细胞电穿孔联合艾迪注射液对小鼠宫颈癌U14作用的实验研究

目的观察细胞电穿孔联合艾迪注射液对小鼠宫颈癌U14生长的抑制作用。方法取雌性昆明小鼠58只,建立U14宫颈癌皮下移植瘤模型,然后随机分为对照组（C组）、艾迪注射液治疗组（Ai组）、电穿孔处理组（E组）、电穿孔＋艾迪注射液低剂量治疗组（EAL组）、电穿孔＋艾迪注射液高剂量治疗组（EAH组）。比较治疗后各组荷瘤鼠体质量和肿瘤的质量,计算各组抑瘤率。光学显微镜下观察肿瘤组织的病理变化,用TUENL细胞凋亡试剂盒检测各组肿瘤细胞的凋亡情况。结果 Ai组、E组、EAL组和EAH组平均瘤质量明显低于对照组,能显著抑制肿瘤生长。EAH组的平均瘤质量显著低于E组和Ai组。Ai组、E组、EAL组和EAH组的抑瘤率分别为26.8%,25.6%,51.9%和59.4%。结论电穿孔联合艾迪注射液对U14移植肿瘤起到很大的杀伤和抑制生长的作用。     

细胞电穿孔联合艾迪注射液对小鼠宫颈癌U14作用的实验研究

目的观察细胞电穿孔联合艾迪注射液对小鼠宫颈癌U14生长的抑制作用。方法取雌性昆明小鼠58只,建立U14宫颈癌皮下移植瘤模型,然后随机分为对照组(C组)、艾迪注射液治疗组(Ai组)、电穿孔处理组(E组)、电穿孔+艾迪注射液低剂量治疗组(EAL组)、电穿孔+艾迪注射液高剂量治疗组(EAH组)。比较治疗后各组荷瘤鼠体质量和肿瘤的质量,计算各组抑瘤率。光学显微镜下观察肿瘤组织的病理变化,用TUENL细胞凋亡试剂盒检测各组肿瘤细胞的凋亡情况。结果 Ai组、E组、EAL组和EAH组平均瘤质量明显低于对照组,能显著抑制肿瘤生长。EAH组的平均瘤质量显著低于E组和Ai组。Ai组、E组、EAL组和EAH组的抑瘤率分别为26.8%,25.6%,51.9%和59.4%。结论电穿孔联合艾迪注射液对U14移植肿瘤起到很大的杀伤和抑制生长的作用。     

夏枯草注射液诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的探讨夏枯草注射液体外抗白血病作用,为临床应用夏枯草注射液治疗白血病提供实验依据。方法采用M TT法测定夏枯草注射液对K 562细胞的增殖抑制率,计算出IC50值;绘制夏枯草注射液(50、100 m g/mL)作用于K 562细胞的生长曲线。用倒置显微镜、姬姆萨染色法、M TT染色法光镜下观察细胞形态,台盼蓝拒染法、流式细胞仪P I染色观察夏枯草注射液对K 562细胞的促凋亡活性,用免疫细胞化学法检测夏枯草注射液对凋亡相关基因bcl-2和bax蛋白表达的影响,并用图文分析系统进行定量分析。结果夏枯草注射液对K 562细胞增殖具有明显的抑制作用,且在一定的剂量范围内抑制作用具有明显的剂量依赖性(r=0.985 0),IC50为0.113 m g/mL。夏枯草注射液(50 m g/mL)作用于K 562细胞后,倒置显微镜、姬姆萨染色、M TT染色光镜下观察,均可见典型的凋亡细胞的形态学特征。流式细胞仪检测结果显示,处理组细胞凋亡率[(37.15±1.46)%]明显高于对照组细胞凋亡率[(5.56±0.68)%](P<0.01)。夏枯草注射液(50 m g/mL)作用于K 562细胞48 h,bcl-2蛋白表达增强,而bax表达减弱,与对照组相比差异显著(P<0.01)。结论夏枯草注射液可明显抑制K 562细胞增殖,可望成为新的抗白血病药物,诱导K 562细胞凋亡可能是其发挥抗肿瘤作用的机制之一。     

鸦胆子油乳剂逆转K562／ADM细胞多药耐药的作用和机制

目的：研究鸦胆子油乳剂能否逆转K562／ADM细胞多药耐药性,初步探讨鸦胆子油乳剂逆转多药耐药的机制。方法：四唑盐比色法（MTT法）检测药物对K562／ADM细胞的半数抑制浓度（IC50）;流式细胞仪分析细胞的凋亡和MDRmRNA的表达。结果：加入无毒剂量的鸦胆子油乳剂后ADM对K562／ADM细胞的IC50由81．5μg／ml降至14．0μg／ml,增敏倍数为5．83;加鸦胆子油乳剂后,K562／ADM细胞MDRmRNA表达下降。结论：鸦胆子油乳剂在一定程度上逆转了K562／ADM细胞的多药耐药性,逆转耐药的机制可能是它下调了MDRmRNA的表达。     

补骨脂素逆转白血病耐药细胞株K562／ADM多药耐药性研究

目的：研究具有钙拮抗作用的中药补骨脂素对多耐药性的逆转作用。方法：选用异搏定作阳性对照，观察其对多药耐药细胞系K562／ADM多药耐药性的逆转作用。结果：补骨脂素在非细胞毒性剂量下能使K562／ADM对阿霉素的浓度升高。结论：补骨脂素具有逆转白血病细胞株K562／ADM多药耐药性的作用？     

雄黄微生物提取液诱导K562/ADM细胞凋亡的作用机制研究

目的：观察雄黄微生物提取液对K562/ADM细胞的诱导凋亡作用,探讨其作用机制、并初步探寻雄黄溶解后表现药理活性的化学物种。方法：应用噻唑蓝（MTT）比色法、Annexin V-PI双染法染色、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术（FCM）观察K562/ADM细胞凋亡,FCM测定K562/ADM细胞Fas、Bcl-2、Caspase3的活性变化,并以H3AsO3（As2O3在该溶液中的主要存在形式）作为阳性对照。结果：雄黄微生物提取液可抑制K562/ADM细胞增殖;K562/ADM呈典型凋亡形态改变;DNA电泳可见梯状条带出现;FCM分析显示：G1期细胞比例增高,G2-M和S期阻滞;Fas蛋白表达明显上调、Bcl-2蛋白表达显著下调、Caspase-3活性明显增强。结论：雄黄微生物提取液可通过Fas/Bcl-2途径,激活Caspase-3而诱导K562/ADM细胞凋亡。砷酸（V）、甲基砷酸盐（V）可能是雄黄溶解后表现药理活性的主要化学物种。     

鬼臼毒素对人K562白血病细胞的作用研究

采用MTT法和流氏细胞仪技术,研究了天然药物鬼臼毒素（podophyllotoxin）对人慢性髓细胞性白血病K562细胞凋亡及细胞周期的影响。结果表明,鬼臼毒素对K562细胞的IC50是79.19unol。L^-1;C以IC50药物浓药作用人K562细胞24h,细胞凋亡率达到31.96%,G0-G1期峰前有亚二倍林峰出现,此结果说明鬼臼毒素能快速有效地诱导K562细胞发生凋亡。     

艾迪注射液对肺癌SPC-A-1细胞的增殖抑制作用及其机制

目的研究艾迪注射液对肺癌SPC-A-1细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法采用巯基罗丹明B(SRB)法检测艾迪注射液对肺癌SPC-A-1细胞的抑制率,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Hoechst 33258荧光染色法观察细胞核形态的变化,免疫印迹法(Western blot)检测ERK1/2磷酸化,caspase-9及caspase-3的表达。结果艾迪注射液作用24h和48 h均对肺癌SPC-A-1细胞增殖具有显著的抑制作用(P0.01,P0.001);与对照组相比,艾迪注射液作用48h后G2/M期细胞比例增加(P0.001),G0/G1期和S期细胞比例下降(P0.01,P0.05),细胞凋亡率升高(P0.01);同时细胞中ERK1/2磷酸化水平降低(P0.01),caspase-9及caspase-3表达增强(P0.05,P0.05)。结论艾迪注射液能够通过阻滞细胞G2/M期和诱导凋亡作用抑制肺癌SPC-A-1细胞增殖,其机制与降低ERK1/2磷酸化水平和增加caspases-9及caspase-3活性有关。     

硒化壳聚糖逆转K562/ADM细胞多药耐药的实验研究

目的:研究硒化壳聚糖对人慢性粒细胞白血病耐阿霉素细胞株( K562/ADM) mdr-1基因/P-糖蛋白(P-gp)表达及功能的影响,为逆转肿瘤多药耐药提供新的途径.方法:硒化壳聚糖100,200 mg·L-1作用K562/ADM细胞24 h,应用RTPCR法和免疫印迹法检测mdr-1/P-gp表达的改变;应用高效液相色谱法检测细胞内阿霉素积聚浓度;应用MTT法检测阿霉素对K562/ADM细胞增殖的影响.结果:硒化壳聚糖可增强K562/ADM细胞对阿霉素的敏感性,增加细胞内阿霉素集聚浓度,200 mg·L-1硒化壳聚糖作用效果显著强于100 mg·L-1硒化壳聚糖(P＜0.01);硒化壳聚糖能明显抑制K562/ADM细胞mdr-1/P-gp的表达(P＜0.01),100 mg·L-1硒化壳聚糖可使mdr-1/P-gp表达分别下降(40.87 -3.19)％和(35.08±0.09)％,200 mg·L-1硒化壳聚糖可使mdr-1/P-gp表达分别下降(78.24±3.42)％和(79.61±0.23)％.结论:硒化壳聚糖可明显抑制K562/ADM细胞mdr-1/P-gp表达,增加细胞内阿霉素含量,恢复细胞对化疗药物敏感性,逆转mdr-1编码蛋白P-gp介导的多药耐药.     

四物合剂对人红白血病细胞株K562/ADM多药耐药性的逆转作用研究

目的 :观察四物合剂对人红白血病细胞株K5 62 /ADM多药耐药性的逆转作用。方法 :以维拉帕米为阳性对照 ,MTT法观察耐药细胞株K5 62 /ADM的耐药倍数及四物合剂的逆转倍数 ;采用反相高效液相色谱法 (RP-HPLC)检测细胞内的ADM浓度 ;免疫荧光法测定细胞膜P-糖蛋白 (Pgp)表达。结果 :四物合剂和ADM合用时 ,对K562/ADM耐药性的逆转倍数及细胞内的ADM含量比ADM单独使用时明显增高 (P<0.01);但对K562/ADM细胞膜Pgp表达的影响差异不显著 (P>0.05)。结论 :四物合剂在无毒性剂量时能逆转细胞株K562/ADM对ADM的耐药性 ,但对细胞膜Pgp表达影响不大 ,其逆转作用可能与降低Pgp药物外排作用、增加细胞内药物浓度有关。     

逆转肿瘤细胞多药耐药性的四物合剂有效组分

目的:研究四物合剂逆转人红白血病细胞株K562/ADM多药耐药作用的药效活性组分。方法:用大孔吸附树脂分离四物合剂,并用体外细胞模型作药效评价,寻找发现活性部位,再用HPLCMS方法研究活性部位的化学组成,进而确定其主要活性组分。结果:熟地黄粗多糖对K562/ADM的耐药性有明显的逆转作用,其逆转倍数与对照组(无逆转剂)相比有显著差异(P<0.01),并且与主要活性部位的逆转作用无明显差异(P>0.05)。结论:熟地黄粗多糖能逆转K562/ADM细胞的多药耐药性,是四物合剂逆转K562/ADM多药耐药性的主要活性组分之一。     

黑木耳多糖对人红白血病K562细胞周期和凋亡的影响

目的:观察黑木耳多糖(Auricularia auricula polysaccharide,AAP)体外对人红白血病K562细胞的抗肿瘤作用及其机制。方法:将K562细胞与AAP以及AAP作用于体外培养人外周血单个核细胞(PBMCs)的上清液培养,用MTT法检测K562细胞增殖和流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况。结果:AAP对K562细胞没有显示直接的细胞毒作用,但AAP作用的PBMC上清液能显著抑制K562细胞的增殖,抑制率最大可达49.68%;AAP作用的PBMCs上清液能使G0/G1期细胞显著增加(P0.05,P0.01);200μg/mL到800μg/mL浓度AAP刺激的PBMCs上清液能显著诱导K562细胞凋亡(P0.05,P0.01),其凋亡率可达24.70%。结论:AAP通过激活免疫细胞抑制肿瘤细胞生长,诱导其凋亡并使细胞阻滞于G0/G1期。     

川楝素提取物诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的探讨川楝素提取物对人白血病K562细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用及其机制。方法采用MTT法检测川楝素提取物对K562细胞增殖的影响;Wright′s染色观察细胞的形态学改变;流式细胞技术检测细胞周期与凋亡率的变化;Annexin V/PI双标记法检测细胞的早期凋亡变化;DNA琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段化;比色法检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9相对活性的改变;RT-PCR检测凋亡相关基因p21、bcr/abl、H-rasmRNA表达水平的改变。结果川楝素提取物显著抑制K562细胞的增殖,并呈剂量-时间依赖性,作用72h的IC50值为20nmol/L;处理组细胞可见典型的凋亡形态学改变;细胞周期和Annexin V/PI双标记检测表明川楝素提取物可诱导K562细胞凋亡,并呈剂量-时间依赖性;处理组细胞DNA琼脂糖凝胶电泳出现明显的DNAladder;处理组细胞Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性均显著增加;p21、H-ras mRNA表达上调,bcr/abl mRNA表达下调。结论川楝素提取物对K562细胞具有增殖抑制和诱导凋亡的作用,其机制与Caspase信号途径的活化有关。     

土槿乙酸体外诱导K562细胞凋亡的研究

目的研究土槿乙酸体外对人白血病细胞(K562)凋亡的诱导作用,探讨其抗癌作用机制.方法以不同浓度土槿乙酸分别处理K562细胞,用琼脂糖凝胶电泳、荧光显微镜和倒置光显微镜、MTT法观察K562细胞DNA带型、形态和抑制率的变化.结果1×10-5mol/L土槿乙酸作用30 h能有效诱导K562细胞凋亡,凋亡细胞有典型的形态学改变及DNA梯形带形成.MTT法测定不同浓度土槿乙酸明显抑制K562细胞系的生长,其IC50值为2×10-6mol/L.结论土槿乙酸能成功诱导K562细胞凋亡,此种诱导作用呈药物作用浓度及时间依赖性.     

硒化壳聚糖对K562/ADM细胞生物学行为的影响

目的 观察硒化壳聚糖对体外培养慢性粒细胞白血病多药耐药细胞株K562/ADM细胞生物学行为的影响.方法 硒化壳聚糖作用K562/ADM细胞12～24 h,应用流式细胞法检测细胞凋亡,软件拟合计算细胞周期;应用免疫印迹法检测P-gp的表达;应用RT-PCR法检测mdr-1 mRNA水平.结果 硒化壳聚糖能够明显增强ADM对K562/ADM细胞的诱导凋亡作用,阻滞细胞周期于G1期(P＜0.05,P＜0.01),下调P-gp表达和mdr-1mRNA水平(P ＜0.05,P＜0.01),硒化壳聚糖浓度越高,作用效果越明显.结论 硒化壳聚糖能够通过下调mdr-1基因和P-gp蛋白表达,阻滞细胞于G1期诱导凋亡来对体外培养的K562/ADM细胞耐药生物学行为产生影响.     

黄连解毒汤中黄酮成分逆转 K562/ADM多药耐药的实验观察

目的:观察黄连解毒汤中黄酮成分逆转肿瘤多药耐药的作用,探讨本方逆转肿瘤多药耐药的物质基础。方法:以人慢性粒细胞白血病红白血病细胞株K562的耐阿霉素(adriamycin,ADM)细胞株(K562/ADM)为细胞系,通过MTT实验观察黄芩苷、京尼平苷对K562/ADM细胞ADM的敏感性的影响,计算细胞增殖抑制率、半数抑制浓度(IC50)及耐药逆转倍数,并对细胞内ADM浓度变化进行测定。结果:黄芩苷、京尼平苷均能部分逆转K562/ADM细胞。黄芩苷、京尼平苷的IC50值分别为5.06,6.74 mg.L-1。黄芩苷、京尼平苷的耐药逆转倍数分别为1.95,1.46倍。与相应的对照组相比,K562/ADM细胞经黄芩苷(50 mg.L-1)、京尼平苷(100 mg.L-1)作用后,细胞内ADM的荧光强度高于对照组,其中黄芩苷组提高到3.6%,京尼平苷组提高到1.7%。结论:黄连解毒汤逆转肿瘤多药耐药的物质基础可能与其含有的黄芩苷、京尼平苷有关。     

硒化壳聚糖对K562/ADM细胞增殖的影响及其与PI-3K/Akt信号途径的关系

目的 研究硒化壳聚糖对耐阿霉素慢性粒细胞白血病细胞株K562/ADM增殖的影响,探讨这种影响与PI-3 K/Akt信号途径的关系.方法 硒化壳聚糖作用K562/ADM细胞后,应用MTT法和克隆形成法检测硒化壳聚糖对细胞增殖和存活的影响,计算逆转倍数;应用免疫印迹法检测p-Akt蛋白表达的改变.结果 随着硒化壳聚糖浓度的增加,细胞增殖抑制率相应增加,存活率相应减少,呈剂量时间效应关系.硒化壳聚糖能够下调p-Akt表达(P＜0.01),明显增强ADM对K562/ADM细胞的增殖抑制作用(P＜0.05,P＜0.01),对细胞耐药产生一定的逆转作用.结论 硒化壳聚糖可通过抑制PI-3 K/Akt信号途径对耐药白血病细胞株K562/ADM产生增殖抑制和多药耐药逆转作用.