83-1型高压蒸汽灭菌用生物与化学指示剂

<正> 上海市卫生防疫站在实验室试制成一种用于监测高压蒸汽灭菌的生物与化学指示剂。该指示剂由热敏变色化学药物与嗜热脂肪杆菌芽胞悬液(含培养基)组成,合并封装于安瓿中,其液体红色透明。经实验室观察,保存一年,芽胞的抗力无变化。使用时,将安瓿放于灭菌物品的中央,或灭菌器柜室中温度不易达到的部位。当灭菌温度达到121℃,作用20分钟后,安瓿内     

金霉素粉快速溶解法

1.溶解前先将装金霉素粉的安瓿充分震动,使贴在安瓿壁上的药块脱落散开,然后打开安瓿待溶。2.以无菌注射器抽取甘氨酸钠液,撤除针头,沿装金霉紊粉安瓿的内壁推入3～5毫升,迅速摇动安瓿,     

细菌鞭毛染色的效果和影响因素

目的探讨在细菌鞭毛染色过程中,各种因素对染色效果的影响。方法将受试菌种在不同琼脂浓度的培养基中培养一定的时间后,移至无菌蒸馏水中孵育,然后进行鞭毛染色。结果细菌鞭毛在液体或半固体培养基中能较好地体现动力;培养8～12h为鞭毛形态观察最佳时间;镜检显示以6×108/mL的菌悬液,在无菌蒸馏水中舒展10min,染色5min的效果最好。结论在细菌鞭毛染色过程中,培养基的琼脂浓度、菌种的培养时间、细菌在无菌蒸馏水中舒展时间、染色液的配制、染色时间等因素都会影响染色效果。     

密封安瓿作氨基酸培养基管

鉴别各种革兰氏阴性杆菌,经常需用氨基酸试验.但是这些培养基用量不多,放置时间稍长些就易蒸发干燥.我们将培养基分装于2毫升安瓿内,每支1毫升,用喷灯熔封安瓿口,8磅15分钟灭菌,置室温     

用半固体安瓿保存菌种

将本室分离的和质控标准菌共98株,分别接种于半固体安瓿中(每安瓿含半固体培养基1.2～1.5ml),37℃温育18～24h,加灭菌液体石蜡后,酒精喷灯熔封,贴上标签,置冰箱保存.结果4株金黄色葡萄球菌、5株大肠埃希氏菌、3株致病性大肠杆菌、4株枸橼酸杆菌、4株阴沟杆     

淋巴细胞分离液的长期保存

为使细胞分离液能长期保存,我们取40g/dl 聚蔗糖(上海试剂二厂)19毫升,60g/dl 泛影葡胺(北京第三制药厂)20毫升,0.1g/dlNaHCO_3 81毫升混匀,pH为7.2～7.4,比重1.075.封装安瓿,每支2毫升,8磅20分钟灭菌,室温保存.三年后测试,效果与新配制分离液完全一致.     

去除嗜热脂肪杆菌芽胞悬液中繁殖体方法的研究

研究表明，用溶菌酶处理法去除嗜热脂肪杆菌芽胞悬液中繁殖体，可使芽胞悬液于４℃或室温下保存１３个月不出现繁殖体，保存６个月芽胞的热抗力无明显下降。用１００℃杀灭者的水悬液或甲醇悬液，于４℃保存１月后均有繁殖体出现，至３个月繁殖体所占比例多达５０％。     

对DNA探针检测培养物中军团菌的评价

近年来,DNA 探针技术已开始应用于军团菌科的鉴定。为了使其进一步完善,本文作者就对培养物中军团菌检测的DNA 探针的性能进行了研究。作者搜集了156份临床和环境分离的军团菌标本(其中嗜肺军团菌125份;其它军团属菌31份,共22个种)和106份革兰氏阴性非军团菌标本。前者经两次含有0.1%α-酮戊二酸的缓冲炭酵母浸液培养基在35℃的湿润空气中孵育(24～96小时),收集细菌混悬于无菌蒸馏水中,使之接近于麦氏硫酸钡标准比浊管的第四管浊度。此悬液保存于5℃,两     

消毒试验用芽胞的离心洗涤

<正> 芽胞的离心洗涤是芽胞悬液制备过程中的一个重要步骤,其目的是去除其中所含培养基的残存物质及细胞的裂解物质,以得到较纯净的芽胞悬液。试验证明,经下述离心洗涤的芽胞,于冰箱中保存半年以上仍很稳定。芽胞的离心洗涤包括以下三个步骤:①第一阶段离心,主要是去除芽胞液中培养基的残存物质。将经过滤的芽胞液,在无菌条件下移入灭菌离心管中加盖连同套管放于天     

引起血流感染常见的革兰氏阴性杆菌蛋白指纹图谱的建立

目的建立引起血流感染的临床常见革兰氏阴性杆菌的蛋白指纹图谱,为血流感染快速诊断奠定基础。方法在血培养分析仪报阳后8小时内抽取报阳血培养基3 ml,经离心、红细胞裂解液溶解红细胞及无菌去离水洗涤后,留取细菌悬液,应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrome-try,SELDI-TOF-MS)和Au蛋白芯片检测细菌蛋白,采用Ciphergen Proteinchip软件自动采集数据。每个标本重复测定4次评价SELDI-TOF-MS检测细菌蛋白的重复性。结果在分子量5～20 kD范围内不同种细菌具有不同的蛋白指纹图谱;同种细菌具有相似的蛋白指纹图谱,主要蛋白峰分子量的变异系数<0.1%;同一株细菌蛋白指纹图谱具有很好的重复性,主要蛋白峰分子量的变异系数<0.05%。结论在分子量5～20 kD范围内不同种细菌具有特征性蛋白指纹图谱,为血流感染病原菌的快速鉴定提供了新思路。     

一种简单实用的菌种保存方法

1材料和方法1．1材料①离心管：1．5ml，1．0ml均可。②空心导线：直径1．5～3．0mm．（可用电源导线抽去铜芯人③冷冻培养液：保存普通细菌（如革兰氏阴性杆菌，葡萄球菌和芽胞杆菌等）用营养肉场即可。苛养菌用含有15％甘油的高营养肉场培养基或加入一定量的免血清。1．2制作方法将空心导线剪成2～3mm大小碎段与高心管分别放人75％酒精中浸泡lh。浸泡后置灭菌纱布上紫外灯下晾干。碎导线分装于离心管内，冷冻培养液分装离心管备用（培养液可随用随加，未加培养液的离心管冰冻保存）。1．3保存与复苏将对数生长期的细菌用灭菌棉签刷取浓悬…     

肺炎链球菌、乙型溶血性链球菌的鸡胚尿囊腔保存法

目前菌种的保存方法有多种,其中最好的保存方法是低温真空干燥法,但一般实验室很难做到.半固体穿刺保存法较易操作,而许多对营养要求较高的细菌又不能用此法保存.为此,我们对肺炎链球菌、乙型溶血性链球菌采用鸡胚尿囊腔接种保存法.实践证明,肺炎链球菌、乙型溶血性链球菌用该方法可以保存1年以上,且生物学特性均无改变.方法如下.选新鲜受精鸡蛋,40℃温箱孵育11天(每天翻1～2次).取肺炎链球菌、乙型溶血性链球菌纯种接种于血平板.37℃24h 后用无菌盐水将菌苔洗下呈悬液(浓度约为10~6个/ml).用检蛋灯照检后定好胚位,     

用安瓿封装培养基制备菌液

基层医疗单位细菌室在中段尿细菌培养(菌落计数)、药敏试验、血浆凝固酶试验等工作中均需用生理盐水、蛋白胨水或ＭＨ培养基制备细菌悬液,以往都是用小试管分装上述制剂后高压灭菌、室温保存。由于工作量较少,配制的试剂久置不用,或蒸发使容量与浓度变化,或在胶塞上长出霉点,夏     

柰瑟氏淋球菌在液体发酵培养基中的鉴定

培养基:液体培养基(ANM)的组成为(?)胨15.0克,氯化钠4.0克,磷酸二氢钾1.0克,玉米淀粉或可溶性淀粉1.0克,碳酸氢钠0.15克,葡萄糖5.0克及蒸馏水1000毫升。调整至pH7.2,用115℃高压灭菌10分钟。培养基加上2%无菌的添加液,此添加液由L-谷酰胺1.0克,硝酸铁0.05克和辅羧酶0.02毫克,溶解在100毫升蒸馏水中组成。分别配制     

计数人全血T淋巴细胞的新的简易快速法:大肠杆菌玫瑰花试验

作者介绍一种新的计数人全血T淋巴细胞的细菌玫瑰花技术(即大肠杆菌玫瑰花试验),采血量少,简易,快速且不需特殊设备。将真空冻干的大肠杆菌(ATCC 11303)(S-igma)接种于硫羟乙酸盐培养基中培养24小时。用0.15MNaCl洗后,在10%甲醛(PH7.2的磷酸盐缓冲盐水配制)中固定过夜,用盐水充分洗涤,然后置分光光度计取650nm波长,以盐水将细菌浓度调整至光密度15。此悬液可保存数月。试验时,取肝素抗凝血100ul,用Hanks 液洗一次,低速离心,吸去     

雾化液配制后有效使用时间的研究

目的 探讨雾化液配制后的有效使用时间.方法 于雾化液配制后24,48,72,96 h分别取0.1 ml直接接种于普通琼脂培养基进行细菌培养,同时分别取8 ml加入无菌小瓶送药剂科进行药物稳定性分析.结果 雾化液配制后72 h内无细菌生长、药物稳定性良好.结论 雾化液配制后的有效使用时间为≤72 h.     

广安市个体诊所使用中消毒剂质量调查

<正> 为了解广安市个体诊所消毒效果,搞好个体诊所消毒管理工作,于2000～2002年期间对个体诊所使用中消毒剂进行了监测。 在无菌条件下,用无菌吸管吸取1ml使用中消毒液或器械保存液加入9ml中和剂中混匀,检测细菌总数。     

快速鉴定肠球菌的氯化钠—七叶苷水解试验

D群链球菌中肠球菌的鉴定在临床上是很有意义的.常用的方法是胆汁-七叶苷和耐盐试验.这些试验需要细菌生长,经24～48小时才能判定结果.该文作者介绍了一种不依赖细菌生长的2小时快速鉴定方法.试验培养基:七叶苷2.0克,枸椽酸铁铵0.5克,氯化钠50.0克,磷酸氢二钾0.4克,磷酸二氢钾0.1克,溶解在1000毫升蒸馏水中,调pH为5.6±0.2.(pH低于或高于这个范围均会影响试验结果.)分装试管,每管0.5毫升,保存于4℃中备用.     

医院临床细菌学诊断所用标本的采取与运送

8穿刺液标本的采取与运送穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等。均应于无菌操作下行穿刺术采取，无菌法将穿刺液注入无菌试管或小瓶中，与无菌抗凝剂混匀后立即送检或置4C冰箱保存疑为淋病住关节炎时关节液采取后立即送检或床旁接种。胸水与腹水可取5～10ml，心包液与关节液可取2。smlo9胆汁液标本的采取与运送9．l十二指肠引流法无菌操作下用十二指肠引流管采取胆汁，将胆汁B部分接入无菌小瓶内立即送检或置4”C冰箱内保存。9．2胆囊或胆管穿刺法于经度肝胆管穿刺术（PTC）中或手术中直接穿刺胆囊、胆管采取胆汁。10生殖系…     

一种简化的T淋巴细胞培养基

1.培养基配制:于100毫升注射用水瓶内抽取10毫升注射用水弃去,注入 Hamk's液甲原液5毫升,0.5%酚红0.1毫升,高压灭菌15磅30分钟,取出注入煮沸消毒 Hamk's 原乙液5毫升,PHA 50毫克,“PHA 用广州医药工业研究所10毫克注射用针剂”,青霉素“2万单位/毫升”0.6毫升,链霉素“0.5克”0.25毫升,肝素“500单位/毫升”3毫升。必要时