正畸力作用下大鼠牙周组织中CCR1及其相关配体的表达

目的 研究正畸力加力后CC类趋化因子受体1（CCR1）及其相关配体（CCL3、CCL5、CCL7）的mRNA在大鼠牙周组织中的表达变化规律,以探讨CCR1在正畸牙移动的作用.方法 将35只8周龄体重（220±25）g雄性SD大鼠随机分为7组,每组5只,空白对照组大鼠不安装实验装置,其余大鼠安装实验装置.安装实验装置大鼠随机选择一侧上颌第一磨牙为实验牙,对侧第一磨牙作为对照牙,采用镍钛拉簧建立大鼠正畸牙移动模型,力值50 g.实验动物分别于加力后0h、12h、1d、3d、7d、14 d处死,取大鼠上颌第一磨牙周围牙周组织应用实时荧光定量PCR法进行研究.结果 大鼠牙齿加力后,观察到牙周组织内CCR1及其配体的mRNA表达量呈现一定的时间规律：加力后12 h,CCR1、CCL3、CCL5、CCL7的mRNA表达均开始上升,CCR1 mRNA表达在3d达高峰（F=1.745,P=0.021）,CCL3、CCL5mRNA表达在1d达高峰（F=19.976,PCCL3 =0.019; F=17.114,PCCL5=0.008）,CCL7表达差异无统计学意义.CCR1及其配体的mRNA转录水平在加力时7d均下降至与对照组基本一致.结论 正畸力作用下,大鼠牙周组织中CCR1及其相关配体mRNA表达出现一过性变化,呈现短时上调规律,推测CCR1及其相关配体表达与正畸牙移动过程及牙周骨改建可能相关.     

eNOS在大鼠正畸牙移动中的表达

目的：观察内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）在大鼠正畸牙移动中的表达分布,探讨eNOS在正畸牙牙周组织改建中的意义。方法：通过正畸力牵引大鼠左上颌第一磨牙近中移动,建立大鼠正畸牙移动模型。随机分为9组,每组5只,分别为：实验加力0、3、6、12、24 h和3、5、7、14 d。大鼠右上颌第一磨牙不加力设为自身对照组。制备大鼠正畸牙移动不同时间牙周组织切片,免疫组化方法检测eNOS表达分布。结果：对照组有少量eNOS表达,实验组张力区eNOS阳性表达,且随牙齿移动时间不同表达分布发生变化。3 h组eNOS即开始表达增强,5 d组eNOS阳性表达达到最高峰值,7 d组及14 d组eNOS表达值开始减少。结论：eNOS参与正畸牙移动牙周组织改建。     

大鼠正畸牙移动中Osterix的表达

目的：通过观察大鼠正畸牙移动过程中牙周膜内转录因子Osterix（Osx）的表达,初步探讨Osx与正畸矫治过程中牙周组织改建的关系。方法：将54只雄性SD大鼠随机分为9组,每组6只,即正畸加力0、3、6、12、24 h和3、5、7、14 d组,以右侧上颌第一磨牙不加力为自身对照组,左侧上颌第一磨牙为实验组,使用自制的加力装置移动磨牙并制备组织标本。SABC免疫组织化学法检测实验性大鼠正畸牙齿移动过程中牙周组织Osx的表达。结果：对照组大鼠牙周组织中Osx低表达,实验组于加力5 d时Osx表达水平达到最高,且张力区整体上比压力区阳性染色深。结论：正畸力作用下Osx参与牙周组织的改建,是正畸成骨的调控途径之一。     

正畸力作用下压力侧Wnt10b、RANKL在牙周组织中的表达

目的: 研究大鼠在正畸力作用下压力侧wnt10b、RANKL 在牙周组织中的表达变化。方法: 将42只健康雄性SD大鼠随机分为7组,即0 h、6 h、12 h、24 h、5 d、7 d、14 d组,使用镍钛拉簧对第一磨牙向近中施加50 g正畸力,以0 h为对照组,每组处死6只。应用实时定量PCR(RT-PCR)对wnt10b、RANKL的mRNA表达进行检测。结果: Real-time PCR结果显示,与对照组相比,实验组压力侧牙周组织中Wnt10b、RANKL mRNA均有表达,其中wnt10b于加力初期表达受抑制,随后升高,于5 d达高峰随后下降,14 d恢复至正常水平。RANKL表达随加力时间延长而逐渐升高,7 d达到高峰,随后下降。结论: Wnt10b、RANKL参与正畸加力作用下的牙周组织改建。     

iNOS在大鼠正畸牙牙周膜中的表达

[摘要] 目的 观察诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthasesi,NOS)在大鼠正畸牙移动牙周膜中的表达分布,探讨iNOS在正畸牙牙周组织改建中的意义。方法 通过正畸力牵引大鼠左上颌第一磨牙近中移动,建立大鼠正畸牙移动模型。随机分为9组,每组5只,分别为:实验加力0 h、3 h、6 h、12 h2、4 h和3 d5、d7、d1、4 d。大鼠右上颌第一磨牙不加力设为自身对照组。制备大鼠正畸牙移动不同时间牙周组织切片,免疫组化方法检测iNOS表达分布。结果对照组有少量iNOS表达,实验组压力区iNOS阳性表达大于张力区,且随牙齿移动时间不同表达分布发生变化。3 d时iNOS即开始表达增强,7 d时iNOS阳性表达达到最高峰值1,4 d时iNOS表达值开始减少。结论 iNOS参与正畸牙移动牙周组织改建。     

正畸力作用下垂直型骨吸收牙周炎大鼠牙槽骨改建的实验研究

目的：观察正畸力作用下牙周炎大鼠垂直吸收的牙槽骨改建,为牙周炎的临床正畸治疗提供依据。方法：将75只10周龄雄性SD大鼠,随机分为3组,正常加力对照组（ A）、牙周炎垂直骨吸收对照组（ B）、牙周炎垂直骨吸收加力实验组（ C）,每组各25只,各组动物分别于加力后8 h,1、7、14、21 d处死,取动物模型上颌左侧第一磨牙近中牙槽骨进行组织学及免疫学检测,所得结果进行对比研究。结果：正畸加力至7d时,实验组大鼠垂直吸收侧牙周膜纤维排列紊乱,出现无细胞结构,结缔组织可见少量炎症细胞,牙槽骨表面还可见功能活跃的多核破骨细胞,与对照组相比较无显著差异,实验组大鼠牙周组织中IGF?1表达达到峰值,光密度值最高,与对照组比较有显著差异（ P＜0．05）;加力至14 d时,实验组大鼠垂直吸收侧牙周组织中RUNX2的表达达到峰值,其光密度值最高,明显高于正常加力对照组,其变化有统计学意义（P＜0．05）。结论：控制牙周炎症和消除咬合创伤后,正畸力能刺激牙周炎大鼠垂直缺损牙槽骨区域的RUNX2和IGF?1的表达增强,合成骨胶原和骨基质的能力增强,从而促进牙槽骨的改建。     

大鼠实验性牙移动牙周组织Ⅰ型胶原的表达变化

目的 研究正畸力作用下大鼠牙周膜中Ⅰ型胶原的表达变化,探讨正畸牙移动过程中牙周组织的改建机理.方法 将56只SD大鼠一侧上颌第一磨牙和前牙间用结扎丝拴结正畸用Ni-Ti螺旋弹簧,按正畸力大小分成施加50 g正畸力的轻力组28只、施加 150 g正畸力的重力组28只.对侧未做处理的磨牙作为对照组.分别于加力后3 、 6、 12、 24 h和3、 7、 14 d分7次处死,每次每组处死4只.采用免疫组织化学染色技术分别观察大鼠牙周膜中Ⅰ型胶原在机械力刺激下的免疫阳性表达变化及相互关系.结果 加力侧与对照侧牵张区之间的染色强度差异有统计学意义(P＜0.05),轻力组与重力组压缩区与牵张区染色强度差异有统计学意义(P＜0.05),牵张区染色强度明显高于压缩区.牵张区1～3 d开始强表达,一直持续到14 d;压缩区1 d后开始表达减弱, 7 d后开始回升.另外发现50～150 g正畸力对大鼠牙周组织无明显破坏.结论 机械力作用下,大鼠牙周膜Ⅰ型胶原代谢发生变化,牵张区表达增强,压缩区表达减弱;机械力作用下Ⅰ型胶原表达变化与时间密切相关; 50～150 g的机械力范围是实验鼠正畸用力的安全范围.     

大鼠正畸牙移动过程中牙周组织NGF的表达变化

目的了解大鼠正畸牙移动过程中牙周组织内神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的变化,探讨NGF在正畸牙移动过程中的作用。方法将85只雄性SD大鼠随机分为17组,其中空白对照组(0d组)、实验加力和对照不加力组各6h、12h、24h、3d、5d、7d、14d、21d组。选择左上第一磨牙作为实验牙,制备大鼠正畸牙移动不同时间牙周组织切片,进行免疫组织化学研究。结果正畸牙移动过程中,牙周组织内NGF表达发生改变。NGF表达量在正畸模型加载后迅速上调,实验组和对照组分别于5d、1d时表达水平达到最高,所有观察区域牙周膜内NGF表达显著增加,且实验组明显高于对照组。结论NGF在正畸牙移动过程中牙周组织改建的多个阶段起作用,参与了牙周膜早期的炎症反应及修复和晚期的改建。     

The effect of orthodontic forces on calcitonin gene-related peptide expression in human dental pulp

Introduction

The purpose of this study was to quantify the effect of moderate and severe orthodontic forces on calcitonin gene-related peptide (CGRP) expression in healthy human dental pulp.

Methods

Thirty human dental pulp samples were obtained from healthy premolars in which extraction was indicated for orthodontic reasons. Before extraction, teeth were divided into 3 groups of 10 premolars each: (1) the control group: healthy premolars without application of orthodontic forces; (2) the moderate force group: a 56-g force was applied to the premolars for 24 hours; and (3) the severe force group: a 224-g force was applied to the premolars for 24 hours. All dental pulp samples were processed, and CGRP was measured by radioimmunoassay.

Results

Greater CGRP expression was found in the severe force group followed by the moderate force group. The lower CGRP values were for the control group. The Kruskal-Wallis test showed statistically significant differences between groups (P < .0001). Least significant difference (LSD) post hoc tests showed statistically significant differences in CGRP expression between the control group and the severe force group (P < .0001) but not with the moderate force group (P = .06). Differences between the moderate and severe force groups were statistically significant (P < .0001).

Conclusions

CGRP expression in human dental pulp increases when teeth are submitted to severe orthodontic forces.     

Levels of gingival crevicular fluid matrix metalloproteinases in periodontally compromised teeth under orthodontic forces

Objective:To examine levels of matrix metalloproteinases (MMPs)-1, -2, -3, -7, -8, -12, and -13 in the gingival crevicular fluid (GCF) of periodontally compromised teeth at different time points during orthodontic movement.Materials and Methods:Ten controlled periodontitis subjects were submitted to orthodontic treatment. One dental arch was subjected to orthodontic movement, and teeth in the opposite arch were used as controls. GCF samples were collected from the lingual sites of two movement and two control incisors 1 week before orthodontic activation (−7 d), immediately after orthodontic activation, and after 1 hour, 24 hours, and 7, 14, and 21 days. Multiplexed bead immunoassay was used to measure MMPs in GCF. Data were analyzed using Friedman and Wilcoxon statistical tests.Results:The only significant change found over time was in the levels of MMP-1 in the movement group (P < .05). When the two groups were compared after activation, the only statistically significant difference found was in levels of MMP-12 24 hours after activation (P < .05).Conclusions:Our findings suggested that the orthodontic movement of periodontally compromised teeth without active pockets did not result in significant changes in the GCF levels of MMPs.     

正畸力作用轻度牙周炎患牙后龈沟液中RANKL、OPG的表达

目的检测正畸力作用轻度牙周炎患牙后龈沟液中核因子κB受体活化子配体(receptor activator for NF-κB ligand,RANKL)、骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)的浓度变化,探讨正畸力是否加重患牙的牙周损伤。方法选择20例无牙周炎病史正畸患者和20例伴有轻度牙周炎但炎症已被控制的正畸患者;分别在正畸加力后0 h、1 h、24 h、7 d、14 d、21 d收集上颌双侧尖牙远中龈沟液;应用酶联免疫吸附(enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)实验测定龈沟液中RANKL、OPG浓度;分析正畸过程中RANKL、OPG的变化趋势及两者比值。结果在正畸加力后各时间点,两组患者龈沟液中RANKL、OPG浓度无明显差异(P>0.05),除加力后7 d外,其他时间点龈沟液中RANKL/OPG比值无差异(P>0.05);以加力后0 h作对照,各时间点组内患者龈沟液中RANKL浓度均升高(P<0.05),在加力后7 d达到最大值;而各时间点组内患者龈沟液中OPG浓度均降低(P<0.01),在加力后7 d,OPG浓度最低;此外,RANKL/OPG比值均增加,同样在加力后7 d达到最大值。结论在相同正畸力作用下,伴牙周炎患牙牙周组织骨改建活动无明显异常;因此,恰当的正畸力不会引起轻度牙周炎患牙牙周病变加重。     

骨疏康对大鼠实验性根吸收过程中MMP-2表达影响的研究

目的 初步研究在骨疏康作用下,大鼠正畸牙移动性根吸收过程中MMP-2的表达规律。探讨骨疏康在根吸收发生发展过程中的作用,为正畸临床中牙根吸收的预防和治疗提供理论参考依据。方法 选取60只雄性SD大鼠,随机分为实验组（30只）和对照组（30只）,实验组进行骨疏康制剂灌胃,对照组采用蒸馏水灌胃,给药剂量为 2.1 g/kg体重,于每天早晨灌胃一次。实验组和对照组再分别分为加力0、3、7、14、21、28 d组,每组5只,两组动物都给予0.6 N的力拉上颌右侧第一磨牙近中移动,建立大鼠正畸牙移动性根吸收模型,分别在实验的规定时间处死大鼠,HE染色观察牙根吸收形态学变化,免疫组化观察MMP-2在牙根吸收区的表达情况。结果 两组大鼠不同牙移动时间牙根吸收指数比较发现,随着加力时间的延长,各组牙根吸收指数逐渐增大,根吸收从第三天开始出现,逐渐加重,14 d后根吸收速度减慢,组间相同时间点比较,骨疏康组根吸收程度轻于对照组,除0、3 d组牙根吸收指数无统计学意义（P＞0.05）,其余各组均有统计学差异（P<0.05）。免疫组化结果显示：MMP-2在加力0 d组表达较弱,随着加力时间的延长,MMP-2的阳性细胞数目逐渐增多,对照组和骨疏康组均在7 d时呈强阳性表达,达到高峰,14 d开始逐渐下降,骨疏康组在加力21 d时MMP-2呈弱表达。对照组在加力28 d时MMP-2呈弱表达,趋于正常组织的表达水平。结论 MMP-2是牙根吸收的主要炎性介质之一,参与了根吸收的过程,骨疏康可有效地抑制正畸牙移动根吸收的发生。     

中草药灯盏花对兔正畸牙移动过程中牙周组织血管内皮生长因子表达的影响

目的 检测中草药灯盏花对正畸牙牙周组织中血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,推测其加速正畸牙移动的可能作用机理。方法 45只兔分为A、B、C组,均以双侧下颌第一磨牙为实验牙。A组右侧第一磨牙离子导入灯盏花（A-R组）,左侧导入生理盐水作为对照（A-L组）。B组安装使双侧下颌第一磨牙近中移动的正畸加力装置,同时右侧离子导入灯盏花（B-R组）,左侧导入生理盐水作为对照（B-L组）。C组为空白对照组。A、B组分别于实验的1、3、7、14 d处死,每次处死5只兔。取所有动物的双侧下颌骨标本,B组测量牙移动距离后,所有标本制成第一磨牙的牙周组织切片,免疫组化法检测VEGF的表达。结果 B组第一磨牙移动距离在加力1、3、7、14 d时依次递增,B-R组在3、7、14 d的移动距离较B-L组大（P<0.01）。免疫组化染色表明C组和A-L组VEGF表达阴性,
A-R组、B-L组和B-R组表达较强,其中B-R组表达最强;A-R组和B-R组表达高峰在实验第3天,而B-L组表达高峰出现于第7天。结论 灯盏花可能通过上调正畸牙加力初期牙周组织中VEGF的表达而加速其移动。     

He-Ne激光对兔实验性牙移动牙周组织中TGF-β1表达的影响

目的:研究局部照射He-Ne激光后,兔实验性牙移动牙周组织中转化生长因子β1(transforminggrowthfactorbeta,TGF-β1)表达的变化,探讨弱激光对正畸牙周组织改建的影响。方法:35只健康日本大耳白兔,随机分为7组:未加力组及加力1、3、5、7、14、21d组,每组5只。于双侧上颌第一磨牙至切牙间拴结不锈钢螺簧,80g力拉上颌第一磨牙向近中移动。加力组动物采用自身对照,右侧为照射侧,左侧为对照侧。除1、3d组分别照射1次、3次外,其余各组连续照射5次,每天1次。制作以上颌第一磨牙为中心的近远中方向的组织切片,行TGF-β1免疫组化染色。镜下观察,并对图像分析的灰度积分应用统计学软件SPSS10.0进行两样本均数比较t检验。结果:未加力组与加力各组牙周组织的张力区和压力区中TGF-β1均有表达。压力区照射侧1d组牙周组织TGF-β1表达显著低于对照侧(P<0.05),而3～5d组照射侧TGF-β1表达则显著高于对照侧(P<0.05),高峰值出现在牙受力后第5天。张力区TGF-β1表达在加力3～7d组照射侧高于对照侧(P<0.05),高峰值也出现在牙受力后第5天。结论:He-Ne激光照射有效地促进了TGF-β1在兔实验性牙移动牙周组织中的表达。     

高度浓缩生长因子对MC3T3-E1成骨细胞生物学性能的影响

目的：观察高度浓缩生长因子（concentrated growth factor,CGF）对成骨细胞生物学性能的影响。方法：将MC3T3-E1细胞在CGF环境下进行培养,并设立空白对照组。扫描电镜观察成骨细胞在CGF表面的附着;培养1、4、7 d后,检测细胞增殖情况以及碱性磷酸酶（ALP）活性;茜素红染色观察矿化结节和成骨相关基因Runx2的表达。CGF浸出液培养细胞24 h后,以鬼笔环肽染色观察细胞骨架的形态变化。采用 SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果：CCK-8比色显示,培养1、4、7 d,在相同时间点,实验组与对照组相比,CGF细胞增殖活性显著增强（P< 0.05）。ALP活性检测显示,培养1 d后,实验组与对照组无显著差异（P>0.05）;培养4、7 d后,实验组与对照组相比,ALP活性具有显著差异（P<0.05)。茜素红染色显示,CGF组钙化结节数量增多且面积较大。鬼笔环肽染色和DAPI染色可见,CGF组中细胞数量增多,细胞铺展面增大,肌动蛋白形态更为清晰。CGF可促进Runx2 mRNA表达（P<0.05）。结论：CGF可促进MC3T3-E1细胞的增殖、分化以及Runx2的表达。     

糖基化终产物对人牙周膜细胞增殖和NF-κB mRNA表达的影响

目的:研究比较在体外高糖、糖基化终产物(advanced glycation end of products,AGEs)刺激环境下对人牙周膜细胞(hPDLFs)增殖能力和NF-κB mRNA表达的影响。方法:选取因正畸治疗而拔除的前磨牙体外分离培养人牙周膜细胞,根据不同的刺激环境分为阴性对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖)、AGEs组(100μg/mL AGEs)3组。培养12、24、36 h,3个时间点,使用Real Time PCR检测各组NF-κBmRNA的表达差异情况;流式细胞仪检测培养hPDLFs 36 h时细胞增殖差异情况。结果:在培养12、24、36 h,高糖组和AGEs组NF-κB mRNA的表达均高于阴性对照组(P<0.05),其中AGEs组最高,与高糖组相比,24、36 h时均有统计学差异(P<0.05);培养36 h AGEs组hPDLFs增殖能力明显低于阴性对照组和高糖组(P<0.05);高糖组与阴性对照组相比无统计学差异(P>0.05)。结论:AGEs能够显著的抑制hPDLFs增殖,并上调NF-κB的表达呈时间依赖性。