细胞凋亡及凋亡相关基因在下肢静脉曲张中的表达及意义

目的：探讨细胞凋亡和凋亡相关基因在下肢静脉曲张中的表达及意义。方法：采用凋亡细胞原位检测、原位杂交、免疫组化研究８３例曲张静脉和１０例对照组内皮细胞和平滑肌细胞凋亡及相关基因表达。结果：①曲张静脉囊性扩张型Ｅｃｓ及ＳＭＣ凋亡指数显著增高（Ｐ＜０．０１）；②曲张静脉囊性扩张型Ｂｃｌ－２　ｍＲＮＡ阳性细胞表达率均显著低于非囊性扩张型（Ｐ＜０．０５）；③非囊性扩张型其Ｂｃｌ－２基因蛋白阳性细胞表达率均显著高于囊性扩张型和对照组（Ｐ均＜０．０５）；④囊性扩张型其Ｂａｘ　和Ｆａｓ基因蛋白阳性细胞表达率均显著高于非囊性扩张型和对照组（Ｐ均＜０．０５）；⑤Ｂｃｌ－２　ｍＲＮＡ表达阳性细胞数和表达率（０．２５±０．２３）与Ｂｃｌ－２基因蛋白（０．３０±０．２７）呈显著正相关，相关系数ｒ分别为０．７９５３８１（Ｐ＝０．００１９８１）和０．６８８２１６（Ｐ　＝０．０００８４４）。结论：①细胞过度凋亡导致静脉血管重塑，可能是静脉曲张发病机制之一；②曲张静脉囊性扩张型其ＥＣｓ和ＳＭＣ过度凋亡可能与Ｂｃｌ－２　ｍＲＮＡ、Ｂｃｌ－２蛋白低水平表达及Ｂａｘ、Ｆａｓ高水平表达相关。     

肝细胞癌组织凋亡基因Bcl—XL,Bcl—2的表达及意义

目的 探讨凋亡抑制基因Ｂｃｌ－ＸＬ、Ｂｃｌ－２在肝细胞癌组织中的表达及相互关系。方法 用免疫组化ＳＰ法检测５７例肝细胞癌组织中Ｂｃｌ－ＸＬ、Ｂｃｌ－２的表达。结果 ５７例肝细胞癌组织中的Ｂｃｌ－ＸＬ、Ｂｃｌ－２阳性表达分别为３６例（６３．２％）、２３例（４０．４％）。两者表达阳性率差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。Ｂｃｌ－２－ＸＬ、Ｂｃｌ－２各组表达水平及组织学分级表达差异无显著性。低分化组１７例中,Ｂｃｌ－ＸＬ、Ｂｃｌ－２阳性表达分别为１０例（５５．８％）、４例（２３．５％）。两组表达阳性率差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。５７例肝细胞癌中,Ｂｃｌ－ＸＬ、Ｂｃｌ－２同时阳性１７例,同时阴性１５例,单独阳性各为１９例、６例。结论 凋亡抑制基因Ｂｃｌ－ＸＬ、Ｂｃｌ－２在肝细胞癌组织中既可同时发挥抑制细胞凋亡作用,也可单独     

bcl—2基因蛋白在外阴营养不良及外阴癌的表达

利用细胞凋亡抑制基因ｂｃｌ－２单克隆抗体免疫组化ＬＳＡＢ法,对正常外阴皮肤、慢性外阴营养不良。不典型增生和外阴癌组织进行标记,发现ｂｃｌ－２蛋白在正常外阴皮肤基度有弱阳性表达;在增生型营养不良,不典型增生及外阴癌组织中表达率有不同程度增高,与外阴硬化苔藓型和混合型营养不良有显著差异;而增生型与不典型增生ｂｃｌ－２基因蛋白表达无明显差异;外阴癌的表达率最高;该基因蛋白表达与外阴癌细胞分化程度有关,与     

8—氯腺苷对Molt—4细胞的生长抑制和凋亡诱导作用细胞

目的：研究８－氯腺苷（８－Ｃｈｌｏｒｏａｄｅｎｏｓｉｎｅ,８－Ｃｌ－Ａｄｏ）对人Ｔ淋巴母细胞白血病细胞株Ｍｏｌｔ－４的生长和凋亡的作用,以及对相关基因和ＣＲＥＢ结合活性的影响。方法：Ｐ以不同浓度８－Ｃｌ－Ａｄｏ处理体外培养的Ｍｏｌｔ－４细胞,采用ＭＴＴ法测定药舶半数抑制浓度（ＩＣ５０）,用光学显微镜、流工细胞仪和琼脂糖电泳分析细胞凋亡,分别用斑点杂交法和免疫组化法观察ｃ－ｍｙｃ和ｂｃｌ－２的表达情     

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞凋亡的初步研究

为探讨细胞凋亡及其相关基因与系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者病情关系,作者采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法及 式细胞仪,观察了２９例ＳＬＥ患者外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）凋亡现象,并应用免疫组化ＡＢ ｂｃｌ－２蛋白和Ｆａｓ蛋白的表达;结果显示：（１）ＳＬＥ患者ＰＢＬ凋亡率明显高于正常组及类风湿关节炎组（Ｐ〈０．００１）,经４８小时培养后ＰＢＬ凋亡率更高,可达３３．４４％;（２）ＰＢＬ凋亡率与疾     

8—Br—cAMP对肺癌NSCLC—3细胞凋亡相关基因表达的影响

目的：观察８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对人肺癌ＮＳＣＬＣ－３细胞凋亡相关基因表达的影响。方法：将体外培育的ＮＳＣＬＣ－３细胞分为实验组和对照组,采用原位杂交方法观察８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对ＮＳＣＬＧ－３细胞ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２基因表达的影响。结果：８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ处理后的实验且较未加８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ的对照组－ｃ－ｍｙｃ,ｂｃｌ－２基因表达降低（Ｐ〈０．０１）。结论：８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ可下调与ＮＳＣＬＣ－３     

利用流式细胞术研究榄香烯对肝癌腹水瘤细胞系Hca—F25／CL—1 …

采用小鼠肝癌腹水瘤细胞系Ｈｃａ－Ｆ２５／ＣＬ－１６Ａ３,利用流式细胞术研究了榄香烯对肿瘤细胞的作用,对Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｃｌ－１６Ａ３细胞周期的影响、ＤＮＡ含量的分析以诱导细胞凋亡。结果表明：榄香烯可以明显抑制Ｈｃａ－Ｆ２５／ＣＬ－１６Ａ３细胞的增殖,有效地杀伤肿瘤细胞;榄香烯对ＣＯ／ＧＩ期细胞无明显作用,主要作用于Ｓ期,阻止由Ｓ期进入Ｇ２／Ｍ期,从而抑制肿瘤生长;可以ＧＯ／ＧＩ期前出现一个凋亡特异     

胃粘膜上皮细胞系GES—1细胞凋亡密度依赖性的研究

目的：探讨细胞密度对ＧＥＳ－１细胞凋亡的影响及其机制。方法：细胞凋亡的存在以Ｇｉｅｍｓａ染色证实，ｂｃｌ－基因的表达采用细胞原位杂交技术。结果：正常培养情况下ＧＥＳ－１细胞凋亡呈细胞密度依赖性，８ｍｇ／Ｌ的五肽胃泌素能增强ｂｃｌ－２基因的表达但不能抑制密度依赖的细胞凋亡。结论：ｂｃｌ－２基因表达可能与ＧＥＳ－１细胞凋亡的密度依赖性无关。     

急性白血病Bcl-2反义寡核苷酸基因治疗的实验研究

目的选用２０ｎｔＢｃｌ－２反义硫代磷酸寡核苷酸（Ａｓ－Ｐｓ－ＯＤＮ，ＡＳＰＯ），并以其正义寡核苷酸（ＳＰＯ）为对照做如下问题探讨：（１）普通剂量（５～２０μｍｏｌ）ＡＳＰＯ对ＨＬ６０细胞、正常及缺铁性贫血患者骨髓细胞及急性白血病病人骨髓细胞或外周白血病细胞（幼稚细胞≥８５％）的作用；（２）大剂量（１６０μｍｏｌ）正义或反义寡核苷酸对ＨＬ６０细胞作用的特点，并通过ＡＳＰＯ引起ＨＬ６０细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达变化和ＳＰＯ对ＨＬ６０细胞毒性的变化，寻找可能的最佳效应剂量和最小毒性剂量；（３）ＡＳＰＯ联合化疗药物对ＨＬ６０细胞和原代急性白血病细胞的作用。方法台盼蓝拒染试验和克隆培养测定细胞的生长能力；免疫细胞化学染色和流式细胞仪检测Ｐ２６Ｂｃｌ－２蛋白表达，ＲＴ－ＰＣＲ法检测Ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ（Ｂｃｌ－２／β－ａｃｔｉｎ）相对水平；光、电镜下观察凋亡细胞形态，吖啶橙染色及流式细胞仪检测细胞凋亡率，ＤＮＡ提取及电泳观察凋亡细胞ＤＮＡ降解片段的形成；ＭＴＴ法检测ＰＳ－ＯＤＮ及化疗药物的细胞毒作用。结果（１）普通剂量的ＡＳＰＯ即能降低ＨＬ６０细胞及白血病细胞Ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达，并抑制ＨＬ６０细胞及１８／２０例白血病细     

核酶抑制神经母细胞瘤Bcl-2的表达及增强顺铂敏感性的实验研究

目的：研究抗Ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的锤头型核酶（ＲｉｂｏｚｙｍｅＲＺ）基因抑制神经母细胞瘤（ＳＫ－Ｎ－ＳＨ）生长以及增强化疗－药物顺铂的敏感性。方法：（１）电穿孔法，分别将整合有抗Ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ核酶的缺陷性逆转现功 ｐＤＯＲ－ＲＺ和空载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ导入ＳＫ－Ｎ－ＳＨ细胞。（２）用免疫细胞染色法定性观察肿瘤细胞内Ｂｃｌ－２蛋白的表达。用间接免疫荧光染色法和流式细胞仪（ＦＣＭ）测定Ｂｃｌ－２蛋白     

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞凋亡的初步研究

为探讨细胞凋亡及其相关基因与系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者病情的关系,作者采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法及流式细胞仪,观察了２９例ＳＬＥ患者外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）凋亡现象,并应用免疫组化ＡＢＣ法检测了ｂｃｌ－２蛋白和Ｆａｓ蛋白的表达。结果显示：①ＳＬＥ患者ＰＢＬ凋亡率明显高于正常组及类风湿关节炎组（Ｐ＜０．００１）,经４８小时培养后ＰＢＬ凋亡率更高,可达３３．４４％;②ＰＢＬ凋亡率与疾病活动程度呈正相关（ｒ＝０．８６,Ｐ＜０．００１）;③并发狼疮肾炎（ＬＮ）者,其ＰＢＬ凋亡率较无ＬＮ者高;④培养前后,ＳＬＥ患者外周血淋巴细胞ｂｃｌ－２蛋白及Ｆａｓ蛋白表达均显著高于正常组（分别为Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．００１）。因此,ＰＢＬ凋亡率的变化可能作为评估ＳＬＥ患者病情的一种指标。     

Bcl-2蛋白在结直肠腺瘤及结直肠癌组织中的表达

了解Ｂｃｌ－ ２ 蛋白在结直肠腺瘤及结直肠癌组织中的表达意义。用流式细胞技术对１３ 例结直肠腺瘤及３６ 例结直肠癌组织中Ｂｃｌ－２ 蛋白表达进行分析。结果：３６ 例结直肠腺瘤组织中Ｂｃｌ－２ 蛋白表达水平显著高于癌旁粘膜组组织中Ｂｃｌ－ ２ 蛋白表达（ Ｐ＜ ０－０５）,也显著高于结直肠腺癌组织中Ｂｃｌ－ ２ 蛋白表达（ Ｐ＜ ０－０５） 。癌组织中Ｂｃｌ－ ２蛋白表达与癌细胞分化程度无关,与Ｄｕｋｅｓ Ａ、Ｂ、Ｃ 期分期无关（Ｐ＞ ０－０５） 。结果提示：Ｂｃｌ－ ２ 基因产物高表达介导的细胞凋亡障碍与结直肠癌的发生有关。     

三氧化二砷对NCI-H69肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨三氧化二砷（ＡＳ２Ｏ３）对肺癌细胞株ＮＣＩ－Ｈ６９的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法：ＭＴＴ法观察不同浓度ＡＳ２Ｏ３作用不同时间后的ＮＣＩ－Ｈ６９生长的产殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）单抗ＬＳＡＢ免疫组化染色－流式细胞仪检测ＰＣＮＡ阳性细胞百分比;ＦＴＩＣ－ＴＵＮＥＬ法－流式细胞仪检测细胞凋亡指数。结果：随ＡＳ２Ｏ３浓度增加和作用时间延长,ＮＣＩ－Ｈ６９肺癌细胞的细胞活度渐下降。随ＡＳ２Ｏ３浓度增     

逆转录病毒介导癌基因疗法体外安全实验

从逆转录病毒ｐＬＸＳＮ与人ＩＬ－２ｃＤＮＡ基因进行重组，包括ＰＡ３１７细胞，建立逆转录病毒包装体系细胞ＰＡ３１７／ｐＬＩＬ－２ＳＮ。用病毒上清液转导人淋巴细胞（ＴＩＬ，ＰＢＬ）和３株人腺癌细胞株（ＳＰＣ－Ａ１，ＭＫＮ－ＨｅｐＧ２）对转ＩＬ－２基因的淋巴细胞（ＴＩＬ／ＩＬ－２，ＰＢＬ／ＩＬ－２）和转ＩＬ－２基因的人癌细胞（ＳＰＣ－Ａ２／ＩＬ－２，ＭＫＮ－４５／ＩＬ－２，ＨｅｐＧ２／ＩＬ２）进行体外安     

凋亡相关基因bcl—2,bax,Fas及FasL在乙型肝炎病毒相关性？…

目的 探讨原发性肝癌中乙型肝炎病毒感染与凋亡基因ｂｃｌ－２、ｂａｘ、Ｆａｓ及ＦａｓＬ表达的关系。方法 采用免疫组化技术分析４０例原发肝细胞癌组织中乙肝病毒表现抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性组和ＨＢｓＡｇ阴性组ｂｃｌ－２、ｂａｘ、Ｆａｓ及ＦａｓＬ的表达。结果 癌组织中ＨＢｓＡｇ阳性率为３０％（１２／４０）,癌旁组织中ＨＢｓＡｇ阳性率为６２．５％（２５／４０）,１２例ＨＢｓＡｇ阳性的癌组织中ｂｃｌ－２的ｂａｘ     

肝炎等三种肝病中癌基因c－myc、c－erbB－2和胰岛素样生成因子Ⅱ及表皮生长因子受体的表达

对慢性肝炎、亚急性重症肝炎、肝硬变及肝细胞肝癌共３７９例标本，进行了癌基因ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｅｒｂＢ－２和胰岛素样生成因子Ⅱ（ＩＧＦⅡ）及表皮生成因子（ＥＧＴ）受体的测定。结果，ＥＧＦ受体主要定位于良、恶性肝组织中的血窦内皮细胞，可能不参与肝癌发生；ｃ－ｍｙｃ表达选择性不强，也见于２１％结构正常肝中，可能与成熟肝细胞的增殖有关；ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性率最高，广泛分布于肝小多角细胞（ＳＰＬＣ）、小细胞性不典型增生（ＳＣＤ）及小管状化生（ＤＭ）之肝细胞及癌细胞，提示ｃ－ｅｒｂＢ－２不仅参与肝癌发生，可能还与肝细胞ＤＭ有关；ＩＧＦⅡ表达仅见于慢性肝脏病变，在细胞类型上有严格的选择性，集中于癌细胞、ＳＰＬＣ和ＳＣＤ肝细胞，提示ＩＧＦⅡ基因的活化及高表达与ＳＰＬＣ明显增生及ＳＣＤ有关，是肝癌发生过程中的关键环节。还观察到ＳＰＬＣ和ＳＣＤ肝细胞中ＩＧＦⅡ和ｃ－ｅｒｂＢ－２的表达与乙型肝炎病毒Ｘ抗原（ＨＢｘＡｇ）密切相关，提示ＨＢＶＸ基因表达可能与这两种肝癌相关基因活化有关。     

人膀胱癌BIU-87/ADM细胞中Bcl-2基因的原位表达

目的：探讨人膀胱癌多药耐药机制。方法：应用原位杂交和免疫细胞化学技术,分别对人膀胱癌耐药细胞株（ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ）及敏感细胞株（ＢＩＵ－８７）中Ｂｃｌ－２基因及其产物的表达进行研究。结果：ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞Ｂｃｌ－２基因表达呈强阳性（＋＋）,ＢＩＵ－８７细胞呈弱阳性（＋）。结论：凋亡抑制基因Ｂｃｌ－２在人膀胱癌多药耐药细胞中的高表达,与人膀胱多药耐药的产生有关。     

TGFβ1对胃腺癌细胞SGC—79001,Bcl—2表达的影响

研究转化生长因子β１对胃癌细胞Ｂｃｌ－２的表达的影响。方法：ＴＧＦβ１作用于人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１，４８Ｈ后收集细胞爬片。用抗Ｂｃｌ－２ｍＡｂ和免疫组织化学ＳＡＢＣ法及图像分析技术分析Ｂｃｌ－２。结果；ＴＧＦβ１作用的胃腺癌细胞Ｂｃｌ－２表达量１     

脑胶质瘤中P53、Bcl—2、Bax蛋白的表达

目的：探讨Ｐ５３、Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ蛋白在脑胶质瘤表达水平以及和细胞凋亡的相关性。方法：采用免疫组化Ｓ－Ｐ染色法检测４７例脑胶质瘤组织中Ｐ５３、Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ蛋白的表达民情况。结果：在４７例脑胶质瘤中,Ｐ５３、Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ蛋白的阳性率分别为４８．９％（２３／４７）,５７．４％（２７／４７）,１７．０２％（８／４７）（ｐ〈０．０５）;发现ＧＢＭ的Ｐ５３蛋白阳性水平要高于ＡＳ;Ｂｃｌ－２蛋白     

天然抗角蛋白自身抗体对角质形成细胞及鳞癌细胞的增殖及Bcl-2,c-Myc表达的影响

目的 探索天然抗角蛋白自身抗体（ＡＫａｕｔｏＡｂ）对培养角质形成细胞及鳞癌细胞凋亡相关蛋白的表达影响,方法 经体外培养人角质形成细胞及鳞癌细胞,以不同滴度的天然抗角蛋白自身抗体作用,并用ＭＴＴ法及免疫组化检测。结果 ＡａｕｔｏＡｂ对二者的增殖有着明显的抑制作用,且呈一定的剂量－效应关系,可促进二者凋亡相关蛋白ｃ－Ｍｙｃ的表达;对Ｂｃｌ－２在ＳＣＣ中的表达表现为抑制作用,而对其在ＫＣ中的表达作用却不