胆固醇逆向转运与动脉粥样硬化的转基因动物研究进展

肝外组织获得的胆固醇通过胆固醇逆向转运(reverse cholesterol transport,RCT)回到肝脏排出体内。RCT起始于肝外组织细胞内胆固醇的流出,以胆固醇从肝脏分泌和粪便中排出体外结束。数个关键蛋白如三磷酸腺苷结合盒转运体A1/G1(adenotriphos binding cassette transporter A1/G1,ABCA1/G1)、卵磷脂胆固醇酰基转移酶(lecithin:cholesterolacyltransfer,LCAT)、胆固醇酯转移蛋白(cholesterol ester transfer protein,CETP)和B类Ⅰ型清道夫受体(scavenger receptor B1,SR-B1)参与了这个过程。本文综述RCT在心血管疾病中作用的转基因动物实验研究。这些动物和实验室资料对临床现象的解释和临床调查的未来方向可能有用。     

非诺贝特对胆管结扎大鼠血生化及肝组织病理学的影响

目的探讨非诺贝特对胆管结扎大鼠血清肝脏生化指标、肝组织丙二醛含量及组织病理学的影响。方法采用胆总管结扎手术制备胆汁淤积大鼠模型。24只雄性W istar大鼠随机分为两组（每组12只）：A组为胆管结扎＋生理盐水组,B组为胆管结扎＋非诺贝特组（30 mg/kg）。术后7 d留取血标本及肝组织后处死。采用全自动生化分析仪检测肝脏生化指标;分光光度计检测肝组织丙二醛含量;光镜下观察肝脏组织病理变化。结果两组血清肝脏生化指标无显著统计学意义;B组大鼠肝组织MDA含量显著低于A组（P=0.001）;B组肝脏坏死面积较A组显著减轻（P〈0.05）,汇管区小胆管数目较A组明显减少（P〈0.05）。结论非诺贝特可显著降低MDA含量,减少肝脏坏死面积以及小胆管增生。     

ABCA1与早发冠状动脉粥样硬化性心脏病

ATP结合盒转运蛋白A1（ATP binding cassette transport protein A1，ABCA1）是一种膜转运蛋白，广泛分布于体内各种组织内。ABCAl参与胆固醇的逆转运（reverse cholesterol transport，RCT），可减少动脉粥样硬化处巨噬细胞内胆固醇及泡沫细胞的生成，减缓动脉硬化发生发展。在与冠心病相关的ABCA1基因突变位点中，部分位点的突变能够使冠心病（CHD）发病年龄前移。现就ABCA1与早发CHD的研究进展做一综述。     

细胞胆固醇流出与功能评估

胆固醇对于细胞发挥正常功能是必不可少的成分.人体内除了肝脏细胞和部分肾上腺细胞能够降解胆固醇外,其他细胞都没有这种作用.研究表明,外周组织细胞内多余胆固醇需要通过胆固醇逆转运（RCT）至肝脏进行代谢排出.在这个复杂的过程中,作为RCT的第一步,外周组织细胞内胆固醇流出对于维持细胞水平的胆固醇平衡非常关键,进而影响动脉粥样硬化的发生发展进程.因此,了解细胞胆固醇流出功能比单纯测定血清胆固醇水平更有意义.细胞胆固醇流出有可能成为动脉粥样硬化性疾病研究的一个新方向和动脉粥样硬化干预的新靶点.     

HnRNP A2/B1及p21WAF1蛋白在非小细胞肺癌中表达及意义

目的探讨核内不均一核糖核蛋白A2/B1（hnRNP A2/B1）和p21WAF1蛋白在人非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达,并进行相关性分析。方法采用免疫组化S-P法检测53例NSCLC组织、40例癌旁组织、7例肺良性病变组织中hnRNPA2/B1和p21WAF1表达。结果 NSCLC组织中hnRNP A2/B1和p21WAF12种蛋白的阳性表达率分别为66.0%和45.2%,显著高于癌旁肺组织和肺良性病变肺组织,差异有统计学意义（P〈0.05）。它们均与分化程度、淋巴结转移有关（P〈0.05）,与组织类型、临床分期无关（P〉0.05）。两种蛋白在NSCLC表达呈显著负相关（P=0.001）。结论 hnRNP A2/B1可能通过下调p21WAF1的表达而缩短细胞周期,促进NSCLC的癌细胞增殖。     

绞股蓝抑制非酒精性脂肪性肝病兔肝脏脂质沉积的实验研究

目的：观察绞股蓝抑制非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）兔肝脏脂质沉积的作用,探讨其机理。方法：40只成年日本雄性大耳白兔随机分为绞股蓝干预组（A组）、辛伐他汀干预组（B组）、模型组（C组）、空白对照组（E组）,分别喂饲高脂饲料＋绞股蓝5 g/kg、高脂饲料＋辛伐他汀5 mg/kg、高脂饲料、标准饲料。实验周期9周。同步检测实验前和实验结束时兔血液甘油三酯（TG）、胆固醇（TCh）。制作肝组织匀浆,检测肝组织匀浆中TG含量。通过肝脏病理学了解NAFLD程度。结果：①TG、TCh水平：A组、B组、C组兔实验前后TG、TCh比较差异有显著性意义（P〈0.01）;A组、B组兔TG、TCh均低于C组,其差异有显著性意义（P〈0.01）;A组TG低于B组,其差异有显著性意义（P〈0.01）;B组TCh低于A组,其差异有显著性意义（P〈0.01）。②肝组织TG水平：A组、B组兔肝组织TG低于C组,其差异有显著性意义（P〈0.01）;A组又低于B组,其差异有显著性意义（P〈0.01）。③肝脏病理学：E组兔肝组织红润柔软,A、B、C组兔肝组织弥漫性肿大,边缘钝而厚,灰黄色,但A组较B、C组兔肝组织色泽红润、肿大程度轻。光镜下：E组兔肝组织结构和细胞形态正常,A组兔肝组织2/3以上细胞发生脂肪样变。B、C两组兔肝组织脂肪样变几乎为100%。结论：绞股蓝能够降低NAFLD兔肝脏脂质沉积量。     

胆固醇逆向转运与动脉粥样硬化的研究进展

血脂异常是动脉粥样硬化的一个重要危险因素。大量的流行病学研究和临床资料显示 ,血浆高密度脂蛋白胆固醇 (HDL -C)水平与动脉粥样硬化的发生呈明显负相关。基础研究发现 ,虽然HDL的抗动脉粥样硬化作用可涉及多种机制 ,如减轻脂蛋白的氧化等 ,但其最主要的作用机制在于参与胆固醇的逆向转运 (reversecholesteroltransport ,RCT)过程。体内肝外组织缺乏使类固醇激素降解为可排泄的胆酸形式的酶 ,除提供生理需要外 ,外周组织中多余的胆固醇均通过HDL运回肝脏代谢 ,这一生理过程称为RCT。RCT的初始步骤是细胞内的游离胆固醇和磷脂经A…     

TGF⁃β1 p38MAPK及BMP⁃7蛋白在肝多房棘球蚴病患者肝组织中的表达及意义

目的　检测肝多房棘球蚴病患者肝组织中转化生长因子⁃β1（transforming growth factor⁃β1, TGF⁃β1）、p38MAPK及骨形态发生蛋白⁃7（bone morphogenetic protein⁃7, BMP⁃7）表达水平,探讨其在肝多房棘球蚴病肝纤维化中的潜在作用。方法　以20例肝多房棘球蚴病患者为研究对象,分别采集距肝脏病灶0.5 cm内（A组）、距肝脏病灶0.5～1.5 cm（B组）肝组织及距肝脏病灶2 cm及以上的正常肝组织（C组）。肝组织标本分别行HE和Masson染色观察纤维化病理变化,采用Western blotting检测肝组织中TGF⁃β1、p38MAPK及BMP⁃7蛋白表达水平,分析TGF⁃β1、p38MAPK及BMP⁃7蛋白表达与肝纤维化的相关性。结果　HE染色结果显示,A组和B组肝组织中肝细胞结构排列紊乱、肝小叶结构有不同程度破坏,可见不同程度肝细胞变性、萎缩、坏死及纤维组织增生,并有嗜酸性粒细胞浸润;C组肝组织无异常病理改变,肝细胞结构形态正常、大小均匀,未见明显排列紊乱,肝小叶结构清晰,无或轻度细胞变性、坏死及炎性细胞浸润。Masson染色结果显示,A组和B组肝组织可见汇管区较多纤维结缔组织增生,出现不同程度小叶内纤维化;C组肝组织无明显异常病理改变。A、B、C组肝组织中TGF⁃β1（P < 0.001）、p38MAPK（P < 0.01）及BMP⁃7蛋白（P < 0.05）表达水平差异均有统计学意义,A组和B组TGF⁃β1、p38MAPK及BMP⁃7蛋白表达水平均显著高于C组（P均< 0.05）,B组TGF⁃β1、p38MAPK及BMP⁃7蛋白表达水平亦显著高于C组（P均< 0.05）。TGF⁃β1、p38MAPK及BMP⁃7蛋白表达水平均与肝纤维化程度呈正相关（r = 0.866、0.702、0.801,P均< 0.05）,不同纤维化程度肝组织中TGF⁃β1（F = 72.580,P < 0.01）、p38MAPK（[χ2] = 31.705,P < 0.01）及BMP⁃7蛋白（[χ2] = 48.388,P < 0.01）表达水平差异均有统计学意义。TGF⁃β1蛋白与p38MAPK、BMP⁃7蛋白表达水平均呈显著正相关（r = 0.607、0.702,P均 < 0.001）,BMP⁃7与p38MAPK蛋白表达水平亦呈显著正相关（r = 0.456,P < 0.001）。结论　TGF⁃β1、p38MAPK和BMP⁃7蛋白通过相互作用、共同介导了肝多房棘球蚴病肝纤维化发生。     

COX-2、CDKN2A在慢性乙型肝炎、肝硬化肝组织中的表达及意义

目的了解慢性乙型肝炎（CHB）、肝硬化肝组织中COX-2、CDKN2A的表达及其与肝脏损伤程度的关系。方法经免疫学及肝穿刺病理学证实为CHB患者46例、乙型肝炎肝硬化17例;正常肝组织10例（来自肝脏良性肿瘤手术切除的标本）。应用病理学判断肝组织的炎症及纤维化程度。采用免疫组化方法、半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫印迹分析法检测COX-2、CDKN2A在组织中的表达。结果 （1）CDKN2A mRNA第一、第二外显子在正常肝、CHB及肝硬化组织的表达水平及CDKN2A蛋白的半定量分析差异有统计学意义（F=28.75、24.86、26.43,P=0.036、0.041、0.038）。（2）正常肝、CHB及肝硬化组织中的COX-2、CDKN2A蛋白水平的表达差异有统计学意义（χ2=13.48、15.73,P=0.042、0.021）;肝组织炎症不同级别的COX-2、CDKN2A蛋白水平的表达差异具有统计学意义（χ2=22.45、23.67,P=0.038、0.027）;肝组织纤维化不同程度的COX-2、CDKN2A蛋白水平的表达差异具有统计学意义（χ2=24.16、22.53,P=0.024、0.037）。结论 COX-2、CDKN2A表达与CHB、肝硬化发生发展过程明显相关,COX-2、CDKN2A可作为反应HBV相关肝病进展程度的良好指标。     

超声弹性成像评价大鼠脂肪肝分级的应用价值

目的探讨实时超声弹性成像评价大鼠脂肪肝分级的应用价值。方法建立大鼠脂肪肝模型,分别于造模第6、8、10、12、14周随机选取大鼠进行超声弹性测量。在超声弹性成像模式下获取参照物与大鼠肝脏的应变比（B/A）,然后处死大鼠,取出肝脏,进行病理切片并进行脂肪肝的分级诊断。最后将所获取的大鼠肝脏弹性数据与病理显示的脂肪浸润程度分级进行相关性分析。结果实验最终获得40只大鼠的超声弹性数据和病理结果,不同脂肪肝病理分级的B/A两两比较差异均有统计学意义（P均〈0.05）;B/A与其病理分级间呈相关性（r=0.88,P〈0.01）。结论实时超声弹性成像为无创定量诊断脂肪肝提供了新方法,将在临床中有良好的应用前景。     

慢性乙型肝炎肝组织α-肌动蛋白基因扩增及蛋白表达分析的临床意义

目的研究慢性乙型肝炎（CHB）肝活检组织α-肌动蛋白（α-SMA）的表达,探讨α-SMA在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用及意义。方法通过RT-PCR对CHB活检组织的α-SMA进行半定量,结合肝脏组织学和免疫组化,对CHB患者的肝组织α-SMA的表达进行分析。结果在基因水平上,轻度CHB患者α-SMA/β-actin为0.126±0.032,与中度（0.323±0.099,P=0.001）和重度（0.410±0.103,P=0.000）比较差异有统计学意义;但在CHB患者中,中度和重度比较差异无统计学意义（P=0.097）。免疫组化显示：在CHB肝组织,α-SMA主要与坏死性炎症反应有关,贮脂细胞和肝窦内皮细胞表达α-SMA较强。CHB轻度组（G1/G2）,α-SMA表达于坏死性炎症反应部位;CHB较重组（G3/G4）,则表达于坏死区及其相邻的肝实质表达明显增加,且Kuppfer细胞明显增多。结论 HBV慢性感染状态下,α-SMA的表达上调,可能参与了与肝脏患者的CHB病理过程。     

干预载脂蛋白AⅠ表达的研究进展

大量的临床流行病学研究已经表明,高密度脂蛋白(HDL)水平与心血管疾病风险呈负相关。载脂蛋白AⅠ(Apo AⅠ)是HDL中的主要功能蛋白,其含量约占HDL的70%左右。寡脂的Apo AⅠ是ATP结合盒转运子A1(ABCA1)介导的巨噬细胞胆固醇流出的主要接受体,能够介导巨噬细胞中游离胆固醇的外流,启动胆固醇逆转运(RCT)过程,并在肝外组织清除过多胆固醇。大量的动物实验也已证实即使HDL保持正常水平,Apo AⅠ的缺乏也可导致动脉粥样硬化病变加重,过表达人Apo AⅠ基因抑制动脉粥样硬化早期脂纹的产生,因此调控Apo AⅠ基因表达对动脉粥样化及其他心血管疾病具有重要意义。本文拟就干预Apo AⅠ基因表达调控机制及诱导和抑制Apo AⅠ表达的相关因素进行综述。     

柔肝抑纤饮对血吸虫性肝纤维化小鼠肝组织病理形态的影响

目的：观察柔肝抑纤饮对肝纤维化小鼠肝组织病理形态的影响，并与秋水仙碱组进行比较。方法：将60只小白鼠随机分为5组：A组（空白对照组）、B组（感染未治疗组）、C组（吡喹酮组）、D组（柔肝抑纤饮组）、G组（秋水仙碱组）。除A组外，各组小鼠均感染血吸虫尾蚴，分别灌服相应药物，检测血清PCⅢ、HA，肝组织Hyp，行HE染色，光、电镜观察肝脏病理形态，肝组织胶原染色（VG），观察胶原纤维增生情况并测定百分比含量。结果：D组与G组小鼠在降低HA方面比较，差异无显著性意义（P〉0．05）；D组小鼠的PCⅢ、Hyp以及VG染色百分比含量显著降低，优于G组（P〈0.05）；D组与G组小鼠肝脏的病理表现明显轻于B组、c组，D组略优于G组。结论：柔肝抑纤饮能够明显抑制小鼠肝纤维化的形成，疗效不低于秋水仙碱。     

炎症调控胆固醇逆向转运的机制研究

胆固醇逆向转运(RCT)是促进细胞内胆固醇流出并转运至肝脏进行代谢的过程,其功能异常在动脉粥样硬化(As)的发生发展中起着关键作用。糖尿病、肥胖等慢性代谢性炎症疾病促进As的进展,而体内炎症、脂肪因子参与调控RCT是其重要的调控机制之一。本期专题收集的研究论文和综述探讨了糖基化终末产物Nε-羧甲基赖氨酸、核因子κB(NF-κB)、脂肪因子Visfatin等对细胞内胆固醇流出及介导RCT中关键蛋白三磷酸腺苷结合盒转运体A1、Sortilin、酯酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶(ACAT)等表达的影响,从不同角度阐释慢性代谢性炎症疾病调控RCT和心血管疾病发生发展的分子机制。     

171例慢性乙型肝炎病毒感染者临床与肝组织病理分析

目的:观察171例HBV DNA阳性的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者临床检测指标与肝脏组织病理的关系.方法:将171例患者分为4组,A组丙氨酸氨基转移酶(ALT)≤0.5 ×ULN(正常值上限),B组0.5 ×ULN＜ALT≤1×ULN,C组1×ULN＜ ALT≤2×ULN,D组2×ULN＜ ALT≤5 × ULN,观察各组患者肝脏炎症分级(G)和纤维化分期(S)的差异,进一步分析各组炎症分级和纤维化分期与其他肝脏生化学指标如天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血小板(PLT).及肝纤维化模型(APRI,以AST/PLT比值的统计量作为数字化模型)的关系.结果:A组25％患者肝组织炎症为G2,B组和C组分别有16.4％、49.2％患者肝组织炎症分级为G2～G3,不同ALT组间肝组织炎症分级的差异有显著性意义(P＜0.05),随着ALT水平升高,肝组织G2～G3检出比例增加;171例患者不同肝组织炎症分级组,球蛋白(Glo)、AST、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、PLT、APRI的差异均有显著性意义(P＜0.05);不同肝组织纤维化分期组,年龄、HBeAg状态、白蛋白(Alb)、AST、GGT、PLT、HBV DNA、APRI的差异均有显著性意义(P＜0.05),其中随着纤维化程度进展,AST、APRI值逐渐升高,Alb、PLT逐渐下降.结论:HBV DNA阳性的慢性HBV感染者,即使ALT正常,仍有不同程度的肝组织炎症和纤维化改变,需综合观察年龄、AST、GGT、APRI、HBeAg状态和HBV DNA水平,必要时建议患者行肝脏穿刺病理检查,以准确了解肝脏疾病进展.     

ATP结合盒转运蛋白A1与动脉粥样硬化

对Tangier病病因的研究,发现ATP结合盒转运蛋白A1(ATP binding cassette transport protein A1,ABCA1)在胆固醇逆向转运(reverse cholesterol transport,RCT)中起重要作用。ABCA1主要通过核受体PPARs途径发挥作用。ABCA1基因变异影响其功能。     

慢性乙型肝炎病毒携带者的病理与临床及预后分析

目的了解慢性HBV携带者的肝脏组织病理与临床的关系,探讨其临床转归和影响预后的因素。方法对90例行肝穿刺活组织检查的慢性HBV携带者的临床和病理资料进行分析并持续随访观察。结果（1）90例患者平均随访时间118（29～260）周。（2）15例（16．7％）患者肝穿刺检查示无肝脏组织学病变,75例患者有炎症病变,其中G1期54例（60．0％）,G2期21例（23．3％）；肝纤维化分期S1期42例（46．7％）,S2期21例（23．3％）。（3）肝纤维化分期S2期的患者平均年龄为（45．9±16．4）岁,与S0期和S1期患者平均年龄[分别是（38．9±13．6）岁和（42．7±14．8）岁]相比较,差异有统计学意义（P＜0．05）。（4）炎症分级为G0期患者的血清ALT水平[（13．4±3．6）U/L]与G1和G2期患者的血清ALT水平[分别为（27．3±4．3）U/L和（31．8±7．2）U/L]相比较,差异有统计学意义（P＜0．05）。（5）肝组织炎症分级与HBeAg阳性与否及血清HBV DNA定量水平无关（P＞0．05）,肝组织纤维化分期与血清HBV DNA定量水平无关（P＞0．05）。纤维化程度高者以HBeAg阴性者为多,差异有统计学意义（P＜0．05）。（6）超声定量检查脾脏长度和厚度在肝纤维化分期S2期与S0、S1期患者比较,差异有统计学意义（P＜0．05）。（7）随访中60例血清ALT持续正常（A组）,22例血清ALT短暂升高（B组）,8例血清ALT持续升高（C组）。肝穿刺活组织检查时肝纤维化分期S2期患者所占百分比在A组和B组低于C组患者,但S0期患者所占百分比高于C组患者,差异有统计学意义（P＜0．05）。（8）年龄、肝纤维化分期是进展为肝硬化的独立预测因素。结论多数慢性HBV携带者肝脏组织学有轻度炎症,不伴有或伴有轻度肝纤维化,且肝纤维化随病程发展有不同程度进展。随访研究表明这些携带者中部分在近期内需要抗病毒治疗。     

静脉充氧结合抗氧化剂“复苏”无心跳供肝的实验研究

目的：探讨利用静脉充氧“复苏”较长时间无心跳（热缺血30－60min)供体器官技术进行动物原位肝移植的可行性。方法：36头家猪随机分为供体和受体各3组，供体3组为A组（肝脏热缺血15min),B组（肝脏热缺血60min)和C组（肝脏热缺血60min＋冷保存期供氧），进行动物原位肝移植，观察移植动物的5d生存率，肝细胞损害，肝脏合成功能和全身炎症反应指标的变化。结果：B组供肝组在移植后3h内动物全部死亡，A，C组动物存活至预定观察时间；A，C组动物的肝细胞损害，肝脏合成功能和全身炎症反应指标的变化趋势类似，两组间差异无显著性。结论：冷保存期静脉系统供氧对较长时间热缺血损伤的供体肝脏有一定的保护和复苏作用，有可能成先心跳供肝进行肝移植的辅助方法。     

肝组织炎症对FibroScan诊断慢性乙型肝炎患者肝纤维化的影响

目的探讨肝组织学炎症对瞬时弹性扫描仪（FS）诊断慢性乙型肝炎患者肝纤维化的影响。方法应用FS对124名慢性乙型肝炎患者进行肝穿刺前肝脏弹性测量值（LSM）的测定,采用肝穿刺活组织病理诊断技术进行肝纤维化分期（S）和炎症分级（G）。对同一肝纤维化分期不同肝组织炎症分级组间LSM进行比较,并对各肝纤维化分期中LSM与肝组织炎症分级进行相关性分析。结果肝组织纤维化逐渐发展伴随肝炎症程度加重,如肝纤维化S1期患者中以G1为主（81.8%）,S2期以G2为主（54.2%）,S3期以G3为主（47.4%）,S4期以G3、G4为主（40%,33.4%）,S1～S4每一纤维化分期水平上,不同炎症分级LSM差异均具有统计学意义（P〈0.05）,且LSM与不同炎症分级之间均呈显著正相关（P〈0.01）。结论肝组织炎症程度是影响FS诊断的一个重要因素,炎症活动程度加重可使LSM增加。     

丝氨酸蛋白酶Omi/HtrA2的表达与大鼠肝功能衰老的关系

目的：观察促凋亡蛋白丝氨酸蛋白酶Omi/HtrA2在衰老大鼠心、肾、肝、肺和脾中的表达情况,研究大鼠肝中Omi/HtrA2的表达与肝功能衰老程度的相关性。方法选用3月龄、9月龄和22月龄雄性SD大鼠;多普勒超声方法检测动物心功能;血清生化方法检测动物的肝功能;免疫组化方法比较Omi/HtrA2在心、肝、肺、肾、脾中的表达情况;Western免疫印迹方法检测动物肝中Omi/HtrA2表达情况。结果（1）在心、肾、肝和肺中,Omi/HtrA2表达量都很高,且蛋白的表达位置有一定的细胞特异性;与壮年组相比,衰老组大鼠的肝中Omi/HtrA2的表达量显著下降（P＜0.05）,而在心、肾、肺组织中Omi/HtrA2的表达量也有下降的趋势,但差异无统计学意义（P＞0.05）;（2）与壮年组相比,衰老组动物肝功能指标：天冬氨酸氨基转移酶（AST）、血清铁（SI）、白蛋白（ALB）、白蛋白与球蛋白比值（A/G）都发生显著改变（P＜0.05）;衰老组动物的心功能指标：左室短轴缩短率（FS）和左室射血分数（LVEF）都有下降趋势,但差异无统计学意义（P＞0.05）;（3）与壮年组相比,中年组和衰老组大鼠的肝中Omi/HtrA2的表达量显著下降（ P＜0.05）,随着年龄增加肝功能逐渐降低,Omi/HtrA2的表达量与ALB和A/G呈显著正相关（P＜0.05）。结论大鼠肝中Omi/HtrA2的表达量与肝功能呈正相关。