检测特异性抗体用于日本血吸虫病疗效考核的研究

为探讨特异性ＩｇＧ及其亚类对日本血吸虫病的疗效考核价值,用直接ＥＬＩＳＡ及间接ＥＬＩＳＡ 方法检测了２６４ 份治疗前和治疗后不同时间慢性血吸虫病病人以及５０ 份正常人血清中虫卵抗原（ＳＥＡ）和成虫抗原（ＡＷＡ）特异性ＩｇＧ、ＩｇＧ１ 和ＩｇＧ４。结果ＩｇＧＳＥＡ 及ＩｇＧ４ＳＥＡ在治疗后３ 个月出现有显著意义的下降且于治疗后１２ 个月降至正常;ＡＷＡ特异性抗体均于治疗后６ 个月才下降,其中仅ＩｇＧ４ＡＷＡ 于治疗后１２ 个月降至正常;ＩｇＧ４ＳＥＡ／ＡＷＡ 在治疗后１２ 个月时的阴转率最高（９７．７ ％） ,ＩｇＧＳＥＡ 次之（７５％ ）。表明治疗后ＳＥＡ 特异性ＩｇＧ 及ＩｇＧ４ 下降较ＡＷＡ特异性抗体快;ＩｇＧ４ 为一短期抗体,尤其ＩｇＧ４ＳＥＡ,可作为判断日本血吸虫病是否治愈的指标。     

4种抗原检测日本血吸虫病人血清中特异性IgG和IgG_4考核疗效的比较研究

目的探讨ＳｊＭＡｇ、ＫＬＨ及ｒＳｊ３２检测日本血吸虫病人的特异性和敏感性及疗效考核价值。方法采用ＥＬＩＳＡ法,用ＳｊＭＡｇ、ＫＬＨ及ｒＳｊ３２及ＳＥＡ检测治疗前及治疗后不同时期血吸虫病人血清中的特异性ＩｇＧ、ＩｇＧ４及正常人和肺吸虫、肝吸虫、囊虫病人血清中的非特异抗体。结果ＳｊＭＡｇ、ＫＬＨ及ｒＳｊ３２的敏感性和特异性与ＳＥＡ比较差异均无显著性（均Ｐ＞０．０５）;用ＳｊＭＡｇ和ＫＬＨ分别检测治疗后１２个月血清中ＩｇＧ和ＩｇＧ４的阴转率均显著高于ＳＥＡ（Ｐ＜０．０１）、检测治疗后２４个月血清中ＩｇＧ４的阴转率均达９７．６％。结论ＳｊＭＡｇ、ＫＬＨ及ｒＳｊ３２具有与ＳＥＡ相似的诊断价值和较高的疗效考核价值;特异性ＩｇＧ４可能系一种疗效敏感抗体,可望成为疗效考核评价指标。     

不同病型,病期HFRS患者特异性抗体水平测定及其临床意义

用捕获ＥＬＩＳＡ方法检测了６０例（１２０份）肾综合征出血热患者（ＨＦＲＳ）血清特异性ＩｇＡ、Ｉｇ－Ｅ、ＩｇＭ、ＩｇＧ抗体。发现４种抗体几何平均滴度均随病期进展逐渐升高，且早期（发热及休克少尿期）与后期（多尿恢复期）间有差异性。ＨＦＲＳ－ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＧ抗体水平的差异在早期（特别是发热期）尤为显著（Ｐ＜０．０５）。结果显示，ＨＦＲＳ－ＩｇＭ确属早期较可靠诊断指标；ＨＦＲＳ－ＩｇＧ、ＩｇＥ抗体水平与病情严重度相关。ＨＦＲＳ－ＩｇＡ抗体可能是一种保护性抗体。     

4种抗原检测日本血吸虫病人血清中特异性IgG和IgG4 …

探讨ＳｉＭＡｇ、ＫＬＨ及ｒＳｊ３２检测日本血吸虫病的特异性和敏感性及疗效考核价值。方法采用ＥＬＩＳＡ法，用ＳｊＭＡｇ、ＫＬＨ及ｒＳｊ３２及ＳＥＡ检测治疗前及治疗后不同时期血吸虫病人血清中的特异性ＩｇＧ、ＩｇＧ４及正常和肺吸虫、肝吸虫、囊虫病人血清中的非特异抗体。结果ＳｉＭＡｇ、ＫＬＨ及ｒＳＪ３２的敏感性和特异性与ＳＥＡ比较差异均无显著性（均Ｐ〉０．０５）     

斑点免疫金银染色与Dot—ELISA检测抗弓形虫抗体的对比研究

为比较斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫抗体的敏感性和特异性，本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原，同时用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测６５份弓形虫感染者血清、１７６份其他寄生虫感染者血清和７６份对照血清。结果显示，用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为９８．４６％及９２．３１％，平均抗体滴度分别为１：３８４及１：     

脑囊虫病人特异性抗体的类别及其诊断意义的研究

用酶联免疫印渍法（ＥＬＩＢ）对治疗前后的脑囊虫病人、绦虫病人及正常人血清中的特异性ＩｇＧ、ＩｇＭ及ＩｇＡ进行了检测与分析。显示３种抗体在脑囊虫病人血清中的存在量依次为ＩｇＧ＞ＩｇＭ＞ＩｇＡ。脑囊虫病人ＩｇＧ有２７条在７８～１１ｋＤ间的特异反应带，其中有８条带（分别为：７１、５７、４６、４３、３８、２９、２７、及１３ｋＤ）是经常出现于疗前及疗后６～８．５个月病人的特异性主带，最具诊断意义。单纯绦虫病人７８ｋＤ带出现机会多，这条带在疗后６～８．５个月的脑囊虫病人中亦存在。８１、６７及４９ｋＤ的特异性ＩｇＭ带是诊断脑囊虫病人最特异的指征。３７ｋＤ的多肽抗原只被病人血清中的特异性ＩｇＡ所识别。用ＥＬＩＢ检测胞囊虫病人血清中的特异性ＩｇＭ及ＩｇＡ优于ＥＬＩＳＡ。     

弓形虫病诊断方法的对比研究

应用５种不同方法测定了６例弓形虫病人不同病期的血清标木。用ＩＨＡＴ和ＩＦＡＴ测定抗弓形虫总免疫球蛋白，ＩＨＡＴ在发病后第３周的２份血清标本中有１份已呈阳性，１４～１７周达高峰。滴度升高非常明显；ＩＦＡＴ第３周的标本都呈阳性，１７～２４周达高峰。用ＩｇＧ－ＥＬＩＳＡ和ＩｇＭ－ＥＬＩＳＡ，ＩｇＭ－ＩＦＡＴ分别测定抗弓形虫特异性抗体ＩｇＧ和ＩｇＭ，ＩｇＧ－ＥＬＩＳＡ从第６周呈阳性，随病情延长，滴度明显升高；ＩｇＭ－ＥＬＩＳＡ两份第３周的标本都呈阳性，至少第１７周仍保持较高水平，其中１人第２４周的标本仍呈阳性；但ＩｇＭ－ＩＦＡＴ仅２例（２／６）呈阳性且滴度不很高，在较短时间内就转阴。结果表明：病人的抗体类型相似；ＩｇＧ－ＥＬＩＳＡ，ＩｇＭ－ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡＴ敏感特异，ＩＨＡＴ简便、快速；高滴度特异性ＩｇＧ易掩盖ＩｇＭ－ＩＦＡＴ；ＩｇＭ－ＥＬＩＳＡ可为早期诊断提供依据。     

吡喹酮治疗曼氏血吸虫感染的小鼠卵谱与特异性抗体及亚型抗体水平关系的动态观察

本文观察了小鼠曼氏血吸虫病经不同剂量吡喹酮治疗后血清中７种抗体的动态变化规律及其组织内卵谱变化的相应关系。结果显示完全治愈小鼠体内虫体迅速消失,活卵于４Ｗ消失,但原虫卵结节内仍残留排空卵壳和钙化虫卵,ＩｇＧ、ＩｇＭ在２０Ｗ内趋于上升。亚型中ＩｇＧ２６效价最高,ＩｇＡ在服药后明显下降,８Ｗ时其平均滴度（ＧＭＲＴ）降至６０。亚治疗量鼠体内成虫数量减少,产卵于８Ｗ内受抑,后渐恢复。ＩｇＧ及亚型、ＩｇＭ消长与对照相近,ＩｇＡ消长规律与卵谱变化一致,因此推测ＩｇＡ变化与肠壁内是否有活卵有关。本文推测抗ＳＥＡ─ＩｇＡ可作为曼氏血吸虫病早期诊断指标之一。     

旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中46-58kD蛋白的纯化及其在诊断中的应用

本研究以常规ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电洗脱技术相结合，分离纯化旅毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物（ＴＳＬＩ－ＥＳ）中４６－５８ｋＤ的蛋白组份，并用于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断旋毛虫病．检测结果：旋毛虫病人血清３４份，阳性３２份，阳性反应率为９４．１２％；正常人血精１００份未发现假阳性；对蛔虫病人（１２份）、囊虫病人（１５份）、血吸虫病人（１５份）及肺吸虫病人（２０份）血清亦无交叉叵应出现；建立的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ易于操作．重复性和稳定性较好。用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ比较纯化抗原和ＴｓＬ１－ＥＳ的诊断效果，结果经卡方检验后显示：用纯化抗原和用ＴｓＬ１－ＥＳ检测的敏感性无显著差异，但纯化抗原的特异性显著优于ＴｓＬ１－ＥＳ。     

风湿热活动性指标的初步探讨

目的：为了指导风湿热的防治并改善其预后，寻找特异性和敏感性较高的指标以探讨风湿热活动性。方法：采用最具生物活性的Ａ组链球菌壁多糖部分作包被抗原，以ＥＬＩＳＡ法测定抗链球菌壁多糖抗体（ＡＳＰ）ＩｇＧ、ＩｇＭ。结果：风湿性心脏病活动期ＡＳＰＩｇＧ、ＩｇＭ的水平（３６５２±２１９５和２６１９±０７４８）和阳性率（５６１％和７５６％）显著高于正常人、风湿性关节炎和风湿性心脏病静止期（Ｐ＜００５～００００１），后二者ＡＳＰ－ＩｇＧ、ＩｇＭ的水平和阳性率明显高于正常人（Ｐ＜００５～００１）；随治疗ＡＳＰ－ＩｇＭ下降较快（Ｐ＜０００１），ＡＳＰ－ＩｇＭ与反映风湿热活动的传统指标（血沉、Ｃ－反应蛋白等）之间具有正相关性，ＡＳＰ在风湿热活动中的阳性率（８５４％）明显高于ＥＳＲ、ＣＲＰ和ＡＣＬ。结论：ＡＳＰ在判断风湿热活动性方面具有较高的敏感性     

单克隆抗体74D_(11)、SJA_(111)检测慢性日本血吸虫病循环抗原的研究

本研究用双抗夹心ＥＬＩＳＡ法检测慢性日本血吸虫病人血清循环抗原，观察血吸虫感染家兔血清循环抗原的动态变化。该方法采用兔抗ＡＷＡ－ＩｇＧ作包被抗体，抗日本血吸虫成虫和虫卵单抗ＳＪＡ１１１和７４Ｄ１１组合作Ⅱ抗，１７２例经粪孵毛蚴确诊的血吸虫病人中，１３６例循环抗原阳性（７９．１％），其中轻度（毛蚴数＜５只／２０克粪）、中度（６－２０）、重度（大于２０）感染者循环抗原阳性率分别为７３．４％、８７．７％、９２．８％，检测６５例健康献血员，２０例肺吸虫病人，１２例华支睾吸虫病人，１０倒包虫病人，交叉反应率依次为１．５％、５％、０％、０％，４２例经吡喹酮治疗后的血吸虫病人用该方法复查，治后３月和６月随访粪孵毛蚴阴转者中，循环抗原阴转率分别为７８．０％和９２．１％，考核疗效明显优于检测循环抗体。用单抗ＳＪＡ１１１检测感染家兔循环抗原动态变化，循环抗原于感染后３—４周可检出，７周达高峰，以后逐渐消退，而循环抗体（ＩｇＧ）推迟１周出现，８－９周达高峰。实验结果表明，血吸虫病血清ＣＡｇ阳性率与感染度有关，可在早期检出，检测方法具有较高敏感性和特异性，可用于早期诊断和疗效考核。     

单克隆抗体74D11,SJA111检测慢性日本血吸虫病循环抗原的研究

本研究用双抗夹心ＥＬＩＳＡ法检测慢性日本血吸虫病人血清循环抗原，观察血吸虫感染家兔血清循环抗原的动态变化。该方法采用兔抗ＡＷＡ－ＩｇＧ作包被抗体，抗日本血吸虫成虫和血卵单抗ＳＪＡ１１１和７４Ｄ１１组合作Ⅱ抗，１７２例经粪孵毛蚴确诊的血吸虫病人中，１３６例循环抗原阳性（７９．１％），其中轻度（毛蚴数〈５只／２０克粪）、中度（－２０）、重度（大于２０）感染者循环抗原阳性率分别为７３．４％、８７．７％、     

应用单克隆抗体检测血吸虫人血清特异性循环免疫复合物的初步研究

抗血吸虫ＭｃＡｂ应用于ＥＬＩＳＡ（ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ）检测血吸虫病人血清中抗原特异性ＣＩＣ，并与其提取的ＣＩＣ沉淀物为对照，二者结果完全相同。另与“抗原非特异性”ＣＩＣ检测法（ＰＥＧ法）作对照。慢性血吸虫病患者６７例ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ有４６例呈阳性反应（６８．７％），２１例呈阴性反应（３１．３％），对肺吸虫病患者５９例、健康人２３例全部呈阴性反应；而ＰＥＧ法，肺吸虫病患者全部呈假阳性反应，健康     

COMPARATIVE STUDY ON DETECTION OF ANTI-TOXOPLASM A GONDII ANTIBODIES BY USING DOT-ELISA AND DOT-IMMUNOGOLD SILVER STAINING

为比较斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫抗体的敏感性和特异性，本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原，同时用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测６５份弓形虫感染者血清、１７６份其他寄生虫感染者血清和７６份对照血清。结果显示，用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为９８．４６％及９２．３１％，平均抗体滴度分别为１∶３８４及１∶２１８（１∶２０－１∶２５６０）。用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测，有２３份血清抗体滴度高于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，有８份低于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。二种方法所测抗体滴度呈直线正相关关系（ｒ＝０．６０８，Ｐ＜０．０１）。二种方法检测其他寄生虫感染者和对照血清，假阳性率分别为５．９５％及１３．８９％。Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ操作流程和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ相似，但敏感性、特异性均优于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，前者不使用对人体有害的底物，有较好的推广前景。     

金标抗rSjc26GST多克隆抗体斑点免疫金渗滤法检测？…

目的 探索一种简捷的检查血吸虫循环抗原的方法。方法 应用抗日本血吸虫重组谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ）的多克隆抗体标记胶体金，建立检测日本血吸虫病患者血清循环抗原的双抗体夹心斑点免疫金渗滤法（Ｓ－ＤＩＧＦＡ），并以Ｓ－ＥＬＩＳＡ作对比。结果 用Ｓ－ＤＩＧＦＡ和Ｓ－ＥＬＩＳＡ平行检测９５例慢性血吸虫病患者，阳性检出率分别为８１．０５％和８２．１１％；正常人血清１８０份，两者的假阳性率分别     

抗rSjCTPI单克隆抗体检测血吸虫循环抗原的研究

为探讨抗重组血吸虫磷酸丙糖异构酶（ｒＳｊＣＴＰＩ）的单克隆抗体检测血吸虫循环酶抗原在血吸虫病免疫诊断和疗效考核中的价值。制备日本血吸虫ｒＳｊＣＴＰＩ表达蛋白,以此重组蛋白免疫小鼠,筛选出高效价的抗ｒＳｊＣＴＰＩ单抗,建立以纯化的抗血吸虫可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ）的多克隆抗体（ＩｇＧ）为捕捉系统,以酶标的抗ｒＳｊＣＴＰＩ单抗为检测系统的酶联免疫吸附试验（Ｐ－Ｍ－ＥＬＩＳＡ）法检测血吸虫病人等血清。并对该法的敏感性、特异性、交叉反应以及疗效考核与常规的ＳＥＡ－ＥＬＩＳＡ比较。结果获得了一株抗ｒＳｊＣＴＰＩ的单克隆抗体,其抗体同型为ＩｇＧ１。Ｐ－Ｍ－ＥＬＩＳＡ检浊急性、慢性血吸虫病人、健康人以及华枝睾吸虫病人、肺吸虫病人血清的阳性率分别为１００％、９１．７％、０、０和０。而ＳＥＡ－ＥＬＴＳＡ为１００％、９８．３％、６．     

弓形虫感染小鼠腹水中虫体分泌排泄抗原（E／SA）的免疫印迹分析

本文应用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）、免疫印迹以及ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ方法对弓形虫３种可溶性抗原进行了比较分析。ＷＡ为全虫熔解抗原，Ｅ／ＳＡ采自感染小鼠腹水。免疫印迹显示Ｅ／ＳＡ被兔ＩｇＧ抗体识别出至少１３条抗原区带，分子量范围为１０８～１２ＫＤａ。上清液抗原（ＳＡ）所含组分较少。Ｅ／ＳＡ与ＷＡ具有１００、５８～５１．５、４０、３８、３５、３０、２０及１２ＫＤａ等共同抗原组分。２７     

检测血清中BCG－A_（60）抗体对结核病诊断的临床意义

ＢＣＧ－Ａ＿（６０）是从牛型结核分支杆菌的胞浆中提纯出来的抗原，为了解用聚合酶联免疫（ＥＬＩＳＡ）法检测血清中抗ＢＣＧ－Ａ＿（６０）抗体对结核病诊断的临床意义，对７３４例健康人和非结核病人，以及５６０例结核病患者作了抗ＢＣＧ－Ａ＿（６０）抗体的检测。结果证实，ＥＬＩＳＡ－Ａ＿（６０）·ＩｇＧ诊断结核病的特异性为８９．３％，敏感性为８４．５％，获得较满意的效果，认为可用于临床对结核病的辅助诊断。还发现在活动性原发型肺结核中ＩｇＭ的阳性率明显高于ＩｇＧ。ＩｇＭ除在急性期病例阳性率高外，而且也见于慢性结核病例。这些证明ＩｇＭ的血清学分析在结核病早期诊断中也是一项重要的辅助手段，在诊断结核性脑膜炎，以及肺结核合并其它活动性肺外结核中有补充ＩｇＧ的价值。     

免疫诊断技术用于姜片虫病流行病学调查的研究──Ⅱ.快速SPA-ELISA用于实验诊断及疗效考核

用姜片虫成虫纯化抗原（ＰＡＡ，１μｇ／ｍｌ）预包被的ＰＳ微量反应板作快速ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ。以本法与常规ＥＬＩＳＡ平行检测姜片虫病人滤纸干滴血４０份，前者的阳性率为９５．０％，后者为９２．５％，二者无显著性差异（Ｐ＞０．１）。以本法检测流行区献血员及非流行区健康检查者血清各４０份，假阳性率分别为１０％（４／４０）和５％（２／４０）；与日本血吸虫病和长膜壳绦虫病患者血清的交叉反应率分别为１２．５％（５／４０）和２５．０％（１／４）；与肺吸虫病和肝吸虫病患者血清之间未出现交叉反应。检测８１例姜片虫病患者治疗前后不同时间血清抗体的变化，提示驱虫后血清特异性抗体下降较快：在治疗后３个月，阳性反应阴转率为８６．６７％（６５／７５）；半年后的阴转率高达９６．００％（７２／７５）。研究结果表明：快速ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ不仅敏感性高、特异性较强，而且具有考核疗效的价值。同常规ＥＬＩＳＡ相比，本法反应快速，整个试验过程仅需１小时左右。     

三种免疫学方法检测抗班氏丝虫IgG的比较

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）和斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）同步检测５０份班氏微丝蚴血症者血清中抗丝虫ＩｇＧ。ＥＬＩＳＡ，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测抗体阳性率分别为８６％（４３／５０），９０％（４５／５０）。ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ联合应用阳性率为９６％（４８／５０）。ＥＬＩＳＡ与Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测微丝蚴血症者抗体阳性率有