雷公藤内酯醇对人淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察雷公藤内酯醇对入淋巴瘤细胞系Raji细胞体外增殖和细胞凋亡的影响。方法：实验于2005—04／11在华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所实验室完成。①入淋巴瘤细胞系Raji（中国科学院上海生物细胞研究所）。雷公藤内酯醇（Sigma公司）分子式C20H25O6，相对分子量360．4，纯度99％，用二甲基亚砜稀释，微孔滤膜（0．22μm）除菌，等量分装，-20℃保存，使用前解冻。②将Raji细胞放入RPMI—1640培养基中常规培养，每48h换液传代1次。实验前24h半量换液，取处于对数生长期、细胞活性大于98％的细胞进行实验。③采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测雷公藤内酯醇对Raji细胞增殖的影响。将Raji细胞按2&;#215;10。L“接种于96孔培养板，200μl／孔。实验共分5组：雷公藤内酯醇12．5，25，50，100nmol/L浓度组分别加入适量雷公藤内酯醇使其终浓度为12．5，25，50，100nmol/L，空白对照组未加入雷公藤内酯醇，5个平行孔／组。分别于培养12，24，48，72h后每孔加入5g／L的四甲基偶氮唑蓝20μL继续培养。用全自动酶标仪测定490nm波长处吸光度值。细胞增殖抑制率（％）=（1-雷公藤内酯醇各浓度组吸光度值／空白对照组吸光度值）&;#215;100％。④采用Annexin V／PI双标流式细胞术检测雷公藤内酯醇对Rafi细胞凋亡的影响。将Rajj细胞按2&;#215;10^8L^-1接种于6孔培养板，实验分组同上，分别于孵育24，48h后收集细胞，调整各组细胞数为2&;#215;10^8L^-1。取195μL细胞悬液，加入异硫氰酸荧光素标记的Annexin V室温孵育，洗涤后加入碘化丙锭5μL，流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：①雷公藤内酯醇对Raji细胞增殖的影响：不同浓度的雷公藤内酯醇对人淋巴瘤细胞系Raji的增殖均具有抑制作用，且呈时效和量效关系。与空白对照组比较，培养12，24，48，72h后雷公藤内酯醇12．5，25，50，100nmol／L浓度组的细胞增殖抑制率均明显升高（f=18．314～77．366，P均〈0．01），培养24h时的半数抑制浓度为43．06nmol／L。②雷公藤内酯醇对Raji细胞凋亡的影响：经雷公藤内酯醇作用后，随着药物浓度的增加和作用时间的延长，Raji细胞凋亡率逐渐增高，且呈时效和量效关系。与空白对照组比较，培养24，48h后雷公藤内酯醇12．5，25，50，100nmol／L浓度组的细胞凋亡率均明显升高（f=-23．657～-37．895，P均〈0．05）。结论：雷公藤内酯醇对人淋巴瘤细胞系Raji细胞具有明显的生长抑制作用及诱导凋亡发生，且存在浓度和时间依赖关系。提示雷公藤内酯醇可能通过诱导细胞凋亡来有效抑制人淋巴瘤细胞的增殖，从而有望为治疗淋巴瘤提供新的策略。     

淋巴瘤细胞Raji细胞血管内皮细胞生长因子表达及基质胶中ECV304细胞血管形成与雷公藤内酯醇的干预

目的:观察雷公藤内酯醇对淋巴瘤细胞系Raji细胞血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达、合成分泌以及对基质胶中ECV304细胞血管形成的影响.方法:实验于2005-08/2006-02在华中科技大学同济医学院公共卫生学院分子生物学实验室完成.①MTT法检测3.125,6.25,12.5,25,50nmol/L的雷公藤内酯醇在作用12,24,36,48,60,72h对Raji细胞增殖的影响.②RT-PCR法检测12.5,25,50 nmol/L雷公藤内酯醇处理Raji细胞24 h后,细胞VEGFmRNA表达的变化.③ELISA法检测25 nmol4/L雷公藤内酯醇处理Raji细胞24 h后,细胞培养上清VEGF的分泌鼍.④采用血管形成实验检测雷公藤内酯醇对ECV304细胞在基质胶中血管形成的影响.结果:①雷公藤内酯醇以时间和剂量依赖方式抑制Raji细胞增殖,24 h半数抑制浓度为25 nmol/L.②Raji细胞内VEGFmRNA主要为VEGF 165和VEGF121,雷公藤内酯醇明显抑制其表达,呈剂量依赖方式.③雷公藤内酯醇明显抑制gaji细胞VEGF的分泌量(P＜0.01).④Raji细胞培养上清、10 μg/L VEGF处理的Raji细胞培养上清可促进ECV304细胞在基质胶中形成血管,而25 nmol/L雷公藤内酯醇处理的Raji细胞培养上清加入基质胶则未见血管形成.结论:雷公藤内酯醇以时间和剂量依赖性方式抑制淋巴瘤细胞增殖、VEGF的表达分泌及血管形成.     

肿瘤坏死因子α和雷公藤内酯醇调节Raji细胞内VEGF的表达及基质胶中ECV304细胞血管形成作用的研究

为了探讨肿瘤坏死因子（TNF—α）和雷公藤内酯醇作用Raji细胞VEGF（血管内皮细胞生长因子）的表达及VEGF与ECV血管形成的关系，采用MTT法检测雷公藤内酯醇抑制Raji细胞增殖的影响；用ELISA法对Raji细胞上清的VEGF定量；用基质胶上的内皮细胞网络形成检测ECV30d（人类脐静脉内皮细胞起源的细胞系）血管生成；用RT-PCR检测VEGF mRNA含量。结果表明：雷公藤内酯醇对Raji细胞增殖抑制作用呈时间和剂量依赖方式，最适合作用时间为24小时，24小时半数抑制浓度IC50为25nmol／L；Raji细胞上清VEGF的含量在TNF-α组明显高于空白对照组，雷公藤内酯醇处理组则明显低于空白对照组，两者比较有极显著差异（P〈0．01）；Raji细胞内VEGF mRNA主要为VEGF165和VEGF121，其含量在TNF—α处理组与空白对照组比较有增加，而雷公藤内酯醇抑制VEGF mRNA表达，并呈剂量依赖方式；Raji细胞上清、VEGF（10ng／ml）和TNF—α（10ng／ml）处理的Raji细胞上清在基质胶中作用ECV30d细胞后可促进血管形成，而雷公藤内酯醇（25nmol／L）处理的Raji细胞上清和1640培养基作为的对照组加入基质胶中ECV304细胞未见血管形成。结论：在TNF-α、雷公藤内酯醇作用Raji细胞过程中，TNF-α促进VEGF的表达而雷公藤内酯醇则抑制其表达；TNF-α处理的Raji细胞上清在基质胶中促进血管形成，而雷公藤内酯醇则抑制血管形成。     

雷公藤内酯醇对硼替佐米诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡的影响

本研究旨在探讨雷公藤内酯醇对硼替佐米诱导骨髓瘤细胞株NCI-H929(H929)凋亡的影响。通过MTT法检测不同浓度的雷公藤内酯和硼替佐米单用及联用对H929细胞的增殖抑制作用;采用Annexin Ⅴ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率。结果表明:雷公藤内酯醇(10-100 ng/ml)和硼替佐米(10-100 nmol/L)单用和联用均可抑制H929细胞增殖,呈浓度依赖性,雷公藤内酯醇和硼替佐米联用组的细胞凋亡率明显高于单用硼替佐米组。经非抑制浓度的雷公藤内酯醇(10 ng/ml)联合硼替佐米(40 nmol/L)处理H929细胞24 h后的凋亡率明显高于单用硼替佐米组(P<0.05)。结论:雷公藤内酯醇能够显著增强硼替佐米对多发性骨髓瘤细胞的促凋亡活性。     

^131 I-chTNT 诱导淋巴瘤 Raji 细胞凋亡的实验研究

目的 探讨^131 I-chTNT 对淋巴瘤细胞的抑制作用,为淋巴瘤的临床治疗提供新策略。方法 体外培养人淋巴瘤细胞 Raji 细胞系,应用^131 I-chTNT、^131 I 以及生理盐水处理淋巴瘤 Raji 细胞,FCM 技术检测细胞凋亡的变化。结果 ^131 I-chTNT 治疗组与131 I 治疗组和空白对照组相比,FCM 显示凋亡率明显增高。结论 ^131 I-chTNT 可诱导淋巴瘤细胞凋亡、抑制淋巴瘤细胞增殖。     

阿托伐醌诱导非霍奇金淋巴瘤Raji细胞周期阻滞和细胞凋亡

目的：探讨阿托伐醌对非霍奇金淋巴瘤Raji细胞周期与细胞凋亡的影响与作用机制。方法：分别采用MTT比色法和锥虫蓝染色法检测阿托伐醌对Raji细胞增殖的作用;PI染色后采用流式细胞术检测细胞周期分布;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;DCFH-DA探针标记检测细胞内活性氧水平变化;Western blot法检测细胞周期和凋亡相关分子的蛋白表达。结果：不同浓度阿托伐醌（5-40μmol/L）剂量依赖性抑制Raji细胞增殖（r=0.951）。阿托伐醌（20和30μmol/L）处理Raji细胞24、48和72 h后均明显抑制细胞增殖,与空白对照组相比具有统计学差异（P<0.01,P<0.001,P<0.001）。阿托伐醌（20和30μmol/L）处理Raji细胞24 h后显著诱导Raji细胞周期G1期阻滞（P<0.01,P<0.001）,同样处理Raji细胞48 h后则显著诱导细胞凋亡（P<0.01）。阿托伐醌（20和30μmol/L）处理Raji细胞24 h后,显著诱导p-JAK2及p-STAT3(Y705)蛋白表达下调（PP<0.001,...     

雷公藤内酯醇诱导T淋巴细胞凋亡时Fas/FasL的表达

目的 检测Fas/FasL在雷公藤内酯醇诱导的T淋巴细胞凋亡中的表达。 方法 培养人T淋巴细胞，10、20、30μg/L的雷公藤内酯醇分别刺激细胞4、8、16 h，流式细胞仪DNA分析、FITC-Annexin Ⅴ binding/PI染色检测细胞凋亡，Western blot分析检测Fas/FasL蛋白的表达。 结果 雷公藤内酯醇以剂量和时间依赖的形式诱导T细胞凋亡，雷公藤内酯醇诱导T细胞凋亡的同时伴随有Fas和FasL表达的上调，同样，雷公藤内酯醇诱导Fas和FasL表达呈现剂量和时间依赖性。结论 雷公藤内酯醇以剂量和时间依赖的形式诱导人T细胞凋亡，雷公藤内酯醇诱导T细胞凋亡的信号通路可能是通过Fas/FasL途径激活的。     

CAL-101对BL细胞系Raji和DLBCL细胞系SUDHL-10的增殖抑制作用及其机制

目的分析不同浓度CAL-101对Burkitt淋巴瘤(BL)细胞系Raji和弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞系SUDHL-10增殖的抑制作用及其相关机制。方法通过不同浓度(5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L)的CAL-101对BL细胞系Raji和DLBCL细胞系SUDHL-10进行处理,采用MTT法测定CAL-101对上述淋巴瘤细胞系增殖的抑制作用,用流式细胞术对淋巴瘤细胞凋亡情况进行测定,通过迁移实验测定CAL-101淋巴瘤细胞迁移情况的影响,并通过Western blot法对CAL-101处理后淋巴瘤细胞表达磷酸化ERK的变化进行检测。结果在CAL-101浓度≥5μmol/L时,对DLBCL细胞系SUDHL-10和BL细胞系Raji增殖具有良好的抑制作用,随着CAL-101浓度的升高,两种淋巴瘤细胞系的增殖抑制率亦明显升高(P 0. 01),具有浓度依赖性的特点。随着CAL-101浓度的升高,两种淋巴瘤细胞系的细胞凋亡率亦明显升高(P 0. 01),具有浓度依赖性的特点。随着CAL-101浓度的升高,CAL-101对两种淋巴瘤细胞系的细胞迁移率亦明显降低(P 0. 01),具有浓度依赖性的特点。Western blot法分析结果显示,经CAL-101处理淋巴瘤细胞后,可明显降低磷酸化ERK的表达水平。结论 CAL-101能够明显阻滞BL细胞系Raji和DLBCL细胞系SUDHL-10增殖,促使细胞凋亡,阻滞细胞迁移至淋巴瘤基底细胞,其发生机制可能与ERK信号途径阻断密切相关。     

姜黄素和Wortmannin联用对胃癌细胞增殖凋亡的影响及机制研究

目的 探讨姜黄素和Wortmannin联用对胃癌细胞增殖凋亡的影响及机制。方法 培养人胃癌SGC-7901细胞,CCK8实验检测10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L姜黄素和10 nmol/L、50 nmol/L、100 nmol/L、500 nmol/L、1 000 nmol/L的Wortmannin分别作用于细胞24 h、48 h、72 h的细胞增殖情况,计算半数抑制浓度(IC50);根据IC50选择最佳的姜黄素及Wortmannin作用浓度;将接下来的试验分为对照组、姜黄素组、Wortmannin组、姜黄素+Wortmannin组,CCK8试验检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测Cleaved caspase3、PI3K、p-AKT蛋白表达。结果 不同浓度的姜黄素和Wortmannin处理细胞24 h、48 h、72 h后的细胞存活率均显著低于0 h细胞存活率(P0.05或P0.01),选择30μmol/L姜黄素和170 nmol/L的Wortmannin做后续研究。姜黄素组、Wortmannin组、姜黄素+Wortmannin组细胞存活率及PI3K、p-AKT蛋白表达显著低于对照组,细胞凋亡率及Cleaved caspase3蛋白表达显著高于对照组(P0.01);姜黄素+Wortmannin组细胞存活率及PI3K、p-AKT蛋白表达显著低于姜黄素组和Wortmannin组,胞凋亡率及Cleaved caspase3蛋白表达显著高于姜黄素组和Wortmannin组(P0.01)。结论 姜黄素和Wortmannin均能抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,姜黄素和Wortmannin联用对细胞增殖凋亡的影响强于单独用姜黄素和Wortmannin。     

雷公藤内脂醇对人卵巢癌耐顺铂细胞株超微结构的影响

目的探讨雷公藤内脂醇对体外培养的人卵巢上皮性癌耐顺铂细胞株（COC，／DDP）超微结构的影响。方法空白对照组加入9mLCOC，／DDP专用细胞培养液培养，雷公藤内脂醇作用组加入9rnL含50μg／L雷公藤内脂醇溶液培养，2组作用48h后收集细胞，通过透射电子显微镜观察COC，／DDP的超微结构。结果透射电子显微镜下观察可见空白对照组中COC1／DDP细胞膜表面有丰富的微绒毛，细胞核大而明显，染色质丰富；雷公藤内脂醇作用组中COC1／DDP细胞表面微绒毛消失，细胞核固缩、染色质凝集成新月状，有凋亡小体形成。结论50μg／L雷公藤内脂醇可诱导COC1／DDP呈凋亡改变。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。     

星状神经节阻滞治疗失眠疗效观察

失眠症又称不寐，指入睡困难，或维持睡眠障碍（易醒、早醒和再入睡困难）导致睡眠时间减少或睡眠质量下降，不能满足身体生理需要，明显影响日间社会功能和生活质量。现将星状神经节阻滞治疗失眠疗效观察总结如下。