当归补血汤对培养心肌细胞缺糖缺氧性损伤的保护作用研究

本实验从细胞水平观察当归补血汤对培养乳鼠心肌细胞缺糖缺氧性损伤有无保护作用。结果证明,当归补血汤能够提高心肌细胞的代谢和补偿能力。     

玉竹对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用

本文运用血清药理学方法,观察了玉竹对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用,报告如下。1 实验材料 玉竹:玉竹水煎醇沉液,文火浓缩成2g/ml生药浓度,备用。RPMI1640培养基;每1000ml培养液含日产1640粉10.4g,谷胺酰氨0.292g,Hepes6.02g,NaH-     

参黄注射液对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用

本实验是在细胞水平上观察参黄液是否对培养的乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤有保护作用,同时这些观察有助于对其作用机理的进一步探讨。材料和方法一、实验药品:参黄注射液由黑龙江中医学院药理教研室提供。药品为水溶性,无菌。每毫升相当于生药1.0克。为人参、黄精、山楂所组成。二、心肌细胞培养:心肌细胞培养按常规法,用新生wigtar大鼠的乳鼠,在无菌的条件下取其心室,剪成1mm~3小碎块,用0.1％的胰蛋白酶消化。用MEM培养基制     

心肌康注射液对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤保护作用的实验研究

目的:探讨心肌康注射液对乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用。方法:实验分正常组、模型组、心肌康1.5 g/L组、心肌康3.0 g/L组4组,细胞培养3 d后,分别进行相应的处理,观察心肌细胞的搏动频率,分光光度法测定心肌细胞LDH(乳酸脱氢酶)含量,细胞化学染色观察心肌细胞LDH及SDH(琥珀酸脱氢酶)活性。结果:与正常组比较,模型组心肌细胞搏动频率明显减少;心肌康注射液2组心肌细胞搏动频率明显增加,与模型组比较,差异具统计学意义(P0.05)。与正常组比较,模型组心肌细胞LDH及SDH活性明显降低,LDH含量明显升高;心肌康2组心肌细胞LDH及SDH活性较模型组显著增强,LDH含量明显降低,统计学处理差异显著(P0.05)。结论:心肌康注射液对心肌细胞缺氧缺糖性损伤具有保护作用。     

野菊花提取物CI-2对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用

本室在筛选中草药过程中发现野菊花对实验性犬心肌缺血有明显的保护作用,并进一步证实野菊花提取物 CI-2可减小心肌梗塞范围、减轻心肌损伤程度,且具有调整心脏血流动力学等作用。迄今国内外对野菊花防治冠心病作用的研究尚少报道,我室初步实验结果表明,它有可能成为一种新的防治冠心病有效的药物。因此有必要对野菊花及其有效成分作进一步的研究。为在活的细胞水平研究药物对心肌细胞的直接保     

当归补血汤对体外培养心肌细胞的作用

当归补血汤出自《内外伤辨惑论》(元·李杲),“治肌热燥热,因渴引饮,目赤面红,昼夜不息,其咏洪大而虚,重按全无”。后世医家用于多种失血后之血虚证。我们利用培养心肌细胞可以模拟缺血缺氧的方法研究了当归补血汤、当归、黄芪对培养心肌缺糖块氧性损伤的保护作用,现将结果报告如下。     

复方黄芪注射液对培养大鼠乳鼠心肌细胞缺糖缺氧/复糖复氧损伤的保护作用

再灌注治疗是急性心肌梗塞最有效的治疗方法,但再灌注时,常常会造成氧自由基介导的再灌注损伤,故清除再灌注时所产生的氧自由基,是防止再灌注损伤的关键。许多研究表明黄芪等中药有较好的抗再灌注及抗氧化损伤的作用。本研究是从体外培养的大鼠乳鼠心肌细胞缺糖缺氧/复糖复氧损伤模拟急性心肌梗塞后再灌注损伤作为实验模型,发现由中药黄芪为主组成的复方注射液对培养的心肌细胞再给氧损伤有明显的保护作用。     

黄芪对体外培养心肌细胞缺糖缺氧性损伤保护作用的超微结构研究

近年来国内外应用体外培养心肌细胞在细胞及细胞药理学、分子生物学一些基本理论等方面研究,引起广泛的重视。为此,我们曾进行了《黄芪益气作用机理的探讨》的研究,表明黄芪对培养心肌细胞缺糖缺氧损伤有一定的调节保护作用。在上述研究的基础上,我们又着重研究黄芪对体外培养心肌细胞缺糖     

延胡索乙素对乳鼠海马神经元缺氧缺糖损伤保护作用的研究

目的:探讨延胡索乙素对乳鼠海马神经元细胞因缺糖缺氧所致损伤的保护作用。方法:建立乳鼠海马神经元细胞缺糖缺氧损伤模型。利用CCK法和预实验确定加药浓度后,将培养的细胞随机分成6组:正常组、模型组、延胡索乙素低、中、高治疗组(2、4、8μg/mL)和阳性药物对照组尼莫地平(8μg/mL)。观察延胡索乙素对乳鼠海马神经元乳酸脱氢酶(LDH)的释放量,细胞一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)含量,一氧化氮合酶(NOS)、超氧化歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性的影响;采用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率。结果:与模型组相比,延胡索乙素中、高剂量组均能显著增加细胞内SOD以及GSH-PX的活性(P0.01);能够显著减少细胞内LDH外漏以及抑制NOS的活性(P0.01);能够显著减少细胞内NO以及MDA的生成量(P0.01)。结论:延胡索乙素对乳鼠海马神经元细胞的缺糖缺氧损伤显示出良好的保护作用,其机制可能与抗氧化、抑制细胞凋亡有关。     

红景天有效成分对缺氧缺糖心肌细胞损伤的保护作用研究

目的:研究红景天有效成分对缺氧缺糖心肌细胞损的保护作用。方法:建立体外缺氧缺糖心肌细胞损伤模型,分别测定细胞MTT、LDH和MDA的变化,观察红景天单体成分红景天苷、酪醇、没食子酸、德钦红景天苷、草质素-7-O-(3'-β-D-葡萄糖)-α-L-鼠李糖苷5种成分对心肌细胞损伤的保护作用,并运用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测不同单体成分对心肌细胞HIF-1αmRNA的表达。结果:5种单体成分均有不同程度的促细胞活力,减少LDA和MDA的含量,其中单体成分红景天苷、酪醇能明显上调HIF-1αmRNA的表达。结论:红景天有明显抗缺氧作用,5种单体成分对缺氧缺糖心肌细胞损伤具有明显的保护作用,其机制与上调HIF-1αmRNA的表达相关。     

西红花酸对缺糖缺氧心肌细胞损伤的保护作用

目的　观察西红花酸 (crocetin)对缺糖缺氧心肌细胞损伤的保护作用。方法　采用氰化钠和灌封高纯氮气两种缺氧方法和低糖培养 ,造成心肌细胞缺糖缺氧损伤 ,测定其细胞培养液中乳酸脱氢酶 (L DH )、肌酸激酶(CK)的活力及心肌细胞中脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)的含量来观察西红花酸对心肌细胞的保护作用。结果1× 10 - 6 ,1× 10 - 7mol/ L 西红花酸能显著降低缺糖缺氧心肌细胞 MDA的含量以及 L DH、CK的活性。结论　西红花酸对缺糖缺氧损伤的心肌细胞具有显著的保护作用。     

舒芬太尼对培养大鼠乳鼠缺氧心肌细胞损伤保护作用的研究

目的探讨舒芬太尼对原代培养心肌细胞缺氧损伤的影响。方法将原代培养成活48h的大鼠乳鼠心肌细胞分为3组：A组为对照组（氰化钠造成心肌细胞细胞内缺氧模型）,B组为sufl组（缺氧＋0．1ng／／mL舒芬太尼）,C组为suf2组（缺氧＋0．2ng／mL舒芬太尼）。比较3组心肌细胞形态学（倒置相差显微镜,透射电镜观察）的变化及吸光度A值的改变。结果缺氧12h后,对照组细胞搏动功能变化明显,呈散在性搏动,而实验组搏动频率减慢。随着时间的延长,细胞形态学变化逐渐明显,对照组较实验组变化更显著。结论舒芬太尼对原代培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧损伤有一定的保护作用。     

积雪草苷对乳鼠心肌细胞缺血缺氧损伤的保护作用研究

目的:研究积雪草苷(Asiaticoside,AC)对乳鼠心肌细胞缺血缺氧损伤的保护作用,初步探讨其机制。方法:实验随机分为4组:正常对照组、缺血缺氧模型组、AC低剂量组(5 mg/L)、AC高剂量组(10 mg/L)。建立心肌细胞缺血缺氧损伤模型,予以AC干预6 h后,酶联免疫吸附测定(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测培养液中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的含量,蛋白印迹法(Western Blot)检测心肌细胞核因子-κB(NF-κB)蛋白表达;AnnexinV法检测心肌细胞凋亡。结果:述AC各剂量组平均荧光强度、MDA及心肌细胞NF-κB蛋白表达均显著低于缺血缺氧模型组,差异均有统计学意义(均P 0.05),SOD均显著高于缺血缺氧模型组,差异均有统计学意义(均P 0.05),且上述各项指标AC高剂量组均优于AC低剂量组,差异均有统计学意义(均P 0.05)。结论:AC对心肌细胞缺血缺氧损伤具有保护作用,作用机制与增强心肌细胞抗氧化能力、抑制NF-κB生成及减少心肌细胞凋亡有关。     

白藜芦醇对缺氧诱导大鼠乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的:观察白藜芦醇(Res)对缺氧诱导大鼠乳鼠心肌细胞损伤的保护作用。方法:建立体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧模型,MTT法检测心肌细胞活力,免疫组织化学法检测心肌细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平,检测心肌细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平和心肌细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果:大鼠乳鼠心肌细胞在体外缺氧培养24 h后,HIF-1α表达水平明显升高;心肌细胞培养液中LDH活性从正常对照组的(93.07±15.84)U.L-1上升到(750.77±181.51)U.L-1(P0.01);心肌细胞内GSH-Px活性从正常对照组(46.96±8.36)U.mL-1下降为(27.13±4.76)U.mL-1(P0.01)。25,50,75μmol.L-1Res可剂量依赖性抑制缺氧诱导大鼠乳鼠心肌细胞内HIF-1α表达增加;心肌细胞培养液中LDH含量呈剂量依赖性下降,分别为(486.17±69.97),(189.43±32.07),(155.34±29.57)U.L-1(P0.05或P0.01);心肌细胞内GSH-Px活性呈剂量依赖性升高,分别为(33.55±6.34),(37.67±6.73),(41.44±7.91)U.mL-1(P0.05或P0.01)。结论:Res对缺氧诱导大鼠乳鼠心肌细胞损伤有良好保护作用。     

丹红注射液对缺氧缺糖致乳鼠海马神经元细胞损伤的保护作用

目的:探讨丹红注射液对原代培养的海马神经元细胞因缺氧缺糖所致损伤的保护作用及其机制。方法:在体外培养新生SD乳鼠原代海马神经元细胞,并以神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组化染色法对其进行鉴定。运用MTT法确定丹红注射液安全剂量,将培养的细胞随机分成6组:正常对照组、模型组、尼莫地平(200μg/m L)阳性对照组及丹红注射液低(40μL/m L)、中(80μL/m L)、高(120μL/m L)浓度组。加药并建立乳鼠海马神经元缺氧缺糖模型。观察丹红注射液对糖氧剥夺损伤乳鼠海马神经元细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)水平,并采用流式细胞仪检测各组细胞早期凋亡率,利用试剂盒检测各组细胞Caspase-3活性,利用Hoechst33342染色观察各组细胞凋亡情况。结果:与模型组比较,丹红注射液能显著减少海马细胞上清液内LDH漏出量,增强糖氧剥夺损伤海马神经元细胞内SOD与GSH-Px活性,降低MDA含量,有效减轻缺氧缺糖损伤导致的海马神经元早期细胞凋亡,抑制细胞内Caspase-3活性。结论:丹红注射液能有效抑制缺氧缺糖所致原代海马神经元凋亡,增强机体抗氧化能力,对脑缺血具有保护作用。