基质金属蛋白酶-9和原癌基因c-myc在甲状腺癌中的表达及其关系探讨

目的探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和原癌基因c-myc在甲状腺癌中的表达及其关系。方法手术中获得的甲状腺癌、甲状腺腺瘤、桥本氏甲状腺炎及正常甲状腺组织的新鲜标本共39例，提取其总RNA，然后进行半定量逆转录多聚酶链反应（RT—PCR），比较MMP-9及c—myc mRNA在不同疾病组织中的表达差异。用酶联免疫吸附方法（ELISA）检测不同患者血清中的MMP-9水平。结果在甲状腺癌组织中，MMP-9及c—myc mRNA的表达均显著性高于甲状腺腺瘤、桥本氏甲状腺炎及正常甲状腺组织（P〈0．05），其他3组问的比较无统计学意义。甲状腺癌患者同时伴有血清MMP-9水平的显著性升高。结论MMP-9及c—myc mRNA的表达增高及血清MMP-9水平的升高可能与甲状腺癌的发生有关。     

人类乳头状甲状腺癌TGF-β1mRNA表达

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在人乳头状甲状腺癌和良性腺瘤、桥本氏甲状腺炎及正常组织中的表达差别.方法利用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)及表达峰度定量法,检测4种新鲜甲状腺手术标本组织中TGF-β1 mRNA的表达.结果 TGF-β1 mRNA在4种甲状腺组织中的表达均有较高的阳性率(＞83.3%),乳头状甲状腺癌中TGF-β1 mRNA的表达量较良性腺瘤、桥本氏炎及正常组织均增多(P＜0.05),后三者之间则无差别.结论 TGF-β1 mRNA在乳头状甲状腺癌中表达代偿性增强与癌的发生有关,且可作为乳头状甲状腺癌的诊断指标之一,并辅助鉴别良恶性;RT-PCR则为临床上较为快捷、有效的辅助诊断方法.     

桥本氏甲状腺炎背景下甲状腺癌中的差异表达蛋白分析

目的：：对桥本氏甲状腺炎背景下甲状腺癌中的高表达差异蛋白进行分析,探索桥本氏甲状腺炎背景下甲状腺癌的发病机理、为寻找特异性肿瘤标志物提供有力依据。方法：采用多肽体外标记技术(即比较蛋白质组学的方法),对桥本氏甲状腺炎背景下甲状腺乳头状癌患者的癌组织和甲状腺滤泡性腺瘤以及桥本氏甲状腺炎腺体组织的蛋白提取物进行iTRAQ分析,并与正常甲状腺组织作为对照组。寻找四种组织中差异表达的蛋白质,并将差异性明显的蛋白进行数据检索,明确这些差异性明显的蛋白质的生物学特性,并进行验证。结果：通过对桥本氏甲状腺炎背景下甲状腺癌组织、甲状腺腺瘤组织、桥本甲状腺炎组织、正常甲状腺组织的四组蛋白提取物的分析比较,比较所得差异蛋白质,进行重合分析,最后得出8种有较高差异的表达蛋白。分别是：K6PL HUMAN, NUCB2 HUMAN, CNBP HU-MAN,UB2V2 HUMAN,RAB8A HUMAN,APOA4 HUMAN,RPL13 HUMAN,TES HUMAN。对 iTRAQ结果进行western blotting验证,得出以上八种蛋白的验证结果,比较发现,RPL13在四种组织中表达差异最明显。结论：通过蛋白比对发现,在桥本氏甲状腺炎背景下甲状腺乳头状癌的发生过程中有8种表达的蛋白有较高差异,而核糖体蛋白13( RPL13)在桥本氏甲状腺炎背景下甲状腺乳头状癌组织中表达最明显,可能为桥本氏甲状腺炎背景下并发甲状腺癌的发生、发展相关性较大的蛋白质。     

MMPs／TIMPs在甲状腺乳头状癌细胞中的表达与作用的研究

目的：探讨甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）患者癌细胞中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）和金属蛋白酶的组织抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinases，TIMPs）蛋白的表达水平，探讨MMPs/TIMPs与甲状腺乳头状癌发生、发展之间的相互关系。方法：应用ELISA方法检测甲状腺正常组织和乳头状癌癌细胞培养液中MMP-2、MMP-9以及TIMP-1、TIMP-2的分泌水平：采用MTS掺人试验检测在rhMMP-2或抗MMP-2中和抗体的作用下，甲状腺正常组织细胞和乳头状癌癌细胞增殖水平。结果：甲状腺乳头状癌癌细胞分泌MMP-2、MMP-9水平提高，而分泌TIMP-1、TIMP-2水平降低，MMPs与TIMPs的比值升高特别显著；MMP-2对甲状腺乳头状癌癌细胞有明显的促增殖作用，抗MMP-2单克隆抗体能明显地抑制癌细胞生长。结论：MMPs与TIMPs的比值有望作为预测甲状腺乳头状癌生长和转移的一项检测指标。     

MMP-2和MMP-9在甲状腺癌中的表达及其意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9(MMP-2和MMP-9)在甲状腺腺瘤及甲状腺癌组织中的表达及意义。方法 应用免疫组化SP法检测12例甲状腺腺瘤及32例甲状腺癌组织中MMP-2和MMP-9的表达。结果 MMP-2、MMP-9在甲状腺癌中的表达明显高于甲状腺腺瘤，且甲状腺癌患者中有淋巴结转移组MMP-2、MMP-9的表达明显高于无淋巴结转移组。结论 MMP-2和MMP-9在甲状腺癌组织中有高表达且在甲状腺癌细胞向外扩散、转移中起着重要作用，参与了甲状腺癌的转移过程。     

血清基质金属蛋白酶9与甲状腺乳头状癌的关系

目前国内外的研究多数集中于基质金属蛋白酶marx metalloproteinases,MMPs）在甲状腺癌组织中的表达,对于血清的检测还比较少。为此,我们对甲状腺乳头状癌患者血清中MMP-9的水平进行检测,旨在探讨人血清中MMP-9和甲状腺乳头状癌的关系。     

乳头状甲状腺癌中转化生长因子-β及其受体的基因表达

目的　探讨转化生长因子 β(TGF β)及其受体基因的表达与乳头状甲状腺癌的关系。 方法　取甲状腺手术标本 ,其中乳头状甲状腺癌 8例、桥本甲状腺炎症 7例、甲状腺腺瘤 8例和正常甲状腺组织 8例 ,扩增TGF β1、TGF β2 、TGF β3 、TGF β受体Ⅰ、TGF β受体Ⅱ及TGF β受体Ⅲ基因 ,比较各种基因在不同组织中的表达水平。结果　TGF β1在 4种组织中表达阳性率均较高 ,但在乳头状甲状腺癌中的表达丰度高于其他 3组 (P<0 .0 5 )。TGF β受体Ⅰ在乳头状甲状腺癌组织中表达阳性率低于其他 3组 ,表达丰度也明显降低 (P <0 .0 5 )。TGF β2 、TGF β3 、TGF β受体Ⅱ及TGF β受体Ⅲ在 4种组织中均部分表达 ,且表达量的差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　TGF β1表达水平上升和TGF β受体Ⅰ表达水平下降可能与乳头状甲状腺癌的发生有关 ,TGF β2 、TGF β3 、TGF β受体Ⅱ及TGF β受体Ⅲ基因与乳头状甲状腺癌可能不存在相关性     

甲状腺乳头状癌组织中MMP-2、CD151 mRNA的表达及其意义

目的探讨甲状腺乳头状癌组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)与CD151mRNA的表达及相互关系,以及其与甲状腺乳头状癌转移之关系。方法收集病理学确证的30例甲状腺乳头状癌、15例滤泡性腺瘤及15例腺瘤旁正常甲状腺组织标本,采用RT-PCR方法分别检测MMP-2和CD151mRNA的表达。结果 MMP-2mRNA和CD151mRNA在甲状腺乳头状癌组织中的表达明显高于滤泡性腺瘤及腺瘤旁正常甲状腺组织(均P<0.05),MMP-2mRNA和CD151mRNA的表达与甲状腺乳头状癌的淋巴结转移密切相关(均P<0.05)。MMP-2mRNA与CD151mRNA的表达呈正相关(r=0.430,P<0.01)。结论 MMP-2和CD151的表达与甲状腺乳头状癌的侵袭、转移密切相关,MMP-2与CD151在癌组织中表达一致。     

MGMT蛋白在甲状腺癌中的表达及其临床意义

目的：探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（O6-methylguanine-DNA methyltransferase, MGMT）在甲状腺癌组织中的表达及其临床意义。方法：用免疫组织化学SP法检测61例甲状腺癌、21例甲状腺良性腺瘤、15例桥本氏甲状腺炎、8例结节性甲状腺肿和12例癌旁正常组织中MGMT蛋白的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果：MGMT在甲状腺癌组织中的表达与正常组织中的表达差异有统计学意义（P＜0.05）。MGMT表达从正常组织（16.67%,10/12）、结节性甲状腺肿（25.00%,2/8）、桥本氏甲状腺炎（60.00%,9/15）、甲状腺腺瘤（52.38%,11/21）到甲状腺癌（60.66%,38/61）中表达水平基本呈上升趋势。在甲状腺乳头状癌与甲状腺滤泡癌的表达差异有统计学意义（P＜0.05）,表达水平随甲状腺癌恶性程度的增加而降低,分别为乳头状癌（72.22%,26/36）、滤泡癌（50.00%,8/16）。MGMT在性别、年龄及民族组中表达差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：MGMT高表达现象可能与甲状腺癌恶性程度有关,可成为候选的临床分子诊断指标。甲状腺癌组织的MGMT蛋白在性别、年龄和民族组表达均无差异,有望成为通用的临床检测指标。     

甲状腺癌中CD44V6和基质金属蛋白酶-2的表达

目的研究黏附分子CD44V6、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在甲状腺癌中的表达、相互关系及其与甲状腺癌侵袭转移的相关性。方法应用S—P免疫组化染色法检测82例甲状腺乳头状癌（PTC）中CD44V6和MMP-2表达。结果82例甲状腺乳头状癌（PTC）中CD44V6和MMP-2阳性表达率为67．1％和68．3％，均高于甲袱腺腺瘤周围正常甲状腺组织，P〈0．01。CD44V6和MMP-2阳性表达与淋巴结转移呈正相关，P〈0．05，且随侵袭程度增加而升高。结论CD44V6、MMP-2在促进甲状腺癌的浸润与转移中呈协同效应。CD44V6和MMP-2表达的综合检测对甲状腺癌转移趋势和预后评估具有重要的参考价值，可能是甲状腺癌侵袭转移、预后判断的分子标志。     

血清中MMP-2、MMP-9水平与乳头状甲状腺癌关系的分析

目的探讨基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinases,MMP-2）及基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinases,MMP-9）与乳头状甲状腺癌的关系。方法采用酶联免疫吸附法测定30例健康者（对照组）和30例甲状腺腺瘤患者及32例乳头状甲状腺癌患者血清中MMP-2和MMP-9的水平,分析其与乳头状甲状腺癌之间的关系。结果乳头状甲状腺癌组血清中MMP-2和MMP-9的水平显著高于甲状腺腺瘤组和健康对照组（P〈0．01）。甲状腺腺瘤组和健康对照组之间没有差异（P〉0．05）。结论血清中MMP-2和MMP-9水平的检测对乳头状甲状腺癌患者的诊断有重要的临床意义。     

甲状腺乳头状癌组织中EG-1基因的表达分析

目的:探讨甲状腺乳头状癌组织中内皮衍生基因-1(EG-1)基因的表达及意义。方法:选取腺体外科收治的24例的甲状腺乳头状癌患者,另取10例良性甲状腺疾病病例作为对照组,通过RT-PCR方法对甲状腺组织进行EG-1基因检测。结果:24例甲状腺乳头状癌组织中检测出16例EG-1mRNA的表达,其阳性表达率为73%(16/24);10例甲状腺瘤组织中检测出2例EG-1mRNA的表达,其阳性表达率为20%(2/10);二者相比较,EG-1mRNA在甲状腺乳头状癌组织的阳性表达率高于甲状腺瘤组织(P<0.05)。结论:甲状腺乳头状癌组织中EG-1基因异常高表达,可能与甲状腺癌的发生有关。     

ghrelin在甲状腺疾病组织中的表达

目的:探讨ghrelin在不同甲状腺疾病的甲状腺组织中的表达情况及其意义.方法:选取我院2000年至2004年手术切除或穿刺活检的甲状腺石蜡标本57例,其中包括亚急性甲状腺炎5例、桥本氏病8例、甲状腺机能亢进症(Graves病)7例、结节性甲状腺肿8例、甲状腺腺瘤5例、甲状腺淋巴瘤3例、乳头状癌8例、滤泡癌3例、髓样癌5例、未分化癌5例,以甲状腺腺瘤的瘤周正常甲状腺组织作为对照.应用免疫组织化学染色方法检测ghrelin的表达.结果:(1)正常对照、亚急性甲状腺炎、桥本氏病以及Graves病的甲状腺组织中均未见ghrelin表达;(2)结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤以及甲状腺淋巴瘤的组织中亦未见ghrelin表达;(3)甲状腺乳头状癌、滤泡癌、髓样癌及未分化癌的肿瘤细胞中均可见ghrelin阳性染色,8例乳头状癌中有5例染色阳性,其中3例为强阳性;3例滤泡癌中有2例染色阳性;5例髓样癌中有3例染色阳性,其中1例为强阳性;5例未分化癌中有3例染色阳性,其中2例为强阳性.结论:ghrelin在恶性上皮性甲状腺肿瘤中可见表达,而在自身免疫性或炎症性甲状腺疾病和良性甲状腺结节性疾病中未见表达.提示ghrelin表达在甲状腺恶性肿瘤的发生和发展过程中可能具有重要意义.     

桥本甲状腺炎合并甲状腺癌98例诊治

目的 探讨桥本甲状腺炎合并甲状腺癌的诊治特点.方法 回顾性分析98例桥本甲状腺炎合并甲状腺癌的临床资料.结果 行甲状腺一侧腺叶切除＋峡部切除2例;行甲状腺双叶切除58例;行中央区淋巴结清扫35例,淋巴结阳性15例;行颈部淋巴结改良根治术3例,淋巴结阳性3例.原发灶直径≤1.0 cm和＞1 cm,中央区淋巴结转移率分别为25.0%和52.2%,差异无统计学意义.结论 桥本甲状腺炎常合并甲状腺乳头状癌,即使为微小癌,也常伴有颈部淋巴结转移.随着肿瘤直径的增大,淋巴结转移亦相应增多.桥本甲状腺炎合并甲状腺癌手术中,应行甲状腺双叶切除,必要时加行中央区及颈侧区淋巴结的清扫.     

桥本病中白细胞介素18表达可能参与甲状腺细胞的自我毁损过程

目的 观察白细胞介素18(IL-18)在桥本病甲状腺组织中的表达及其细胞定位,并探讨干扰素γ(IFN-γ)对甲状腺细胞中IL-18表达的影响.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学染色,检测IL-18在正常和桥本病甲状腺组织中的表达及其细胞定位.原代培养的人甲状腺细胞与IL-1B、肿瘤坏死因子α(TNF-α)或IFN-γ孵育后,应用RT-PCR和Western印迹检测IL-18表达的变化.结果 新鲜甲状腺组织的RT-PCR分析显示,IL-18 mRNA在正常甲状腺组织中表达水平极低,但在桥本病的甲状腺组织中表达显著增高,IL-18/β-肌动蛋白的灰度比分别为0.15±0.02和0.90±0.13(P<0.05).免疫组织化学染色显示,IL-18表达在桥本病的甲状腺组织中明显增加,且主要定位于甲状腺滤泡上皮细胞.在离体培养的甲状腺上皮细胞中,IFN-γ可剂量依赖性增加IL-18 mRNA的表达,而TNF-α和IL-1β则无类似的效应.Western印迹显示,IL-18原在离体甲状腺细胞中可见表达,IFN-γ使IL-18原表达增加.结论 IL-18在桥本病的甲状腺滤泡上皮细胞中表达明显增加,IFN-γ可上调离体甲状腺细胞IL-18表达.IL-18与IFN-γ之间的相互作用在桥本病的甲状腺细胞破坏中可能具有重要的意义.     

CK19、Ret/PTC在桥本恶变中的表达及其意义

目的 :从免疫组织化学角度初步探讨桥本甲状腺炎恶变的发生、发展以及演进的可能机制 ,寻找敏感而又特异的检测指标 ,以助于桥本甲状腺炎恶变的诊断。方法 :采用免疫组化S -P法检测 2 0例甲状腺瘤旁的正常甲状腺组织 ,2 5例桥本甲状腺炎组织以及 2 1例桥本甲状腺炎恶变的标本中CK19、Ret/PTC的表达和分布情况。结果 :CK19、Ret/PTC蛋白在癌旁正常甲状腺组织中无阳性表达 ,而在桥本甲状腺炎以及桥本甲状腺炎合并甲状腺癌组织中均有不同程度的表达 ,两组之间比较 ,CK19、Ret/PTC蛋白阳性表达率差别均无显著性 (P >0 .0 5 )。但其染色形态及强度存在明显差异 (P <0 .0 5 )。CK19、Ret/PTC在桥本甲状腺炎组织中均表现为弱灶性染色。而在桥本甲状腺炎合并甲状腺癌组织中CK19、Ret/PTC多表现为强而弥漫性染色。Ret/PTC的异常表达与乳头状甲状腺癌的淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 )。结论 :检测CK19、Ret/PTC的表达 ,有助于桥本甲状腺炎恶变倾向的判断和甲状腺癌的早期诊断 ,Ret/PTC的异常表达对乳头状甲状腺癌的发生、发展、淋巴结转移有密切关系和重要临床意义     

CK19和甲状腺过氧化物酶表达在甲状腺疾病诊断中的作用

目的 探讨CK19和甲状腺过氧化物酶(TPO)在甲状腺癌和良性甲状腺病变中的表达情况,以提高甲状腺癌的诊断和鉴别诊断水平。方法 应用SP免疫组织化学法检测了62例甲状腺癌(30例典型乳头状癌、22例滤泡型乳头状癌和10例滤泡型癌)和44例良性甲状腺病变(22例结节性甲状腺肿、14例甲状腺腺瘤和8例桥本氏甲状腺炎)中CK19和TPO的表达。结果 CK19在甲状腺癌中表达率为96.8%,在良性甲状腺病变中极少表达或小灶性弱表达,表达率为4.5%,两者有显著性差异(P<0.01);TPO在良性甲状腺病变中的表达率为100%,在甲状腺癌中极少表达或小灶性表达,表达率为3.2%,两者有显著性差异(P<0.01)。结论 CK19和TPO在甲状腺癌的病理诊断和鉴别诊断中具有重要意义和临床实用价值。