肝细胞癌染色体lp36杂合子丢失及其与临床病理特征关系的研究

目的探讨肝细胞癌(HCC)在染色体lp36杂合子丢失(LOH)的特点及其与临床病理表现的相关性.方法采用毛细管电泳DNA分析系统,对56例HCC中染色体1p36上10个微卫星的杂合子丢失进行检测.结果56例HCC在1号染色体上10个基因座发生LOH的总频率为69.6%(39/56),LOH以RIZ最高为76.7%,其次为D1S199(53.3%).LOH与血清AFP、HBsAg、肿瘤大小、Edmondson分级和转移等临床病理学参数无明显关系;D1S2893和DlS507基因座,血清HBsAg阳性患者的LOH频率显著高于HBsAg阴性者(P<0.01),D1S199基因座,血清AFP阳性者的LOH明显高于血清AFP阴性者(P=0.001);DlS468基因座,无肝内转移者的LOH显著高于肝内转移者(P<0.01).结论HCC在染色体lp36上存在广泛的LOH,其在HCC的发生和发展过程中起重要作用,而特定基因座的LOH与临床和病理学参数有一定的相关性.     

乳腺浸润性导管癌染色体1p36杂合性缺失的初步研究

目的 探讨染色体1p36可能存在的与非特殊类型乳腺浸润性导管癌发生、发展有关的肿瘤抑制基因,为发现和定位肿瘤抑制基因提供线索和热点位点.方法 选取1号染色体8个微卫星多态位点标志物,采用新鲜和石蜡组织基因组DNA抽提-PCR扩增-变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳-银染法-全自动凝胶成像系统分析,检测80例浸润性导管癌及癌旁正常组织基因组DNA的杂合性缺失（LOH）频率.应用x2检验对实验结果进行综合分析.结果 80例浸润性导管癌中有45例（56.3％）至少在一个位点出现LOH,其中D1S1310微卫星位点频率最高,为35.7％（25/70）.结论 乳腺浸润性导管癌染色体1p36发生高频率LOH,提示1p36.23 ～ 33区间可能存在与乳腺癌发生、发展有关的抑癌基因.     

小肝细胞癌患者染色体1p36杂合性缺失的特点

目的: 探讨人类染色体1p36等位基因杂合性缺失在小肝细胞癌(small hepatocellular carcinoma, sHCC)发生发展中的作用及其与临床病理表现的关系。方法：采用PCR非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和硝酸银染色技术，对140例信息性sHCC中1p36上9个多态性微卫星标志位点的杂合性缺失(lo     

原发性肝细胞癌多染色体杂合性丢失研究

研究原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）５对染色体３８个位点等位基因杂合性丢失（ＬＯＨ）,ＬＯＨ与肝癌的临床病理改变和肝炎病毒的关系。方法：用ＰＣＲ微卫星多态性分析检测肝癌ＬＯＨ。结果发生高频率ＬＯＨ的位点有染色体１ｐ的Ｄ１Ｓ１８６（这,４８．１％）和Ｄ１Ｓ２４３（１ｐ３６．３,５１．６％）;染色体９ｎ２４的Ｄ９Ｓ５４（６１．８％）,９这的Ｄ９Ｓ１７４７（５２．％）和ＤＤ９Ｓ１７５２（５１．８％）ＷＵＧ ＨＫ     

原发性肝癌8号和16号染色体杂合子丢失的研究

目的:分析人肝细胞肝癌(HCC)组织中染色体8和16部分染色体片段的杂合子丢失及与临床病理关系,初步筛选HCC相关的抑癌基因,为HCC的早期诊断、预后预警提供可能的新分子标记物.方法:应用聚合酶链反应-变性聚丙烯酰胺凝胶-银染法分析45例HCC组织标本中分别位于染色体8和16上的具有高度多态性微卫星位点的杂合性丢失(LOH)状态.结果:发生LOH的总频率为68.89％ (31/45),其中D16S511位点的LOH发生率最高为53.33％ (24/45),其次是D8S261( 39.02％,16/41)和D8S499(34.88％,15/43).结论:染色体16q23、8p22-21.3及8p12区域的LOH发生频率高,可能存在与HCC发生发展相关的新的抑癌基因,特定位点的遗传变异可能与HBV感染、临床病理恶性程度等预后因素相关.     

肝细胞癌17pl3.3位点杂合缺失及其临床意义

目的 探讨染色体17pl3.3 位点杂合缺失与肝细胞癌临床病理参数的关系。方法 采用PCR 扩增肝细胞癌组织和癌旁正常肝组织17pl3.3 位点的3个微卫星标志,即D175643, D175926 和D1751574,并比较和确定杂合子等位基因缺失。结果 3个微卫星标志总的杂合率为89.8 % (79/88) ,杂合缺失率为41.7 % (33/79) ;杂合缺失与肝细胞癌门静脉癌栓和肝内转移明显相关（P＜0.01）。结论 染色体17pl3.3 位点杂合缺失是肝细胞癌最常见的遗传学事件之一,该位点的缺失与肝癌门静脉癌栓和肝内转移密切相关。     

人肝细胞癌VEGF及受体的表达与临床病理的关系

目的:分析VEGF及其受体flt-1/flk-1蛋白表达与肝细胞癌临床病理的关系.方法:应用ABC免疫组化染色法,检测60例肝细胞癌中VEGF、flk-1、flt-1蛋白表达情况,并分析它们与肝细胞癌临床病理的关系.结果:60例肝细胞癌组织中VEGF、flk-1、flt-1蛋白的阳性表达率分别为81.3%、88.3%、80.0%,均明显高于正常肝组织(P＜0.05);并且VEGF蛋白表达与肿瘤的病理分级、有无包膜、瘤栓、直径大小均有相关性.结论:VEGF蛋白表达水平越高,细胞恶性程度及侵袭、转移能力越强,并且VEGF与flt-1/flk-1在肿瘤形成过程中具有协同作用.     

散发性结直肠癌1号染色体短臂遗传位点杂合缺失

目的：抑癌基因的杂合缺失（loss of heterozygosity，LOH）被认为是结直肠癌形成的关键步骤之一。本实验研究了结直肠癌1号染色体短臂杂合的缺失情况，并探讨其临床意义。方法：选取11个微卫星DNA标记与83例结直肠癌病例的肿瘤和正常组织进行PCR。PCR产物在ABI Prism 377自动荧光测序仪上进行电泳，以GeneScan3．1和Genotyper 2．1软件进行遗传位点扫描以及杂合缺失分析。结果：1号染色体短臂的平均杂合缺失率为18．00％，D1S468（1p36．33—36．31）位点的杂合缺失率最高，达36．54％。D1S2726位点的杂合缺失现象主要存在于直肠癌，缺失率为28．57％（6／21），而结肠癌的缺失率为0．00％（0／33），二者差异具统计学意义（P=0．002）。结论：在1号染色体短臂上可能存在与结直肠癌发生相关的抑癌基因，位于1p36．33—36．31这个区域。     

肝细胞癌ZIC1基因启动子区甲基化与临床病理特征的关系

目的:探讨肝细胞癌ZIC1基因启动子区甲基化与临床病理特征的关系.方法:采集2008年8月至2014年8月武警陕西总队医院63例肝细胞癌患者手术切除的肿瘤组织标本,通过Real-time PCR法检测肝细胞组织及癌旁组织中ZIC1 mRNA表达水平;用甲基化特异性PCR (methylation specific polymerase chain reaction,MSP)法检测癌组织及癌旁组织中ZIC1基因启动子区甲基化状态.结果:ZIC1 mRNA在肝细胞癌组织中呈低表达与其启动子区甲基化有关;ZIC1基因在肝细胞癌中频发甲基化(P＜0.05),并与肿瘤分化程度及分级显著相关(均P＜0.05).结论:启动子区甲基化是ZIC1基因失活的重要机制,ZICI基因启动子区异常甲基化可能参与了肝细胞癌的发生发展.     

肝癌染色体17p13.3区的杂合性缺失分析及缺失区连续克隆群的构建

目的　检测原发性肝癌在染色体 17p13.3区的杂合性缺失状况 ,确定其共同缺失范围和最小热点缺失范围 ,并获得缺失范围内基因组克隆和构建连续克隆群。方法　应用Southern杂交分析VNTR(variablenumberoftandemrepeat,VNTR)和RFLP标志在肝癌中杂合性缺失 (LOH)状况。应用PCR扩增微卫星标志 ,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析各个微卫星标志的LOH状况。以微卫星标志为引物 ,经过 3轮PCR筛选阳性基因组克隆。通过检测各位点标志对基因组克隆的反应 ,构建连续克隆群。结果　检测了 5 4份原发性肝癌样品在染色体 17p13.3区 16个位点标志和染色体 17p13.1区的p5 3基因的TP5 3位点标志的LOH情况 ,发现从D17S5位点至D17S34位点间的各个标志都有较高LOH ,频率 >6 3%。而从D17S5位点起、近着丝粒方向的 3个标志LOH率都较低或无LOH。染色体17p13.1的TP5 3标志只有 31%的LOH ,低于染色体 17p13.3区的D17S5至D17S34位点间各标志的LOH率。有 2例肝癌样品在近端粒的D17S34、D17S186 6位点和近着丝粒的D17S5、D17S15 74位点均无LOH ,但在D17S849至D17S15 74间的各位点上均呈LOH或为纯合子。在缺失范围内 ,共筛选了 18个位点的基因组克隆 ,获得了相对应的阳性基因组克隆 ,经过检测各位点对基因组克隆的反应性 ,构建了覆盖 9个标     

Relationship between Microsatellite Alterations of RASSF1A Gene and Development of Cervical Carcinoma

Objective： To explore the relationship between microsatellite alterations of RASSFIA gene and the development of cervical carcinoma, and its relationship with HPV16 infection. Methods： Two sites of microsatellite polymorphism of RASSFIA gene were selected. Polymerase chain reaction （PCR） technique was used to detect LOH and MSI in 50 cases of cervical carcinoma and 40 cases of cervical intraepithelial neoplasia （CIN）, and to detect the infection state of HPV16. Results： At D3S1478 and D3S4604, the LOH rates of cervical carcinomas were 32.6% （14/43） and 48.9% （23/47）, the MSI rates were 14% （6/43） and 19.1% （9/47）, respectively. The LOH rates of CINs were 31.4% （11/35） and 39.5% （15/38）, the MSI rates were 11.4% （4/35） and 15.8% （6/38）, respectively. There were no significant differences between cervical carcinomas and CINs in respect to their positive rates of LOH and MSI at D3S1478 and D3S4604 （P〉0.05）. There were significant differences in LOH rates at D3S1478 and D3S4604 between the stage Ⅰ-Ⅱ and Ⅲ-Ⅳ cervical carcinomas and between the well/moderately differentiated cervical carcinomas and the poorly differentiated cervical carcinomas （P〈0.05）. The positive rates of LOH and MSI for CIN Ⅲ and noninvasive cervical carcinomas were higher than those in CIN Ⅰ-Ⅱ. The rates of infection of HPV16 in cervical cancer was obviously higher than that in CIN and in normal cervical tissues （P〈0.05）, and the incidence of LOH of RASSFIA gene was higher in HPV16（＋） than that in HPV16（-） （P〈0.05）. Conclusion： The RASSFIA gene change is a relatively late event in cervical carcinomas. The detection of LOH and MSI of RASSFIA gene might be helpful to the early diagnosis and the screening of cervical carcinoma. It might also be useful for predicting the prognosis of cervical carcinoma.     

肝细胞癌高表达中期因子蛋白与肝内转移的关系

目的 探讨中期因子（midkine,MK)蛋白在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的表达特点、水平及其与肝内侵袭、转移的可能关系。方法 应用免疫组织化学染色、Western印迹等方法,对33例人HCC组织、10例良性肝肿瘤组织及其配对瘤旁肝组织进行了MK蛋白定位表达及表达水平的研究,并结合肝内有无卫星灶形成进行分析。结果 免疫组织化学结果与Western印迹结果具有一致性（P＞0．05）。在正常肝组织及良性肝病变组织中,MK无表达;而在HCC组织中,MK高表达。在癌旁肝硬化组织中,MK微量表达;而在肿瘤侵袭前沿区域,MK表达则增强。HCC中MK表达率与其组织学类型、组织分级、瘤体大小、包膜状况、AFP值之间差异均无显著性（P＞0．05）,但在有卫星灶形成的HCC中,MK蛋白表达率显著高于无卫星灶形成者（P＜0．05）。结论 HCC在蛋白水平上表达MK增加,并可能与肝内侵袭、转移有关。     

广西黄曲霉毒素高危区肝癌p53基因序列改变

目的　检测广西肝细胞癌 p53基因的序列改变。方法　 4 0例肝细胞性肝癌 ( HCC)分两组 :一组 2 6例 ,来自广西扶绥地区已知 HCC、黄曲霉毒素 ( AFB1)和乙型肝炎病毒 ( HBV)高危区 ;对照组 14例 ,来自广西玉林地区 ,该地 HCC和 HBV高危 ,但 AFB1可能低 ,因居民以低 AFB1的大米为主食。第七外显子直接测序。 p53蛋白和 HBs Ag免疫染色。结果　扶绥组 16/ 2 6例 ,占 61.5% ,2 4 9密码子第三号位 G→ T颠换 ,形成公认的突变热点。玉林组仅在贵港地区 p53突变集中在热点 ,为 3/ 5例 ,其他地区第七外显子突变点则分散在不同位点。全组 38/ 4 0例 HBs Ag( ) ,占 95%。结论　除启东和南部非洲外 ,世界上第三个 AFB1高危区肝癌 p53基因出现特异突变位点。已知肝癌 p53基因突变发生在这热点则提示该地 AFB1高污染。 HBV常伴随这些基因改变。     

广西肝细胞癌与丙型肝炎病毒的相关性

目的研究广西肝癌高、中、低危区的癌及癌旁肝组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的表达,探讨ＨＣＶ在广西肝细胞癌（ＨＣＣ）病因中的地位。方法用ＨＣＶ的Ｃ区、ＮＳ３和ＮＳ４区３种单克隆抗体及抗ＨＢｓＡｇ抗体进行检测。免疫组化染色用ＳＰ法。结果ＨＣＣ高、中、低危区肝癌中ＨＣＶ阳性率依次为３８．１％（２４／６３）、３７．１％（２３／６２）和３９．０％（３０／７７）;ＨＢｓＡｇ阳性率依次为８４．１％、８３．８％和８４．４％。ＨＣＣ中ＨＣＶ感染的总数为７７／２０２（３８．１％）,乙型肝炎病毒感染总数为１７０／２０２（８４．２％）。结论ＨＣＣ经常伴随乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染,但ＨＣＶ可见于１／３的ＨＣＣ。在广西肝癌高、中、低发地区,ＨＢＶ与ＨＣＶ感染情况无明显差别。     

肝癌组织雌激素受体表达与生物学特征的研究

目的 探讨雌激素受体（ｅｓｔｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＥＲ）在肝细胞肝癌（ｂｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＨＣＣ）中的表达及其与ＨＣＣ生物学特征的关系。方法 用免疫组织化学方法检测了４３例ＨＣＣ及对应癌旁肝组织及４例正常肝组织的雌激素受体的表达,经大体及显微镜检查了这些肝细胞肝癌的病理特征。结果 雌激素受体阳性率在肝细胞肝癌为３７．２１％,癌旁肝组织为６０．４６％,正常肝组织     

鼻咽癌染色体3p21-26的等位基因杂合性丢失研究

目的细胞遗传学研究表明,３号染色体缺失是鼻咽癌常见的染色体异常之一。分子生物学研究表明,染色体３ｐ在鼻咽癌中出现高频率的等位基因杂合性丢失（ＬＯＨ）。本研究将进一步确定鼻咽癌３ｐ等位基因杂合性丢失的频率及范围。方法应用位于３ｐ２１２６区域１６个微卫星多态性位点,对２４例低分化鼻咽癌患者进行了ＬＯＨ分析。结果２４例患者中有１６例存在杂合性丢失（６６．７％）。丢失频率最高的两个位点是Ｄ３Ｓ１５６０（５０％,１１／２１）和Ｄ３Ｓ１６２０（５０％,９／１８）。在具有丢失的１６例患者中,８例显示为１个连续的多个相邻位点的杂合性丢失区域,５例患者存在２个或２个以上的杂合性丢失区。病例１,３,４,７,８,１０,１６,１７,１８,１９和２２在Ｄ３Ｓ１５９７和Ｄ３Ｓ１２９７之间,表现为一个不同大小的杂合性丢失区。结论最小共同丢失区位于Ｄ３Ｓ１５６０Ｄ３Ｓ１６２０（３ｐ２５．３２６．２）之间,提示该区域有一个尚未克隆的、与晚期鼻咽癌明显相关的抑癌基因。     

肝移植治疗晚期原发性肝癌的初步报告

目的 探索晚期肝癌行同种原位肝移植的治疗价值。方法收集我院2000年8月～2002年2月进行的36例肝移植的临床资料,对其中15例晚期肝癌的临床资料进行分析．并对其中手术后出院的13例进行随访。结果 1年生存率85．7％(6／7),有1例6个月内肝癌复发转移而死亡;至2002年2月,无瘤生存10例,最长19个月,最短5个月;带瘤生存2例,1例生存19个月,1例生存10个月。结论 根据我国国情,只要患者经济状况允许,无肝外转移的晚期肝癌仍是目前我国肝移植的适应证。