恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+调节T细胞的检测及其临床意义

目的探讨恶性肿瘤外周血CD4+CD25+调节T细胞水平的特点及其临床意义.方法采用流式细胞术检测53例恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+调节T细胞水平及淋巴细胞亚群,并进行分层分析.结果外周血淋巴细胞亚群分析显示恶性肿瘤患者CD4、CD16阳性细胞比例在早期(Ⅰ+Ⅱ期)患者即低于对照组,但差异无显著性意义(P＞0.05),CD4/CD8亦低于对照组,差异有显著性意义(P＜0.05);随着疾病进展(Ⅲ、Ⅳ期)CD4、CD4/CD8、CD16阳性细胞比例减低明显,差异有显著性意义(P＜0.05);各期CD8、CD19、CD3与对照组接近(P＞0.05).外周血CD4+CD25+调节T细胞比例健康对照组CD4+CD25+T细胞水平为(14.49±4.69)%,恶性肿瘤53例CD4+CD25+T细胞比例为(19.61±8.17)%,统计学有差异(P＜0.05);进一步分层分析显示随疾病进展外周血CD4+CD25+T细胞水平升高,在肿瘤进展期(Ⅳ期)尤其明显,统计学有极显著差异(P＜0.01).结论恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+调节T细胞水平的升高,与恶性肿瘤免疫功能低下及肿瘤的发生发展密切相关.去除这群细胞可有效诱导肿瘤免疫,为肿瘤治疗提供一种新的方法.     

117例肝癌患者外周血调节T细胞水平及其临床意义

背景与目的:CD4 CD25 T细胞又称为调节性T细胞(Treg),是一群具有免疫抑制功能的T细胞亚群.近来的研究表明Treg能够显著地抑制免疫反应,导致肿瘤细胞的免疫耐受.然而,Treg在肝癌临床中的意义目前尚未阐明.本研究旨在探讨Treg水平与肝癌临床病理特征及预后的关系.方法:采用前瞻性研究设计,117例原发性肝癌患者于1999年1月至2000年12月住院且首次行肝癌根治性手术切除,术前用流式细胞仪检测其外周血Treg水平.术后随访至2005年12月30日.分析外周血Treg水平与肝癌临床病理特征及生存率的关系.40例正常对照来自健康献血者.结果:肝癌患者外周血中Treg的水平为(12.54±4.69)%,正常对照组为(8.81±1.98)%,两者比较差异有显著统计学意义(P＜0.01).全组1、3、5年生存率分别为83.8%、49.6%、35.9%.在单个病灶的患者中,Treg水平与肿瘤的边界有关,肿瘤边界不清楚者Treg水平显著增高;外周血Treg水平与其它临床病理特征无关.外周血Treg水平增高的患者预后差.结论:肝癌患者外周血Treg比例升高是影响预后的独立危险因素.     

食管癌患者外周血调节性T细胞亚群格局变化及其临床意义

[目的]分析食管癌患者外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞(Treg)占CD4+T细胞的比例变化.[方法]采用流式细胞仪检测104例食管癌患者和68例健康及良性疾病对照者外周血中CD4+CD25+CD127-Treg占CD4+T细胞的比例,分析其与临床分期、淋巴结转移及外膜受侵的关系.[结果]食管癌患者与对照组的外周血CD4+CD25+CD127-Treg占CD4+T细胞比例分别为(5.19％±1.82％)和(4.56％±1.16％),两组比较差异有统计学意义(t=2.544,P=0.012).Ⅱa期CD4+CD25+CD 127-Treg细胞比例分别与Ⅱb期和Ⅲa期比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);不同年龄、淋巴结及外膜受侵状况患者的外周血CD4+CD25+CD127-Treg细胞比例变化比较无统计学差异(P＞0.05).[结论]食管癌患者外周血CD4+CD25+CD127-Treg占CD4+T细胞的比例明显升高,且分期高患者升高更为明显,提示可能与食管癌免疫逃逸和免疫耐受有关.     

结直肠癌患者外周血CD4+ CD25high调节性T细胞的作用

目的探讨结直肠癌患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞(Treg)的作用。方法采用流式细胞仪测定36例结直肠癌患者及30例健康对照者外周血中CD4+CD25highFoxP3 Treg、CD4+CD25highTreg、CD4+CTLA-4 Treg及CD4+T细胞水平。结果与健康对照组比较,结直肠癌组患者外周血CD4+CD25highFoxP3 Treg显著增多(P<0.01),CD4+CD25high Treg和CD4+CTLA-4 T细胞也增多(P<0.05)。结论CD4+CD25highFoxP3 Treg可能在结直肠癌发展过程中起着重要作用。     

晚期非小细胞肺癌患者外周血CD4~+ CD25~+ FOXP3~+调节性T细胞的表达及临床意义

目的探讨晚期非小细胞肺癌患者外周血CD4~+ CD25~+ FOXP3~+ 调节性T(Treg)细胞的表达及其临床意义。方法采用免疫荧光术及流式细胞仪检测50例晚期非小细胞肺癌患者及50例健康对照组外周血中CD4~+ CD25~+ FOXP3~+ Treg细胞、CD4~+ CD25~+ Treg细胞、CD4~+ T细胞和CD4~+ CTLA-4~+ T细胞的表达。结果晚期非小细胞肺癌患者外周血中CD4~+ CD25~+ FOXP3~+ Treg细胞、CD4~+ CD25~+ Treg细胞和CD4~+ CTLA-4~+ T细胞的比例均高于健康对照组(均P<0.05),CD4~+ T细胞的比例均低于健康对照组(均P<0.05)。结论晚期非小细胞肺癌患者外周血CD4~+ CD25~+ FOXP3~+ Treg细胞比例高于健康对照者,可能与肺癌患者的免疫抑制和肿瘤进展相关。     

肺癌患者外周血调节性T细胞和IL-10的检测及其意义

  目的  探讨肺癌患者外周血调节性T细胞和IL-10检测的诊断意义及与临床特征相关性。  方法  采用流式细胞仪检测60例肺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞的表达水平, 同时采用ELISA法检测IL-10的表达水平。并随机选30例健康体检者作为对照组。  结果  肺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞和IL-10的表达水平明显高于健康对照组（P < 0. 05）; CD4+CD25+T细胞与IL-10的检测结果呈正相关; 肺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞和IL-10的表达水平与临床分期有关（P < 0. 05）, 与病理类型无关（P>0. 05）。  结论  检测肺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞和IL-10的表达水平, 有助于肺癌患者病情的评估和治疗。      

胃腺癌患者外周血中CD4+T淋巴细胞表面抑制性分子PD-1的表达

目的:检测胃腺癌患者外周血中程序性死亡分子1（programmed death-1,PD-1）在CD4+T淋巴细胞上的表达水平,探讨其与胃腺癌的关系。方法:选取未经放、化疗或外科手术治疗的胃癌患者57例、疾病对照22例与健康对照20例,取新鲜抗凝血经流式细胞术（flowcytometry,FCM）检测抑制性分子PD-1的百分比例;同时对胃腺癌患者进行TNM分期比较。结果:胃腺癌患者外周血中PD-1在CD4+T淋巴细胞上的表达水平（10.91±4.36）%比疾病对照（8.14±3.65）%和健康对照（7.37±3.06）%显著升高,Ⅲ-Ⅳ期胃腺癌患者的CD4+PD-1+T细胞的百分比例（11.9±3.85）%显著高于Ⅰ-Ⅱ期（9.08±3.13）%。结论:抑制性分子PD-1在胃腺癌外周血中CD4+T淋巴细胞表面表达增加,并随胃腺癌进展而升高,提示CD4+PD-1+T淋巴细胞与胃腺癌的发生发展相关。     

氩氦冷冻消融对晚期肾癌外周血调节性T 细胞的影响*

目的：研究氩氦冷冻消融治疗对晚期肾癌患者外周血CD4 +CD 25+ 调节性T 细胞（Treg ）的影响及临床意义。方法：回顾性分析本院32例晚期肾癌患者临床资料,所有患者均于氩氦冷冻消融治疗术前、术后1～6 个月分别取外周血,应用流式细胞仪检测外周血T 淋巴细胞亚群（CD3 + T、CD4 + T、CD8 + T、CD4 +T/CD 8 +T、NK细胞、Treg 细胞）变化情况。术后1 个月采用增强MRI或CT评价肿瘤坏死情况,影像学显示肿瘤无强化区即认为肿瘤坏死,根据Cavalieri 方法计算肿瘤坏死率,进而评价肿瘤负荷。结果：冷冻消融治疗术后,Treg 细胞比例由术前（4.18± 1.58）% 逐渐下降至第3 个月达最低值（1.96± 0.54）% ,二者差异有统计学意义（P=0.001）。 CD3 +T、CD4 +T、CD4 +T/CD 8 +T、NK细胞比例分别由术前（19.26± 7.52）% 、（43.54± 12.99）% 、（1.15± 0.57）% 、（17.49±8.36）% 逐渐上升至第3 个月达最大值（30.83± 5.69）% 、（49.58± 10.76）% 、（1.84± 0.12）% 、（27.63± 8.20）% ,差异均有统计学意义（P=0.000,P=0.003,P=0.02,P=0.001）。 CD8 + T由术前（40.86± 8.89）% 逐渐下降至第3 个月达最低值（26.74± 4.29）% ,差异具有统计学意义（P=0.000）。 冷冻治疗后3～6 个月CD3 +T、CD4 +T、CD4 +T/CD 8 +T、NK、CD8 + T、Treg 细胞比例虽略有改变但差异均无统计学意义（P>0.05）。相关性分析结果表明：经氩氦冷冻治疗后Treg 细胞比例变化与肿瘤负荷下降程度呈正相关（r=0.793,P<0.01）。结论：肾癌氩氦冷冻治疗后外周血T 淋巴细胞亚群分布异常得到一定改善,抗肿瘤免疫反应增强,Treg 细胞比例变化与肿瘤负荷有关。     

B细胞非霍奇金淋巴瘤患者外周血调节性T细胞分析

目前认为B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)常伴随免疫抑制,CD4^ CD25^ -Tregs细胞是一种新型免疫抑制性调节细胞,在肿瘤的免疫抑制及免疫逃逸机制中起重要作用,但它在B-NHL患者外周血的分布情况及其免疫抑制中的作用目前尚不清楚。本文通过分析它在化疗前及化疗后B-NHL患者外周血中比例及变化规律,初步探讨B-NHL的免疫抑制机制,以及化疗对免疫抑制的影响,为有效干预患者免疫功能提供参考。     

弥漫大B细胞淋巴瘤两种预后亚型患者的外周血T细胞亚群动态监测

 　目地　检测弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者两种预后亚型（生发中心型和非生发中心型）不同治疗阶段的T细胞亚群分布,评估患者的T细胞免疫功能状态。方法　采用流式细胞术（FCM）检测34例DLBCL患者发病初、化疗期间、疗程结束后外周血中的CD+3、CD+4、CD+8和CD+4 CD+25 T细胞的分布情况。以16名健康人外周血作为对照。结果　DLBCL两种预后亚型患者化疗前外周血中CD+4 T细胞比例和CD4／CD8比值分别为（32.27±2.00）%和（0.81±0.39）,明显低于正常水平;CD+8 T细胞、CD+4 CD+25 T细胞比例分别为（40.80±6.23）%和（5.68±5.45）%,明显增高。而CD+3 T细胞比例则在整个治疗过程中保持稳定状态,与正常水平比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。化疗3个周期后CD+8 T细胞逐渐减少,而CD+4、CD+4 CD+25 T细胞、CD4／CD8比值则明显上升,至化疗6个周期结束后除了CD+4 CD+25 T细胞仍明显高于正常及化疗前水平外,余各项指标与正常水平比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。至化疗结束3个月后,CD+4 CD+25 T细胞逐渐下降至接近正常,除了化疗前生发中心型CD+3 和CD+8 T细胞比例[分别为（74.83±3.59）%和（40.80±6.23）%]高于非生发中心型[分别为（68.26±3.56）%和（33.76±5.46）%],不同治疗时期DLBCL患者两种预后亚型间各项指标差异均无统计学意义（t值分别为2.039、2.419,P值分别为0.041、0.018）。不同时期DLBCL患者两种预后亚型间各指标差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论　不同基因亚型DLBCL患者不同治疗时期均存在不同程度的细胞免疫受抑,动态监测T细胞亚群的变化可以实时了解患者的T细胞免疫功能状况。     

新辅助化疗对乳腺癌患者调节性T细胞的影响

目的探讨新辅助化疗对乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg细胞)的影响。方法采集68例乳腺癌患者新辅助化疗前1d和化疗后第10天的外周静脉血,应用流式细胞仪检测外周血中Treg细胞及CD3+、CD4+及CD8+T细胞占T淋巴细胞的百分比。定量资料分别采用独立样本或配对样本t检验进行统计分析。结果化疗前,乳腺癌患者外周血Treg细胞占T淋巴细胞的百分比较健康对照组明显增高[(4.77±0.76)%比(0.68%±0.36)%,t=21.176,P=0.000]。化疗后CD4+/CD8+较化疗前升高[(1.95±0.72)%比(1.19±0.43)%,t=8.280,P=0.000];化疗后Treg细胞较化疗前明显降低[(1.59±0.58)%比(4.77±0.76)%,t=19.041,P=0.000]。化疗有效组Treg细胞较无效组明显降低,差异有统计学意义(t=8.227,P=0.000)。结论新辅助化疗可调控乳腺癌患者机体的肿瘤免疫耐受,改善其免疫功能,从而达到治疗肿瘤的效果。     

Proportion of CD4+CD25+ regulatory T cell is increased in the patients with ovarian carcinoma

Objective: To study the frequency of the CD4⁺CD25⁺ regulatory T cells (Tregs) in the patients with ovarian carcinoma and its possible mechanism. Methods: The percentages of CD4⁺CD25⁺ Tregs in the peripheral blood lymphocytes (PBLs), tumor infiltrating lymphocytes (TILs) and tumor associated lymphocytes (TALs) from 13 patients with ovarian carcinoma and in the PBLs from 14 healthy women were determined by flow cytometry. The expression of CD69 on CD4⁺PBLs from the patients was detected. PBLs from healthy women were cultured in complete RPMI 1640 containing the supernatant from SKOV3 cell line with or without PHA (phytohemagglutinin) stimulation for 72 hours, then the percentage of CD4⁺CD25⁺ T cells was detected. Results: CD4⁺CD25⁺ Tregs in the PBLs from patients with ovarian carcinoma were significantly increased compared with those from the control. The percentage of CD4⁺CD25⁺ Tregs in TILs was higher than that in PBLs and TALs from the patients, but not significantly. The expression of CD69 on CD4⁺PBLs from the patients was negative. The percentages of CD4⁺CD25⁺ T cells in PBLs cultured with SKOV3 supernatant elevated significantly compared with those without supernatant whether PHA was added or not (P = 0.001 and 0.001, respectively). Conclusion: There is an increasing of the proportion of CD4⁺CD25⁺ Tregs in PBLs, TILs and TALs of the patients with ovarian carcinoma, which probably results from up-regulation of soluble factor secreted by ovarian carcinoma cells.     

CD4+/CD8+ T淋巴细胞在肝细胞癌组织中的浸润及与预后的相关性研究

目的 检测CD4⁺/CD8⁺ T淋巴细胞在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织中的浸润程度,并分析其与预后的相关性。方法 收集行肝切除术的HCC患者215例,采用免疫组化技术检测CD4⁺/CD8⁺ T淋巴细胞在HCC癌组织中的浸润程度,根据浸润情况比较患者肝切除术后无瘤生存率和总生存率。结果 CD4⁺ T淋巴细胞高浸润和低浸润比例分别为60.9%和39.1%。CD4⁺ T淋巴细胞高浸润组患者总生存率和无瘤生存率均显著高于低浸润组（P=0.015,P=0.038）。CD8⁺ T淋巴细胞高浸润和低浸润比例分别为34.9%和65.1%。CD8⁺ T淋巴细胞高浸润组患者的总生存率和无瘤生存率亦显著高于低浸润组患者（P=0.033,P=0.047）。结论 CD4⁺或CD8⁺ T淋巴细胞低浸润可能与HCC患者术后不良预后相关。     

EXPRESSION OF IL-2R ON PERIPHERAL BLOOD LYMPHOCYTES OF PATIENTS WITH COLORECTAL CANCER AND ITS CLINICAL SIGNIFICANCE

In recent years it has been noted that the levels of serum soluble interleukin-2 receptor (sIL-2R) in patients with malignancy were abnormally elevated and the levels of sIL-2R might be considered as an index to monitor patient's condition and assess treatment effects. But in medical literature it was reported that the levels of membrane interleukin-2 receptor (CD25) in peripheral blood lymphocytes (PBL) in patients with malignancy were various, some were elevated, some were dropped.[1] Th…     

肿瘤患者CD4+CD25+调节性T细胞流式细胞术分析

目的:分析比较肿瘤患者和健康人外周血CD4+CD25+调节性T细胞的特点,为肿瘤免疫学研究及治疗探索新方法.方法:收集并分离30例肿瘤患者和32例健康人的外周血单个核细胞(PBMCs),用荧光标记的抗人CD4及抗人CD25单抗标记肿瘤患者和健康人PBMCs细胞,FCM检测CD4+CD25+Treg细胞,分析CD4+CD25+Treg细胞在肿瘤患者和健康人中的差别.结果:肿瘤患者的CD4+CD25+Treg细胞百分数明显高于健康人(年龄<55者62.4 vs 40.4;年龄≥55者53.1 vs 31.0,P<0.05).结论:肿瘤患者的CD4+CD25+Treg细胞高于健康对照,为肿瘤免疫治疗提供新策略,通过删除CD4+CD25+Treg细胞,有可能增强抗瘤免疫反应.     

乳腺癌患者淋巴结CD4＋CD25＋T细胞和相关细胞因子的检测及相关性分析

目的探讨CD4＋CD25＋T细胞在乳腺癌发生、发展中的作用。方法将取自35例乳腺癌患者的105个肿大淋巴结,制备成单细胞悬液,应用流式细胞仪检测CD4＋CD25＋T细胞比例及CD4＋CD25-、CD8＋T细胞、NK细胞的相对水平。采用定量RT-PCR法,检测IL-2、IL-10、TGF-β1和IFN-γ的细胞因子水平。结果乳腺癌患者淋巴结中的CD4＋CD25＋T细胞水平（在CD4＋T细胞中的百分含量）与淋巴结转移相关,转移淋巴结中其水平明显高于未转移淋巴结。乳腺癌患者淋巴结中CD4＋CD25＋T细胞与CD4＋CD25-、CD8＋T细胞和NK细胞的水平呈负相关关系。乳腺癌患者淋巴结中CD4＋CD25＋T细胞水平与TGF-β1呈正相关,与IL-2、IL-10、IFN-γ无相关性。乳腺癌患者淋巴结中TGF-β1、IL-10、IFN-γ水平与淋巴结转移相关,转移淋巴结中TGF-β1、IL-10含量高而IFN-γ含量较低。IL-2与淋巴结转移无相关性。结论乳腺癌患者转移淋巴结中的CD4＋CD25＋T细胞水平高于未转移淋巴结。     

肺癌患者外周血淋巴细胞与癌细胞体外化疗药敏实验研究

目的　研究肺癌患者外周血淋巴细胞和癌细胞体外化疗药敏的相关性。方法　采用MTT法测定了 74例肺癌患者外周血淋巴细胞及其癌细胞对 15种临床常用化疗药物的敏感性。结果　肺癌患者外周血淋巴细胞与癌细胞对其中 12种化疗药的敏感性有很好的相关性 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　外周血淋巴细胞的体外化疗敏感性检测对肺癌的临床化疗药物的选择具有重要的参考价值。     

浸润性T淋巴细胞及Th细胞因子在不同类型乳腺癌中的表达

目的研究浸润性T淋巴细胞和Th细胞因子在不同类型乳腺癌中表达的意义。方法利用免疫组织化学链霉亲和素生物素法（labelled streptavidin-biotin method,LSAB）方法检测61例浸润性微乳头状癌（invasive micropapillary carcinoma,IMPC）、71例浸润性导管癌（invasive ductal carcinoma,IDC）和27例髓样癌（medullary carcinoma,MC）3种乳腺癌中浸润T淋巴细胞亚群分布以及Th细胞因子的表达。T淋巴细胞组间比较采用Kruskal-Wallis Test,组内比较采用Witcoxon Signed Ranks Test;组间Th细胞因子的比较采用x^2检验。结果CD3、CD8和CD4均表达于淋巴细胞胞膜。CD3^＋T细胞在3组间差异无统计学意义（P=0．735）。CD8^＋T和CD4^＋T细胞在3组间差异均有统计学意义（P=0．000,P=0．012）。Th细胞因子主要表达于肿瘤细胞和淋巴细胞的胞质。IL-2表达在IMPC组最低（25／61,41．0％）,其次是IDC组（33／71,46．5％）,最高是MC组（20／27,74．1％）,3组间差异有统计学意义（P=0．014）;IFN-γ的表达类似于IL-2,IMPC组最低（39／61,63．9％）,其次是IDC组（57／71,80．3％）,最高是MC组（24／27,88．9％）,3组间差异有统计学意义（P=0．019）;IL-4的表达在IDC组最高（42／71,59．2％）,其次是IMPC组（19／61,31．1％）,最低是MC组（5／27,18．5％）,3组间差异有统计学意义（P=0．000）;IL-10的阳性率在IMPC组是87．8％（47／61）,在IDC组是87．3％（62／71）,在MC组是88．9％（24／27）,3组间差异无统计学意义（P〉0．050）。结论浸润性T淋巴细胞和Th细胞因子在不同类型乳腺癌中表达不同。     

Treg 细胞与乳腺癌的研究进展

CD4＋CD25＋调节性T细胞是一类具有特殊免疫调节功能的T细胞亚群,在机体免疫稳态维持、肿瘤免疫以及移植耐受等方面发挥着重要的作用。最近,大量的研究发现CD4＋CD25＋调节性T细胞在乳腺癌患者外周血和组织中表达增加,与肿瘤的发生、发展密切相关。本文就CIM＋CD25＋调节性T细胞与乳腺癌的关系作一简要综述。