肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其受体与卵巢恶性肿瘤的研究

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是近年来颇受关注的一个新的凋亡分子,可选择性促进肿瘤细胞凋亡,对正常细胞的凋亡作用较弱。目前发现的该家族成员包括TRAIL和它的5个受体。卵巢恶性肿瘤细胞表面表达TRAIL和TRAIL受体,并可以被其诱导凋亡。许多化疗药物能协同TRAIL诱导卵巢肿瘤细胞的凋亡,因此TRAIL在卵巢恶性肿瘤的治疗领域可能具有一定的应用前景。     

重组人可溶性TRAIL分子诱导细胞凋亡机理探讨

目的 探讨重组人可溶性TRAIL蛋白（rhsTRAIL）诱导细胞凋亡的机理。方法 应用DNA染料和流式细胞仪定性分别检测rhsTRAIL诱导的细胞凋亡；流式细胞仪检测靶细胞膜表面TRAIL受体表达格局，荧光定量法检测凋亡细胞中Caspase-3活性。结果 100ng/ml人可溶性TRAIL蛋白分子对外周血淋巴细胞无明显毒性，但可诱导肿瘤细胞凋亡，不同的肿瘤细胞凋亡率有差异。凋亡范围在26%-57%。不同细胞表面TRAIL受体表达量不同，外周血淋巴细胞的死亡受体DR4，DR5受体表达5%，而诱骗受体DcR1表达55%，相反肿瘤细胞上的DR4，DR5表达高（40%——88%）。而DcR1表达很低（8%-17%），rhsTRAIL诱导HL-60细胞发生凋亡，其细胞内Caspase-3活性增高，ActD可增加TRAIL抑制细胞生长活性。结论 重组人可溶性TRAIL蛋白分子可诱导肿瘤细胞凋亡，凋亡活性TRAIL受体类型及Caspase-3活性增高有关。     

胃癌细胞TRAIL耐药机制以及TRAIL联合化疗应用的研究进展

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）通过多种分子信号通路触发肿瘤细胞的凋亡,而胃癌细胞却可通过多种机制抵抗这种凋亡。TRAIL与化疗药物联合应用可明显逆转胃癌细胞对TRAIL的耐药现象。本文就TRAIL及其受体的结构和功能、TRAIL诱导凋亡的信号通路、胃癌细胞的TRAIL耐药机制以及其联合化疗药物的疗效进行综述。     

重组人可溶性TRAIL分子诱导细胞凋亡机理探讨

目的探讨重组人可溶性TRAIL蛋白(rhsTRAIL)诱导细胞凋亡的机理.方法应用DNA染料和流式细胞仪定性分别检测rhsTRAIL诱导的细胞凋亡;流式细胞仪检测靶细胞膜表面TRAIL受体表达格局,荧光定量法检测凋亡细胞中Caspase-3活性.结果100ng/ml人可溶性TRAIL蛋白分子对外周血淋巴细胞无明显毒性,但可诱导肿瘤细胞凋亡,不同的肿瘤细胞凋亡率有差异,凋亡范围在26%～57%.不同细胞表面TRAIL受体表达量不同,外周血淋巴细胞的死亡受体DR4、DR5受体表达5%,而诱骗受体DcRl表达55%,相反肿瘤细胞上的DR4、DR5表达高(40%～88%),而DcRl表达很低(8%～17%).rhsTRAIL诱导HL-60细胞发生凋亡,其细胞内Caspase-3活性增高.ActD可增加TRAIL抑制细胞生长活性.结论重组人可溶性TRAIL蛋白分子可诱导肿瘤细胞凋亡,凋亡活性TRAIL受体类型及Caspase-3活性增高有关.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导骨肉瘤细胞凋亡的研究

目的：研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）对骨肉瘤OS-732细胞的诱导凋亡作用，探寻骨肉瘤临床化疗的斯方案。方法：将TRAIL应用于体外培养的骨肉瘤OS-732细胞，采用MTr法检测细胞毒性作用，倒置相差显微镜及荧光染色方法观察肿瘤细胞形态改变，扫描及透射电镜在亚细胞形态上证实凋亡细胞。结果：不同浓度TRAIL作用下，细胞抑制率问差别十分显著（P〈0.01）。超微结构观察显示骨肉瘤细胞凋亡。结论：TRAIL诱导骨肉瘤细胞凋亡，且具有浓度依赖性。     

重组人可溶性凋亡素-2配体在Pichia系统中的表达

目的：在甲醇营养型酵母（Pichia)表达系统中表达重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL,凋亡素－2配体）分子。方法：人可溶性TRAIL编码基因片段插入pIC3.5酵母表达载体,氯化锂转化酵母GS115株,甲醇诱导表达5d,SDS－PAGE和Western-blotting确认表达,L929细胞鉴定活性,结果：发现在酵母细胞中重组表达的TRAIL在SDS－PAGE上占总蛋白的50％以上,用抗人TRAIL多抗可以确认表达了TRAIL重组分子,杀伤肿瘤细胞的比活性较原核表达后复性的TRAIL有明显提高,并能诱导几株肿瘤细胞DNA片段化,说明TRAIL可能已正确折叠并形成活性必需的高级结构。结论：在Pichia系统中正确表达了可溶性TRAIL分子。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体与白血病的研究进展

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）是TNF超家族新成员。TRAIL能选择性诱导肿瘤细胞凋亡。而对正常细胞无明显毒性作用。故作为一种新型的肿瘤治疗生物制剂，具有良好的临床应用前景。但目前大量研究证明白血病细胞对TRAIL的诱导凋亡作用不敏感，其具体机制是近几年来肿瘤凋亡的研究热点。本文就其耐药机制的最新研究进展进行综述。     

TRAIL联合放射线诱导人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的协同作用研究

目的：研究肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）对人脑胶质瘤细胞株U251的凋亡诱导作用及与放射线联合应用的协同作用，并探讨不同剂量TRAIL对人脑胶质瘤细胞株U251凋亡率的影响。方法：利用显微镜、流式细胞仪，观察和检测不同剂量TRAIL、放射线、TRAIL加放射线对传代培养的人脑胶质瘤细胞株U251的凋亡诱导作用，比较各组间肿瘤细胞凋亡率的差异。结果：TRAIL作用后镜下可见到人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的典型表现，不同剂量TRAIL均有诱导入脑胶质瘤细胞株U251凋亡的作用，联合应用放射线后U251细胞凋亡率显著提高。结论：TRAIL可有效的诱导入脑胶质瘤细胞株U251凋亡，并和放射线有显著协同作用。     

重组可溶性TRAIL联合化疗药诱导急性白血病细胞凋亡

目的肿瘤坏死相关凋亡诱导配体(TNT-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)作为肿瘤细胞诱导凋亡剂,可单独或与化疗药联合作用诱导多种肿瘤细胞株凋亡。本实验观察重组人可溶性TRAIL是否可有效诱导临床白血病患者的白血病细胞凋亡,并检验化疗药Ara-C联合TRAIL对白血病细胞的杀伤作用。方法将13例原始细胞比例均>60%急性白血病患者的骨髓标本的每份分4组:对照组、TRAIL组、Ara-C组、TRAIL+Ara-C组,进行细胞培养24h后,用AnnexinⅤ及碘化丙啶染色后流式细胞仪观察细胞凋亡率。结果对照组细胞凋亡率为(10.22±7.48)%,TRAIL组为(14.61±11.95)%,Ara-C组为(15.95±11.12)%,TRAIL+Ara-C组为(22.11±15.97)%。将4组标本进行组间方差检验,对照组与TRAIL+Ara-C组比较差异有统计学意义(P=0.015<0.05)。在TRAIL组中,13例中有3例(23%)显示对TRAIL诱导的凋亡敏感(若TRAIL组细胞凋亡率高于对照组10%以上,即认为对TRAIL敏感);在TRAIL+Ara-C组中,2例原对TRAIL不敏感的标本及1例对TRAIL敏感标本在TRAIL+Ara-C联合作用下,细胞凋亡率均高于对照组20%以上。结论1)TRAIL在体外可诱导急性白血病患者的白血病细胞凋亡;2)化疗药Ara-C与TRAIL联合应用可增加白血病细胞的凋亡率,包括先前对TRAIL不敏感的白血病细胞。     

抗TRAIL死亡受体抗体及其在肿瘤治疗中的研究进展

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor related apoptosis-inducing ligand,TRAIL）是近几年发现的肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）超家族成员。TRAIL能与他的死亡受体（death receptor,DR）TRAIL-R1（DR4）和TRAIL-R2（DR5）结合并特异性地诱导许多肿瘤细胞凋亡,但对大多数正常细胞没有毒性。一些抗TRAIL死亡受体抗体也能先择性杀伤肿瘤细胞,并在癌症治疗上显示了良好的治疗效果。本文就TRAIL的凋亡诱导途径以及抗TRAIL受体抗体在肿瘤治疗中的研究进展作一综述。     

胃癌细胞NF-κB和survivin的表达对 TRAIL抗瘤作用的影响

目的探讨胃癌细胞NF-cB和survivin的表达对TRAIL抗瘤作用的影响.方法应用细胞培养和流式细胞仪检测的方法,观察胃癌细胞SGC-7901、MKN28、AGS、MKN45经TRAIL作用后细胞凋亡率,Western blot方法分析四种胃癌细胞中NF-κB和survivin的表达.结果TRAIL300 ng/ml作用于胃癌细胞24 h后,胃癌细胞MKN28、MKN45、AGS和SGC-7901的凋亡率分别为36.05%、20.27%、16.50%和11.80%.Western blot结果显示SGC-7901细胞NF-κB、survivin的表达均高于MKN28细胞的表达.结论TRAIL具有选择性诱导肿瘤细胞凋亡的特性,肿瘤细胞对TRAIL的耐药现象,可能与凋亡抑制因子survivin和NF-κB的表达有关.     

TRAIL及其受体的研究进展

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子超家族成员之一,能选择性诱导多种肿瘤细胞系的凋亡,而对正常细胞没有作用。TRAIL通过活化Casepase或线粒体依赖的途径诱导细胞凋亡。这种凋亡信号可以被其诱骗受体(DcR)所阻断,并且受Bcl-2家族蛋白所调节。本文将介绍TRAIL诱导凋亡的信号传导途径以及TRAIL的临床应用。     

腺相关病毒介导Smac和DR5单链抗体表达对抑制肿瘤细胞生长的作用

肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体（tumor necrosis factor—related apoptosis—inducing ligand，TRAIL）是肿瘤坏死因子（TNF）家族成员，可有效地抑制多种肿瘤的形成和生长，诱导肿瘤细胞凋亡，但对绝大多数正常细胞无毒副作用。除了TRAIL配体以外，死亡受体的抗体也和TRAIL一样，能特异性地杀伤肿瘤细胞，其对肿瘤细胞的靶向性比TRAIL更有优越性，具有良好的临床应用前景。     

可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在大肠杆菌中的表达与纯化

目的：探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对肿瘤细胞的杀伤作用。方法：采用ITPG诱导TRAIL基因细胞外可溶性区域(114—281氨基酸残基)在大肠杆菌中的表达，并初步分析TRAIL的抗肿瘤生物学活性。结果：重组的TRAIL，可溶性蛋白占细菌总蛋白的30％以上，Westem Blot证实了TRAIL，可溶性蛋白表达的抗原性。体外实验中，纯化的超声上清可诱导不同的肿瘤细胞凋亡。结论：对某些肿瘤而言，TRAIL可能是一种极具前途的治疗药物。     

青蒿琥酯和TRAIL对前列腺癌细胞凋亡诱导作用的实验研究

目的探讨青蒿琥酯和肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)对前列腺癌细胞(PC-3、LNCaP)凋亡的诱导作用。方法培养前列腺癌PC-3、LNCaP细胞,分别加入不同浓度的青蒿琥酯和TRAIL,随机分为7个组:对照组、青蒿琥酯Ⅰ组(低剂量组)、青蒿琥酯Ⅱ组(高剂量组)、TRAILⅠ组(低剂量组)、TRAILⅡ组(高剂量组)、TRAIL(1 ng/mL)加青蒿琥酯(1mmol/L)Ⅰ组及TRAIL(1 ng/mL)加青蒿琥酯(5 mmol/L)Ⅱ组。流式细胞仪检测青蒿琥酯和TRAIL诱导前列腺癌细胞凋亡的凋亡率。结果青蒿琥酯和TRAIL均可增加前列腺癌细胞凋亡的凋亡率,二者联合使用诱导的前列腺癌细胞的凋亡率明显高于两种药物单独使用。结论青蒿琥酯与TRAIL联合使用对前列腺癌存在诱导凋亡的协同作用。青蒿琥酯能诱导提高前列腺癌细胞对TRAIL的敏感性,加强TRAIL的诱导肿瘤细胞凋亡的作用。     

肿瘤细胞TRAIL耐药性的产生及缓解策略的研究进展

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)作为肿瘤坏死因子(TNF)超家族的一员,具有能够特异性识别肿瘤细胞表达的促凋亡TRAIL受体(TRAILR)的能力,进一步使其在诱导肿瘤细胞凋亡的同时对正常细胞不造成损伤。这一特性使得TRAIL成为新型抗肿瘤药物作用靶点的研究热点,但同时部分肿瘤细胞极易产生针对TRAIL的耐药性,使得其临床应用进展缓慢。     

TRAIL联合放射线诱导人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的协同作用研究

目的:研究肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)对人脑胶质瘤细胞株U251的凋亡诱导作用及与放射线联合应用的协同作用,并探讨不同剂量TRAIL对人脑胶质瘤细胞株U251凋亡率的影响。方法:利用显微镜、流式细胞仪,观察和检测不同剂量TRAIL、放射线、TRAIL加放射线对传代培养的人脑胶质瘤细胞株U251的凋亡诱导作用,比较各组间肿瘤细胞凋亡率的差异。结果:TRAIL作用后镜下可见到人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的典型表现,不同剂量TRAIL均有诱导人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的作用,联合应用放射线后U251细胞凋亡率显著提高。结论:TRAIL可有效的诱导人脑胶质瘤细胞株U251凋亡,并和放射线有显著协同作用。     

TRAIL联合奥沙利铂对结肠癌细胞株SW480凋亡的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合奥沙利铂(oxaliplatin)对结肠癌细胞株SW480凋亡的影响,并初步探讨其作用机制.方法 应用MTT法分别检测TRAIL组、奥沙利铂组及联合组的细胞抑制率,Annexin Ⅴ-FITC/PI染色,流式细胞仪检测SW480细胞的凋亡率.结果 SW480细胞对TRAIL不敏感,对奥沙利铂相对敏感,TRAIL与亚毒性浓度的奥沙利铂联用对细胞的杀伤作用显著增强;亚毒性浓度的TRAIL、奥沙利铂及联合组作用SW480细胞24h的抑制率分别为8.62%,60.51%,81.28%;凋亡率分别为2.43%,11.76%,18.37%,流式细胞学证实这种杀伤作用主要通过诱导细胞凋亡实现.结论 TRAIL能显著提高奥沙利铂对结肠癌细胞的杀伤作用,此协同作用主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现.     

TRAIL与肿瘤关系的研究进展

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）是肿瘤坏死因子超家族第三个成员,可诱导多种肿瘤细胞发生凋亡,但不会损害正常组织细胞.其特异性受体死亡受体（DR）4、DR5在多数肿瘤细胞表达,正常细胞缺失,这使得应用TRAIL进行抗肿瘤治疗成为可能.TRAIL能触发细胞凋亡通路,激活caspase家族,促进线粒体凋亡途径的启动,诱导细胞凋亡.该文就TRAIL的结构、受体及其与肿瘤的关系作一综述.     

紫杉醇联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对前列腺癌细胞的抑制作用

目的 探讨紫杉醇联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）对前列腺癌细胞的抑制作用。方法 MTT法测定紫杉醇、TRAIL及紫杉醇联合TRAIL作用于LNCAP、Du145、PC3细胞后的细胞生存率，同时，用流式细胞技术测定3种细胞的凋亡率。结果 2ng／ml TRAIL对LNCAP、PC3细胞有明显的抑制作用，但对Du145细胞抑制作用不明显；当TRAIL与紫杉醇联用则对3种癌细胞均显示出明显的抑制作用，且发生在给药24h后，72h时抑制作用最强。TRAIL对3种癌细胞有诱导凋亡作用，5ng／ml较2ng／ml作用强；紫杉醇与TRAIL联用明显增强诱导凋亡作用。结论 紫杉醇与TRAIL联合应用能明显增强对LNCAP、Du145、PC3细胞的抑瘤效果和诱导凋亡作用。