大蒜素对贝赫切特病的治疗作用及机制探讨

目的：探讨大蒜素对实验性贝赫切特病（BD）的治疗作用及机制。方法构建BD模型鼠,将其分为实验组、阳性对照组和阴性对照组,分别鼻饲注入大蒜素、秋水仙碱和生理盐水。肉眼观察治疗前后皮损的变化,ELISA法检测治疗前后血清γ干扰素（IFN‐γ）、肿瘤坏死因子α（TNF‐α）、IL‐4和化学比色法检测总抗氧化力（T‐AOC）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷甘肽过氧化物酶（GSH‐PX）。结果模型小鼠背、腹、阴部出现溃疡,IFN‐γ、TNF‐α、IL‐4和MDA升高,T‐AOC、SOD和GSH‐PX下降。治疗20d后实验组和阳性对照组小鼠溃疡基本愈合;30d后实验组仅2只复发,阳性对照组有6只复发,差异有统计学意义（P＜0．05）。治疗后实验组IFN‐γ、TNF‐α和IL‐4较治疗前降低（P＜0．01）,与阳性对照组比较差异无统计学意义（P＞0．05）;实验组T‐AOC、SOD和GSH‐PX较治疗前升高,MDA下降（P＜0．01）,与阳性对照组比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论大蒜素是治疗实验性BD的有效药物,可能是通过抑制炎症因子、阻止氧化应激而作用。     

IL-24联合靶向减毒沙门菌载体SL7207／pBud-V P3对胃癌细胞的生长抑制作用

目的：探讨白细胞介素（IL）‐24联合靶向减毒沙门菌载体SL7207／pBud‐VP3对胃癌细胞生长的抑制作用及机制。方法构建 pBud‐VP3‐IL‐24真核双表达质粒,利用高压电穿孔法将pBud‐Vp3‐IL‐24质粒导入减毒沙门菌SL7207株中,构成SL7207／pBud‐VP3‐IL‐24菌株。建立小鼠胃癌移植瘤模型,将模型随机分为生理盐水对照组、SL7207／pBud组、SL7207／pBud‐VP3组及SL7207／pBud‐VP3‐IL‐24组,菌株口服饲喂荷瘤小鼠,测量肿瘤体积并计算抑瘤率。采用蛋白质印迹法检测肿瘤组织中IL‐24的表达;采用实时荧光定量‐PCR（RT‐PCR）检测干扰素‐γ（IFN‐γ）、IL‐6及肿瘤坏死因子‐α（TNF‐α）水平;采用免疫组织化学法测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶‐3（Caspase‐3）及血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果成功构建基于IL‐24的减毒沙门菌载体系统SL7207／pBud‐VP3‐IL‐24;治疗14 d后,胃癌组织可检测到IL‐24蛋白的表达;治疗28 d后,SL7207／pBud‐VP3‐IL‐24组与其他组比较,肿瘤体积缩小并能够明显抑制肿瘤生长,差异有统计学意义（ P＜0．05）。RT‐PCR及免疫组织化学显示,IL‐24联合SL7207／pBud‐VP3能够明显增加免疫因子IFN‐γ、IL‐6及TNF‐α的表达水平（P＜0．05）,上调Caspase‐3及下调VEGF的表达（P＜0．05）。结论 IL‐24联合SL7207／pBud‐VP3可以协同发挥对胃癌细胞的生长抑制作用,其作用机制与肿瘤凋亡促进、肿瘤血管抑制、免疫调节等有关。     

特应性皮炎Th1／Th2／Th17平衡的研究

目的：探讨特应性皮炎（AD ）外周血清T h1／T h2／T h17平衡的变化规律及相关细胞因子的变化规律,以进一步探讨AD发病的免疫机制。方法采用流式荧光技术测定47例AD患者（AD组）和40例健康自愿者（对照组）外周血清中的γ‐干扰素（IFN‐γ）、白细胞介素（IL ）‐4、IL‐17、IL‐21、IL‐23水平并进行统计分析,从而分析T h1／T h2／T h17／T reg平衡在AD中变化规律。结果在AD患者血清中,IL‐4水平较对照组升高（ P＜0．05）,IL‐17、IL‐23的水平显著高于对照组（ P＜0．05）;IFN‐γ／IL‐4和IFN‐γ／IL‐17较对照组明显降低（P＜0．01）;IL‐17与AD严重程度（SCORAD）评分呈正相关（P＜0．05）。结论在 AD病程中T h1／T h2、T h1／T h17降低,T h1／T h2／T h17平衡的漂移可能是AD发病的重要机制。     

快速康复外科在胰腺癌术后对血清IL-6、IL-10、TNF-α水平的影响

目的：探讨快速康复外科（FTS）在胰腺癌手术后对血清IL‐6、IL‐10及TNF‐α水平的影响及其临床意义。方法入选胰腺癌手术患者80例,分为验组40例和对照组40例,检测并比较两组手术前后不同时段血浆中各指标水平。结果（1）两组术前血清IL‐6、IL‐10、TNF‐α水平差异无统计学意义（P＞0．05）;试验组术后1、3d血清IL‐6水平高于术前,差异有统计学意义（P＜0．05）,而术后5d血清IL‐6水平与术前比较,差异无统计学意义（P＞0．05）;对照组术后3d血清IL‐6水平均高于术前（P＜0．05）;试验组术后同一时间段IL‐6水平均低于对照组（P＜0．05）。（2）试验组术后IL‐10水平均高于术前（P＜0．05）;对照组术后1、3d血清IL‐10水平高于术前（P＜0．05）;试验组术后同一时间段IL‐10水平均高于对照组（P＜0．05）;（3）试验组术后1d血清TNF‐α水平明显高于术前（P＜0．05）;术后3、5dTNF‐α水平与术前差异无统计学意义（P＞0．05）;对照组术后1、3d血清TNF‐α水平高于术前（P＜0．05）,而术后5d与术前差异无统计学意义（P＞0．05）;术后1、3d血清TNF‐α,试验组明显低于对照组（P＜0．05）。结论FTS疗法能明显降低胰腺癌术后的炎性反应,改善免疫抑制,加速患者术后康复。     

右美托咪定对脂多糖诱导大鼠外周血中性粒细胞TREM-1mRNA表达的影响

目的：探讨右美托咪定对脂多糖（LPS）诱导大鼠外周血中性粒细胞髓样细胞触发受体‐1（TREM‐1）mRNA表达的影响。方法健康雄性Wistar大鼠40只,取外周血分离培养中性粒细胞,采用随机数字表法,将其随机分为4组（n＝10）,A组：阴性对照;B组：中性粒细胞中加入L PS （终浓度为100μg／L ）;C组：中性粒细胞中加入L PS （终浓度为100μg／L ）加右美托咪定（终浓度为0．5 ng／mL）;D组：中性粒细胞中加入LPS（终浓度为100μg／L）加右美托咪定（终浓度为1．0 ng／mL）。孵育24 h后,收集上清液,采用ELISA法测定TNF‐α、IL‐1β和IL‐6的浓度,采用RT‐PCR法测定TREM‐1 mRNA的表达。结果与A组比较,B组TREM‐1 mRNA表达上调,TNF‐α、IL‐1β和IL‐6的浓度升高,差异有统计学意义（P＜0．05）;与B组比较,C组和D组TREM‐1 mRNA表达下调,TNF‐α、IL‐1β和IL‐6的浓度降低,差异有统计学意义（P＜0．05）;与C组比较,D组 TREM‐1 mRNA表达水平、TNF‐α、IL‐1β和IL‐6的浓度比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论右美托咪定可通过下调 TREM‐1 mRNA表达,抑制L PS诱导大鼠外周血中性粒细胞T N F‐α、IL‐1β和IL‐6的生成及分泌。     

白藜芦醇对脂多糖诱导的巨噬细胞极化改变的影响

目的：探讨白藜芦醇对脂多糖（LPS）诱导的小鼠巨噬细胞系RAW264．7细胞极化表型改变的影响。方法体外培养的RAW264．7小鼠巨噬细胞在六孔板孵育12 h ,分为磷酸盐缓冲液（PBS）对照组、LPS（100 ng／mL）组、LPS（100 ng／mL）＋白藜芦醇（30μmol／L）组,LPS＋白藜芦醇组在加入LPS前预先加入白藜芦醇孵育12 h;上述细胞在LPS刺激12 h后分别收集细胞和培养上清液;实时定量PCR（RT‐qPCR）检测经典的炎症活化型巨噬细胞（M1）型相关基因iNOS、TNF‐αmRNA表达,以及替代活化巨噬细胞（M2）型相关基因IL‐10、PPARγ和Arg‐1 mRNA表达,Western blot检测细胞iNOS、Arg‐1蛋白表达,ELISA检测培养上清液中炎性因子IL‐12 p40、IL‐10和 TNF‐α的水平。结果 RT‐qPCR检测结果显示,与LPS组相比,M1型相关基因iNOS、TNF‐αmRNA较LPS＋白藜芦醇组显著上升（P＜0．05）,而M2型相关基因IL‐10、PPARγ、Arg‐1 mRNA表达显著下调（P＜0．05）。Western blot检测发现,LPS组iNOS蛋白水平显著高于LPS＋白藜芦醇组（P＜0．05）,而Arg‐1蛋白水平显著低于LPS＋白藜芦醇组（P＜0．05）。ELISA检测发现,LPS组培养上清液中炎性因子IL‐12 p40、TNF‐α水平显著高于LPS＋白藜芦醇组（P＜0．05）,而IL‐10和水平显著低于LPS＋白藜芦醇组（P＜0．05）。结论白藜芦醇可能促进了LPS刺激的RAW264．7巨噬细胞向M2型极化改变。     

白藜芦醇对β淀粉肽1～42刺激内皮细胞炎症因子表达的影响

目的：探索白藜芦醇对β淀粉样蛋白1～42（Aβ1～42）刺激内皮细胞炎症因子IL‐1、IL‐6与TNF‐α表达影响。方法5×101μmol／LAβ1～42刺激人脐静脉内皮细胞（HUVEC）24h,同时给予白藜芦醇160、80、40、20μg／L干预,CCK‐8法检测HU‐VEC细胞活性;ELISA法检测IL‐1、IL‐6和TNF‐α水平。结果与模型组比较,白藜芦醇各浓度组可以明显提高Aβ1～42刺激后HUVEC细胞活性,抑制Aβ1～42致HUVEC的IL‐1、IL‐6与TNF‐α表达,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论20μg／L以上浓度白藜芦醇可减少Aβ1～42致HUVEC炎症因子IL‐1、IL‐6与TNF‐α的表达。     

塞来昔布对膝骨关节炎患者血清IL-1及TNF-α水平的影响

目的：探讨塞来昔布对膝骨关节炎（KOA）患者血清IL‐1及肿瘤坏死因子‐α（TNF‐α）水平的影响。方法观察128例KOA患者在塞来昔布（200 mg口服,每天1次）治疗前,治疗后3 d ,治疗后1、2、4周血清IL‐1及 TNF‐α水平,并进行疼痛评估。结果塞来昔布治疗后3 d ,KOA患者视觉模拟评分法（VAS）、IL‐1及TNF‐α较治疗前显著下降（P＜0．01）,之后随治疗时间延长,呈逐渐下降趋势,治疗后2周维持较稳定水平。结论塞来昔布抑制IL‐1及TNF‐α的促炎作用,从而抑制KOA患者的炎症反应,缓解患者的疼痛程度。     

Slit2蛋白对TNF-α诱导的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖迁移的影响

目的：观察Slit2蛋白对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖迁移的影响。方法采用川北医学院第二临床医学院实验室培养的大鼠VSMCs ,实验分两部分,第一部分：Slit2单独作用,分为正常对照组和实验组（Slit2蛋白浓度分别为：50、75、100、125、150 ng／mL）;第二部分：Slit2与TNF‐α共同作用,分为正常对照组、阳性对照组（含TNF‐α10 ng／mL）和实验组（TNF‐α10 ng／mL＋Slit250 ng／mL、TNF‐α10 ng／mL＋Slit275 ng／mL、TNF‐α10 ng／mL＋Slit2100 ng／mL、TNF‐α10 ng／mL＋Slit2125 ng／mL、TNF‐α10 ng／mL＋Slit2150 ng／mL）。分别采用CCK‐8及transwell小室法检测各组细胞的增殖及迁移能力。结果第一部分：实验组与对照组OD值及迁移细胞数目比较差异均无统计学意义（P＝0．516,P＝0．52）。第二部分：正常对照组与阳性对照组比较细胞迁移数目差异有统计学意义（P＝0．00）,实验组细胞迁移数较阳性对照组明显减少;CCK‐8结果显示实验组和阳性对照组与正常对照组OD值比较差异有统计学意义（P＜0．05）,而实验组与阳性对照组OD值比较差异无统计学意义（P＝0．173）。结论 Slit2对VSMCs增殖无影响,但能抑制TNF‐α诱导的VSMCs迁移。     

血液灌流联合血液滤过对有机磷农药中毒患者疗效及炎症状态的影响

目的：探讨血液灌流（HP）联合血液滤过（HF）在有机磷农药中毒患者中的应用及对机体炎症状态的影响。方法将68例急性有机磷农药中毒（AOPP）患者按随机数字表法分为对照组及观察组,对照组采用血液透析（HD）联合HP进行血液净化,而观察组则采用HP联合 HF进行血液净化。观察并比较两组患者生存率、生存时间、全血胆碱酯酶活力、血清转化生长因子‐β1（TGF‐β1）、血清肿瘤坏死因子‐α（TNF‐α）以及血清白细胞介素‐6（IL‐6）的水平。结果与治疗前相比,所有患者血清 TGF‐β1、TNF‐α、IL‐6水平均显著下降（P＜0．05）;与对照组相比,观察组生存时间显著延长（P＜0．05）,治疗后血清 TGF‐β1、TNF‐α以及IL‐6水平下降更为显著（P＜0．05）。结论血液净化疗法治疗AOPP疗效肯定,以 HP联合HF方案疗效更佳。     

重组人乳铁蛋白对幽门螺杆菌抑菌作用的实验研究

目的：评估重组人乳铁蛋白（rhLF）对幽门螺杆菌（H ．pylori）的抑菌作用及其对细胞毒素相关蛋白A（CagA）、尿素酶（Ure）和胃黏膜白细胞介素8（IL‐8）的影响。方法测定最低抑菌浓度（MIC）和不同药物浓度对 H ．pylori增殖的影响。通过实时定量PCT和Western blot检测rhLF对 H ．pylori CagA和Ure的mRNA和蛋白表达的影响。动物实验,144只BABL／c小鼠,分为4组,标准三联＋rhLF组（A组）、rhLF组（B组）、标准三联组（C组）、生理盐水组（D组）,组织病理学苏木素‐伊红（HE）染色观察不同分组间胃黏膜炎性反应,ELISA法检测各组胃组织IL‐8水平。结果 MIC为0．5 mg／mL ,且rhLF抑制细菌生长增殖呈现浓度依赖性过程。rhLF能降低H ．pylori主要毒力因子CagA、Ure mRNA和蛋白的表达。A组胃黏膜组织炎症积分和匀浆液IL‐8水平与B、C、D组比较,差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论 rhLF抑制H ．pylori生长及增殖,并不同程度抑制H ． pylori主要毒力因子CagA、Ure mRNA及蛋白的表达,削弱该菌的致病性,同时降低小鼠胃黏膜IL‐8水平,减轻H ．pylori相关性胃黏膜炎性反应。     

等量幽门螺杆菌不同灌胃方法对小鼠胃黏膜的影响

目的：探讨等量幽门螺杆菌不同灌胃方法对小鼠幽门螺杆菌的感染率及小鼠胃黏膜感染幽门螺杆菌程 度的影响。方法： 将含等量NCTC11637幽门螺杆菌的布氏肉汤混悬液通过A,B,C,D 4种方法感染6周龄的雄性 C57BL/6小鼠。A方法用幽门螺杆菌悬液0.2 mL/只灌胃小鼠,隔天1次,共5次。B方法用幽门螺杆菌悬液0.2 mL/只 灌胃小鼠,每天1次,连续5次。C方法第1天用幽门螺杆菌悬液灌胃小鼠0.4 mL/只,以后连续3 d每天灌胃1次,每次 0.2 mL/只。D方法第1天用幽门螺杆菌悬液灌胃小鼠0.4 mL/只,以后隔天灌胃1次,每次0.2 mL/只,共3次。E方法用 等量生理盐水灌胃小鼠。灌胃后第2,4,6周处死小鼠,其胃黏膜组织用快速尿素酶检测是否有幽门螺杆菌感染,并 取胃黏膜组织进行HE染色,观察胃黏膜组织的感染程度。结果：2周后A,B,C,D组小鼠的感染率分别为33.3%, 50.0%,66.7%,33.3%;炎症的感染程度C方法>B方法>D方法>A方法>E方法。4周后A,B,C,D组小鼠的感染率分别 为50.0%,83.3%,83.3%,66.7%;炎症的感染程度C方法>B方法>D方法>A方法>E方法。6周后A,B,C,D组小鼠的 感染率均为100%;炎症的感染程度C方法>D方法>B方法>A方法>E方法。结论：在幽门螺杆菌急性感染期,灌胃方法 不同小鼠的感染率不同,炎症程度不同;在幽门螺杆菌的慢性感染期,灌胃方法不同小鼠的感染率相同,感染的炎 症程度不同。采用第1天灌0.4 mL,以后连续3 d每天1次,0.2 mL/次的灌胃方法最有利于幽门螺杆菌在小鼠胃黏膜定 植,感染炎症程度最严重,有利于幽门螺杆菌感染模型的成功建立。     

细胞因子在胃十二指肠疾病中的作用机理

目的：探讨细胞因子在胃十二指肠疾病中的作用机理。方法：应用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法对３０例慢性浅表性胃炎（急性期）、３０例消化性溃疡患者胃粘膜组织中细胞因子 Ｉ Ｌ １、 Ｉ Ｌ ８及 Ｔ Ｎ Ｆ α活性进行了测定。结果：慢性急性期浅表性胃炎患者胃粘膜中 Ｉ Ｌ １、 Ｉ Ｌ ８及 Ｔ Ｎ Ｆ α活性明显高于对照组（ Ｐ＜００１）;消化性溃疡患者明显高于对照组（ Ｐ＜ ００１）;幽门螺杆菌阳性疾病组明显高于阴性疾病组（ Ｐ＜ ００１）;其中消化性溃疡组 Ｉ Ｌ ８活性明显高于慢性胃炎组（ Ｐ＜ ００１）。结论：细胞因子在慢性胃炎、消化性溃疡疾病发生发展中起一定作用。     

帕瑞昔布钠在腹腔镜胆囊切除术中超前应用的随机对照研究

目的：探讨帕瑞昔布钠对腹腔镜胆囊切除术的超前镇痛作用及对患者致炎因子的影响观察。方法将择期拟行全身麻醉下腹腔镜胆囊切除术患者96例分为A组、B组、C组,每组32例。A组于全身麻醉诱导时静脉注射帕瑞昔布钠40mg（稀释成5mL）,术毕前15min静脉注射5mL生理盐水;B组全身麻醉诱导时、术毕前15min分别予以5mL生理盐水、帕瑞昔布钠40mg（稀释为5mL）静脉注射;C组于全身麻醉诱导时及术毕前15min均予以5mL生理盐水静脉注射。比较3组患者术后12h患者自控镇痛（PCA）按压总数和有效按压次数、视觉模拟评分法（VAS）评分,术前、术毕即刻、术后2h、术后12h、术后24h血清肿瘤坏死因子α（TNF‐α）、白细胞介素（IL）‐6、IL‐12的水平。结果A组术后12hPCA总按压次数和PCA有效按压次数明显低于B、C组（P＜0．05）;A组术后1、2、4、6、8、12h的VAS评分较B、C组低（P＜0．05）,而术后24hA组与B组未见明显差异（P＞0．05）。3组患者术毕即刻、术后2h、术后12h、术后24h的IL‐6、TNF‐α水平变化为：A组＜B组＜C组,IL‐12各时点比较：A组＞B组＞C组。结论腹腔镜胆囊切除术中超前应用帕瑞昔布钠具有良好的镇痛效果,全身麻醉诱导时应用比术毕前应用效果更佳,且其发挥镇痛作用同时可降低炎症因子IL‐6、TNF‐α的产生,提高IL‐12的水平,有利于术后恢复。     

幽门螺杆菌国内流行株动物模型的建立

目的建立国内幽门螺杆菌（Hp）流行株的动物模型,研究Hp流行株感染小鼠的胃黏膜改变,为进一步治疗提供更好的动物模型。方法60只SPF级C57BL/6小鼠,分为正常组和模型组,每组30只。模型组经口灌服VacAs1、CagA、iceA阳性的临床分离株,距末次灌胃后5、10、15、20、25、30周分6批处死,取标本行快速尿素酶试验,Giemsa染色法观察Hp在胃黏膜上的定植情况,HE染色观察小鼠胃黏膜的病理变化。结果正常组小鼠的胃窦、胃体及十二指肠黏膜的尿素酶试验,Giemsa染色结果均阴性,模型组在距末次灌胃后5、10、15、20、25、30周Hp定植率分别为60%、80%、100%、100%、100%、100%。至30周模型组慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠化、异型增生、胃癌发生率分别为100%、60%、0%、0%、0%。结论成功建立了HpVacAs1、CagA、iceA阳性的国内流行株感染C57BL/6小鼠的模型,并明确了其感染小鼠后各阶段的胃黏膜病理改变。