P38MAPK与HO-1在急性肺损伤中的探讨

目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶P38(P38MAPK)与血红素加氧酶-1(HO-1)在急性肺损伤中的相互关系.方法 健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为5组(n=8).对照组(NS组)、内毒素组(LPS组)、血晶素组(Hemin组)、锌原卟啉Ⅸ组(ZnPPⅨ组)、SB203580组(SB组).于6 h后用Western Blot和免疫组化法分别检测肺组织P38MAPK和HO-1蛋白表达,检测肺泡灌洗液(BALF)中中性粒细胞比、肺组织湿/干重、蛋白含量和动脉血气,并进行病理学观察.结果 与NS组比较,LPS组、Hemin 组、SB组、ZnPPⅨ组P38MAPK含量蛋白表达明显增高(P<0.05),HO-1强阳性表达(P<0.01或P<0.05),肺组织湿/干重明显增加(P<0.05),中性粒细胞比、蛋白含量显著增加(P<0.05或P<0.01),PaO2、PaCO2和HCO3ˉ较NS组显著下降(P<0.05);与LPS组比较,Hemin 组、SB组P38MAPK蛋白表达显著降低(P<0.05),HO-1的表达明显升高(P<0.05),肺组织湿/干重、中性粒细胞比、蛋白含量明显减少(P<0.05),而ZnPPⅨ组恰好相反;Hemin 组、SB组之间无显著差异(P>0.05).ZnPPⅨ组肺组织损伤最重,LPS组次之,Hemin组和SB组最轻.结论 P38MAPK与HO-1在急性肺损伤中各自独立,相互抑制.     

脂氧素A_4及其受体对急性肺损伤Na~+-K~+-ATP酶的影响

目的研究脂氧素A_4及其受体对大鼠急性肺损伤Na~+-K~+-ATP酶的影响及机制。方法将大鼠随机分为7组:1对照组;2油酸(OA)组;3油酸+脂氧素A4(OA+LX)组;4OA+Alcohol组;5油酸+BML-111组(OA+BML-111组);6油酸+脂氧素A_4+BOC-2(OA+LX+BOC-2)组;7OA+DMSO组。机械通气1 h后处死,取肺组织测定Na~+-K~+-ATP酶α_1、β_1亚基蛋白表达和Na~+-K~+-ATP酶活性。结果与OA组比较,OA+LX组和OA+BML-111组肺组织Na~+-K~+-ATP酶β_1亚基蛋白表达明显增高(P0.05),Na~+-K~+-ATP酶活性明显增强(P0.05);与OA+LX组比较,BOC-2抑制Na~+-K~+-ATP酶的活性(P0.01)。结论脂氧素通过上调Na~+-K~+-ATP酶蛋白表达及活性减轻油酸诱导的大鼠急性肺损伤,其作用机制与脂氧素受体(ALX)相关。     

N-乙酰半胱氨酸对急性肺损伤大鼠的保护作用

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对油酸(OA)诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠的保护作用.方法:成年雄性SD大鼠18只,随机分成对照组、损伤组(ALI组)和N-乙酰半胱氨酸组(NAC组),后两组在注射OA后3h检测肺湿重与肺干重比(W/D),肺组织匀浆髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及肺组织病理检查.结果:ALI组MPO、MDA明显升高,SOD明显降低,与对照组比较有明显差异(P<0.01),NAC组MPO、MDA低于ALI组,SOD明显升高,P<0.01;ALI组MPO水平与肺组织病理损伤程度成正相关(r=O.793,P<0.01);肺组织病理组织学显示,NAC预处理能明显改善肺组织病理损伤.结论:NAc对ALI大鼠具有保护作用,其保护机制可能与清除氧自由基有关.     

肺瘤平膏联合环磷酰胺化疗对肺癌的抑瘤作用和酸性微环境的影响

目的 观察肺瘤平膏和化疗药环磷酰胺对肺癌小鼠的作用,并从酸性微环境和细胞凋亡角度探索其内在作用机制.方法: 建立Lewis肺癌小鼠模型,分别给予环磷酰胺,肺瘤平膏,环磷酰胺+肺瘤平膏相应处理,以生理盐水组作为对照,观察各组小鼠的肿瘤体积,肿瘤增殖率,食物消耗量.给药15 d后处死小鼠,取肿瘤组织,用乳酸试剂盒检测肿瘤组织的乳酸相对浓度,免疫组织化学法检测葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4,GLUT4),己糖激酶1(hexokinase 1,HK1),葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78),碳酸酐酶-Ⅸ(carbonic anhydrase-Ⅸ,CA-Ⅸ)的蛋白表达,流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率和调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)比例,Wes-tern blot法检测缺氧诱导因子1-α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α),Bcl-2,Bax,Caspase-3,白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)的蛋白表达.结果: 肺瘤平膏+环磷酰胺组小鼠的肿瘤生长受到抑制最为明显,肿瘤增殖率最低,与生理盐水组相比差异有统计学意义(P<0.05),食物的消耗量也最多,但差异并不具有统计学意义(P>0.05).进一步的分子生物学检测发现,肺瘤平膏+环磷酰胺组肿瘤组织的乳酸水平在各组中最低,并伴有GLUT4,HK1,GRP78,CA-Ⅸ等蛋白表达和Treg细胞比例的下降,与生理盐水组相比差异具有统计学意义(P<0.05).此外,与生理盐水组相比,肺瘤平膏+环磷酰胺组肿瘤细胞凋亡显著增加,而HIF-1α,Bcl-2,Bax,Caspase-3,IL-2等蛋白的表达与生理盐水组相比存在明显差异.结论: 化疗药环磷酰胺与肺瘤平膏在抑制肺癌生长,提高荷瘤小鼠一般状况上具有协同作用,这些作用部分是因为二者联用改善组织缺氧,抑制HIF-1α表达,进而调控下游GLUT4,HK1,GRP78,CA-Ⅸ等蛋白的表达,降低肿瘤组织局部的乳酸水平,改善肿瘤组织酸性微环境,从而诱导肿瘤细胞凋亡,抑制T细胞向Treg细胞分化.     

肺瘤平膏联合环磷酰胺化疗对肺癌的抑瘤作用和酸性微环境的影响

目的 观察肺瘤平膏和化疗药环磷酰胺对肺癌小鼠的作用,并从酸性微环境和细胞凋亡角度探索其内在作用机制.方法: 建立Lewis肺癌小鼠模型,分别给予环磷酰胺,肺瘤平膏,环磷酰胺+肺瘤平膏相应处理,以生理盐水组作为对照,观察各组小鼠的肿瘤体积,肿瘤增殖率,食物消耗量.给药15 d后处死小鼠,取肿瘤组织,用乳酸试剂盒检测肿瘤组织的乳酸相对浓度,免疫组织化学法检测葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4,GLUT4),己糖激酶1(hexokinase 1,HK1),葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78),碳酸酐酶-Ⅸ(carbonic anhydrase-Ⅸ,CA-Ⅸ)的蛋白表达,流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率和调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)比例,Wes-tern blot法检测缺氧诱导因子1-α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α),Bcl-2,Bax,Caspase-3,白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)的蛋白表达.结果: 肺瘤平膏+环磷酰胺组小鼠的肿瘤生长受到抑制最为明显,肿瘤增殖率最低,与生理盐水组相比差异有统计学意义(P<0.05),食物的消耗量也最多,但差异并不具有统计学意义(P>0.05).进一步的分子生物学检测发现,肺瘤平膏+环磷酰胺组肿瘤组织的乳酸水平在各组中最低,并伴有GLUT4,HK1,GRP78,CA-Ⅸ等蛋白表达和Treg细胞比例的下降,与生理盐水组相比差异具有统计学意义(P<0.05).此外,与生理盐水组相比,肺瘤平膏+环磷酰胺组肿瘤细胞凋亡显著增加,而HIF-1α,Bcl-2,Bax,Caspase-3,IL-2等蛋白的表达与生理盐水组相比存在明显差异.结论: 化疗药环磷酰胺与肺瘤平膏在抑制肺癌生长,提高荷瘤小鼠一般状况上具有协同作用,这些作用部分是因为二者联用改善组织缺氧,抑制HIF-1α表达,进而调控下游GLUT4,HK1,GRP78,CA-Ⅸ等蛋白的表达,降低肿瘤组织局部的乳酸水平,改善肿瘤组织酸性微环境,从而诱导肿瘤细胞凋亡,抑制T细胞向Treg细胞分化.     

油酸型ARDS大鼠心肌组织IL-1β、IL-10含量及mRNA表达的动态观察

目的:探讨油酸型急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠心肌组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)含量及其mRNA的表达在心肌损伤过程中的作用。方法:Wistar大鼠32只,随机分为4组,采用油酸复制ARDS大鼠模型,观察对照组、油酸(OA)注射后2h(OA2h组)、4h(OA4h组)、6h(OA6h组)组肺的湿/干重、心肌组织的病理改变及血清心肌酶谱(AST、CK、CK-MB、LDH)。用放射免疫分析法检测血清及心肌组织中IL-1β、IL-10的含量,以RT-PCR法检测心肌组织中IL-1β、IL-10mRNA的表达情况。结果:OA各组肺湿/干重均高于C组(P<0.05)。OA各组AST以及OA2h、OA4h组CK、CK-MB、LDH均高于对照组(P<0.05)。OA6h组血清及心肌组织中的IL-1β含量显著升高(P<0.01);OA2h组血清IL-10含量明显高于其它各组(P<0.01),OA6h组心肌组织中IL-10含量明显高于对照组及OA2h组(P<0.01)。OA各组心肌组织IL-1βmRNA表达均高于对照组(P<0.01);OA6h组IL-10mRNA表达有所升高(P<0.01)。结论:油酸型ARDS大鼠并发心肌损伤可能与心肌组织中IL-1β、IL-10含量的增高、mRNA表达的增强有关。     

银杏叶提取物抗大鼠肺缺血/再灌注损伤的实验研究

目的 探讨银杏叶提取物(EGb761) 能否通过诱导血红素氧合酶-1(HO-1)活性减轻肺缺血/再灌注损伤.方法 采用呼气末无创血管夹夹闭阻断左主支气管、左肺动脉和左肺静脉30 min后再灌注2 h建立缺血/再灌注(I/R)动物模型.40只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为4组:假手术组、I/R组、EGb组(术前24 h腹腔注射EGb 20 mg/kg)、EGb ZnPP组(EGb 20 mg/kg 再灌注前15 min静脉注射ZnPP Ⅸ 40 μmol/kg),检测肺湿重/干重比、肺泡损伤数、肺组织中HO-1的活性和肺组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Pxase)活性变化.结果 ①EGb761明显诱导肺组织HO-1活性增加(P<0.01);②同假手术组比较,I/R组肺湿重/干重比及肺泡损伤数增加(P<0.01),肺组织GSH-Pxase活性降低(P<0.01),缺血/再灌注前用EGb761可逆转上述病理改变(P<0.01),用HO-1的抑制剂ZnPP Ⅸ可部分抑制EGb761的保护作用.结论 EGb761通过HO-1的抗氧化作用减轻肺缺血/再灌注损伤.     

A3腺苷受体激动剂预处理对兔体外循环中肺组织损伤的影响

目的 研究A3腺苷受体(A3AR)激动剂IB-MECA预处理对兔体外循环(CPB)中肺组织损伤的影响.方法 24只新西兰大白兔随机分为对照组(仅行体外循环)、激动剂组(阻断主动脉前15 min静脉注射IB-MECA)和拮抗剂+激动剂组(IB-MECA干预前15 min静脉注射选择性A3AR拮抗剂 MRS-1191),每组8只.CPB结束后采集样本,分别检测和比较各组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-8(IL-8)水平、肺组织丙二醛(MDA)含量和髓过氧化物酶(MPO)活性、肺组织湿/干重比(W/D)、氧合指数(PaO2/FiO2)、肺血管阻力(PVR)和气道压(AWP)等指标,观察各组动物肺组织病理学改变.结果 CPB后,激动剂组血清TNF-α和IL-8水平显著低于对照组和拮抗剂+激动剂组 (P<0.05);与对照组和拮抗剂+激动剂组比较,激动剂组CPB后肺组织W/D较小,MDA含量较少,MPO活性较低,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);CPB后,激动剂组PaO2/FiO2显著高于对照组和拮抗剂+激动剂组(P<0.05),而AWP和PVR显著低于对照组和拮抗剂+激动剂组(P<0.05);组织学观察发现,激动剂组肺组织的组织病理学改变较对照组和拮抗剂+激动剂轻微.结论 A3AR激动剂IB-MECA预处理可显著减轻CPB过程中的肺组织损伤程度.     

广藿香醇对脂肪酸诱导原代小鼠肝细胞脂质积蓄的作用及机制研究

目的 研究广藿香醇对油酸(OA)+棕榈酸(PA)诱导小鼠原代肝细胞脂质积蓄的作用及机制.方法 将小鼠原代肝细胞(MPH)分为对照组(DMSO)、模型组(OA+PA)、广藿香醇低、中、高剂量组(5、10、20μmol/L)和奥贝胆酸组(OCA,10μmol/L),采用1 mmol/L的OA+PA处理MPH细胞24 h构建...     

阿奇霉素对急性肺损伤大鼠炎症介质及炎症细胞的影响

目的:应用油酸(oleic acid,OA)静脉注射复制大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型,探讨支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、多形核白细胞(poly-morphonuclear leukocyte,PMN)在油酸性肺损伤中的变化规律;探讨阿奇霉素对OA致ALI大鼠的治疗作用及可能的作用机制,为临床治疗ALI提供一定的理论和实验依据.方法:应用OA静脉注射复制大鼠ALI模型.将90只SD大鼠随机分为3组:生理盐水对照组(NC组),油酸致急性肺损伤组(0A组),阿奇霉素治疗组(AZI组).每组分别在1、3、7 d抽取动脉血并放血迅速处死.测定动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、pH值、左上肺测湿/干重比(wet/dry weight,W/D值),下段行病理检查.右肺灌洗,测BALF中总蛋白(total proteins,TP)、TNF-α含量,并对BALF中炎症细胞进行分类计数.结果:与NC组比较.OA组各时间点W/D值、BALF中的TNF-α、TP及炎症细胞计数显著升高(P<0.01),PaO2降低(P<0.01),肺组织病理见充血、水肿、出血、炎性细胞浸润等急性肺损伤表现;AZI组与OA组相比,病理学观察肺组织病变减轻.PaO2升高(P<0.05),W/D、TNF-α、PMN均降低(P<0.05).结论:阿奇霉素可以减轻肺微血管渗漏,改善大鼠肺换气功能,降低BALF中TNF-α、PMN水平,调节肺部炎症介质及炎症细胞,对ALI有一定的治疗作用.     

术中肺保护策略对行肺切除患者术后肺功能的影响

目的 研究术中肺保护策略对行肺切除患者术后肺功能的影响.方法 50名择期行肺叶或全肺切除的患者,被随机分为试验组和对照组.试验组采用肺保护策略:单肺通气潮气量为5～6 mL/kg(预测体重,PBW),吸入氧浓度0.4～0.7,术中输液补足出血量并以2.0～3.0mL/kg·h(实测体重,MBW)维持.对照组的通气和输液不予限定.测定术前和术后第1、3、5日的第1秒用力呼气容积(FEV1.0),呼气峰流速(PEF),及动脉血气分析,并记录氧合指数(01).结果 肺保护策略干预的患者术后FEV1.0(P=0.002),PEF(P=0.004)和OI(P=0.005)都要明显优于对照组.结论 术中肺保护策略可以改善择期行肺叶切除术的患者术后的肺功能和氧合指数,有利于患者术后的恢复.     

移植肺保护的研究进展

肺移植已成为治疗终末期肺疾病的有效方法之一。作者结合近几年文献，针对术后原发性移植物无功能(PGF)所采取的肺保护方法如低温、肺通气、肺保存等作一系统性回顾，旨在为临床移植肺保护提供更好的方法和策略。     

单侧肺移植治疗终末期间质性肺病

目的探讨单侧肺移植治疗终末期间质性肺病的手术方法、效果及围手术期的处理措施.方法4例终末期间质性肺病患者包括2例肺淋巴管平滑肌瘤病和2例矽肺,均接受单侧肺移植,其中1例由非血缘供体肺叶移植.术后均接受抗排异免疫治疗及抗感染治疗.结果手术死亡率及术后早期（术后＜90 d）死亡率均为零.术后肺动脉压力、血氧分压及二氧化碳分压均较术前有明显改善（P＜0.01）.随访率为100%.1例术后4个月死亡,1例术后生存2年3个月死亡,其余2例仍在随访中.结论肺移植是目前治疗终末期间质性肺病的唯一有效手段.肺水肿、排异反应、感染、呼吸道并发症以及过度通气等是引起术后呼吸功能不全的主要原因.围手术期的处理是保证肺移植手术成功的关键.     

Thoracoscopic lung biopsy for diffuse infiltrative lung disease

Thoracoscopic lung biopsy is becoming the procedure of first choice for the diagnosis of many localized and diffuse lung diseases. We have performed thoracoscopic lung biopsy for 17 patients with diffuse infiltrative lung disease, in Kurume University Hospital. There were 13 females and 4 males with a mean age of 48 years (range: 19-71 years). Thoracoscopic surgical biopsy was performed in the right lung in 12 and in the left lung in 5. Adequate lung tissue from each case was obtained for pathological examination. The mean surgical biopsy time was 49 min (range: 25-72 min) and bleeding was negligible. The mean duration for chest tube drainage was 2.6 days. No postoperative complication such as prolonged air leakage occurred. A specific diagnosis from the biopsy was achieved in 13 (76.4%) of the 17 cases. In only 6 (35.2%) of the 17 cases, the pathological diagnosis was the same as that from the thoracoscopic biopsy. In these 6 cases, the same diagnosis was obtained only in those with idiopathic interstitial pneumonitis or diffuse panbronchitis. Thoracoscopic lung biopsy was safe and useful for diagnosis for diffuse infiltrative lung disease.     

肺挫伤及肺撕裂伤的CT诊断

目的分析肺挫伤及肺撕裂伤的CT表现，提高对肺挫伤及肺撕裂伤的认识。方法搜集连续4个月收治的肺挫伤及肺撕裂伤患者35例，其中男31例，女4例；车祸伤18例，坠落伤6例，撞伤6例，棍击伤2例，挤压伤2例，刀刺伤1例。均行胸部平扫，层厚5．0-10．0mm。结果肺挫伤33例，CT表现为：肺纹理增粗、紊乱、模糊33例；小点状、小片絮状影9例；磨玻璃影5例；斑片状、片条状影24例以及叶段分布的大片影3例；以上各种表现混合存在，且合并肺不张3例。肺撕裂伤5例：其中肺气囊肿4例：3例与肺挫伤并存，1例多发，圆形或扁形，可见小气液平面；肺血肿2例，表现为边缘光滑的椭圆形结节影，最大径4.0cm，其中1例也与肺挫伤并存。结论结合病史，CT能明确肺挫伤及肺撕裂伤的诊断。     

放射性肺损伤肺成纤维细胞的活化机制研究

目的 通过研究大鼠放射性肺损伤模型,探讨肺成纤维细胞在放射性肺损伤的作用及机制,为临床预防和治疗放射性肺损伤提供新的思路.方法 建立Wistar大鼠半胸照射的放射性肺损伤实验动物模型,35只Wistar大鼠常规分为A～F、N组共7组,每组5只大鼠.A～F组在接受相同剂量照射后分别在放疗后1 d,1、2、4、8和12周处死,N组在实验第1天处死作为正常对照组,分别以免疫组化检测双侧肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 照射后照射野内肺成纤维细胞(阳)免疫组化α-SMA呈强阳性,与对照组有显著差异(P=0.001);对侧未照射肺组织也可见散在分布梭形样形态的间质细胞,α-SMA阳性表达且与正常对照组有显著差异性(P=0,001).结论 肺内成纤维细胞无论射野内或射野外肺FB照射后均活化成为功能活跃的肌纤维母细胞(MF),由此猜测具有增殖和分泌活性的MF可能有部分来源于肺外,通过血液传递分布于肺组织照射野内或野外,可能参与了淋巴细胞性放射性肺损伤的发生.