来氟米特活性代谢产物A771726对人外周血T淋巴细胞的免疫调节作用

目的:探讨来氟米特(leflunomide,LEF)在体外对人外周血T淋巴细胞的免疫调节作用.方法:在植物血凝素(phytohemagglutinin, PHA)刺激下,人外周血淋巴细胞与不同剂量的LEF (5,15,45 μg/ml)共培养.检测各组T淋巴细胞的增殖、凋亡情况,分析各组T淋巴细胞免疫表型CD152,CD28的表达以及各组T淋巴细胞的IFN-γ,IL-10,TGF-β1 mRNA水平.结果:在体外,LEF对由PHA诱导的T淋巴细胞的增殖、凋亡均有抑制作用,且抑制作用与LEF呈剂量依赖性.LEF对T淋巴细胞CD152,CD28的表达无明显影响.LEF能促进IL-10,TGF-β1 mRNA的表达,抑制IFN-γ mRNA的表达.结论:LEF可能通过抑制T淋巴细胞增殖、减少T淋巴细胞凋亡、促进T淋巴细胞IL-10、TGF-β1 mRNA表达及抑制IFN-γ mRNA表达来下调免疫反应.     

绿原酸对人外周血T淋巴细胞体外增殖及免疫调节功能的影响

目的 绿原酸对T淋巴细胞的影响尚不清楚。文中旨在探讨绿原酸对植物凝集素(PHA)刺激人外周血T淋巴细胞体外增殖及免疫调节功能的影响。方法 采用Ficoll离心法分离人外周血单个核细胞，分为对照组、PHA组、PHA+绿原酸50μg/mL组、PHA+绿原酸100μg/mL组。CCK-8法检测细胞增殖，瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态，实时荧光定量PCR检测T细胞增殖标志物Ki-67,Th1细胞因子IFN-γ、TNF-α,转录因子T-bet和Th2细胞因子IL-4、IL-13及转录因子GATA-3的mRNA表达水平；活性氧试剂盒检测细胞内ROS变化。结果 与对照组比，PHA组刺激后T细胞明显增殖并转化为淋巴母细胞，增殖标志物Ki-67和Th1相关因子IFN-γ、TNF-α、T-betmRNA表达水平明显升高(P<0.05),Th2相关因子IL-4、IL-13的表达上升(P>0.05),GATA-3 mRNA表达明显下降(P<0.01),胞内ROS水平明显增加(P<0.01);与PHA组比较，PHA+绿原酸50μg/mL组、PHA+绿原酸100μg/mL组处理后T细胞增殖、...     

香加皮羽扇豆烷乙酸酯对人外周血淋巴细胞免疫调节功能的影响

目的 研究香加皮中提取的羽扇豆烷乙酸酯(CPLA)对正常人外周血淋巴细胞和吞噬细胞免疫调节功能的影响.方法 无菌分离人外周血淋巴细胞和巨噬细胞,加入PHA和不同质量浓度的CPLA,MTT法检测其对淋巴细胞增殖及巨噬细.胞对食管癌细胞株ECA-109生长的影响;RT-PCR法检测CPLA对γ-干扰素(INF-γ)mRNA表达的影响;ELISA法检测CPLA作用后淋巴细胞和巨噬细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)等细胞因子分泌的变化.结果 5～40μg/mL CPLA能明显增强PHA活化的人外周血淋巴细胞的增殖(P<0.01);20、40 μg/mL的CPLA能使淋巴细胞IFN-γ mRNA的表达水平明显升高(P<0.01);用CPLA处理后的巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤功能明显增强(P<0.01),并证实了该作用可能与CPLA促进巨噬细胞分泌TNF-α增多有关;CPLA能促进淋巴细胞产生IL-2和TNF-α,并呈现浓度依赖性(P<0.01).结论 CPLA能增强人外周血淋巴细胞和巨噬细胞的免疫功能,发挥抗肿瘤作用.     

人骨髓间充质干细胞对异体外周血T淋巴细胞的抑制作用及机制

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)体外对异体外周血T淋巴细胞的抑制作用及机制.方法:从骨髓中分离培养MSCs,反复贴壁进行纯化;用尼龙棉柱法纯化异体外周血T淋巴细胞;观察MSCs对植物血凝素(PHA)刺激下T淋巴细胞增殖的影响,用ELISA方法检测IFN-γ,IL-4水平变化.结果:MSCs对PHA诱导的T淋巴细胞增殖有抑制作用,并呈剂量依赖性;同时MSCs亦可抑制T淋巴细胞的IFN-γ分泌,但可促进IL-4的分泌.结论:MSCs对异体外周血T淋巴细胞的增殖有抑制作用,其作用可能与其影响T淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-4有关.     

特应性皮炎小鼠中Th1/Th2类细胞因子失衡对神经生长因子表达的影响

目的 初步探讨特应性皮炎(AD)小鼠中Th1/Th2 类细胞因子失衡对脾淋巴细胞神经生长因子(NGF) mRNA 表达的影响.方法 用卵清蛋白经皮肤致敏建立小鼠AD模型, ELISA测定血清总IgE水平.分离脾淋巴细胞并培养.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法测定细胞在刀豆素A(ConA)刺激下表达NGF mRNA的基础水平及γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL -4)干预后NGF mRNA表达改变.结果 ①AD小鼠脾淋巴细胞在基础状态下具有表达NGF mRNA的功能,在12、24、36、48 h时基础NGF mRNA表达量随着时间的延长逐渐升高,IL-4组(50 μg/L)随着时间的延长基础NGF mRNA表达量逐渐升高,并高于同时间空白对照组(P均<0.01). 相反, IFN-γ组(25 μg/L)的NGF mRNA水平随时间逐渐下降,并均低于同时间空白对照组(P均<0.01).②干预24 h时,随着IL-4干预浓度的增加,NGF mRNA的表达水平亦升高,并且分别与前一梯度低浓度干预组比较差异有统计学意义(P均<0.01),随着IFN-γ干预浓度的增加, NGF mRNA的表达水平却逐渐减低,分别比前一梯度低浓度干预组有显著降低(P均<0.01).结论 在特应性皮炎中Th2类细胞因子IL-4可上调淋巴细胞NGF mRNA表达,Th1类细胞因子IFN-γ可下调淋巴细胞NGF mRNA表达,两者均呈时间和浓度依赖性,Th1 / Th2类细胞因子免疫失衡可能通过调控NGF mRNA 表达间接促进其诱导神经源性炎症. Abstract： Objective To explore the effect of Th1 / Th2 cytokines on the expression of nerve growth factor (NGF) in splenic lymphocytes in atopic dermatitis mice.Methods Four AD mice were sensitized and challenged with ovalbumin to establish AD model, and serum IgE level was measured by ELISA.The mouse splenic lymphocytes were isolated and cultured with ConA. The expressions of NGF mRNA were detected by RT-PCR, and were observed after the lymphocytes were exogenously added with interferon -γ(IFN-γ) or interleukin-4 (IL-4). Results ①The lymphocytes of the AD model stimulated by ConA in vitro expressed NGF mRNA in a time-dependent manner. After the lymphocytes had been cultured with IL-4 for 12 h, 24 h, 36 h, and 48 h, 50μg/L IL-4 upregulated the expressions of NGF mRNA in a time-dependent manner and all the NGF mRNA expressions were significantly higher than the basal values at the same time (P all<0.01), however,25μg /L IFN-γ downregulated the expressions of NGF mRNA in a time-dependent manner and all the NGF mRNA expressions were significantly lower than the basal values at the same time (P all<0.01).②The lymphocytes of the AD model stimulated by ConA in vitro also expressed NGF mRNA in a dose-dependent manner.After 0,10, 25,50, and 100 μg /L IL-4 had been added for 24 h, IL-4 upregulated the expressions of NGF mRNA in a dose-dependent manner and the NGF mRNA expressions were all significantly higher than the values of the lower dose IL -4 (P all <0.01), however,after 0, 1, 10, 25,and 50μg /L IFN-γ had been added for 24 h, IFN-γ downregulated the expressions of NGFmRNA in a dose-dependent mannerand all the NGF mRNA expressions were significantly lower than the values of the lower IFN-γ dose (P all<0.01).Conclusions In the splenic lymphocytes of atopic dermatitis mice, IL -4, one of the Th2 cytokines, can upregulate the expressions of NGF, IFN-γ, one of the Th1 cytokines, can downregulate the expressions of NGF both in a time-dependent manner and in a dose-dependent manner. Th1 /Th2 cytokine immune imbalance may indirectly induce the skin neurogenic inflammation by regulating the NGF mRNA expression.     

VitD3对Th细胞极化的调节作用研究

目的研究VitD3对Th细胞分化的影响及可能的机制。方法无菌分离BALB/c小鼠细胞脾细胞,2.5μg/ml的ConA 加入刺激脾细胞,在不同时间段加入不同剂量的VitD3,72h后收集细胞,3H-TdR掺入法测定淋巴细胞增殖活性,RT-PCR方法检测参与Th细胞分化的细胞因子的mRNA表达水平。结果VitD3呈剂量依赖抑制ConA诱导的淋巴细胞的活化,10-5mol/L的VitD3对ConA诱导的淋巴细胞活化的抑抑制作用最强;该抑制作用与作用时间的长短呈相关性,ConA活化淋巴细胞24h后加入VitD3对淋巴细胞活化的抑制作用最显著,并且淋巴细胞的活化程度越低,VitD3对其抑制作用越强。VitD3可增强经ConA活化的淋巴细胞Th2型细胞因子(IL-4、IL-6)mRNA的表达水平,而Th1型细胞因子(IFN-γ、TNF-α)的mRNA的表达水平显著性下降(P<0.05)。结论VitD3可抑制ConA刺激的淋巴细胞增殖活性,但亦可增强Th2细胞的分化。     

人脐血间充质干细胞抑制异体T淋巴细胞反应的实验及临床意义

目的:研究人脐血间充质干细胞(MSCs)对异体外周血T淋巴细胞抑制的影响.方法:分离、扩增脐血MSCs,流式细胞术检测表面标志以鉴定.取分离培养的脐血MSCs,与经分离的异体淋巴细胞共培养,在植物血凝素(PHA)刺激下,用MTT还原法测定细胞增殖,观察脐血MSCs对PHA刺激的T淋巴细胞转化抑制作用.采用ELISA检测培养上清中IFN-γ和IL-4的分泌水平.结果:脐血MSCs在PHA刺激下可抑制T淋巴细胞增殖,且其培养上清也具有抑制异体淋巴细胞增殖转化能力.ELISA检测7 d共培养上清中IFN-γ和IL-4两种细胞因子的含量,发现IFN-γ分泌水平下调、IL-4分泌水平部分上调.结论:脐血MSCs具有抑制异体淋巴细胞免疫反应,降低移植物抗宿主反应(GVHD)的作用.具有研究价值和应用潜能.     

白细胞介素21对SHIV感染的恒河猴外周血CD8+ T细胞分泌γ干扰素的影响

目的 研究白细胞介素21(interleukin 21,IL-21)对SHIV感染CD8+T细胞分泌干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)的影响.方法 从SHIV/恒河猴模型外周血中分选出CD8+T细胞,加入IL-21诱导培养,应用ELISA方法检测细胞培养上清液中IFN-γ浓度,RT-PCR方法检测细胞中IFN-γ mRNA的表达水平,流式细胞术检测分泌IFN-γ的CD8+T细胞所占的百分比.结果 10 ng/mL,IL-21明显促进CD8+T细胞分泌IFN-γ(P＜0.05),IFN-γ mRNA的表达明显升高,4h为刺激CD8+T细胞胞内IFN-γ合成的最佳时间.结论IL-21对CD8+T细胞分泌IFN-γ有促进作用.     

灵芝多糖对前列腺素E2抑制小鼠脾细胞增殖及IL-1α,IL-2 mRNA表达的拮抗作用

[目的]观察灵芝多糖(GLB)对前列腺素E2(PGE2)抑制小鼠脾细胞增殖及IL-1α、IL-2 mRNA表达的拮抗作用.[方法]采用混合淋巴细胞培养反应作为实验模型,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖程度,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测IL-1α及IL-2 mRNA的表达水平.[结果]PGE2连续作用48 h后,脾细胞增殖反应受到不同程度的抑制作用,当PGE2浓度在10 μmol/L以上时差异有显著性意义(P＜0.01);固定PGE2的浓度为20 μmol/L,并合用不同浓度的GLB(25、50、100、200 mg/L),当GLB为100 mg/L以上浓度时可部分对抗PGE2(20 μmoL/L)的抑制作用(P＜0.05);培养8 h及12 h后,PGE2(20 μmol/L)可抑制IL-1α及IL-2 mRNA的表达,GLB为100 mg/L以上浓度时可部分拮抗PGE2的抑制作用(P＜0.05或P＜0.01).[结论]灵芝多糖可部分拮抗前列腺素E2对小鼠脾细胞增殖及IL-1α和IL-2 mRNA表达的抑制作用.     

肝郁脾虚因素刺激对DEN诱发肝癌大鼠免疫功能的影响

观察肝郁脾虚因素刺激对二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠实验性肝癌的发生及T淋巴细胞功能的影响,以及用疏肝健脾方药对该模型的防治作用.大鼠经肝郁脾虚因素刺激和DEN 70 mg/kg灌胃,每周1次,连续8周后停用DEN,预防和治疗组给予疏肝健脾方药2 mL/只灌胃(1.5 g/kg).大鼠分别在实验第9、14、19周取脾测定T淋巴细胞增殖和产生IFN-γ和IL-2的能力.结果显示:大鼠经肝郁脾虚因素刺激和DEN作用下,与单纯DEN诱发肝癌大鼠比较,T淋巴细胞增殖和产生IFN-γ和IL-2能力的显著降低(P值分别<0.05);然而,经疏肝健脾方药防治后大鼠T淋巴细胞增殖能力和产生IL-2、IFN-γ的能力恢复明显.说明应用疏肝健脾方药能显著改善肝郁脾虚因素刺激对DEN诱发肝癌大鼠的免疫功能.也能减轻肝癌的发生发展过程.     

红桂木凝集素对Jurkat T淋巴细胞生长的影响

目的 研究红桂木凝集素(ALL)对Jurkat T淋巴细胞生长的影响.方法 将ALL单独作用于CD4+T淋巴细胞系Jurkat E6-1细胞株,WST-8比色法检测细胞增殖;倒置显微镜观察细胞生长变化;酶联免疫夹心法(ELISA)检测IL-2、IL-10和IFN-γ的分泌水平.结果 ALL(0.36～360 μg/ml...     

T-cell proliferation is inhibited by the induction of indoleamine 2,3-dioxygenase in spleen-derived dendritic cells in rat

Background  Increasing evidence suggests that, by the production of indoleamine 2, 3-dioxygenase (IDO), dendritic cells (DC) may reduce the activity of T lymphocytes and inhibit T lymphocyte proliferation-induced immune tolerance. One promising way is inspired by increasing IDO expression in DC cells for immune tolerance after transplantation. The aim of this work was to examine the effect of interferon-γ (IFN-γ) on the expression of IDO by DC.

Methods  Spleen-derived rat DCs were cultured and induced by cytokines, and the expression of OX62 and surface molecules CD80 and CD86 were measured with flow cytometry. After the DCs were induced by IFN-γ at different concentrations (0, 100, 300, 500 U/ml), the expression levels of IDO mRNA were measured with real-time PCR, and the expression levels of IDO protein in DCs were measured with Western blotting. The allogeneic mixed lymphocyte reaction (MLR) was used to test the effects of DCs incubated with different concentrations of IFN-γ on allogeneic T lymphocyte proliferation.

Results  Under the microscope, the DCs induced by IFN-γ showed a typical dendritic morphology. The expression rate of OX62 was above 80% and the positive expression rates of CD80 and CD86 were both about 80%. The expressions of IDO mRNA and IDO protein increased gradually with the increase of IFN-γ concentration, showing statistical significance in the differences between the groups (P <0.05). Compared with the control DC, the DC incubated with IFN-γ had a notable decrease in allostimulatory activity (P <0.05). With the increasing IFN-γ concentration, the T lymphocyte proliferation decreased, and the difference between the groups was also statistically significant (P <0.05).

Conclusions  The highly purified spleen derived rat DCs can be successfully acquired through the improved adhesion in-vitro method. IFN-γ can induce increased expression of IDO in spleen-derived rat DCs and reduce the spleen DCs’ capacity to stimulate the proliferation of allogeneic T cells.

     

甲氨蝶呤对类风湿关节炎CCP/AST分泌白介素-4及干扰素-γ水平的影响

目的:观察甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血环瓜氨酸肽抗原特异性T细胞(circum-citrullinated peptide antigen specific Tcells,CCP/AST)分泌白介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)水平的影响。方法:体外分离、培养RA患者外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL),分别设RA空白组不加任何干预药物;RA CCP组仅加CCP干预(CCP终浓度为20μg/ml);RAMTX组同时加CCP与MTX干预(CCP与MTX终浓度均为20μg/ml);健康对照组培养健康者PBL,不加任何干预药物。体外培养72 h后,采用酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中IL-4、IFN-γ分泌水平。结果:CCP干预后,RA患者PBL分泌的IFN-γ水平升高,IL-4分泌水平下降,IFN-γ/IL-4比值也明显升高;加入MTX后,RA患者CCP/AST分泌的IFN-γ水平下调,IL-4水平升高,IFN-γ/IL-4比值下降,差异有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。结论:MTX对RA患者PBL源CCP/AST分泌的TH1/TH2型细胞因子的网络失衡状态有调节作用;MTX可以抑制CCP诱导的TH1型细胞因子,上调TH2型细胞因子的表达,这可能是MTX治疗RA有效途径之一。     

血必净注射液对严重脓毒症患者免疫调理机制的影响

目的 观察血必净注射液对严重脓毒症患者Th1细胞转录因子T-bet mRNA和Th2细胞转录因子GATA-3 mRNA表达的影响,探讨其能否通过影响Th1/Th2漂移来调理严重脓毒症患者的免疫紊乱.方法 将15例严重脓毒症患者分为血必净治疗组(n=9)和常规治疗组(n=6).常规治疗组给予脓毒症的一般治疗,包括液体复苏、抗感染、必要时呼吸机辅助治疗以及营养支持等.血必净治疗组在相同的常规治疗基础上加用血必净注射液(100 mL,2次/d,应用7 d).两组分别于入院当天(0 d)和入院后第1、3和7 天抽外周静脉血;应用Real-time RT-PCR检测T-bet和GATA-3 mRNAs;ELISA法检测血Th1分泌的IFN-γ和Th2分泌的IL-4;并同时进行APACHE II评分.结果 常规治疗组患者入院第3 天和第7 天的血IFN-γ、T-bet mRNA、T-bet/GATA-3、IFN-γ/IL-4均明显高于0 d(均P<0.05),GATA-3 mRNA和IL-4明显低于0 d(均P<0.05);血必净注射液治疗后第3 天和第7天患者的血IFN-γ、T-bet mRNA、T-bet /GATA-3、IFN-γ/IL-4明显低于常规治疗组(均P<0.05),GATA-3 mRNA和IL-4明显高于常规治疗组(均P<0.05).血必净注射液治疗后第7 天 APACHE II评分较常规治疗组显著下降(18.22±1.99 vs.22.67±2.16,P=0.042).结论 严重脓毒症患者存在Th1/Th2 失衡;血必净注射液能通过抑制T-bet mRNA表达和促进GATA-3 mRNA表达来改善Th1/Th2 失衡和缓解病情的严重程度.     

人重组蛋白PDCD5抑制胶原诱导性关节炎大鼠来源的淋巴细胞增殖和炎性细胞因子分泌并促进活化的 淋巴细胞凋亡

目的研究腹腔注射人重组蛋白PDCD5（rhPDCD5）对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠脾脏来源的活化淋巴细胞的作用,探 讨rhPDCD5对活化的脾细胞发挥免疫抑制作用的机制。方法将雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组,CIA动物模型+卵白蛋 白（OVA）治疗组,CIA动物模型+rhTNFR:Fc治疗组,CIA动物模型+ rhPDCD5治疗组。第0天建立胶原诱导性类风湿性关节炎 大鼠模型,第2 天到26 天腹腔注射给药。第28 天取脾脏制成单细胞悬液,体外用CII (20 μg/mL)和anti-CD3 (1 μg/mL)+anti- CD28（2 μg/mL）分别刺激活化48 h和72 h。ELISA检测细胞上清中细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）和白介素-17A（IL-17A）的水平; [3H]掺入法检测活化脾细胞的增殖;流式细胞技术检测活化的CD4+ T淋巴细胞的凋亡。结果rhPDCD5处理的CIA大鼠来源 的脾细胞经CII和anti-CD3+anti-CD28分别刺激活化之后,分泌的细胞因子IFN-γ 和IL-17A水平下降,增殖能力下降,CD4+ T 淋巴细胞凋亡百分比上调。结论rhPDCD5通过抑制活化的脾细胞分泌炎性细胞因子,抑制活化的脾细胞增殖,促进活化的 CD4+ T淋巴细胞凋亡多条途径发挥免疫抑制作用。     

顽疣净对郎格汉斯细胞刺激T细胞增殖和分泌Th1/Th2细胞因子的影响

目的:观察顽疣净含药血清对对郎格汉斯细胞(LC)刺激T细胞增殖和分泌Th1/Th2细胞因子的影响。方法:以顽疣净含药血清干预分离的人表皮LC。用同种异体混合T淋巴细胞反应,观察顽疣净含药血清对LC刺激T淋巴细胞增殖的影响;用ELISA法检测混合T淋巴细胞反应上清中IFN-γ和IL-10表达,了解顽疣净含药血清对LC调节Th分化的影响。结果:顽疣净含药血清干预后的LC刺激T细胞增殖能力提高,能提高混合T淋巴细胞反应上清中IFN-γ表达,抑制IL-10分泌。结论:顽疣净含药血清体外具有调整LC功能的作用。     

黄芪多糖调节黑色素瘤小鼠PD-1/PD-Ls分子表达的研究

目的:研究中药黄芪提取物黄芪多糖在黑色素瘤B16-F10细胞荷瘤小鼠体内的抑瘤效应及对共刺激分子PD-1/PD-Ls通路的调节作用,阐明相关的抗肿瘤免疫调节机制。方法:对荷瘤小鼠进行黄芪多糖干预,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率;CCK-8法检测荷瘤小鼠外周T淋巴细胞增殖活性;ELISA法检测荷瘤小鼠外周血IL-2、IFN-γ的分泌水平;Real-time PCR法检测荷瘤小鼠脾脏PD-1及肿瘤组织PD-L1、PD-L2在mRNA水平的表达;Western Blot法检测荷瘤小鼠脾脏PD-1及肿瘤组织PD-L1、PD-L2在蛋白水平的表达。结果:黄芪多糖可显著抑制B16-F10细胞在C57BL/6小鼠腋部皮下移植形成肿瘤的生长(P0.01);促进荷瘤小鼠外周T淋巴细胞的增殖(P0.01);升高荷瘤小鼠外周血IL-2、IFN-γ的分泌水平(P0.01);抑制荷瘤小鼠脾组织PD-1mRNA和蛋白的表达(P0.05,P0.01);抑制小鼠肿瘤组织中PD-L2的mRNA表达和PD-L1、PD-L2的蛋白表达水平(P0.01)。结论:黄芪多糖能抑制荷瘤小鼠皮下黑色素瘤的生长,其机制可能与黄芪多糖调节PD-1、PD-Ls分子的表达及相互作用,进而增强小鼠T淋巴细胞抗肿瘤免疫活性有关。     

枸杞多糖对细粒棘球蚴小鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的研究枸杞多糖(Lycium Barbarum Polysaccharides,LBPs)对细粒棘球蚴小鼠脾脏T细胞亚群的影响,初步探讨LBP对细粒棘球蚴感染后机体免疫功能变化的影响。方法枸杞多糖溶液皮下给药3次,每次间隔2周,于第3次给药后2周,用细粒棘球蚴原头蚴攻击感染BALB/c小鼠,使用流式细胞仪动态检测给药前后、感染前后不同时间点小鼠脾脏IFN-γ+CD3+T细胞、IL-4+CD3+T细胞占总T细胞的比例以及CD4+/CD8+T细胞的比值变化。结果与给药前比较,枸杞多糖给药后7周,小鼠脾脏分泌IFN-γ的T细胞比例增加,分泌IL-4的T细胞比例减少,CD4+/CD8+的比例明显增加;与感染对照组相比,枸杞多糖能使细粒棘球蚴感染小鼠脾脏分泌IFN-γ的T细胞比例增加(感染后2、15周);分泌IL-4的T细胞比例减少(感染后2、10周),CD4+/CD8+的比例先升高(2、10周),后降低(15、20周)。结论枸杞多糖有正向免疫调节作用,通过促进细粒棘球蚴感染小鼠脾脏T淋巴细胞向Th1的分化,抑制Th2的分化,发挥抗细粒棘球蚴的作用。     

白介素12在γδT细胞表达L-选择素中的调控作用

目的观察白介素12（IL-12）对γδT细胞表面L-选择素（CD62L）表达的调控作用。方法人外周血活化γδT细胞经诱导及扩增后,采用Mtb-Ag首次刺激和再次刺激,在细胞分孔培养时分别加入不同的细胞因子（IFN-γ、IL-12＋抗IFN-γ、IL-12＋抗IL-12、IL-12＋IFN-γ）和不同浓度（0、0.1 ng/mL、1 ng/mL）IL-12。收集各组培养第0、3、5、7天的细胞,流式细胞术检测γδT细胞表面CD62L的表达。结果 Mtb-Ag首次刺激和再次刺激后,IL-12组、IL-12＋抗IFN-γ组和IL-12＋IFN-γ组γδT细胞表面CD62L的表达量均较空白对照组显著升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;而IFN-γ组、IL-12＋抗IL-12组的CD62L表达量与空白对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。随着IL-12浓度的增加,γδT细胞表面CD62L的表达量增加,其中Mtb-Ag首次刺激后第3和5天时,0.1 ng/mL和1.0 ng/mL IL-12组CD62L表达量均明显高于阴性对照组（P〈0.05）,且1.0 ng/mL IL-12组明显高于0.1 ng/mL IL-12组（P〈0.05）,具有浓度依赖性;Mtb-Ag再刺激后CD62L的表达量下调,但在加入IL-12后CD62L表达的下调速度减缓,且1.0 ng/mL IL-12比0.1 ng/mL IL-12更能使CD62L表达维持在相对较高水平（P〈0.05）。结论 IL-12在γδT细胞活化时调控CD62L的表达并且具有浓度依赖性。