受体（glucagon-like peptide 1 receptor,GLP-1R）表达的变化。方法 将雄性SD大鼠左前降支动脉结扎30 min建立心肌梗死(MI)模型,然后松开血管进行再灌注。心电向量示波图和心脏彩超均证实MI模型成功建立。在再灌注的不同时间点,用免疫组化染色法及Western blot半定量检测GLP-1R受体表达水平的变化。结果 心电向量示波图证实MI发生。模型组再灌注后1 d心脏超声示,大鼠射血分数〔(70.4±0.5)%〕较Sham组〔(87.4±1.0)% 〕明显下降(P<0.01)。与Sham组相比,Western blot测定显示,GLP-1R的表达在I/R后8 h升高并达到峰值(P<0.01),再灌注后1 d和3 d开始下降,但仍高于Sham组(P<0.05,P<0.01),再灌注7 d后恢复正常水平,与Sham组无差异。免疫组化染色法的检测结果变化与Western blot法的检测结果规律相同。结论 大鼠心脏I/R损伤可激活心肌中GLP-1R先上调后恢复正常水平的表达变化。     

羟基红花黄色素A改善SD大鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的研究羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对大鼠心肌缺血/再灌注(myocardial ischemia/reperfusion,MI/R)损伤的改善作用。方法采用结扎Sprague Dawley(SD)大鼠冠状动脉左前降支的方法,建立MI/R损伤模型;结扎大鼠冠状A前降支30 min,再灌注3 h,灌注即刻给药。实验分为假手术组(Sham组)、模型组(MI/R组)、HSYA治疗组(MI/R+HSYA组,5 mg/kg),每组10只动物。观察心肌缺血损伤面积大小、HE染色变化、心电图监测变化、心肌损伤标志物以及血清中IL-1、IL-6和TNF-α的含量变化。结果 MI/R+HSYA组心肌梗死面积显著低于MI/R组(P0.05)。HE染色显示MI/R+HSYA组心肌细胞形态更接近于假手术组。血流动力学及心电监测显示MI/R+HSYA组心肌舒缩功能指标左心室收缩末压(LVSP)、左心室上升最大速率(+dp/dtmax)、左心室下降最大速率(-dp/dtmax)以及心率(HR)较MI/R组均升高(P0.05)。MI/R+HSYA组血清肌酸激酶同工酶(CKMB)、肌钙蛋白I(c Tn I)水平较MI/R组有所降低(P0.05);IL-1、IL-6及TNF-α水平也较MI/R组有所降低(P0.05)。结论 HSYA可以降低心肌梗死的程度和范围,改善心功能,减少心肌细胞损伤,抑制炎症因子的释放,从而发挥保护和改善心肌缺血的作用。     

鸢尾素对缺血再灌注心肌铁死亡的抑制作用

目的 建立小鼠心肌缺血再灌注（MI/R）损伤模型,探讨鸢尾素（irisin）能否抑制心肌铁死亡进而发挥心肌保护作用。 方法 将80只5周龄健康雄性C57小鼠随机分为正常对照组（40只）和运动训练组（40只）。运动组完成训练后进一步将两组小鼠分为假手术组和MI/R组（每组20只）。采用小鼠急性MI/R在体模型(缺血30 min,再灌注24 h) 于再灌注后取心肌组织,检测各组血清及组织中irisin水平、铁死亡相关信号表达、心肌梗死面积和整体心脏功能。在细胞学实验中,采用H9c2心肌细胞建立缺氧/复氧（H/R）模型并给予irisin处理后检测铁死亡相关信号表达情况。 结果 铁死亡抑制剂ferrostatin-1可显著减小MI/R心肌梗死面积,降低MI/R心肌中铁死亡标志物Ptgs2 mRNA和丙二醛（MDA）水平,提示心肌铁死亡是MI/R心肌损伤的重要部分。与对照组相比,有氧运动训练可有效提高骨骼肌和心肌中的irisin水平（P<0.05）。运动组MI/R心肌的铁死亡程度被显著抑制,心肌Ptgs2 mRNA、MDA和脂质过氧化程度均显著降低（P<0.05）,心功能显著改善（P<0.05）。外源性补充irisin可有效提高MI/R心肌中GPX4水平而抑制心肌铁死亡程度,减小心肌梗死面积（P<0.05）。细胞学实验发现采用siRNA抑制H9c2细胞整合素αV/β5受体可有效阻断irisin对铁死亡的抑制作用。 结论 鸢尾素通过整合素αV/β5受体-GPX4信号途径抑制MI/R心肌铁死亡。有氧运动训练可通过提高内源性irisin水平实现心肌保护作用。     

Endothelium and myocardial protecting actions of taprostene, a stable prostacyclin analogue, after acute myocardial ischemia and reperfusion in cats

The effects of taprostene, a synthetic prostacyclin analogue, were investigated in a 6-hour model of myocardial ischemia (MI) with reperfusion in anesthetized cats. Taprostene (100 ng/kg/min) was infused intravenously starting 30 minutes postocclusion of the left anterior descending coronary artery followed by reperfusion 1 hour later, and the cats were observed for an additional 4.5 hours. Taprostene infusion resulted in significantly lower plasma creatine phosphokinase activities at every time from 3 to 6 hours for the MI + taprostene group compared with the MI + vehicle group and were not significantly different when compared with sham MI controls. The areas at risk, expressed as a percentage of the total left ventricular weights, were not significantly different between the MI groups. However, the necrotic area expressed as a percentage of the myocardial area at risk was significantly lower in the taprostene-treated cats compared with the untreated MI group (p less than 0.01). Cardiac myeloperoxidase activities indicated that significantly fewer neutrophils were attracted to the area at risk and to the ischemic zone of the MI + taprostene cats when compared with the MI cats given only the vehicle. Data from isolated left anterior descending coronary artery ring preparations removed from hearts after 6 hours of ischemia indicated that the endothelium was damaged by ischemia-reperfusion injury in the untreated cats. However, endothelial dysfunction was not observed in circumflex coronary arteries of ischemic cats or in coronary rings isolated from MI + taprostene cats. Thus, taprostene exerted a significant cardioprotection in cats subjected to ischemia and reperfusion.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

胰岛素抑制缺血-再灌大鼠心肌细胞凋亡及其信号转导机制

目的　观察胰岛素对在体缺血 /再灌 (MI/R)大鼠心肌细胞凋亡的影响并探讨其主要细胞内信号转导机制。方法　常规制备大鼠MI/R模型 ,于再灌前 5min给大鼠随机静脉输注生理盐水、胰岛素或胰岛素 +磷脂酰肌醇 3激酶 (PI3K)抑制剂渥曼青霉素。分别以DNA梯带形成和TUNEL方法定性和定量检测心肌细胞凋亡 ;以激酶反应法测定蛋白激酶B(Akt)及p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性 ,以化学发光法测定心肌一氧化氮 (NO)。结果　MI 30min/R 4h可在缺血区心肌检测到大量凋亡细胞 (1 9 3± 4 6) % ,再灌时输注胰岛素显著降低心肌细胞凋亡指数 [AI:(8 0± 2 9) % ,q =1 0 2 ,P <0 0 1 ] ,并明显减弱DNA梯形成 ;此时 ,胰岛素使心肌Akt活性增加了 2 7倍 (q =1 0 5 ,P <0 0 1 ) ,心肌NO增加 2 8% (q=3 4,P <0 0 5) ,而p38MAPK活性无明显变化。上述Akt的激活及NO增加均可被渥曼青霉素阻断 ,且此时胰岛素抗凋亡效应几乎消失。结论　胰岛素可通过PI3K Akt信号转导途径明显抑制MI/R心肌细胞凋亡 ,其中Akt激活是胰岛素上述抗凋亡效应的关键环节     

κ-阿片受体激动剂U50,488H抑制缺血/再灌注心肌线粒体分裂的作用及机制

目的研究外源性κ-阿片受体激动剂U50,488H对缺血/再灌注心肌线粒体分裂的影响及机制。方法将SD大鼠随机分为6组:假手术（Sham）组，心肌缺血/再灌注（MI/R）组，MI/R+κ-阿片受体激动剂U50,488H（MI/R+U）组，MI/R+κ-阿片受体阻断剂nor-BNI+U50,488H（MI/R+N+U）组，MI/R+磷脂酰激醇3-激酶（pi 3-kinases，PI3K）抑制剂wortmannin+U50,488H（MI/R+W+U）组，MI/R+蛋白激酶B（protein kinase B, Akt）抑制剂MK2206+U50,488H（MI/R+M+U）组。血清肌酸激酶（creatine kinase, CK）试剂盒检测血清CK水平；三苯基氯化四氮唑（triphenyte-trazoliumchloride, TTC）-伊文氏蓝双染检测心肌梗死面积；Western blotting检测细胞内磷酸化PI3K、磷酸化Akt（Ser 473）、磷酸化线粒体动力学分裂相关蛋白（dynamin-related protein, Drp）1（Ser 637）的表达；透射电镜观察线粒体形态。结果与Sham组相比，MI/R组血清CK水平明显升高（P<0.01），出现明显的心肌梗死（P<0.01），磷酸化PI3K、磷酸化Akt表达增加（P<0.05），磷酸化Drp1表达降低（P<0.01），线粒体分裂明显增加（P<0.01）；与MI/R组相比，MI/R+U组血清CK水平明显降低（P<0.01），心肌梗死面积减小 （P<0.01），磷酸化PI3K、磷酸化Akt和磷酸化Drp1的表达显著增加（P<0.01），线粒体分裂减少（P<0.01）。给予nor-BNI、wortmannin或MK2206后，U50,488H的上述作用均被阻断。结论缺血/再灌注可引起心肌损伤和线粒体分裂增加，κ-阿片受体激活后通过PI3K-Akt通路使Drp1磷酸化增加，抑制缺血/再灌注心肌的线粒体分裂，减轻心肌损伤。     

Insulin inhibits leukocyte–endothelium adherence via an Akt-NO-dependent mechanism in myocardial ischemia/reperfusion

Clinical evidence indicates that intensive insulin therapy during critical illness protects the endothelium and contributes to prevention of organ failure and death but the mechanisms involved remain unclear. This study was designed to test the hypothesis that insulin inhibits adherence of polymorphonuclear leukocytes (PMNs) to endothelial cells in myocardial ischemia/reperfusion (MI/R) and to investigate the underlying mechanisms. Anesthetized rabbits were subjected to MI/R (45 min/4 h) and randomly received saline, glucose-insulin-potassium (GIK) or GK respectively (2 mL/kg/h, i.v.). In vitro study was performed on cultured endothelial cells subjected to simulated ischemia/reperfusion. In vivo treatment with GIK but not GK attenuated myocardial injury as evidenced by reduced plasma creatine kinase activity, myocardial apoptosis and infarct size in MI/R rabbits compared with the saline group. Interestingly, GIK but not GK significantly decreased coronary endothelial expression of P-selectin and intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1), inhibited adherence of PMNs to coronary endothelium (107.7 ± 7.4 vs. 155.0 ± 9.2 PMNs/mm² in saline group, n = 8, P < 0.01), and therefore decreased myocardial PMNs accumulation. In cultured endothelial cells subjected to simulated ischemia/reperfusion, insulin (10^− 7 M) increased Akt activity and eNOS phosphorylation with subsequent NO production, and concurrently exerted an anti-adhesive effect as manifested by reduced endothelial P-selectin and ICAM-1 surface expression and PMNs adherence (13.7 ± 1.3% vs. 22.2 ± 1.9% in vehicle, n = 9, P < 0.01), all of which are abolished by the specific Akt inhibitor. Furthermore, inhibition of insulin-stimulated NO production using either the selective eNOS inhibitor cavtratin or the NOS inhibitor L-NAME blocked the anti-adhesive effect of insulin. These results demonstrate that insulin reduces endothelial P-selectin and ICAM-1 expression, and thus inhibits leukocyte–endothelium adherence in MI/R rabbit hearts. The anti-adhesive property by insulin may be mediated by the Akt-mediated and NO-dependent pathway.     

缬沙坦和卡托普利对缺血再灌注纤溶活性、内皮血管活性物质的影响

目的　探讨缬沙坦和卡托普利对缺血再灌注纤溶活性、内皮血管活性物质的影响。方法　新西兰大白兔 6 0只 ,随机分为五组 ,每组 12只 , 组 :假手术组 , 组 :急性心肌梗死 (AMI)组 , 组 :缺血再灌注 (ischem ic reperfu-sion,IR)组 , 组 :IR+卡托普利组 , 组 :IR+缬沙坦组 ;各组 (除 组外 )分别结扎冠状动脉左心室支中点 ,缺血6 0 min,松开结扎线再灌注 2 4 0 min后 ( 组不进行再灌注 ) ,分别取结扎前、再灌注前、再灌注 2 4 0 min血测定内皮素 (endochelin ,ET)、一氧化氮 (nitric oxide NO)浓度和组织型纤溶酶原激活剂 (tissue- type plasminogen activa-tor,t- PA )、纤溶酶原激活剂抑制物 (,plasm inogen activator inhibitor PAI)活性。结果　冠状动脉结扎后 ,血浆ET、NO浓度和 PAI活性显著升高 (P<0 .0 1) ,t- PA活性显著下降 (P<0 .0 1) ,再灌注后 ,血浆 ET、NO浓度和 PAI活性进一步升高 ,t- PA活性进一步下降 ,与再灌注前对比均有显著性差异 (P<0 .0 1)。再灌注后 ,与 IR组对比 ,卡托普利、缬沙坦均能显著的升高 t- PA活性 ,降低血 PAI活性和 ET、NO浓度 (P<0 .0 1)。结论　卡托普利、缬沙坦有改善缺血再灌注过程中纤溶活性、抑制内皮细胞释放 ET、NO的有益作用