湖南衡山、浏阳县临床确诊97例钩体病人血清dot－ELISA与MAT检测结果比较

湖南衡山、浏阳县临床确诊９７例钩体病人血清ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ与ＭＡＴ检测结果比较中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所（北京，１０２２０６）时曼华，梁中兴钧端螺旋体病（简称钩体病）的临床表现复杂多样，散发时颇易误诊和漏诊。国内外常用的实验诊断方法是...     

酶免疫斑点试验检测钩端螺旋体病抗体的研究

酶免疫斑点试验检测钩端螺旋体病抗体的研究文建华，张万里，郑夔，何剑峰，社志明为了使钩端螺旋体病（以下简称钩体病）的诊断向快速、特异、敏感的方向发展，我们开展了用酶免疫斑点试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）方法检测钩体病人血清ＩｇＭ和ＩｇＧ抗体的研究，并与显微...     

Dot—ELISA法检测伤寒特异性IgM抗体的研究

对４３份伤寒杆菌培养阳性及７８份临床确诊为伤寒的病人血清，用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测伤寒特异性ＩｇＭ抗体，其阳性率分别为９５．６５％和９３．５９％，明显高于ｗｉｄａｌ’ｓ反应的７８．２６％和７５．６４％（Ｐ〈０．００１）。对１０４份非伤寒人及２３０份正常人血清标本，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ试验仅有３．８９％的交叉反应，而Ｗｉｄａｌ’ｓ反应交叉率达到８．３８％，二差异有显性意义。Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ试验     

Dot－ELISA法检测伤寒特异性IgM抗体的研究

对４３份伤寒杆菌培养阳性及７８份临床确诊为伤寒的病人血清，用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测伤寒特异性ＩｇＭ抗体，其阳性率分别为９５．６５％和９３．５９％，明显高于ｗｉｄａｌ’ｓ反应的７８．２６％和７５．６４％（Ｐ＜０．００１）．对１０４份非伤寒病人及２３０份正常人血清标本，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ试验仅有３．８９％的交叉反应，而Ｗｉｄａｌ’ｓ反应交叉率达到８．３８％，二者差异有显著性意义。Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ试验操作简便，１．５ｈ即可获得明确结果．制成的抗原片在４℃冰箱中可保存６个月，作为伤寒快速诊断方法具有较大的实用价值。     

用ELISA检测大鼠血清中肾综合征出血热病毒特异性抗体

本研究应用单克隆抗体（ＭｃＡｂ）技术，建立了三种检测大鼠血清中肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）特异性抗体的ＥＬＩＳＡ。通过与间接免疫荧光法（ＩＦＡＴ）对比试验发现，三种ＥＬＩＳＡ在检出大鼠血清ＨＰＲＳＶ特异性抗体的阳性率和敏感性上均明显高于ＩＦＡＴ试验，并且ＥＬＩＳＡ与ＩＦＡＴ总检出符合率为８８．５％。此外还发现由于引入小鼠抗大鼠Ｋａｐｐａ轻链ＭｃＡｂ，抗体捕捉ＥＬＩＳＡ和间接夹心ＥＬＩＳＡ具有早期诊断的特性，这些方法的建立对野生及实验动物的ＨＦＲＳＶ流行病学监测及检疫有一定价值。     

用Dot—ELISA方法快速检测钩端螺旋体抗体IgG

用Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ方法快速检测钩端螺旋体抗体ＩｇＧ蔡俊源检测构端螺旋体（以下简称钩体）抗体的方法有多种［１］，但各有不足，有的设备昂贵，不适宜于基层开展工作。有的需时较长，不适宜于快速诊断。为此，我们用酶免疫斑点－ＥＬＩＳＡ深圳市沙头角卫生防疫站（...     

广东省清远市2007年钩端螺旋体病监测分析

目的对2007年广东省清远市钩端螺旋体病（以下简称钩体病）疫情、人群及宿主动物监测情况进行分析，为制定防治措施提供科学依据。方法采集相关人群及宿主动物血清，用显微镜凝集试验（MAT）进行抗体测定；采集相关人群全血、宿主动物脏器做钩端螺旋体分离培养及分群鉴定。结果报告钩体病8例，发病率0．23／10万。流行前健康人血清抗体阳性率为19．897％，菌群以黄疸出血热为主；流行后期健康人血清体抗阳性率为15．54％，菌群以七日热为主；流行期疑似病人血清抗体阳性率为0．88％，菌群为七日热。鼠血清抗体总阳性率为18．15％，黄毛鼠、板齿鼠、褐家鼠、臭鼬鼯和施氏屋顶鼠的血清抗体阳性率在14．08％～50．00％之间，菌群以秋季热群为主，其次为波摩那群，黄胸鼠和青毛鼠血清抗体阳性率为零；水禽（鸭）血清抗体阳性率为2．0％，菌群为犬热群。未从人群及宿主动物中分离出钩端螺旋体。结论该市人群及宿主动物钩体病隐性感染水平均较高，出现钩体病发病年龄组后移。     

聚合酶链反应检测沅江县牛尿中的钩端螺旋体DNA

本研究应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物的凝胶电泳及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ，检测湖南４３份牛尿标本中的钩端螺旋体ＤＮＡ，前法阳性率为９．３％，后法为１４％，表明牛群具有较高的带菌率，是钩端螺旋体的主要宿主，是钩端螺旋体病的重要传染源。     

不同血清学方法诊断弓形虫病的比较

本研究应用ＩＨＡ、ＩＦＡＴ和ＥＬＩＳＡ法诊断技术，对采自本站日常门诊１３０份人血清进行弓形虫抗体检测，对其敏感性和特异性等指标进行比较，结果是ＩＨＡ、ＩＦＡＴ和ＥＬＩＳＡ的弓形虫抗体阳性率分别为６．９２％（９／１３０）．８．４６％（１１／１３０）和１５．３８％（２０／１３０）。３种试验方法以ＥＬＩＳＡ较敏感和特异，总符合率为８２．３１％。３种方法阳性率（％）之比为１００．００．１２２．２５：２２２．２５。ＥＬＩＳＡ法的稳定性，重复性和特异性优于ＩＨＡ法，而且操作简便、反应快速，不需特殊仪器设备，还可目测结果，试验成本低廉，便于推广和应用。     

三种血清学方法对马来丝虫病监测的应用研究

目的：比较三种方法监测马来丝虫病的效果。方法：间接荧光抗体试验（ＩＦＡＴ）、酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、斑点－酶联吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）。结果：检测１９９０、１９９１、１９９４年基本消灭马来丝虫病的流行区人群血清，ＩＦＡＴ阳性率分别为２４８５％、２０３２％和８３０％；ＥＬＩＳＡ阳性率分别为２１６６％、３０３２％和１５８４％；Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阳性率分别为３２５０％、１０９６％和１８８６％；总阳性率分别为４６６６％、３５８０％和３２０７％。结论：以ＩＦＡＴ法较为稳定，３种方法联合应用，可提高阳性率     

一种快速诊断钩端螺旋体病方法的研究

应用dot-ELISA和显微镜凝集试验对79份钩端螺旋体病患者血清标本进行检查。结果表明两种方法的符合率为96.19%。20份正常人血清、4份乙型肝炎病人血清和4份出血热病人血清经用dot-ELISA检测均为阴性。我们认为dot-ELISA方法具有简便、快速,适用于诊断钩体病病人。     

应用纯化重组外膜脂蛋白LipL32检测钩端螺旋体病抗体

目的 建立以纯化重组外膜脂蛋白LipL32为基础的钩端螺旋体(钩体)病抗体的检测方法 .方法 以摹因重组技术获取重组钩体外膜脂蛋白LipL32,以该蛋白为抗原,分别使用间接法和夹心法ELISA应用于不同人和鼠血清的检测,检测结果 与钩体显微镜凝集试验(MAT)进行比较,同时人血清的检测结果 还与进口试剂盒比较.结果 纯化的重组蛋白检测9例钩体确诊病例双份血清标本,三种ELISA法的检出率与MAT无明显差别.检测45份MAT阳性标本,间接法ELISA敏感性为71.11%(32/45),夹心法ELISA为80.00%(36/45),而进口 ELISA阳性13份,占28.89%(13/45),25份可疑占55.56%(25/45).特异性检测,MAT阴性血清69份,间接和夹心法ELISA特异度均为97.10%(67/69),其中检测门诊体检血清43份,间接和夹心法ELISA均为阴性,进口ELISA检测14份,也为阴性.检测非钩体发热病例血清标本16份,间接和夹心法ELISA共检出2份阳性,进口ELISA则是1份阳性,12份可疑.检测梅毒螺旋体质控阳性血清10份,四种方法 均为阴性.重组蛋白检测鼠血清标本274份,夹心法ELISA的敏感性为86.75%(131/151),特异性为99.19%(122/123),符合率为92.34%(253/274),与MAT检测结果 相符.结论 重组LipL32蛋白具有结合活性,可应用于钩体血清抗体的检测,其中夹心法ELISA对鼠血清钩体抗体的检测显示较好的敏感性和特异性,适用于钩体病现场血清流行病学大样本调查.     

江西省耕牛钩端螺旋体血清流行病学调查

目的了解江西省耕牛自然感染钩端螺旋体（钩体）菌群状况，为钩体病防治提供科学依据。方法对江西省4个县部分耕牛血清进行显微镜凝集试验。结果共采集耕牛血清样本206份，检出阳性33份，阳性率16．02％。此次共检出12个群钩体血清抗体，分群阳性率以黄疸出血群最高，为6．80％，其次为犬群、七日热群均为3．40％。耕牛血清标本的几何平均滴度（GMT）以黄疸出血群、犬群、七日热群最高，均为1：53．70。结论通过本次调查发现，耕牛自然感染率及GMT均较低，但感染的主要菌群毒力强，一旦流行条件成熟，其作为传染源的作用不可忽视。     

Leptospirosis during dengue outbreak, Bangladesh

We collected acute-phase serum samples from febrile patients at 2 major hospitals in Dhaka, Bangladesh, during an outbreak of dengue fever in 2001. A total of 18% of dengue-negative patients tested positive for leptospirosis. The case-fatality rate among leptospirosis patients (5%) was higher than among dengue fever patients (1.2%).     

90年代鄂西北地区钩端螺旋体病流行病学研究

目的：调查鄂西北地区90年代钩端螺旋体（简称钩体）病流行情况。方法：病人血清检测采用MAT和Dot-ELISA法。健康人群免疫水平检测采用MAT法,传染源调查用夹夜法捕鼠,培养鼠肾和猪肾皮质,分离钩体并鉴定钩体菌群。结果：90年代前鄂西北地区很少发生钩体病,90年代后,该地区竹溪,竹山,襄阳,宜城等县市发生钩体病964例,占该地区40年总发病数的88．93％,钩体病暴发时间主要集中在9－10月,钩体病人临床类型以流感伤寒型和肺出血型为主,分别占调查总数的70．47％和21．12％,鼠密度3．62％,鼠带菌率14．37％,健康人群血清抗体阳性率41．50％,结论：钩体病人感染菌群以黄疸出血群为主,与当地鼠,猪感染的钩体菌群一致。     

Evaluation of Lepto Dri Dot as a rapid test for the diagnosis of leptospirosis

Lepto Dri Dot is a new card agglutination test developed by the Dutch Royal Tropical Institute for the rapid diagnosis of leptospirosis. We evaluated the test in field conditions in The Andaman Islands. Patients suspected of leptospirosis who attended three primary health centres were included in the study. The test results were compared with blood culture or microscopic agglutination tests on paired serum samples; 74 of 124 patients were diagnosed as having leptospirosis based on these criteria. Lepto Dri Dot had a sensitivity of 67.6% (50/74) and a specificity of 66.0% (33/50) during week 1. During weeks 2-4 the values increased to 85.5% (47/55) and 80% (40/50) respectively. An IgM ELISA was also performed on the serum samples for comparison and this was marginally less sensitive, but more specific, during the first week of illness. The positivity rates for the Dri Dot test during days 2-3, 4-5 and 6-7 were 53.1% (17/32), 75.0% (18/24) and 83.3% (15/18), respectively. The corresponding values for ELISA were 28.1% (9/32), 54% (13/24) and 77.8% (14/18). Both Dri Dot and ELISA showed good agreement with the standard diagnostic criteria after the first week of illness (kappa= 0.65 and 0.74, respectively). The overall concordance of the two tests was 89.5 % (kappa = 0.79). The test does not require special storage or sophisticated equipment and can be performed by relatively low skilled personnel.     

三峡库区蓄水后重庆段钩端螺旋体病流行动态监测

目的分析三峡库区重庆段二期蓄水前后钩端螺旋体病（钩体病）的流行病学特征变化,了解钩体菌型谱和优势菌型,防止钩体病疫源地向三峡库区和长江下游地区扩散。方法选择长寿区和丰都县为监测点,开展钩体病传染源监测,用显微镜凝集试验（MAT）检测患者、健康人群及耕牛血清抗体。结果三峡库区蓄水前后均有散发钩体病例。2001-2005年总蓄水前和蓄水后鼠密度的差异无统计学意义（X^2=1．00,P＞0．05）。蓄水前优势鼠种为褐家鼠,蓄水后为鼩鼱。鼠带菌率为1．72%（10/583）,与PCR检测阳性率（16．51%）差异有统计学意义（X^2=51．80,P＜0．01）。患者血清钩体抗体阳性率为73．33%（33/45）,血清群以澳洲群为主。健康人群钩体抗体阳性率为26．84% （233/868）,流行前期阳性率（23．85%）与流行后期（29．86%）比较,差异有统计学意义（X^2=3．99,P＜0．05）。牛血清钩体抗体GMRT为1：29．97,优势菌群为拜伦群。结论三峡库区二期蓄水后未出现钩体病流行,蓄水前后鼠密度无明显变化,但优势鼠种发生了变化,主要流行菌群为澳洲群,人群自然感染免疫水平较低,是钩体病潜在的流行地区。     

广西百色地区肝病患者及受血者HCV感染现状调查

笔者应用ＥＬＩＳＡ法对广西百色地区１７９例各类肝病患者及４１例受血者血清进行了抗－ＨＣＶ检测。结果各类肝病抗－ＨＣＶ阳性率为１７．９％，受血者抗－ＨＣＶ阳性率为３１．７％。在急性肝炎（急肝）、慢性肝炎（慢肝）、肝硬化和肝癌中，抗－ＨＣＶ阳性率各为４．３％（１／２３）、１２．８％（１０／７８）、２８．６％（１２／４２）和２５．０％（９／３６）。抗－ＨＣＶ阳性率有随肝病慢性比而增高的趋势，肝硬化的抗－ＨＣＶ阳性率明显高于急肝或慢肝（Ｐ＜０．０５），而肝癌的抗－ＨＣＶ阳性率与急肝或慢肝相差不显著（Ｐ＞０．０５或０．１），且发现ＨＢｓＡｇ阴性肝病者的抗－ＨＣＶ阳性率明显高于ＨＢｓＡｇ阳性患者（Ｐ＜０．５），肝病患者抗－ＨＣＶ的检出率与ＡＬＴ活性无关（Ｐ＞０．０５）。在受血者中，抗－ＨＣＶ的检出率与受血次数、ＡＬＴ活性关系非常密切。因此，加强对ＨＣＶ的检测是当前预防输血后肝炎的紧迫任务。     

钩端螺旋体病血清抗体水平监测资料分析

目的通过对莒县钩端螺旋体病监测资料的分析,了解人群钩端螺旋体菌群分布和变动情况,为莒县研究钩端螺旋体病流行规律,制定预防和控制措施提供依据。方法用显微镜凝集实验,采集高发人群血清,进行钩体病抗体检测。结果 2006—2009年全县累计检测444名高发人群,血清抗体阳性者116人,阳性率26.13%;病人血清抗体对应菌群以波摩那型为主(占75.86%),其次为黄疸出血型(占29.31%)。结论莒县曾发生过波摩那型钩端螺旋体病暴发,今年监测数据显示仍以波摩那型为主,说明疫区净化效果不理想,一旦发生洪水,就有再次暴发流行的可能,应引起重视。