核因子kappa B与体外循环炎性反应

核因子κB(NF-κB)是近年发现的一种重要转录因子，参与多种细胞因子及免疫基因表达的转录、调节。一般情况下，NF-κB与抑制蛋白IκB结合呈非活性状态，受刺激激活后与其抑制蛋白解离，移位到核内，参与细胞因子、粘附分子、生长因子和急性期蛋白等因子的转录、调控，在炎性疾病的启动中起重要作用，并在体外循环中诱发炎性反应。现就NF-κB在体外循环炎性反应发生机制中所起的作用，并对现有NF-κB激活的抑制药物和措施作一综述。     

核因子-κB与乳腺癌的发生、发展和转移

核因子-κB(NF-κB)是参与一系列基因表达调控的关键性核转录因子,其与肿瘤关系密切,近年备受关注。本文主要讨论NF-κB在乳腺癌发生、发展、转移中的作用。     

核因子κB——急性肺损伤基因治疗的新焦点

核因子-κB(NF-κB)是一类能与多种基因启动子部化的κB位点发生特异性结合并促进转录的蛋白质的总称。体内外实验发现，NF-κB活化与TNF-α，IL-6,IL-8,ICAM-1,VCAM-1等细胞因子的基因过度表达有关，后者在急性肺损伤(ALI)的发病中起着重要作用。NF-κB的激活可能是ALI的重要发病机制。因此，通过抑制NF-κB的激活能对ALI起到防治作用。     

核因子-κB与乳腺癌的发生、发展和转移

核因子-κB（NF-κB）是参与一系列基因表达调控的关键性核转录因子,其与肿瘤关系密切,近年备受关注.本文主要讨论NF-κB在乳腺癌发生、发展、转移中的作用.     

核转录因子κB在泌尿系肿瘤的研究进展

按转录因子κB(muclear facter of kappa B,NF-κB）是一种多极性核转录因子，参与调控多种与免疫反应、凋亡、炎症、肿瘤形成和转移有关的基因表达。近年，NF-κB在肿瘤发生、耐药、转移中的作用及其机制逐渐成为医学研究的热点。     

他克莫司对移植免疫反应中核因子κB活性和淋巴细胞趋化因子表达的影响

目的研究他克莫司(FK506)对移植免疫反应中细胞核因子κB(NF-κB)活性和淋巴细胞趋化因子(Lptn)表达的影响。方法应用小鼠同种心脏移植急性排斥反应模型,分为BALB/c-BALB/c同基因对照组、C57BL/6-BALB/c异基因对照组、C57BL/6-BALB/c移植+FK506处理组。RT-PCR检测移植心组织内Lptn mRNA的表达,凝胶电泳迁移率和ELISA分别检测心脏移植小鼠脾细胞NF-κB的活性和活化T细胞核因子(NFAT)c1活性。结果同基因移植组各时间点移植心内无Lptn mRNA表达;异基因移植组和FK506处理组移植后第1天和第3天均无Lptn mRNA表达,而第5天和第7天均可检测到Lptn mRNA阳性表达,但FK506组Lptn mRNA表达受抑制。治疗剂量的FK506可以明显抑制脾细胞NF-κB和NFATc1的活性,但FK506处理组心脏移植后第5、7天脾细胞NF-κB的活性仍明显高于同基因移植组。NF-κB活性与Lptn基因转录水平呈正相关关系(r=0.775,P=0.000)。结论 FK506除了通过抑制NFATc1活性途径调控部分Lptn mRNA的表达,还可通过抑制NF-κB途径参与Lptn mRNA表达的调控。     

泛素蛋白酶体途径在激活NF-κB过程中的作用

1986年Sen和Baltimore从B淋巴细胞核抽提物中发现一种蛋白,它结合于免疫球蛋白κ轻链基因增强子的B位点,能调节κ链的转录,故命名为核转录因子κB(nuclear fac-tor,NF-κB).它广泛存在于多种生物体细胞的胞质中,能够与许多启动子核苷酸序列结合,调节细胞因子、细胞粘附分子和急性期蛋白等多种蛋白的基因转录,在机体的免疫应答、炎症反应及细胞的生长调控等方面发挥重要作用[1].     

一种新的NF-κB信号小分子抑制物

核转录因子-κB（NF-κB）能与多种细胞基因启动子和增强子序列位点发生特异性结合，调控其转录和表达，参与众多与免疫、炎症和应激反应相关的基因转录，同时也参与细胞增殖调控和凋亡等过程。近年来研究亦现实NF-κB活性失控与人类肿瘤发生密切相关。NF-κB蛋白在胞浆内与抑制性蛋白IκB结合成无活性复合物而存在，活化时IκB先被磷酸化为IκBα，随后被泛素一蛋白酶系统（UPS：由泛素活化酶E1、泛素结合酶E2与泛素一蛋白连接酶E3等组成）经泛素化及蛋白水解而降解，NF-κB被释放出来，进而进入细胞核发挥转录调控作用。     

大鼠缺氧再灌注脑损伤时核因子-κB的表达

核因子κB(NF-κB)是一种广泛存在于各种细胞(包括神经元)核内的转录调节因子，在免疫、应激反应、炎症和细胞凋亡等方面具有重要作用。但是NF-κB的活化对神经元具有保护作用还是损伤作用并不十分清楚。本研究拟应用Western印迹分析技术检测缺氧再灌注后大鼠脑皮质内NF-κB的表达，并通过观察其下游靶基因诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)的变化以期阐明NF-κB在缺氧再灌注脑损伤过程中的作用。     

核因子-κB在缺血／再灌注肠粘膜损伤中的研究进展（文献综述）

核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)是一种多向性核转录调节蛋白，参与多种炎症介质基因的转录和调控，在炎症、免疫反应中发挥重要作用。近年来研究发现肠粘膜在缺血／再灌注过程中NF-κB活化的分子机制及其与缺血／再灌注肠粘膜损伤关系的研究进展作一综述。     

NF-κB与缺血/再灌注肠粘膜损伤

核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)是一种多向性核转录调节蛋白,参与多种炎症介质基因的转录和调控,在炎症、免疫反应中发挥重要作用。近年来研究发现肠粘膜缺血/再灌注过程中NF-κB对细胞因子、粘附分子等因子的基因转录调控发挥了重要作用。现就NF-κB活化的分子机制及其与缺血/再灌注肠粘膜损伤关系的研究进展作一综述。     

核转录因子—κB与肾脏疾病

NF-κB是细胞内一个具有多向性调节作用的核转录因子,在细胞因子诱导的基因表达中起着关键性的调控作用。多种不同的刺激信号可激活核转录因子参与细胞生长、分化、粘附、凋亡及炎症反应。本篇NF-κB的性质及其与肾脏疾病的关系作一综述。     

流式细胞术快速检测急性胰腺炎核因子-κB激活的研究

核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)是细胞内一种重要的核转录因子,它在细胞因子诱导的基因表达中起关键性的调控作用,并参与了机体的免疫炎症反应等[1].     

BC047440基因调控HepG2的NF-κB活性机制的实验研究

目的 应用基因芯片进行高通量分析沉默基因BC047440后相关基因表达谱的变化,以了解BC047440通过NF-κB信号途径上游的何种分子调控NF-κB活性.方法 应用博奥公司提供的人全基因组基因芯片检测沉默BC047440基因后相关基因表达谱的改变,利用其数据库和MAS分析系统进行分析筛选,寻找NF-κB发生表达改变的上游分子并进行RT-PCR验证.结果 沉默BC047440基因后有189个基因表达改变,其中130个基因上调表达2倍以上,59个基因下调表达超过50%,其中NF-κB信号途径上游分子中仅TRAF6下降为对照组的23.06%.RT-PCR验证TRAF6的mRNA的表达下降为对照组的29.5%,与基因芯片结果类似.结论 应用基因芯片可以高通量高效率地分析沉默BC047440基因后的基因表达谱,BC047440基因可通过调控上游分子TRAF6作用于NF-κB信号途径来调控肝癌增殖.     

NF-κB与肝脏缺血再灌注损伤的研究进展

正NF-κB自1986年发现至今一直颇受关注,作为一种重要的转录因子,其在真核生物的分布及作用十分广泛。许多基因的启动子中都存在NF-κB的结合位点,在细胞因子诱导的基因表达中起关键性调控作用。肝脏缺血再灌注损伤可以诱导NF-κB激活并调控相关基因转录。鉴于NF-κB的研究工作对     

S100A10基因沉默对人软骨细胞内核转录因子NF-κB活性的影响

目的针对人S100A10基因设计siRNA序列并构建shRNA表达载体;重组载体转染人关节软骨(HCs)细胞,观察细胞内S100A10基因表达及其对细胞内核转录因子κB(NF-κB)活性的影响。方法登陆美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库,根据人钙结合蛋白A10(S100A10)基因信息,设计3条针对其编码区(CDS)区的小干扰RNA(siRNA)序列。根据设计的siRNA序列,设计两条互补的shRNA序列,构建shRNA重组表达载体;阳离子脂质体法转染shRNA重组表达载体到HCs细胞,转染后48 h,收集细胞,提取细胞总RNA及总蛋白,使用实时PCR(RT-PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)的方法检测转染后细胞中S100A10 mRNA及蛋白相对含量;Western blot检测细胞内NF-κB的P65及P50亚基磷酸化。数据统计使用单因素方差分析。结果成功设计siRNA序列并成功构建了shRNA表达载体;mRNA及蛋白含量检测结果显示,三条siRNA序列对目的基因均有沉默效果,其中1号siRNA序列最为-有效,其转染后48 h,细胞内mRNA及蛋白含量相比较未转染组细胞,分别下降了74.2%和76.4%,差异均有统计学意义(t=5.21,P0.01);HCs细胞内S100A10基因沉默,能够明显抑制核转录因子NF-κB活性,与对照组比较,P65及P50亚基磷酸化明显减弱(t=3.02,P0.01)。结论 S100A10基因沉默可以有效抑制HCs细胞内NF-κB活性。     

肿瘤坏死因子-α对肿瘤抑制基因RECK在HepG2细胞中表达的调节作用

目的 探讨肿瘤坏死因子（TNF）-α对人肝癌细胞HepG2肿瘤抑制基因RECK表达的影响，检测核转录因子（NF）-κB在RECK基因表达的调控中的作用。方法 将培养的细胞分为3组，A组用4种浓度的TNF-α（1、5、50、100μg／L）作用人肝癌细胞HepG2细胞株6h，B组用浓度为50μg／L的TNF-α分别作用HepG2细胞1、6、12、24h，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测RECK mRNA的表达；C组将NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡硌烷（PDTC，10mol／L）与TNF-α（50μg／L）同时作用以及TNF-α（50μg／L）单独作用于HepG2细胞6h，凝胶滞留电泳实验（EMSA）DNA结合反应检测NF-κB出的活性，RT-PCR和Western blot分别检测RECK基因mRNA和蛋白的表达。明胶酶谱试验检测细胞MMP-9的活性。结果HepG2细胞中RECK基因无表达。TNF-α作用后RECK的表达显著增高，作用呈时间和剂量依赖关系（P〈0．01），TNF-α能激活NF-κB并能显著抑制HepG2细胞MMP-9的活性（P〈0．01），而PDTC能显著的抑制这种作用（P〈0．01）。结论TNF-α能上调RECK基因在肝癌细胞系HepG2中的表达同时抑制细胞MMP-9的活性。而NF-κB可能参与了这一过程。     

核因子κB诱捕物寡核苷酸对肾小管上皮细胞炎症因子表达的影响

目的 研究核因子(NF)κB结合位点诱捕物寡核苷酸(NF—κBdecoyODN)对肾小管上皮细胞的NF-κB活性及下游炎症因子表达的影响。方法 (1)鱼精蛋白-脂质体法转染NF-κBdecoy ODN：将NF-κBdecoyODN与鱼精蛋白、脂质体混合，转染至TNF—α刺激培养的大鼠肾小管上皮细胞内，测定转染率。(2)凝胶电泳迟滞分析测定转染NF-κBdecoy ODN后细胞NF-κB活性。(3)RT—PCR方法检测转染NF-κB decoy ODN后细胞ET-1、iNOS、ICAM-1、VCAM-1以及MCP-1mRNA表达水平。结果 当 ／一比例为4时，鱼精蛋白-脂质体法转染率高达93．20％；转染NF-κB decoy ODN可抑制TNF—α激活的NF-κB活性，从而进一步抑制ET-1、iNOS、ICAM-1、VCAM-1和MCP-1的mRNA表达。结论 (1)鱼精蛋白-脂质体法是一种不受血清影响的高效率转染方法。(2)NF—κBdecoy ODN在体外通过抑制NF-κB活性，进而影响肾小管上皮细胞炎症因子的表达。     

转录因子诱杀性寡聚核苷酸抑制NF—κB基因治疗的研究

核因子-κB(NF-κB)是一种很重要的转录因子，其过度表达与许多疾病的免疫病理机制有关。国内外有关以NF-κB为靶点的拮抗治疗策略很多，目前针对NF-κB基因治疗已经成为非常有吸引力的治疗方法。近年的研究发现，诱杀性寡聚核苷酸抑制N-κB靶性基因治疗利用外源性含有转录因子结合序列的寡聚核苷酸来操纵转录因子和其他调节因子的基因表达，达到治疗疾病的目的，在实验中取得了一些可喜成果，但有局限性，临床应用尚需进一步研究。     

核因子-κB/I-κB传导通路在肝脏缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨核因子(NF)—κB／Ⅰ—κB传导通路在肝脏缺血再灌注损伤中的作用。方法 采用阻断大鼠部分肝血供的缺血再灌注损伤模型，左半肝缺血90min，再灌注分0、1、2、4h等时点。用凝胶滞留电泳方法测定NF—κB的结合活性；应用逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)测定肝组织中肿瘤坏死因子—α(TNF—α)、细胞间粘附因子—1(ICAM—1)mRNA的表达量。结果 肝脏缺血再灌注损伤时NF—κB与其特异性调控序列的结合活性增高且具有时相性。再灌注1～2h NF—κB结合活性增高，4h后开始降低。肝组织中TNF—α、ICAM—1 mRNA表达在再灌注2h后升高。讨论 肝脏缺血再灌注损伤时，NF—κB激活并进入细胞核内，与一些炎症因子基因启动子区特异序列结合，上调TNF—α、ICAM—1 mRNA表达，从而引起肝脏缺血再灌注损伤。