川芎嗪对人肝星状细胞TGF-β1信号传导的影响

目的：探讨中药单体川芎嗪（TMP）对肝星状细胞（HSC）转化生长因子-β1（TGF-β1）信号传导的影响。通过检测TGF-β1及其Ⅰ型和Ⅱ型受体、Smad 3及Smad 7 mRNA表达的变化,探讨川芎嗪抗肝纤维化作用的相关机制。方法：体外培养人肝星状细胞,RT-PCR法检测HSC中TGF-β1及其Ⅰ型和Ⅱ型受体、Smad 3及Smad 7 mRNA表达。结果：与阴性对照组相比,TMP A、B、C各组均可显著降低TGF-β1 mRNA（P〈0.01）;TMP B、C组TβRⅠmRNA相对表达量降低,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;TMP B、C浓度组的TβRⅡmRNA、Smad 3 mRNA表达量显著降低（P〈0.01）;TMP B、C组可显著升高Smad 7 mRNA表达量（P〈0.01）。结论：川芎嗪可降低HSC中TGF-β1及其Ⅰ、Ⅱ型受体及Smad 3 mRNA表达,同时促进Smad7 mRNA表达,表明川芎嗪可抑制肝星状细胞的活化、增殖,这可能与阻断TGF-β/Smad通路的信号传导有关。     

去甲斑蝥素对TGF—β1诱导的人近端肾小管细胞上皮细胞转分化及信号蛋白Smad2／3表达的影响

目的探讨去甲斑蝥素对体外人源性肾小管细胞株（HK－2）上皮细胞间质转分化（epithelial—mesenchymal transition,EMT）以及信号蛋白Smad2／3的影响。方法体外培养HK2细胞,分为对照组、TGF-β1组和去甲斑蝥素组（NCTD组）。对照组为无血清DMEM培养,TGG-β1组为TGF-β1 5ng·mL^-1诱导,NCTD组为不同浓度NCTD（0．5、1．0、2．5μg·mL^-1）与TGF-β1（5ng·mL^-1）共同作用,各组作用时间48h。使用半定量RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、上皮性钙黏附蛋白（Ecadherin）与Smad2、Smad3mRNA表达;采用Western blot检测α-SMA、E-cadherin、Smad2／3、p-Smad2／3蛋白质表达。结果与对照组相比,TGF-β1组α—SMAmRNA及其蛋白表达明显上调（Pd0．05）,E-cadherin mRNA及其蛋白表达显著下调（P〈0．05）;与TGF-β1组相比,NCTD干预组α—SMAmRNA及其蛋白表达明显下调（P〈0．05）,而E-cadherin mRNA及其蛋白表达显著上调（P〈0．05）,且均呈剂量依赖性。与对照组相比,TGF-β1组Smad2、Smad3rnRNA和Smad2／3、p-Smad2／3蛋白表达上调（P〈0．05）;与TGF-β1组比较,NCTD干预组Smad2、Smad3mRNA和Smad2／3、p-Smad2／3蛋白表达下调（P〈0．05）,具有剂量依赖关系。结论去甲斑蝥素具有抑制肾小管上皮细胞EMT的作用,该作用可能与其下调信号蛋白Smad2／3的表达有关。     

二烯丙基二硫下调TGF-β1/Rac1通路抑制人胃癌细胞β-catenin表达

目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)是否通过下调TGF-β1/Rac1通路抑制人胃癌MGC803细胞β-catenin表达。方法实验组分为6组,对照组(Control),DADS处理组,TGF-β1处理组,TGF-β1+SB431542组,TGF-β1+DADS组,TGF-β1+NSC23766组。RT-PCR、Western blot分别检测TGF-β1、Rac1、β-catenin、E-cadherin和vimentin mRNA和蛋白水平。结果DADS下调TGF-β1、Rac1、β-catenin和vimentin,上调E-cadherin表达。TGF-β1受体阻断剂SB431542和Rac1抑制剂NSC23766下调β-catenin和vi-mentin,上调E-cadherin表达。结论DADS通过下调TGF-β1/Rac1通路抑制人胃癌MGC803细胞β-catenin表达。     

五灵胶囊有效成分对TGF-β1诱导HSC—T6表达Ras／ERK、TGF-β／Smad信号通路蛋白的影响

目的：研究五灵胶囊有效成分对转化生长因子（TGF—B1）诱导HSC—T6细胞表达Ras／ERK、TGF-β／Smad信号通路蛋白的作用,探寻产生药效的主要化学成分。方法：HSC-T6细胞分组：对照组、TGF-β1（10ng·ml^-1）组、PD98059组、PT组、五味子醇甲、五味子乙素、柴胡皂苷、柴胡多糖、丹参新醌乙、X1、二氢丹参酮I（各100μg·ml^-1）、丹参酚酸B（10ng·ml^-1）组,培养24h（10ng·ml^-1TGF-β1于最后12h加入）;ELISA检测培养上清中COL—I,Western Blot检测COL—I、α-SMA、Ras、ERK、p—ERK、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad2／3蛋白表达。结果：与TGF—β1组相比,各有效成分组能明显降低COL-Ⅰ分泌,其中以X1、丹参新醌乙、二氢丹参酮Ⅰ、五味子醇甲、丹参酚酸B为显著（P〈0．05）,同时各药物组能显著下调COL—I、α—SMA、ERK、p-ERK、T8RI、TβRII蛋白表达（P〈0．05）;五味子醇甲、X1、二氢丹参酮I能显著下调表达Ras蛋白（P〈0．01）;柴胡皂苷对TβRI表达无作用;X1、醇甲、乙素、二氢丹参酮I、柴胡多糖能显著下调Smad2／3蛋白表达（P〈0．01）。结论：五灵胶囊有效成分对Ras／ERK和TGF—β1／Smad信号通路蛋白的作用不尽相同,强度也不尽一致。抗纤维化作用的最强的成分是X1、二氢丹参酮 I、柴胡多糖、五味子醇甲,丹参新醌乙的作用较弱。     

表没食子儿茶素没食子酸酯抑制人腹膜间皮细胞上皮-间质转化的作用及机制

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对人腹膜间皮细胞（HPMCs）上皮-间质转化（EMT）的作用及机制。方法 收集新开管的腹膜透析和腹膜透析1年以上患者的HPMCs，分别采用逆转录实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）法和免疫印迹（Western blot）法检测紧密连接蛋白1(ZO-1)、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、铁死亡抑制蛋白1(FSP1)mRNA和蛋白表达水平。采用HPMCs细胞系HMrSV5进行体外实验研究，分别加入20,40,60,80,100μg/mL EGCG，检测EGCG对HMrSV5的细胞毒性。通过200μg/mL和500μg/mL晚期糖基化终产物（AGEs）构建HPMCs EMT模型，将HMrSV5细胞分为对照组（AGEs造模前无处理）、实验组（AGEs造模前2 h加入EGCG共孵育）、si-NC+EGCG组（转染si-NC后，AGEs造模前2 h加入EGCG共孵育）、si-Notch3+EGCG组（转染si-Notch3后，AGEs造模前2 h加入EGCG共孵育），检测ZO-1,E-cadherin,FSP1,Notch3 mRNA和蛋白...     

白藜芦醇对胃癌细胞上皮间质转化作用及其机制的研究

目的 探讨白藜芦醇（RSVL）对胃癌细胞上皮间质转化（EMT）的影响并分析其作用机制。方法 胃癌细胞SGC-7901分为空白对照组、转化生长因子β1(TGF-β1)组和TGF-β1+RSVL组三组。MTT实验检测增殖情况;Transwell实验检测迁移、侵袭情况;q RT-PCR检测EMT相关转化因子的mRNA表达水平;Western blot检测E-cadherin、Vimentin、N-cadherin、Snali 1、YAP蛋白表达水平;免疫荧光观察YAP蛋白表达及细胞核内YAP蛋白表达。结果 与空白对照组相比,TGF-β1组24、48、72、96 h细胞增殖率增加（P<0.05）;与TGF-β1组相比,TGF-β1+RSVL组24、48、72、96 h细胞增殖率降低（P<0.05）,均呈时间依赖性。与空白对照组相比,TGF-β1组0、48 h的细胞迁移数、侵袭数增加（P<0.05）;与TGF-β1组相比,TGF-β1+RSVL组0、48 h的细胞迁移数、侵袭数降低（P<0.05）。与空白对照组相比,TGF-β1组E-cadherin mRNA、蛋白表达水...     

FGF21对HepG2细胞TGF-β信号通路的影响

目的研究FGF21对TGF-β/Smads信号通路中相关蛋白和mRNA表达的影响。方法采用Western blot法检测HepG2 cells的TGF-1,TGF-βRⅡ,Smad 2,3,4,7的蛋白表达水平和采用Q-PCR方法检测HepG2 cells的TGF-β1,TGF-βRⅡ,Smad 2,3,4,7的mRNA表达水平。结果在不同FGF21浓度下,TGF-β1,TGF-βRⅡ,Smad 2,3,4,7蛋白和mRNA表达水平不同(P<0.05)。结论 FGF21通过促进TGF-β信号通路中的信号分子或受体的表达,或者通过下调此信号通路的阻断分子而抑制肿瘤发生。     

endophilin A2抑制小鼠肾间质纤维化的形成

目的探讨endophilin A2(EndoA2)对肾间质纤维化的抑制作用,为评估EndoA2是否可作为肾脏纤维化防治的新靶点提供实验室依据。方法 EndoA2转基因小鼠通过单侧输尿管结扎手术,形成肾间质纤维化。造模结束后,分离小鼠肾脏并作石蜡切片。Masson染色检测小鼠肾间质纤维化程度,并检测纤维胶原相关分子的蛋白表达情况。另外,HK2细胞过表达EndoA2,观察细胞形态变化与上皮间质转分化(EMT)标志物的蛋白表达以及TβRI与TβRⅡ的mRNA和蛋白表达;检测EndoA2对TGF-β/smad通路的影响。结果造模后的EndoA2转基因小鼠肾间质纤维化程度明显减弱,而且肾皮质中多个纤维胶原相关分子的蛋白表达均明显降低;EndoA2可明显抑制TGF-β1诱导的HK2细胞EMT及TGF-β/Smad通路,而且TβRⅠ的mRNA和蛋白表达均明显降低;EndoA2可抑制TβRⅡ的蛋白表达但并不影响其mRNA水平。结论 EndoA2可通过抑制TβRⅠ和TβRⅡ的蛋白表达,从而抑制TGF-β/Smad通路,最终抑制肾间质纤维化的形成。     

黄芪注射液对腹膜透析相关腹膜间皮细胞 TGF-β1分泌与表达的影响

目的:探讨黄芪对腹膜透析相关性腹膜纤维化的作用。方法:人腹膜间皮细胞(HPMC)做体外培养,第三代细胞用于实验。分5组观察,对照组为RP-MI1640;PDS(peritoneal dialysis solution,腹膜透析液)组为加入PDS;黄芪12、3、组为加入含黄芪注射液的PDS,黄芪终浓度分别为102、04、0 mg.ml-1。分别在24 h采用ELISA法检测细胞上清液中转移生长因子-1β(TGF-1β)的含量,采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测TGF-1βmRNA表达。结果:腹膜间皮细胞在PDS干预下分泌TGF-1β明显增加(P<0.05)。腹膜间皮细胞经含不同浓度黄芪注射液的PDS干预后,TGF-1β分泌与PDS组比较有显著下降(P<0.05)。不同浓度黄芪注射液组之间比较无显著差异(P>0.05)。腹膜间皮细胞在PDS干预下TGF-1βmRNA表达明显升高,比对照组上升62.43%,腹膜间皮细胞经含不同浓度黄芪注射液的PDS干预后,TGF-1βmRNA表达显著低于PDS组(P<0.01)。结论:商业性腹膜透析液可促进腹膜间皮细胞分泌和表达TGF-1β,黄芪可以部分抵消这一作用所致的腹膜透析相关性腹膜纤维化。     

转化生长因子-β1及其受体TβRⅠ、Ⅱ在鼠牙髓炎组织中的表达及意义

目的 观察转化生长因子（TGF）-β1及其受体TβRⅠ、TβRⅡ在大鼠可复性牙髓炎模型中不同时间的动态表达及定位情况,探讨TGF-β1及其受体TβRⅠ、TβRⅡ在大鼠牙髓炎症发展过程中可能的作用机制及在牙髓损伤修复中的意义.方法 通过对大鼠上颌第1磨牙进行机械性不喷水均匀磨除釉质,后用酸蚀剂处理暴露的牙本质,建立实验性大鼠可复性牙髓炎模型.然后对牙髓炎组织连续切片采用免疫组化法分析,并进行单因素方差分析（ANOVA）、Tukey检验.结果 在炎症牙髓中TGF-β1及其受体TβRⅠ、TβRⅡ的表达明显增强,且随时间呈动态变化趋势;TGF-β1在5 d达到高峰,之后明显下降.TβRⅠ、TβRⅡ在3 d达到最高,之后略有下降.在0～3 d TGF-β1及TβRⅠ、TβRⅡ均呈上升趋势,但不成正比例关系.结论 TGF-β1通过与受体TβRⅠ、TβRⅡ结合,参与牙髓组织损伤修复并发挥重要作用,TGF-β1可上调TβRⅠ、TβRⅡ表达,但不成正比例关系.     

扶肾方对尿毒症腹膜透析大鼠腹膜超滤功能及VEGF-Notch信号通路的影响

目的探讨扶肾方对尿毒症腹膜透析大鼠的腹膜超滤功能及腹膜组织Notch1、delta-样配体4(Dll4)、Notch胞内域(NICD)、Hes1、血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)的影响。方法采用随机数字表法将50只雄性SD大鼠分为正常组、模型组、扶肾方低剂量组(模型+扶肾方324 g/L灌胃)、扶肾方高剂量组(模型+扶肾方648 g/L灌胃)和塞来昔布组(模型+塞来昔布1.8 g/L灌胃),每组10只。规律腹腔注射腹膜透析液4周,行腹膜平衡实验计算超滤量后处死大鼠,取腹膜组织,HE染色观察腹膜形态学变化,采用实时荧光定量PCR(q PCR)和蛋白印迹法检测Notch1、Dll4、NICD、Hes1、VEGF、VEGFR-2的mRNA和蛋白表达,蛋白印迹法检测p-VEGFR-2的蛋白水平。结果模型组、扶肾方低剂量组、扶肾方高剂量组及塞来昔布组大鼠腹膜超滤量明显低于正常组,扶肾方高剂量组与塞来昔布组超滤量高于模型组和扶肾方低剂量组,塞来昔布组超滤量低于扶肾方高剂量组(P<0.05)。腹膜HE染色显示,扶肾方低剂量组与高剂量组大鼠腹膜新生血管较模...     

苦参碱对乙醛活化的肝星状细胞CFSC-8B增殖和胶原合成的影响及机制研究

目的:研究苦参碱对乙醛活化的大鼠肝星状细胞CFSC-8B增殖和胶原合成的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:取体外培养的CFSC-8B细胞,分为空白对照组、模型组、阳性对照组(2.5μmol/L秋水仙碱)和苦参碱低、中、高浓度组(30、60、120μmol/L)。除空白对照组外,其余各组细胞均加入200μmol/L乙醛溶液诱导活化,并同时加入相应药液(空白对照组和模型组加入等体积空白培养液),共同作用24 h后,采用CCK-8法检测各组细胞的存活率。另取细胞分为空白对照组、模型组、阳性对照组(2.5μmol/L秋水仙碱)和苦参碱中、高浓度组(60、120μmol/L),同法活化和加药处理。分别采用酶消化法检测细胞培养液中羟脯氨酸(Hyp)含量;采用酶联免疫吸附法检测细胞培养液中Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)和Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅲ)含量;采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法检测细胞中α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β₁(TGF-β₁)、TGF-β₁Ⅰ型受体(TβR-Ⅰ)、TGF-β₁Ⅱ型受...     

氧化苦参碱下调ZNF580以抑制LTC-14细胞分泌细胞外基质的分子机制研究

目的 探讨氧化苦参碱（OM）对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导的大鼠胰腺星状细胞 LTC-14中细胞外 基质（ECM）分泌的影响及其分子机制。方法 取生长良好的 LTC-14细胞株,分为对照组（正常培养的 LTC-14细 胞）,TGF-β1组（10 μg/L TGF-β1刺激 12 h）,TGF-β1+OM组（1 g/L OM预处理 30 min,再加入 10 μg/L TGF-β1刺激 12 h）,TGF-β1 + SiZNF850组（LTC-14细胞中瞬时转染 ShRNA-ZNF580质粒,24 h后加入 10 μg/L TGF-β1刺激 12 h）。实时定量 PCR、Western blot 检测细胞内 Smad2、Smad3、ZNF580、α-肌动蛋白（α-SMA）、基质金属蛋白酶-2 （MMP-2）、基质金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP1）的mRNA和蛋白表达情况,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测ECM中 胶原蛋白-Ⅰ（Col-Ⅰ）、Col-Ⅲ、纤维连接蛋白（FN）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的分泌情 况。结果 TGF-β1诱导的 LTC-14细胞中 Smad2、Smad3、ZNF580和 α-SMA的 mRNA和蛋白表达水平均升高（P＜ 0.05）,MMP-2/TIMP1比值下降（P＜0.05）,且 Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、FN、TNF-α和 IL-1β的分泌水平升高（P＜0.05）;而用 OM预处理或沉默 ZNF580基因后,LTC-14细胞中 TGF-β1/Smads通路 Smad2、Smad3、α-SMA和 ZNF580的 mRNA和 蛋白表达水平均下调（P＜0.05）,MMP-2/TIMP1表达比值升高（P＜0.05）,细胞外基质 Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、FN、TNF-α和 IL-1β分泌水平均降低（P＜0.05）。结论 OM通过抑制胰腺星状细胞LTC-14中TGF-β1/Smads通路激活,下调ZNF580, 阻滞胰腺星状细胞的活化,使ECM分泌减少、降解增多,减轻胰腺纤维化。ZNF580可能是OM作用的分子靶点。     

裂果薯皂苷单体Ⅰ通过TGF-β1调控上皮间质转化对人肝癌细胞SMMC-7721侵袭和转移的影响

目的探究裂果薯皂苷单体Ⅰ通过转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对人肝癌细胞SMMC-7721侵袭和转移的影响。方法MTT法检测SMMC-7721细胞的增殖活性;用TGF-β1刺激细胞24 h,以TGF-β1/Smad信号通路抑制剂SIS3作阴性对照。细胞划痕实验和Tran-swell小室侵袭实验分别检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测Smad7、Smad2/3、p-Smad2/3、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达。结果SSPHⅠ能抑制SMMC-7721细胞的增殖,其24 h的IC50为1.72μmol·L^-1;与TGF-β1组相比,TGF-β1+SSPHⅠ组细胞迁移率和侵袭细胞数显著降低;Western blot实验结果显示,TGF-β1+SSPHⅠ组的Smad2/3,p-Smad2/3,N-cadherin和Vimentin蛋白的表达降低,Smad7和E-cadherin表达升高,结果与TGF-β1+SIS3组相同(P均<0.05)。结论SSPHⅠ能抑制SMMC-7721细胞侵袭和转移,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号通路,阻断EMT发生有关。     

SHR大鼠肾组织AngⅡ和TGF-β/Smads水平变化与肾纤维化的关系及依那普利干预效果

摘要：目的 探讨依那普利对自发性高血压大鼠（SHR）肾组织血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）和TGF-β/Smads通路相关因 子mRNA表达的影响。方法 20只雄性SHR随机分成模型组和依那普利组;另取雄性Wistar-Kyoto（WKY）大鼠10只 作为对照组。依那普利组给药剂量为1.05 mg/ （kg·d）,每日1次灌胃,持续10周,模型组和对照组灌胃等量生理盐水。 每2周监测1次血压,10周后处死动物并取材。使用脲酶法检测各组大鼠血尿素氮（BUN）水平,采用酶联免疫吸附测 定（ELISA）i法检测各组AngⅡ、血清胱抑素C（CysC）、尿微量白蛋白（mALB）水平,Masson染色观察大鼠肾组织病理变 化,实时荧光定量PCR检测肾组织中AngⅡ、转化生长因子β1（TGF-β1）、Smad2、Smad3、Ⅰ型胶原（CollagenⅠ）和Ⅳ型 胶原（CollagenⅣ）的mRNA相对表达量。结果 给药前（0周）,与对照组相比,模型组和依那普利组大鼠收缩压与舒张 压均显著升高（P＜0.05）;与模型组比较,依那普利组收缩压与舒张压差异无统计学意义（P＞0.05）;药物干预后,与模 型组比较,依那普利组的收缩压与舒张压均显著下降（P＜0.05）。与对照组比较,模型组AngⅡ、BUN、CysC和尿mALB 水平明显升高（P＜0.05）;肾组织出现大量蓝色胶原纤维沉积,同时AngⅡ、TGF-β1、Smad2、Smad3、CollagenⅠ和Collagen Ⅳ的mRNA相对表达量明显升高（P＜0.05）。与模型组相比,依那普利组肾组织胶原纤维沉积程度明显减轻,血清及肾 组织中上述指标均明显下降（P＜0.05）。结论 依那普利可对SHR起到稳定的降压作用,并通过降低AngⅡ的水平、抑 制TGF-β/Smads信号通路的表达,减轻肾纤维化,改善高血压导致的肾损伤。     

生松素对AngⅡ诱导的大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质合成的影响及其机制研究

目的 探讨生松素（Pb）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质（ECM）合成的影响及其机制。方法 以大鼠肾小球系膜细胞为研究对象,将实验分为以下5组：正常对照（NC）组、1×10-6mol/L AngⅡ（Ng）组、1×10-6 mol/L AngⅡ+1‰ DMSO（Ng-D）组、 1×10-6 mol/L AngⅡ+30 μmol/L Pb（Ng-Pb）组、1×10-6 mol/L AngⅡ+10 μmol/L缬沙坦（Ng-Val）组。分别在干预12、24、48 h搜集细胞和上清液,采用Western blot检测Ⅳ型胶原（ColⅣ）、纤连蛋白（FN）、转化生长因子-β（ 1 TGF-β1 ）、Smad3、磷酸化Smad3（p-Smad3）、核因子κB（NF-κB）、磷酸化NF-κB（pNF-κB）的蛋白水平,酶联免疫吸附法（ELISA）检测上清液中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）水平,实时荧光定量PCR（qPCR）检测细胞中ColⅣ、FN、TGF-β1、TNF-α、IL-6的mRNA水平。结果 （1）Pb对 AngⅡ诱导的系膜细胞合成ECM的影响：与NC组相比,Ng组细胞内ColⅣ和FN的蛋白质和mRNA 水平升高（P＜0.05）,而Ng-Pb组和Ng-Val组细胞内ColⅣ和FN的蛋白质和mRNA水平均较Ng组降低（P＜0.05）。（2）Pb对TGF-β1/Smad3通路的 影响：与NC组相比,Ng组细胞内TGF-β1的蛋白质和mRNA水平增加,p-Smad3/Smad3水平增加（ P＜0.05）,而Ng-Pb组和Ng-Val组细胞内TGF-β1的蛋白质和mRNA水平以及p-Smad3/Smad3水平均较Ng组降低（P＜0.05）。（3）Pb对NF-κb介导的促炎症因子产生的影响：与NC组相比,Ng组 p-NF-κb/NF-κb水平增加,IL-6和TNF-α的蛋白质和mRNA水平增加（P＜0.05）,而Ng-Pb组和 Ng-Val组p-NF-κb/NF-κb水平以及IL-6和TNF- α的蛋白质和mRNA水平均较Ng组降低（P＜0.05）。结论 Pb可能通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路和NF-κb介导的促炎症因子的产生, 从而抑制AngⅡ诱导的大鼠系膜细胞合成ECM。     

大黄素对 TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞上皮间质转分化及 Mfn2表达的影响

目的 探讨大黄素（EM）对转化生长因子 β1（TGF-β1）诱导的人肾小管上皮细胞（HK-2）上皮间质转分化及线粒体融合蛋白 2（Mfn2）的影响。方法 采用 CCK-8法检测不同浓度 EM对 HK-2细胞增殖的影响;实验分空白对照组、TGF-β1组、TGF-β1+EM（10、20、40 μmol/L）组,EM干预组予以不同浓度的大黄素处理 HK-2细胞 30 min后,TGF-β1组和 EM干预组同时给予浓度为 10 μg/L的 TGF-β1刺激 48 h收集细胞,Western blot法检测 α-平滑肌肌动蛋白（a-SMA）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、结缔组织生长因子（CTGF）及 Mfn2蛋白的表达。结果 CCK-8结果提示 0、10、20、40、80、160 μmol/L 浓度的 EM 处理组的 HK-2 细胞存活率（%）分别为 100.00±0.00、90.89±2.17、88.52±1.67、87.72±2.00、63.46±1.73、52.19±2.60 ,呈逐渐降低趋势（P＜0.01）;Western blot结果表明,与空白对照组比较,TGF-β1刺激后,HK-2细胞中 α-SMA、CTGF及 Mfn2蛋白水平升高,E-cadherin蛋白表达降低（P＜0.05）,与 TGF-β1组比较,给予不同浓度大黄素干预后,α-SMA、CTGF及 Mfn2蛋白水平降低,E-cadherin蛋白表达升高（P＜0.05）,且呈一定剂量依赖性。结论 大黄素缓解了 TGF-β1诱导的 HK-2细胞上皮间质转分化,可能通过减少 TGF-β1诱导的 Mfn2的表达来减缓肾脏纤维化。