白介素—10对内毒素诱导肺泡巨噬细胞核因子—kB活化及肿瘤坏死因子释放的调节

目的 探讨白介素－10对内毒素（LPS）诱导肺泡巨噬细胞核因子－kB(NF-kB）活伦及肿瘤坏死因子α（TNF-α)基因表达的调节,为临床运用白介素－10提供理论依据。方法 用支气管肺泡灌洗法收集肺巨噬细胞（PAM）进行培养,分正常对照组、LPS 、IL－10＋LPS组。用凝胶电泳迁移率改变分析（EMSA）法和ELIS法分别检测核提取物中NF－kB活性和细胞培养上清中TNF－α含量。结果 LPS组NF－kB活性和TNF－α含量在刺激后0.5-4h明显高于正常对照组;IL－10＋LPS组NF-kB活性和TNF-α含量均显著低于LPS组。结论 LBS诱导PAM的NF－kB活化,导致TNF－α基因表达增强;白介素－10可抑制NF－kB活化而减少TNF－α的释放。     

一氧化氮对内毒素刺激肺泡巨噬细胞核因子-κB的影响

目的：探讨一氧化氮（NO）在内毒素刺激肺泡巨噬细胞（PAM）对核因子－kB(NF-kB)活性的影响。方法：用支气管肺泡灌洗法收集PAM进行培养，分正常对照组、脂多糖（LPS）组和NO＋LPS组。用凝胶电泳迁移率改变分析（EMSA）法和酶联免疫吸附（ELISA）法分别检测核提取物中NF－kB活性和细胞培养上清中肿瘤坏死因子－α（TNF-α）含量。结果：LPS组NF－kB活性和TNF－α含量在刺激后1小时明显高于正常对照组；NO＋LPS组NF－kB活性和TNF－α含量在刺激后1小时均显著低于LPS组。结论：LPS诱导PAM的NF－kB活化，导致TNF－α大量释放；NO可抑制NF－kB活化而减少TNF－α的基因表达。     

白介素10和一氧化氮对内毒素诱导肺泡巨噬细胞核因子κB活化及肿瘤坏死因子释放的调节

目的：探讨白介素-10和外源性一氧化氮(NO)对内毒素（LPS）诱导肺泡巨噬细胞(PAM)核因子-κB(NF-κB)活化及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）基因表达的调节,为临床运用提供理论依据。方法：用支气管肺泡灌洗法收集PAM进行培养,分为正常对照组、LPS组、IL-10+LPS组和NO+LPS组。用凝胶电泳迁移率改变分析（EMSA）法和酶联免疫吸附(ELISA)法分别检测核提取物中NF-κB活性和细胞培养上清中TNF-α含量。结果：LPS组NFκB活性和TNF-α含量在刺激后3小时显著高于正常对照组;IL-10+LPS组和NO+LPS组NF-κB活性和TNF-α含量均显著低于LPS组。结论：LPS诱导PAM的NF-κB活化,导致TNFα基因表达增强;白介素-10和外源性NO可抑制NF-κB活化而减少TNF-α的释放。     

一氧化氮和白介素—10抑制核因子—kB活化的实验研究

目的探讨一氧化氮(NO)和白介素-10(IL-10)对内毒素(LPS)诱导的肺泡巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活化的调节,为临床运用提供理论依据.方法用支气管肺泡灌洗法收集肺泡巨噬细胞(PAM)进行培养,分正常对照组、LPS组、NO+LPS组和IL-10+LPS组.用凝胶电泳迁移率改变分析(EMSA)法和ELISA法分别检测提取物中NF-κB活性和细胞培养上清中TNF-α含量.结果LPS组NF-κB活性和TNF-α含量在刺激后0.5～4h显著高于正常对照组(P＜0.01);NO+LPS组和IL-10+LPS组的NF-κB活性和TNF-α含量与LPS组相比均明显下降,尤在刺激后1h最显著(P＜0.01).结论LPS诱导PAM的NF-κB活化,导致TNF-α基因表达增强;NO和IL-10可抑制NF-κB活化,减少TNF-α的释放,缓解LPS诱导的ALI.     

白介素-10对内毒素诱导肺泡巨噬细胞核因子-κB活化及肿瘤坏死因子释放的调节

目的 探讨白介素-10对内毒素(LPS)诱导肺泡巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活化及肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达的调节,为临床运用白介素-10提供理论依据。方法 用支气管肺泡灌洗法收集肺泡巨噬细胞(PAM)进行培养,分正常对照组、LPS组、IL-10＋LPS组。用凝胶电泳迁移率改变分析(EMSA)法和ELISA法分别检测核提取物中NF-κB活性和细胞培养上清中TNF-α含量。结果 LPS组NF-κB活性和TNF-α含量在刺激后0.5～4h明显高于正常对照组;IL-10＋LPS组NF-κB活性和TNF-α含量均显著低于LPS组。结论 LPS诱导PAM的NF-κB活化,导致TNF-α基因表达增强;白介素-10可抑制NF-κB活化而减少TNF-α的释放。     

一氧化氮和白介素-10抑制核因子-κB活化的实验研究

目的探讨一氧化氮(NO)和白介素-10(IL-10)对内毒素(LPS)诱导的肺泡巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活化的调节,为临床运用提供理论依据.方法用支气管肺泡灌洗法收集肺泡巨噬细胞(PAM)进行培养,分正常对照组、LPS组、NO+LPS组和IL-10+LPS组.用凝胶电泳迁移率改变分析(EMSA)法和ELISA法分别检测提取物中NF-κB活性和细胞培养上清中TNF-α含量.结果 LPS组NF-κB活性和TNF-α含量在刺激后0.5～4 h显著高于正常对照组(P＜0.01);NO+LPS组和IL-10+LPS组的NF-κB活性和TNF-α含量与LPS组相比均明显下降,尤在刺激后1 h最显著(P＜0.01).结论 LPS诱导PAM的NF-κB活化,导致TNF-α基因表达增强;NO和IL-10可抑制NF-κB活化,减少TNF-α的释放,缓解LPS诱导的ALI.     

山莨菪碱对创伤性肺损伤激酶IKK的影响及意义

目的：探讨激酶IKK－β在创伤性急性肺损伤（ALI）病理变化中可能的作用机制及山莨菪碱（654－2）的影响效应。方法：复制创伤性ALI家兔模型，实验动物随机分为正常对照组，创伤模型组、654－2治疗组。用原位杂交方法检测肺组织中IKK－β的mRNA表达，用凝胶电泳迁移改变分析？（EMSA）法检测肺泡巨噬细胞（PAM）中核因子（NF）－kB的活性，用酶联免疫吸附（ELISA）法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子α（TNF－α）、白细胞介素6（IL－6）的含量。同时对各组动物动脉血气，肺湿／干（W／D）比值及肺组织的病理变化进行检测。结果：654－2治疗能明显改善创伤性ALI动物的血气，减少肺W／D值，减轻肺组织的损伤程度；能明显抑制创伤性ALI家兔肺组织中IKK－β的mRNA表达和PAM中NK-kB活性降低BALF中TNF－α、IL－6含量，结论：IKK－β/NF-kB/TNF－α效应在创伤性ALI的炎症反应中发挥重要作用，654－2可通过抑制IKK－β的激活，阻止NF－kB活化，缓解TNF－α介导的组织损伤。     

核因子-κB在小鼠急性肺损伤发病中的作用及治疗干预研究

目的　探讨核因子 (NF) -κB在内毒素 (LPS)诱导的急性肺损伤 (ALI)小鼠发病中的作用以及地塞米松 (Dex)的干预作用。方法　腹腔内注射LPS诱导小鼠ALI模型 ,随机分为LPS组、LPS +Dex组 ,LPS注射后 0、1、3、6、12h测定肺湿重 干重比值 (W D)、肺组织NF -κB活性、肺组织匀浆中肿瘤坏死因子 (TNF)α及白细胞介素 (IL) - 10浓度 ,检测mRNA表达 ,并观察肺组织光镜、电镜病理改变。结果　LPS注射后 ,W D明显增高 ,3h开始明显升高 ,6h达到高峰 ( 4 82± 0 10 ) ,显著高于注射前 ( 3 6 7± 1 0 4,P <0 0 5 ) ;肺组织核蛋白NF -κB活性 1h开始明显升高 ,6h达到峰值 ( 40 5 7± 6 2 4) ,显著高于注射前( 44 8± 30 9,P <0 0 5 ) ;肺组织匀浆TNF -α和IL - 10浓度分别在注射后 6h和 12h升高最明显 ,分别为 ( 197 1± 5 2 4)pg mL和 ( 16 4 9± 39 7)pg mL ,显著高于注射前。地塞米松明显抑制NF -κB活化 ,肺组织匀浆中TNF -α、IL - 10及其mRNA表达明显下降。肺组织病理显示LPS可导致肺泡出血、水肿 ,大量炎症细胞浸润 ,电镜下见Ⅰ型肺泡上皮细胞断裂 ,Ⅱ型肺泡上皮细胞变性 ,地塞米松可明显改善肺损伤。结论　LPS导致肺组织NF -κB的活化 ,介导炎症介质大量表达 ,参与ALI发生 ,地塞米松通过抑制炎症反     

核因子-κB在小鼠急性肺损伤中的作用

目的　探讨核因子 (NF) κB在内毒素 (LPS)诱导的急性肺损伤小鼠发病中的作用。方法　腹腔内注射LPS诱导小鼠急性肺损伤模型。LPS注射后 0、 1、 3、 6、 12测定肺湿重 /干重比值 (W/D) ,迁移率改变电泳法检测肺组织NF κB活性 ,同时酶联免疫吸附法测定肺组织匀浆中肿瘤坏死因子 (TNF) α、白介素 (IL) 10浓度 ,RT PCR检测mRNA表达。结果　LPS注射后 ,W/D比值明显增高 ,6h升高最明显 (4 82± 0 10 ) ,显著高于LPS注射前 (3 6 7± 1 0 4 ,P <0 0 5 )。LPS注射后肺组织核蛋白NF κB活性明显增强 ,6h达到峰值 (40 5 7± 6 2 4 ) ,显著高于LPS注射前 (44 8± 30 9,P <0 0 5 )。肺组织匀浆TNF α和IL 10浓度分别在LPS注射后 6h和 12h升高最明显 ,分别为 (197 1± 5 2 4 )pg/ml和 (6 4 9± 39 7)pg/ml,显著高于LPS注射前 [分别为 (6 1 2± 10 7)pg/ml和 (71 6± 15 9)pg/ml]。与LPS注射前比较 ,LPS注射后 3～ 12h ,肺组织匀浆TNF α和IL 10mRNA表达显著增高。肺组织病理显示肺泡出血、水肿、大量炎症细胞浸润 ,电镜下见Ⅰ型肺泡上皮细胞断裂 ,Ⅱ型肺泡上皮细胞变性。结论　LPS导致肺组织NF κB的活化 ,介导炎症介质大量表达 ,参与急性肺损伤发生     

重症急性胰腺炎核因子-κB及炎症介质与肺损伤的实验研究

目的：观察核因子－κB（NF－κB）在大鼠重症急性胰腺炎（SAP）时动态表达，探讨NF－κB在急性胰腺炎炎症反应中的信号传导过程以及NF－κB的活化与SAP时肺损伤的关系。方法：108只SD大鼠随机分为假手术组（SO组）、重症急性胰腺炎组（ASP组）及 症急性胰腺炎地塞米松处理组（DEX组），采用免疫组织化学的方法检测脯NF－κB活性，同时测定血淀粉酶（AMS）及肿瘤坏死因子－α（TNF-α）和白细胞介素－6（IL－6）水平，并于光镜下观察胰腺及肺脏病理改变。结果：SAP组术后1h NF-κB开始表达，TNF－α和IL－6开始升高，3h达高水平,6h后下降。地塞米松能明显下调NF－κB的表达，抑制TNF-α和IL－6的产生，并能减轻对肺组织的损伤程度，使SAP病情明显缓解。结论：信号转录因子NF－κB参与了大鼠SAP时肺组织的炎症反应，地塞米松发挥了明显的抗炎作用，减轻了SAP时肺组织损伤，这与其对NF－κB表达的抑制及细胞因子的调节作用密切相关。     

卡巴胆碱对肠缺血-再灌注大鼠血浆肿瘤坏死因子-α和白介素-10含量的影响

目的：研究拟胆碱药卡巴胆碱对肠缺血－再灌注大鼠血浆肿瘤坏死因子－α（TNF－α）、白介素－10（IL－10）和皮质醇含量的影响及其意义。方法：成年雄性Wistar大鼠，戊巴比妥钠腹腔麻醉，用动脉夹阻断肠系膜上动脉血流(SMAO），1h后松夹恢复灌流。随机数字表法将大量分为预防、治疗和对照3组，预防组和治疗组分别在夹闭后30min和再灌注后30min肌肉注射卡巴胆碱（0.1mg/kg)，对照组注射等量生理盐水。各组分别于未夹闭前（0h)和夹闭后1h,2.5h和6h测定血浆中TNF－α、IL－10和皮质醇含量。结果：大鼠缺血－再灌注损伤后，血浆TNF－α、IL－10和皮质醇含量均明显升高。肌肉注射卡巴胆碱后，治疗组及预防组血浆TNF－α含量在各时间点均明显低于对照组（P均＜0．01），同时预防组TNF－α含量在1h和6h点低于治疗组（P均＜0．05）；3组动物之间血浆IL－10和皮质醇含量在夹闭后各时间点均无明显差异。结论：卡巴胆碱能抑制肠缺血－再灌注大鼠体内促炎细胞因子的产生，而对抗炎细胞因子的释放影响轻微，有助于减轻缺血－再灌注损伤的全身性炎症反应。     

脑梗死患者恢复期脑组织血浆肿瘤坏死因子—α白介素—1β含量变化

目的：观察急性脑梗死患血浆肿瘤坏死因子－α（TNF－α），白介素－1β（IL－1β）含量变化。方法：采用双抗体夹心（ELISA）法测量44例急性脑梗死患急性期，恢复期血浆TNFα，IL－β含量，并与40例正常对照组相比较。结果：急性期脑梗死患血浆TNF－α，IL－1β含量较恢复及其对照组均显增高，P＜0．01，恢复期TNF-α，IL-β含量虽明显下降，但较对照组为高，P＜0．01，二含量变化的关系与病情严重程度相一致。结论：急性脑梗死患存在神经－炎症／免疫－内分泌功能紊乱，两可能参与了脑梗死急性期的炎症反应及再灌注损伤。     

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对失血性休克诱导急性肺损伤小鼠器官组织核转录因子-κB活化的影响

目的探讨特异性抗粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）的抗体（22E9）和地塞米松（DEX）对失血性休克诱导急性肺损伤（ALI）小鼠肾、肝、心、肺组织核转录因子-κB（NF-κB）活化的影响，为失血性休克继发的多器官损伤防治提供理论依据。方法C57BL／6雄性小鼠20只，用心脏穿刺致失血性休克诱导ALI小鼠模型。制模前经鼻分别滴入磷酸盐缓冲液（PBS，PCG组）、PBS＋1μg 22E9（HS1组）、PBS＋10pg22E9（HS10组）、PBS＋20μgDEX（DEX组）进行干预，阴性空白对照组（NCG组）经鼻滴入PBS后仅予心脏穿刺。休克4h时采用凝胶电泳迁移率改变分析法（EMSA）检测肺、心、肝、肾组织NF—κB活性；用酶联免疫吸附法（ELISA）检测肺、心组织肿瘤坏死因子-α（TNF—α）含量。结果与PCG组比较，高、低剂量22E9均可显著抑制肝、心、肺组织NF—κB活性，且低剂量的抑制效果比高剂量明显，同时可增加肾组织NF—κB活性（P均〈0．05）。DEX可增强肾、肝组织NF—κB活性（P均〈0．05），但与PCG组比较，DEX对肾、肝、肺组织NF—κB活性未见明显的抑制作用。22E9干预可显著抑制心、肺组织TNF—α含量的升高，DEX仅能有效抑制心组织TNF—α含量（P均〈0．05）。结论22E9能显著抑制失血性休克诱导ALI小鼠多器官组织NF-κB的活化及炎症反应，减少失血性休克引起的多器官损伤；DEX的抑制作用不显著。     

醒脑静注射液对内毒素诱导大鼠肺泡巨噬细胞核转录因子-κB激活和细胞因子产生的影响

目的 探讨内毒素诱导大鼠肺泡巨噬细胞（AMs）核转录因子-κB（NF—κB）的激活和细胞因子的释放以及醒脑静注射液（XNJ）的干预作用。方法 通过支气管肺泡灌洗获取大鼠AMs。先用XNJ（10ml／L）孵育AMs2h后，加入内毒素（10μg／L）分别刺激2、4和6h。用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测AMs中肿瘤坏死因子-α（TNF—α）基因表达水平；用酶联免疫吸附法（ELISA）检测培养上清液中TNF—α和白细胞介素-8（IL-8）含量；蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测AMs中NF—κB抑制蛋白-α（κB-a）、磷酸化κB-α（IκB—α）和NF—κB的水平变化。结果内毒素能增加AMs中TNF—κ基因表达水平和培养上清液中TNF—α、IL-8的水平，同时能促进IκB—α降解和NF—κB激活。与内毒素组比较，XNJ能减少AMs中TNF—α基因表达水平和培养上清液中TNF—α和IL-8的水平；抑制内毒素诱导的IκB-α降解和NF—κB激活（P均〈0．05）。结论 XNJ通过抑制AMs中IκB-α的降解，减少了NF—κB的激活，减少了内毒素诱导大鼠AMs细胞因子的产生。     

全身炎症反应综合征患者致炎因子与抗炎因子的变化及相关性研究

目的 观察全身炎症反应综合征（SIRS）患者血浆中致炎因子肿瘤坏死因子－α（TNF-α）、白介素－6（IL－6）和抗炎因子转化细胞生长因子－β（TGF-β）、白介素－10（IL－10）的变化规律及其相关性。方法 符合SIRS诊断48例，分别在入院后第1、8小时和第2、3、4天清晨空腹抽肘静脉血3mL，测定TNF－α、IL－6、TGF－β和IL－10，并设对照组。结果 TNF－α和IL－6各监测点均比对照组显著升高（P＜0．05，P＜0．01），TGF－β和IL－10入院后第小时与对照组比较无显著差异，第8小时以后各监测点均比对照组显著升高（P＜0．05，P＜0．01），TNF－α和IL－6峰值出现早于TGF－β和IL－10，致炎因子与抗炎因子具有显著的相关性。结论 拮抗炎症因子的同时提高机体免疫功能，达到致炎因子与抗炎因子的平衡是治疗SIRS的新思路。     

急性脑血管病患者血清和脑脊液肿瘤坏死因子、白介素及免疫球蛋白水平与免疫功能关系的临床研究

目的：探讨肿瘤坏死因子－α（TNF-α）、白介素－2（IL－2）和免疫球蛋白（Ig）与急性脑血管病（ACVD）的关系。方法：采用放射免疫分析法 测定了80例ACVD患者血清及60例ACVD患者脑脊液（CSF）中TNF－α、IL-2和1g含量，并与30例正常对照组比较。结果：ACVD患者血清和CSF中TNF－α、IL－2和Ig水平明显高于对照组（P均＜0．01），以CSF中TNF－α和1g改变最明显（P均＜0．001），且与病情程度明显相关（P＜0．01）。 治疗后TNF－α、IL－2和1g水平随病情好转、血－脑脊液屏障的修复逐渐趋于正常。结论：ACVD发病过程中存在TNF－α、IL－2介导的免疫反应，ACVD患者血－脑脊液障碍功能不同程度受损。     

乳腺癌患者一氧化氮、肿瘤坏死因子—α水平变化特点及临床意义

目的：探讨乳腺癌患者一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子－α（TNF－α）水平变化特点及临床意义。方法：利用硝酸还原酶法对47例乳腺癌患者进行血清NO测定,利用双抗体夹心ELISA法进行TNF－α的测定。结果：乳腺癌患者血清NO水平显著高于正常对照组及乳腺小叶增生组（P＜0．01）;血浆TNF－α水平亦显著高于正常对照组及乳腺小时增生组（P＜0．01）;乳腺小叶增生组NO、TNF－α水平与对照组组相比无显著差别（P＞0．05）。结论：检测结果提示NO参与了抗肿瘤免疫,并可能由TNF－α所诱导。检测NO、TNF－α水平有利于乳腺癌的鉴别诊断,对乳腺癌的检测、随访和预后评估有帮助。     

白介素-10治疗急性胰腺炎的实验研究

目的：研究白介素－10（IL－10）对急性胰腺炎（AP）病理，生理方面的影响。方法：Wistar大鼠结扎胆胰管汇合末端制作AP模型，随机分为AP对照组及IL－10治疗组（AP加IL－10），治疗组在模型制作后1．5小时腹腔内注入IL－10蛋白10000U，1次／3h，共3次，AP组则注射等量生理盐水，分别于第3，15，27小时断尾取血，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子－α（TNF－α）及血清淀粉酶水平，于27小时断头杀鼠切取胰腺组织，固定切片后以双盲法测出2组的胰腺组织病理学分级，结果：给予外源性IL－10后不同时间点血清TNF－α和淀粉酶均较相应AP组降低，以15小时最为显著，IL－10治疗组胰腺组织各项病理学评分均较AP组有所下降，除胰腺组织水肿外，炎症，空泡样变性及坏死均有显著性差异（P均＜0．05）。结论：IL－10能显著性降低AP的病情严重度，对AP的治疗可能有潜在的临床应用价值。     

脂多糖对中性粒细胞核转录因子-κB活性的影响

目的：探讨在脂多糖（LPS）刺激下,中性粒细胞核转录因子-κB（NF-κB）活性变化及其抑制因子（IκBα）的影响。方法：离体培养人中性粒细胞,分为来普霉素B（LMB）干预组（A组）、LPS刺激组（B组）和LPM＋LPS组（C组）。各组分别在刺激后0、15、60、120min,用NF-κBp65试剂盒检测细胞核NF-κB活性,用Western-blot检测细胞核、浆中IκBα含量。结果：A组中各时相点NF-κB活性无明显变化;同一时相点细胞核、浆之间,以及不同时相点细胞核之间、细胞浆之间IκBα含量无明显变化。B组LPS刺激后,NF-κB活性较0点时明显增强;细胞核、浆中各时相点IκBα较未刺激时显著降低;细胞核、浆中呈现一致性变化。C组NF-κB活性于60min时点后,较B组同时相点明显受抑制;胞浆中IκBα于60min时较B组明显减少,而核中IκBα于60min后较B组明显增加。结论：NF-κB活性与核中IκBα含量呈负相关;IκBα在中性粒细胞存在核浆穿梭,通过抑制IκBα核浆穿梭,可显著降低NF-κB活性。     

急性脑梗塞患者TNF—α、IL—6与肺部感染的关系及护理对策

目的 探讨急性脑梗塞（ACI）合并脑部感染与细胞免疫因子白介素－6（IL－6）、肿瘤坏死因子（TNF－α）的关系及其护理对策。方法 151例急性脑梗塞患者,其中肺部感染组占93例,非感染组58例。采用RIA放射免疫方法对两组综合治疗后血中IL－6、TNF－α水平进行检测。结果 肺部感染组的TNF－α、IL－6水平显著高于非感染组（P＜0．001）。结论 TNF－α、IL－6升高水平与肺部感染密切相关,而TNF－α、IL－6水平升高是脑损伤的关键环节。如能采取有效的护理对策,预防和控制肺部感染,将有利于提高脑梗塞的疗效。