一种同时显示G带和姊妹染色单体交换的技术

让细胞在含有5-溴脱氧尿苷(BrdU)的培养基中生长两个细胞周期,而后用特殊荧光染色剂和/或Giemsa染色剂处理,可使姊妹染色单体分化显色,这种方法使人们能够检出姊妹染色单体交换(SCEs),然而只有通过耗费时间的染色-脱色-再染色程序,或通过BrdU-胰酶-Giemsa结合染色法,或使用BrdU吖啶橙处理才能将SCE点精确定位,这些方法仅在一个染色单体上显带。这里介绍的BrdU Giemsa结合显带技术能使SCE点较为精确的定位,而且简便易行。方法:将人体淋巴细胞在含有20、50或100μMBrdU的GIBCO染色体培养基1A中     

大肠癌可能的特异性染色体改变

人类某些肿瘤具有特异性染色体改变特征,然而这些染色体改变对癌起因的含意仍未确定。最近发现若干肿瘤形成有不同的细胞转化基因(癌基因)被激活,并且发现其中一些癌基因被定位在人和小鼠的正常染色体上。据报导从人大肠腺癌的细胞株分离的大肠癌原癌基因被定位在12号染色体上。因此,大肠癌细胞核型的检测,对于此恶性     

三例畸变Y染色体的重组形式及定位分析

目的 对3例畸变Y染色体进行定位分析并确定其重组形式.方法 采用染色体G显带、多重连接依赖探针扩增(multiplex ligation dependent probe amplification,MLPA)、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)、Y染色体多个序列标签位点(sequence tagged site,STS)及Illumina人类全基因组单核苷酸多态性芯片扫描(single nucleotide polymorphisms array,SNP-array)等多种技术.结果 3例患者染色体G显带核型均为46,X,+ mar.MLPA检测发现例1 SRY、ZFY、UTY基因重复;例2 SRY、ZFY基因重复、UTY基因缺失;例3X染色体短臂/Y染色体短臂(X/Yp)、X染色体长臂/Y染色体长臂(X/Yq)亚端粒区域基因拷贝数减少.Y染色体STS分析提示:例1的SRY及Y染色体AZFa区sY84、sY86、AZFb区sY1227存在,但sY1228及AZFc区多个STS缺失,断裂点位于AZFb区sY1227和sY1228之间;例2的SRY及着丝粒区域sY1200存在,其余STS均缺失;例3的SRY及AZF多个STS均存在.SNP-array扫描提示,例1 Yp11.31-p11.2区重复,Yq11.22-q11.23区缺失,缺失片段约为5.18 Mb;例2 Yp11.31-p11.2区重复,重复片段为3.724 Mb,Yq11.21-q11.23区域缺失,缺失约14.644Mb;例3 X/Yp亚端粒区域(PAR) p22.33单拷贝缺失,X/Yq亚端粒区域(PAR) q28单拷贝缺失.FISH分析提示,例1和例2细胞中期原位杂交核型均为46,X,+ mar.ish(Y)(SRY++,DYZ3++,DYZ1-).综合分析:例1和例2的标记染色体均为短臂等臂双着丝粒Y染色体.分子核型:例1为46,X,idic (Y)(q11.23);例2为46,X,idic(Y) (q10);例3为标记染色体为环状Y,核型为46,X,r(Y)(p1 1q12).结论 Y染色体畸变形式多样,选用MLPA、Y染色体STS、FISH、SNP-array等多项技术联合诊断是确定其断裂点及重组形式的重要手段.     

人类肿瘤的染色体基础

近两年内,由于肿瘤细胞培养方法的改进以及人类染色体高分辨显带技术的应用,已证明大多数肿瘤存在染色体异常。关于染色体异常与细胞癌基因的知识已经相互汇合在一起。例如,Burkitt淋巴瘤的人类细胞癌基因myc(c-myc)位于8号染色体,当它与14号染色体上的免疫球蛋白重链基因或2号和22号染色体上的免疫球蛋白轻链基因重排的时候,就被激活了。这些发现提示,染色体异常在人类恶性肿瘤中起到重要作用,可能代表着在分子水平上癌基因活性改变的机制。     

染色体畸变和癌基因

今年年初Rowley发表了一篇细胞癌基因(c-onc)在染色体定位研究现状的综述(译文见本刊,1983年第4期,192-194页),这些细胞癌基因是反转录病毒基因v-onc在细胞中的同源对应物。文章指出     

应用多种技术综合诊断胎儿嵌合型X环状染色体

目的应用多种技术对2例嵌合型特纳综合征45,X/46,X,r(X)进行产前诊断,探讨X环状染色体胎儿的遗传学和影像学特征。方法应用染色体G带、Bac-on-Beads技术、荧光原位杂交技术及SNP array技术从多个水平对胎儿进行识别与定位。结果两例嵌合型X环状染色体胎儿经G显带、荧光原位杂交技术、芯片技术等均证实为环状染色体。结论产前诊断中应用多种技术联合检测有利于发现、明确各种染色体异常。     

男性性反转患者发病机制的研究进展

人类不育与性分化障碍正在成为全球危害人类健康和生活的重大医学问题。然而男性Y染色体的性别决定区域中有决定睾丸组织的分化及功能,这个性别决定区域被成为睾丸决定因子(testis-determining factor)TDF,TDF被认为是只存在于男性,并推算其编码的氨基酸序列是一种锌指蛋白基因,并将其命名为ZFY(ZincfingerproteinY)。通过进一步研究发现Y染色体中高度特异的基因命名为SRY,并认为其就是睾丸决定因子。46,XX男性性反转的出现常常是由于其继承了父亲的X染色体,并且该X染色体中含有TDF。因在减数分裂中,X染色体与Y染色体进行部分互换,且互换的区域含有TDF。有10%-20%的46,XX男性没有Y染色体上的任何基因片段,第一个原因是46,XX男性的性别决定基因在某些特殊的常染色体或是X染色体上,这些患者常是Y(-)并且性别不明确,这些性别决定基因可能位于TDF片段的下游,目前仍没有研究可以明确定位到这些基因片段,但可以肯定的是它们的表型与TDF有很大的差别。第二个原因是含有X染色体和隐藏的Y染色体所组成的嵌合体也可以对Y(-)46,XX的男性进行解释。总之,46,XX男性性反转至少可以被以下机制所解释,即Y染色体中的性别决定基因,Y-X交换学说,常染色和X染色体决定学说,嵌合体学说等。本文就对现阶段46,XX,男性的发病机制进行以下综述。     

T幼淋巴细胞白血病和毛细管扩张性共济失调患者T细胞白血病染色体14q11、14q32倒位和连续易位

特定染色体异常与特定恶性肿瘤间的密切关系证实染色体异常在肿瘤发生中的诱发作用。淋巴细胞中具有重要功能的基因与癌基因间的易位是常见的。B细胞中IgH(免疫球蛋自重链)基因定位于14q32.3,T细胞中TCR(T细胞受体)的α和δ链基因定位于14q11、γ链基因定位于7p14、β链基因定位于7q35-36。人类复癌基因定位于14q32。细胞遗传学分析显示,毛细管扩张性共济失调(AT)患者淋巴细胞常见的染色体异常是inv(14)(q11q32)、t(14;14)(q11;q32)及涉及7p13-14和7q32-35的重排,这些异常可以是散发的,也可以是克隆性     

150例无精子症患者的染色体核型分析

目的通过对无精子症患者行染色体核型分析,探讨无精子症与染色体异常的关系。方法对150例无精子症患者行G显带核型分析,分析染色体异常的类别及其导致无精子症的原因。结果 150例无精子症患者共检出异常核型30例,异常检出率为20.0%。异常核型中数目异常有20例,占异常核型的66.7%(20/30),全部为47,XXY;结构异常有10例,占异常核型的33.3%(10/30),其中罗氏易位45,XY,der(13;14)有3例、常染色体相互易位46,XY,t(6;15)(p21.2;q26)和46,XY,t(3;4)(p13;p14)各1例、Y染色体和常染色体相互易位46,X,t(Y;13)(q12;q22)有1例、大Y染色体46,X,Yqh+有3例、Y倒位46,X,inv(Y)(p11q12)有1例。结论染色体异常是导致无精子症的重要原因,对无精子症患者有必要行染色体核型分析,如果有条件还可以对染色体正常及Y染色体结构异常的无精子症患者做Y染色体微缺失检查,进一步查明无精子症的原因。     

白血病和淋巴瘤的染色体脆性部位和遗传素因

目前,有22种特异性染色体缺陷与30种以上人类癌有关。这些缺陷多数表现为染色体相互易位或特定的染色带缺失。作者最近发现,在非何杰金氏淋巴瘤和急性白血病,有66％的病例可观察到染色体的一种特殊异常,最常见为相互易位。目前这种染色体交换被视为决定性事件,因其使干细胞趋于恶性变。在Burkitt淋巴瘤中发现1种常见的8;14易位,其断裂点在q24.1和q32.3〔t(8:14)(q24.1;q32.3)〕亚带上。在这种情况下,当14号染色体的重链免疫球蛋白基因重排时,8号染色体的癌基因c-myc被激活。在白血病,染色体缺陷可能与9个其他     

微阵列比较基因组杂交检测和分析一例46,X0,+der(?)胎儿的全基因组拷贝数变化

目的检测和分析一例46,X0,+der(?)胎儿的全基因组拷贝数变化(CNVs),确定胎儿的核型,探讨微阵列比较基因组杂交(array-CGH)在临床细胞遗传诊断中运用的可行性和优越性。方法对胎儿进行常规G显带染色体分析,应用array-CGH芯片进行全基因组高分辨率扫描和分析,RT-qPCR验证array-CGH的结果。结果G显带染色体分析显示胎儿的核型为46,X0,+der(?)。Array-CGH显示衍生染色体为Y染色体,且不存在CNVs;另外,共检测出了118个亚显微CNVs。RT-qPCR证明array-CGH的结果是准确的。结论与传统的细胞遗传分析方法相比,array-CGH具有高分辨率、高通量和高准确性等优点,为亚显微水平染色体畸变的检测提供了一种新型的强大的分析平台。     

51例Turner综合征患者染色体核型分析及临床特征

目的探讨Turner综合征不同核型的遗传学特征、临床特点及其所占比例。方法无菌取患者外周血,淋巴细胞常规培养制作染色体标本,胰酶法G显带,显微镜下进行染色体核型分析。结果 51例Turner综合征患者的染色体核型为:45,XO 19例(37.56%),45,XO/46,XX 9例(17.65%),46,Xi(Xq)8例(15.69%),45,XO/46,Xi(Xq)5例(9.8%),47,XXX 3例(5.88%),45,XO/46,X+mar 2例(3.92%),45,XO/46,XY 2例(3.92%),45,XO/45,i(Xq)2例(3.92%),46,X,del(X)(qter→q11:)1例(1.96%)。结论 Turner综合征患者的染色体有数目异常和结构畸变等多种核型,均可不同程度导致女性闭经、性腺发育异常及智力低下等症状,应提倡优生优育,做好产前诊断。     

26个细胞癌基因中的19个被准确定位于原发性癌特异性重排所涉及的83条带之一

肿瘤细胞有非随机的染色体异常,这是肿瘤细胞遗传学研究最有创见的结论之一。近来还认识到细胞癌基因的激活是导致某些肿瘤的通常途径。已有人强调指出,在一些癌断裂点和癌基因之间存在着联系。本文收集文献、作者实验室和其他同事提供的资料,综合分析了5345例采用显带研究的肿瘤病例,试图了解癌断裂点和癌基因相关的程度有多大。上述病例不包括以Ph染色体为唯一异常的慢性粒细胞性白血病,且均只有一个结构畸变。为了减少核型解释上可能发生的错误,要求该种结构畸变至少见于2例相同或密切相关的肿瘤。26个细胞癌基因定位于特定带的资料系从文献中获得。结果在5 345例肿瘤中共检出77种不同     

Wolf氏综合征患者第4号染色体短臂缺失

一例11岁患Wolf氏综合征的男孩由皮肤活检建立的成纤维细胞培养物,发现其第4号染色体短臂末端缺失。该患者出现多种异常,包括智力迟钝,小头,两眼距宽,眼睑斜裂,斜视及尿道下裂等。患者的细胞培养表明,染色体核型为46,XY,del(4)(pter→p14:),即第4号染色体短臂末端到短臂1区4带断裂缺失,这应当可用于基因定位的研究。细胞培养中的亚群(33％)有一个第7号染色体长臂增加(7q~ )以及第4号     

30例膀胱癌的细胞遗传学研究

本文作者通过输尿管用冷杯活检术取得膀胱癌标本46例,29例用直接法制片,第30例用3天短期培养法,都具有适当的中期分裂相。每一例最少计数4个中期分裂相,最多计数24个。22例进行了染色体显带分析,结果发现在膀胱癌中存在染色体数目和结构畸变,其中19例存在异常克隆(按Rowely标准,鉴定克隆异常,即用显带技术确定至少有两个细胞具有相同的额外染色体或结构重排,或三个细胞都丢失了同一个染色体),主要涉及1号、3号、及11号染色体的改变(分别是36.6%、26.6%、20%)其次是4号、7号、及18号(均为10%)。结     

类淋巴瘤中的染色体异常:在瘤病理发生中的机理和作用

肿瘤细胞的染色体异常(易位、倒位或缺失)与肿瘤发生有关,这是癌细胞发生的中心法则。这种观点似乎已经被以下观察所证实:Burkitt′s淋巴瘤和慢性粒细胞白血病中恒定的染色体易位都与已知病毒癌基因(v-onc)的细胞同源物有关。这一设想的推论是,肿瘤细胞中观察到的任何明显的染色体变化,总与某一细胞原癌基因的改变有关。这一假设意味着罕见的或不够恒定的染色体畸变在肿瘤病因学中也有作用。人的T细胞瘤在14号染色体上带有涉及T细胞受体(TCR)的δ/α座位,而且这些异常正属     

19例小睾丸患者染色体核型分析

目的通过对19例小睾丸患者染色体核型的分析,探讨小睾丸患者染色体核型对生育的影响。方法对19例小睾丸患者进行外周血淋巴细胞培养,G显带进行核型分析。结果 19例小睾丸患者中,1例为男性综合征,核型为46,XX,占小睾丸患者的0.53%(1/19);其余18例均为染色体数量异常,在这18例患者中,16例核型为47,XXY(又称klinefelter综合征),占小睾丸患者的84.2%(16/19);还有2例嵌合型患者,占小睾丸患者的10.5%(2/19)。在嵌合型患者中,1例为数目异常嵌合,核型为47,XXY/46,XY(10%);另1例为数目和结构异常嵌合,核型为47,XXY,del(14)(p13)。结论对小睾丸患者进行染色体核型分析,可以帮助患者找出不孕症的原因,明确诊断。     

早孕期自然流产绒毛组织的遗传学检测方法比较

目的比较G显带核型分析、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)、多重连接依赖探针扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)及染色体微阵列分析(chromosomal microarray analysis,CMA)等技术检测早孕期自然流产样本的结果,探讨这几种遗传学检测技术检测早孕期自然流产样本的临床适用性。方法回顾分析354例进行遗传学检测的早孕期自然流产样本,其中G显带核型分析181例、FISH116例、MLPA43例和CMA32例。结果 181例G显带核型分析成功率86.2%(156/181),检出69例异常核型,阳性率44.2%(69/156),其中染色体数目异常63例,平衡性结构异常6例;116例FISH检测均成功,检出53例异常(13、16、18、21、22、X、Y染色体数目异常),阳性率45.7%(53/116);43例MLPA检测均成功,其中4例异常(13、18、21、X、Y染色体数目异常),阳性率9.3%(4/43);CMA检测的标本32例均成功,异常结果20例,阳性率62.5%,其中染色体数目异常17例,亚显微结构异常(5Mb以下的染色体结构异常)3例。结论和其他方法相比CMA技术快速、成功率高,能够明显提高检测范围和样本的异常检出率,在早孕期自然流产样本遗传学分析中具有较强的临床应用价值。     

联合应用多种遗传学方法鉴定1例嵌合型胎儿微小额外标记染色体

目的联合应用染色体微阵列分析(CMA)、荧光原位杂交(FISH)和染色体核型分析对1例嵌合型微小额外标记染色体(sSMC)进行鉴定。方法以2022年深圳市龙华区妇幼保健院无创产前检测(NIPT)提示胎儿染色体4q12-4q13.1区存在8.75 Mb重复的1例孕妇作为研究对象, 采集羊水样本与夫妇双方的外周血样进行染色体G显带核型分析, 用CMA鉴定sSMC的来源和大小, 之后用FISH对羊水中sSMC的嵌合比例进行进一步的确定。结果孕妇外周血G显带染色体核型为46, XX, 其丈夫为46, XY, inv(9)(p12q12), 胎儿为47, XY, inv(9)(p12q12)pat, +mar[75]/46, XY, inv(9)(p12q12)pat[25]。羊水CMA检测结果为arr[hg19]4p11q13.1(48978053₆3145931)×3, 并未显示嵌合。FISH检测经培养的分裂间期的羊水细胞中59%包含3个4号染色体的着丝粒信号, 复抽羊水检查, 有65%的分裂间期羊水细胞包含3个4号染色体着丝粒信号, 证实羊水为三体嵌合体。结论结构异常...     

胃癌Ha-ras、APC基因的电镜原位标记

超微水平的电镜原位分子杂交 (又称电镜原位分子 )技术是近十余年发展起来的一种新的电镜技术。它能在超微水平对特异性ＤＮＡ或ＲＮＡ进行精确定位 ,给生物学及病理学研究提供了新的手段。为了对胃癌癌基因 (Ｈａ -ｒａｓ)和抑癌基因 (ＡＰＣ)进行定位 ,作者将电镜酶细胞化学有关技术〔1〕和原位分子杂交技术〔2〕结合起来 ,建立了电镜原位分子杂交技术 ,取得较为满意的结果。1　材料和方法胃癌手术切除标本 ,取材后经预冷的ＰＧ液 (4 %多聚甲醛 0 5 %戊二醛 )固定 4ｈ(0℃～ 4℃ )。用 0 1ｍｏｌ/ＬＰＢＳ漂洗后在该液中细切成条。应用…