山东泰安地区人群中TTV感染调查及TTV山东株基因序列分析

目的 了解山东地区输血后丙型肝炎和非甲－庚型肝炎TTV感染及基因变异的状况。方法 应用RT－PCR方法检测41例输血后丙型肝炎和16例非甲－庚型肝炎患者血清中TTVDNA，并对阳性血清扩增的产物利用PCR技术片段直接克隆法测充，分析其基因变异的情况。结果 41例输血后丙型肝炎患者血清中TTVDNA阳性检出率为19.5%(8/41)，而16例非甲－庚型肝炎患者血清中阳性检出率为31.3%(5/16)。TTV山东第一析序列与山东第二株序列相应位置核苷酸同源性与日本 株和中国第一株相比较分别为94%和91％；山东TTV的两株序列间同源性均为91％。结论 本项研究证实山东地区输血后丙型肝炎和非甲－庚型肝炎患者中存在较高TTV感染，输血可能为会传播TTV感染途径之一，是否该地区存在着不同的TTV亚型还有待于进一步调查证实。     

海口市吸毒人群TT病毒与肝炎病毒感染状况的调查

目的：研究海口市吸毒人群病毒与甲－庚型肝炎病毒感染状况。方法：对221例吸毒者进行不同因素分析，采用巢式PCR法检测血清中的TTV DNA，对一株TTV部分基因序列进行了测定，用ELISA法检测甲－庚型肝炎病毒。结果：221名吸毒人群中TTV DNA与甲－庚型肝炎病毒感染率分别为HBV45.7%,TTV DNA31.6%，HCV11．8％、HGV10．4％，HEV2．2，HAV0．4％，静脉毒瘾者，有非固定婚外性伴侣等因素与TTV，HBV，HCV感染有关，TTV与甲－庚型肝炎病毒均存在合并感染；一株TTV DNA序列与GenBank中主要序列核苷酸同源性大于98％，结论：吸毒人群是TTV和肝炎病毒感染的高危人群，静脉毒瘾者，有非固定性伴侣是TTV，HBV，HCV传播的重要因素，TTV还存在非血源性传播途径。TTV与甲－庚型肝炎合并感染后引起的作用尚须作进一步研究。     

肝炎病人中不同基因型TTV的检出及序列分析

目的：了解TTV在肝炎病人中的感染率及基因型别。方法：采用半式套式PCR方法,对72例不同型别的肝炎病人血清进行TTV DNA的PCR检测并对部分阳性株进行序列测定及计算机分析。结果：在72例不同肝炎病人中,共检出39例TTV DNA阳性血清, 总检出率为54．16％。其中在非甲庚型肝炎病人中TTV DNA阳性率为87．5％,而在明确诊断为甲－庚型肝炎病人中TTV DNA阳性率为50％,两组相比差异显（x^2＝4．0278,P＜0．05）。测序的6分离株相互间的核酸同源性为60．4％－93．2％,氨基酸的同源性为54．1％－97．3％。这6个分离株与9个G1、G2代表株核酸的同源性为60．4％－99．1％,氨基酸的同源性为55．4％－98．6％。经系统发育分析表明这6株TTV可分属于G1、G2两个基因型的4个亚型。结论：非甲－庚型肝炎病人的TTV感染率明显高于明确病原的甲－庚型肝炎的病原之一。检出的TTV至少可分属于G1、G2两个基因型中的4个亚型。     

献血员中TTV感染的检测及部分基因序列分析

目的　探讨湛江地区献血员中输血传播病毒 (TTV)的感染状况及部分TTV的基因序列。方法　采用SDS和蛋白酶K法提取 4 80份正常献血员、6 0份血清丙氨酸转氨酶 (ALT)异常献血员的血清标本DNA ,应用套式PCR方法检测TTV的感染状况 ,并对部分扩增出的阳性片段进行克隆测序 ,与国内外报道的序列进行同源性比较。结果　在 4 80份正常献血员血清标本中 ,5 2份 (10 83% )TTVDNA阳性 ;在ALT异常的 6 0份献血员血清标本中 ,15份TTVDNA阳性 ,阳性检出率为 2 5 % ,明显高于正常献血员人群 (χ2 =9 84 7,P <0 0 1)。序列分析结果显示 ,从献血员中随机选出的 5例TTVDNA阳性片段 ,其序列与日本株 (AB0 0 8394 )和中国株 (TTVCH1)相应位置核苷酸序列的同源性大于97% ,可能属同一基因型。结论　湛江地区献血员中存在TTV感染 ,输血可能成为TTV感染的传播途径之一。     

不同人群TTV检测及阳性标本核苷酸序列分析

目的了解不同人群TTV感染状况及基因型别，探讨TTV传播途径。方法设计合成引物采用半套式聚合酶链反应方法，对献血者、肝炎病人、幼儿及母婴配对等4组人群血清进行TTV DNA的PCR检测并对部分阳性株进行序列测定及分析。结果(1)在457份被检血清中检测出TTV DNA阳性111份，总阳性率24．29％。在血清转氨酶(ALT)正常的96份献血者血清标本中TTV DNA阳性检出率为16．6％，而在ALT异常、HBsAg及抗HCV阴性的99份献血者血清标本中，TTV DNA的阳性检出率为36．3％，明显高于ALT正常献血者。(2)在72例不同肝炎病人血清中，TTV DNA阳性检出率为54．16％；在非甲一庚型肝炎病人中TTV DNA阳性率为87．5％，高于甲一庚型肝炎的病人中TTV DNA阳性率。(3)110份体检幼儿血清中，共检出TTV DNA阳性14份，总检出率为12．73％。(4)一对母婴配对血清的TTV DNA同时阳性且序列相同。(5)12个阳性株序列分析结果显示：11株分属于G1、G2 2个基因型的5个亚型，而另1株与Gla、Glb的同源性为74．8％～80．2％。结论(1)献血者人群中存在TTV感染，TTV可以导致感染个体的肝功能异常。(2)TTV感染与肝炎有关，可能是非甲一庚型肝炎的病原之一。(3)TTV可能存在血源途径外的其它传播选径；TTV存在母婴垂直传播途径。     

常州地区不同人群TTV感染情况的调查

目的 调查常州地区正常人群、献血员及不同肝炎患者TTV（transfusion transmittcd virus)感染情况。方法 运用巢式聚合酶链反应（巢式PCR）对常州地区152例健康体检人员,121例正常献血员,301例不同肝炎患者进行TTV DNA的检测。结果 常州地区不同人群TTV DNA阳性分别为：正常人群10．53％、献血员11．57％、甲型肝炎12％、乙型肝炎27．16％丙型肝炎0、戊型肝炎0、庚型肝炎0、非甲－庚型肝炎34．72％。正常人群、献血员中阳性率与乙型肝炎、非甲－庚型肝炎中的阳性率相比差异有显著性（P＜0．05）。且正常人群、献血员中TTV DNA阳性者内氨酸转氨酶（ALT）均正常。结论 常州地区正常人群与献血员中TTV携带者较常见;部分非甲－庚型肝炎可能与TTV相关。     

3株TT病毒的基因组结构特点及其在肝炎病人中感染情况

目的：了解TT病毒(TTV)分离株基因组结构特点及其在各型病毒性肝炎患中感染情况。方法：对49株TTV相关病毒全基因组结构进行分子进化树分析，比较从我国分离的3株TTV全基因结构与原型株的同源性，并采用巢式聚合酶链反应法(nPCR)对各型病毒性肝炎患血清中TTV DNA进行检测。结果：3株TTV分离株基因组全长为3739bp，有2个读码框架（ORFs），ORF1编码770个氨基酸，位于589-2901核苷酸；ORF2编码202个氨基酸，位于107-715核苷酸。与TTV原型株TA278的核苷酸同源性为86％-96％，ORF1氨基酸同源性为88％-97％，ORF2氨基酸同源性为79％-96％。全基因组序列分子进化树分析表明，从我国分离的3株TTV属于原型组。在180例各型病毒性肝炎患中，检出TTV DNA阳性40例，阳性率为22.2％。在甲-戊型肝炎、非甲、戊型肝炎、慢性乙型肝炎患和正常人中，TTV DNA流行率分别为24.2％（29/120），18.3％（11/60），17.8％（106/595）和19.8％（19/96），4组无显性差异。结论：从我国分离的3株TTV的全基因结构特点与原型株相似，各型病毒性肝炎、慢性乙型肝炎和正常人群TTV DNA流行率相对较高。     

一株庚型肝炎病毒NS 3区和NS 5区部分基因序列的分析

用RT－PCR的方法从非甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病人血清中检测到一株庚型肝炎病毒（GBV－C/HGV）。其中扩增NS3区基因采用56个循环周期的减温PCR方法；扩增NS5区基因采用35个循环周期的正常PCR方法。并对其PCR产物进行了克隆测序。在NS3区，样品与GBV－C和HGV的核苷酸序列同源性分别为84．2％和89．9％；而在NS5区样品与HBV－V和HGV的核苷酸同源性分别为94．9％和98．1％，因此，NS3区的基因变异似乎大于NS5区的变异，而且这种变异可能与HCV的基因变异趋势类似。     

上海地区部分人群输血传播病毒(TTV)感染的研究

目的 调查上海地区输血传播病毒(TTV)在不同人群中的感染情况,探索TTV的高危人群和传播途径.方法 应用半巢式PCR方法检测TTVDNA,并抽取部分阳性标本的PCR产物(249bp)测定核苷酸序列.结果 检测有关人群8组计473例,其中非甲～非庚型肝炎病人60例,甲～庚型肝炎病人102例,血液透析病人55例,血液病儿童38例,健康人群68例,以及性病病人、静脉吸毒人群、肝癌病人各50例.TTVDNA总阳性率28.33%(134/473).阳性率波动在17.64%～50%.8组人群中静脉吸毒人群阳性率高达50%(25/50),性病组阳性率36%(18/50),该2组人群TTV感染率与健康人群(17.64%)相比均有显着性差异(χ²=14.01P<0.001,χ²=5.12P<0.05).其余各组群阳性率差异比较无统计学意义.将肠道传播途径的组群(甲、戊肝)与血液传播途径的组群(静脉吸毒者、血液病疾患、血液病人及乙、丙肝病人)比较分析,其阳性率分别为25.49%、32.17%.二者无显着性差异(χ²=0.46,P>0.05).20份阳性标本扩增产物测序结果,核苷酸序列与日本株(N22)同源性在85%以上的有15例,在<85%的有5例.结论 研究证实上海地区存在较广泛的TTV感染,其中静脉毒瘾者与性病患者为高危人群,传播途径除经血感染外,可能存在性接触传播及其他非血源性传播途径.TTV在人群中存在携带状态,可能是致病性不强的病毒.上海地区存在TTV毒株的变异.     

中国部分地区新型肝炎病毒TTV感染的分子流行病学

目的了解我国部分地区新型肝炎病毒ＴＴＶ感染的分子流行病学、ＴＴＶ在人群中的感染分布状况,探讨ＴＴＶ在肝炎发病中的作用和地位。方法采用ＰＣＲ方法检测血清标本中ＴＴＶＤＮＡ,克隆测定不同地理株ＴＴＶ的部分基因序列,分析其基因变异情况。结果检测了南方（广东深圳和江苏南京）和北方（北京和辽宁沈阳）的１１２例非甲～非庚型肝炎病人,其中ＴＴＶＤＮＡ阳性者４８例,阳性率４２．９％,而１０２例甲～庚型肝炎病人中阳性率为２．９％（χ２＝４２．８,Ｐ＜０．０１）。ＡＬＴ异常而无甲～庚型肝炎病毒感染标志的献血员中,ＴＴＶＤＮＡ阳性率（３４６％）明显高于ＡＬＴ正常献血员的阳性率（１６．８％,χ２＝４．５,Ｐ＜０．０１）。南方株（广东深圳ＴＴＶＣＨＮ００２、南京ＴＴＶＮＡＮ００１）和北方株（北京ＴＴＶＳＨＢ０１５）病毒间同源性在９８％以上,日本发表的序列同源性也高于９７％。结论我国北方和南方地区均存在ＴＴＶ感染。ＴＴＶ感染与ＡＬＴ异常有极为密切的关系,可能是导致非甲～非庚型肝炎的重要病原。正常人群中存在ＴＴＶ感染者,类似于ＨＢｓＡｇ的所谓“慢性携带状态”。     

输血感染TT病毒的检测及致病性的研究

目的 探讨受血者接受TTV－DVA阳性血后引起感染的情况。方法 采用套式PCR和PCR产物测序，对献血者和受血者进行TTV感染率的调查和基因序列分析。结果 223份献血者血清检出TTV感染96份（43.1%），22名受血者输注TTV－DNA阳性血后，有14名（63.6%）转为阳性，其中两名与供血者TTV－DNA序列同源性达100％。仅1例血清转氨酶轻度升高。结论 本组献血者中TTV感染率较高，TTV可经血传播感染，但其致病性较弱，4周后，少数受血者TTV－DNA可转为阴性。     

不同人群TT病毒的检测及部分核苷酸序列分析

目的：了解不同人群TTV感染状况及基因型别。方法：采用TTV（N22）区核苷酸序列设计引物，建立半巢式（nPCR）方法，对健康人群、不同型别肝炎病人、非甲-非戊型肝炎、肝硬化患者等7组人群血清进行啊VDNA检测，并对部分阳性标本进行序列测定和分析。结果：TTV在非甲-非戊型肝炎、肝硬化患者、丙型肝炎、急性甲型肝炎、急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎和健康人群中感染率分别为75．00％（15／20）、75．00％（27／36）、61．90％（13／21）、58．06％（18／31）、52．78％（38／72）、45．61％（26／57）和38．89％（28／72）。肝硬化患者及非甲-非戊型肝炎感染率明显高于健康人群（P〈0．01），也明显高于急、慢性乙型肝炎患者（P〈0．05）。5个阳性株序列分析结果显示：4株属于G1基因型，1株属于G2基因型。结论：TTV在河北地区肝病患者中有较高的感染率，TTV感染与不明原因ALT升高有一定的关系，基因型以G1型为主。     

伯氏疏螺旋体广西分离株外膜蛋白A基因的克隆和序列分析

目的：探求广西伯氏疏螺旋体外膜蛋白A（OSPA）基因变异情况。方法：应用聚合酶链反应从3株广西莱姆病螺旋体GXLD－4，9，18及1株贵州分离株长14全基因组DNA中将OSPA基因调出，并克隆到pGEM-T Easy Vector载体上，构建重组质粒，测序后与国外其它分离株进行同源性比较。结果：4株莱姆病螺旋体均扩增出约774bp的OSPA基因，编码258个氨基酸。4者之间核苷酸同源性98．8％－99．9％，氨基酸同源性98％－99％，其中GXLD－4与长14同源性最大。与国外分离株（10MT，Ya501)的同源性均较高。结论：莱姆病螺旋体OSPA基因在广西3个分离株及贵州株长14间差异较小，但与国外分离株存在一定差异。     

新疆不同人群血清中TTV病毒流行病学调查

目的 了解新疆地区不同民族，不同人群中TTV－DNA病毒的感染情况及流行病学特征。为进一步研究新疆人群中TTV－DNA病毒的分布，分子生物学性状及临床诊断奠定基础。方法 应用微板－核酸杂交PCR－ELISA技术对采集到的血样进行了TTV－DNA检测，同时进行肝功能及其他各型肝炎的检测。结果 本次共检测了不同人群的血要201人份，TTV－DNA的阳性率为12．93％（26／201）。民族与性别分布，汉族为13．04％（15／155），维吾尔族为12．79％（1／186），女性17．31％（9／52），明显高于男性11．41％（17／149）。在不同人群中，已排除甲－庚型肝炎的单纯转氨酶增高者TTV－DNA阳性率为21．05％（8／38），HIV阳笥人群中TTV－DNA阳性率为18．36％（9／49）；一般肝炎病人阳性率为13．64％（9／66），透析人群及正常对照人群中未检出阳笥。结论 TTV－DNA的阳性率为12．93％（26／201），不同民族和性别的阳性率不同。     

急性散发性戊型肝炎病毒（HEV）部分核苷酸序列分析

应用逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）检测杭州市散发性成型肝炎病人的急性或血清，３例ＨＥＶＲＮＡ阳性（３／１０），对其中一份扩增产物用荧光法测序，并与ＨＥＶ墨西哥株、缅甸流行株和散发株以及中国流行株ＣＨ１．１序列比较表明，该株散发性ＨＥＶ与墨西哥株核昔酸和氨基酸序列的同源性分别为７９．４％和９５．０％，与缅甸流行株和散发株的核苷酸同源性分别为ｇ３．５％和９５．１％，氨基酸同源性分别为９６．６％和９８．３％，与中国新疆流行株ＣＨ１．１核苷酸和氨基酸同源性分别为９５．９％和９５．８％。提示该ＨＥＶ散发株与新疆流行株一样，与ＨＥＶ缅甸株可能为同一亚型。     

北京地区1996至2000年肾综合征出血热流行状况研究

目的：搞清北京地区鼠间汉坦病毒（HIV）感染分布状况、HV基因型、病例血清型,为确定疫源地性质和制定防制策略提供依据。方法：分别应用间接免疫荧光（IFAT）、逆转录多降酶链反应（RT－PCR）和微量细胞中和试验方法,对北京地区捕获鼠的标本进行带病毒情况、毒株的型和病人血清型别检测。结果：北京地区鼠间广泛存在着HV感染,鼠的年度带病毒率为1.89%-6.17％。不同区（县）21份免疫荧光阳性鼠肺RT－PCR基因护增分型,均能以SEO型特异性引物扩增出300bp的DNA基因片段,而不能被HNT型特异性引物所扩增。9株核苷酸序列测定结果与SEO型HV代表株L99、SEO核苷酸同源性达94.3%－100％,与HNT型HV代表株A9同源性＜71％。9株SEO型HV核苷酸序列存在一定差异,所构建的地至少存在4个不同分支。BF10与L99株核苷酸同源性100％,BF7与G199同源性99.3%,是否为远程传播而来也应深入研究。55例肾综合征出血热（HFRS）病例血清型,53例为SEO型病例,2例Ⅰ、Ⅱ型中和抗体滴度等同病例未能定型。结论：证实SEO型HV淡近年北京地区主要流行株,并构成了众多SEO型HV疫源地,此为近年发病迅速增多的根本原因。     

少数民族地区输血后肝炎（TTV）分子生物学检测实验

目的：输血后肝炎病毒在人群中有一定的感染和致病性。但在我省少数民族半封闭、封闭地区对TTV的感染观察甚少。方法：应用血清学、分子生物学检测TTV的感染性和核苷酸的序列分析。结果：血清检测藏族TTV阳性率15．49％，蒙古族血清学阳性率1、9％。藏族TTV24序列分析为Gla亚型。结论：藏族与蒙古族TTV感染有显著差异性。蒙族株TTV24与BDH1对照有99％同源性，藏族地区疑似为输入性感染。     

深圳地区HBsAg阳性人群TTV核酸序列分析

目的 分析HBsAg阳性和阴性人群输血传播肝炎病毒（TTV）感染率的差异及TTV病毒核酸序列。方法应用套式PCR扩增TTV病毒核酸序列，将扩增的TTV核酸片段进行核酸测序，构建进化树分析TTV核酸序列的同源性。结果 HBsAg阳性和阴性人群TTV感染率比较，差异无统计学意义，深圳TTV病毒株与日本TTV病毒株的核酸序列同源性较大。结论人群中TTV病毒株携带率与HBsAg的携带率无相关性。     

河南省不同人群庚型肝炎病毒感染的调查分析

为探讨河南省庚型肝炎病毒感染现状,我们采用ＥＬＳＡ法对自然人群、献血员、慢性肝炎、肝硬化、肝细胞癌、ＨＢｓＡｇ携带者进行了抗－ＨＧＶ检测,其阳性率分别为６．９３％、１６．００％、２４．００％、２２．００％、４０．００％、２４．００％、２１．８８％。在不同人群中选择抗－ＨＧＶ阳性或阴性标本４０份,用ＰＣＲ法进行了ＨＧＶＲＮＡ检测,阳性复合率为４２．５０％。结果提示我省不同人群中均存在庚型肝炎感染,献血员的筛查对控制输血后庚型肝炎至关重要;抗－ＨＧＶ检出结果与ＨＧＶＲＮＡ检出结果有较好的一致性;ＨＧＶ和ＨＢＶ、ＨＣＶ有同时或重叠感染。     

儿童血液病患者输血传播病毒感染的调查

为调查上海地区输血传播病毒 (以下简称 TTV)在儿童血液病患者中的感染情况及探讨影响因素 ,应用半巢式 PCR方法检测儿童血液病患者 TTV DNA,以 6 8例健康人群的献血员 (AL T正常 )作为对照 ,并抽取部分阳性标本的PCR产物 (2 4 9bp)测定核苷酸序列。检测儿童血液病患者 37例 ,结果 TTV DNA阳性率 2 7.0 3% (10 / 37) ,高于献血员阳性率 17.6 4 % (12 / 6 8) ,统计学无显著意义。 2例儿童血液病患者与 2例献血员 TTV DNA测序结果核苷酸序列与日本株(N2 2 )比较同源性分别为 89.16 %、95 .18%和 96 .39%、95 .38%。37例儿童血液病患者中输血次数 2～ 15次不等 ,与 TTV阳性有关 ,临床均未见血液病外的明显症状。提示 :儿童血液病患者中存在 TTV感染。TTV测序表明与日本株 N2 2基本属于同一亚型